HPLC测定注射用兰索拉唑中兰索拉唑的含量以及有关物质

HPLC测定注射用兰索拉唑中兰索拉唑的
含量以及有关物质
摘要：目的：建立高效液相色谱法测定注射用兰索拉唑的有关物质。

方法:
采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（SymmetryShield TM RP C18，4.6mm×150mm，5μm）色谱柱，以水-三乙胺（60:1）(用磷酸调pH值至pH6.2) ，将该溶液与
40体积的乙腈混合为流动相，检测波长为285nm，流速为1.2ml/min。

研究了有
关物质检查方法的特异性，考察了已知杂质的线性、精密度、溶液稳定性和回收率。

结果:所有杂质峰和主峰均能很好地分离，空白辅料溶液保留3min后无色谱
峰出现。

杂质A～E的定量限分别为0.0170.016、0.019、0.023和0.009g/ml。

杂质A～E的检出限分别为0.006、0.005、0.006、0.008和0.003 g/ml。

杂质
A～E在三种浓度下的平均回收率分别为97.7%、98.2%、100.4%、102.4%和97.0%，均在97.0%至103.0%之间，相对标准偏差分别为2.8%、2.0%、2.5%、2.1%和
3.0%。

杂质A的峰面积(y)为0.017～3.27μg/ml，杂质B为0.016～
12.97μg/ml，杂质C为0.019～4.09μg/ml，杂质D为0.023～4.40μg/ml，杂
质E为0.009～3.20μg/ml。

结论:该方法专属性强，辅料对有关物质的测定无干扰。

该方法灵敏、简便、可靠、准确、重现性好，适用于注射用兰索拉唑中有关
物质的测定。

关键词：HPLC测定；注射用兰索拉唑；兰索拉唑；含量；有关物质
引言
兰索拉唑和右旋兰索拉唑是一类苯并咪唑类质子泵抑制剂，广泛用于治疗反
流性食管炎和佐林格-埃利森综合征。

质子泵抑制剂兰索拉唑是日本武田公司成
功开发的Ogilvy & Mather的改进产品。

5月份录取后，在美国上市。

在世界七
大医药市场中，武田公司、公嘉制药公司、Wyeth和Abbott在世界七大医药市场
的销售额达数十亿美元。

在中，被美国福布斯杂志评为世界十大畅销药物之一。

兰索拉唑是抑制胃酸分泌的新药。

其结构特点是氟被引入侧链，因此其生物利用
率高于奥美拉唑，其抗幽门螺杆菌的抗菌活性是奥美拉唑的两倍。

兰索拉唑不耐酸。

目前，口服兰索拉唑片常用于耐胃药涂层和耐胃药胶囊，效果缓慢。

但是，
静脉兰萨唑给药途径的改变提高了该产品的生物利用率，缩短了作用时间，满足
了不同患者的临床需要。

为保证产品质量，采用高效液相色谱法对薪资确定方法
进行了研究。

1资料
1.1仪器
电子天平；高效液相色谱仪，色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（SymmetryShield TM RP C18，4.6mm×150mm，5μm）。

1.2 试药
注射用兰索拉唑；乙腈；水；甲醇，三乙胺；磷酸。

2方法
2.1色谱条件
(1)色谱柱: 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（SymmetryShield TM RP C18，
4.6mm×150mm，5μm）；(2)流动相: 水-三乙胺（60:1）（用磷酸调pH值至
pH6.2），将该溶液与40体积的乙腈混合，流速为每分钟1.0ml；(3)检测波
长:284nm；(4)进样量为20uL。

理论板数应大于1500，具体计算应严格按照兰索
拉唑峰进行。

2.2线性关系
参考解决方案分别为0.5ml、2.0ml、4.0ml、5.0ml、6.0ml和10.0ml，把它
们放入棕色25ml容量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，得到相应的溶解度系列，然后将它们注射20uL到液相色谱仪中，详细记录色谱图。

绘制预设曲线，以浓
度（µg/ml）为横坐标，峰面积为纵坐标，求得线性回归方程。

结果表明，16～320 ug/ml范围内浓度与色谱峰面积的线性关系符合相关要求。

3结果
3.1专属性试验
见图１。

3.1.1空白辅料干扰试验
精密称取空白辅料适量，置于10ml量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取20μl注入液相色谱仪。

空白辅料溶液在保留时间3min后无色谱峰出现，不干扰本品的有关物质测定。

见图２。

3.1.2供试品溶液
取注射用右兰索拉唑适量，精密称定，用稀释剂溶解并稀释制成每1ml中含右兰索拉唑1mg的溶液，作为供试品溶液。

在“２．１”的色谱条件下进样，记录色谱图。

见图３。

3.1.3已知杂质对照品混合溶液
精密称取右兰索拉唑、起始物料（氯化物，见图４“６”注释）、杂质Ａ～
Ｅ对照品适量，分别加少量稀释剂超声溶解并用稀释剂稀释至刻度，摇匀，作为
储备液；精密移取各储备液1ml置同一10ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀，作为混合对照品溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。

结果显示，
各杂质峰、起始物料峰、右兰索拉唑峰之间的分离度均＞１．５，达到系统适用
性要求。

见图４。

3.2重复性试验
在同一批注射剂和胃药中准确称重。

对于溶液的制备，必须严格遵循试验样
品1和2的方法，并按照相同的控制方案方法工作。

注入20uL样品，仔细记录
色度图，并用外部标准方法计算内容。

注射药物和口服胃液耐药片的RSD分别为0.83%、0.83%和0.90%。

结合结果表明试验是有效的。

3.3回收率试验
称量10瓶处方量的辅料，放入研磨碗中均匀搅拌，磨成细粉，然后加入80%、100%和120%的处方量10瓶，制成不同浓度(低、中、高)的模拟样品。

取适量以
上细粉，放入棕色25ml容量瓶中，通过添加适量甲醇和搅拌溶解主要指标，稀
释后均匀缩放和搅拌。

此外，10片胃药被放入同一恢复试验为注射准备的砂浆中。

从上述两种解决方案中各取20uL，条件的确定应严格根据内容，回收率计算，平
均回收率为100.0%，RSD为1.08%，胃计算膜尾99.63%，RSD为1.03%。

3.4精密度试验
兰索拉唑无菌冷冻干燥产品连续注射5次测定。

分别计算了公共峰的停留时
间和峰面积，并计算了RSD值。

结果表明其相对标准偏差(RSD)低于2%。

因此，
结果表明该仪器具有良好的精密度。

3.5稳定性试验
采用兰索拉唑参考溶液(1.0mg/ml)、兰索拉唑杂质A参考溶液(0.01mg/ ml)、兰索拉唑杂质B参考溶液(0.01 mg/ml)和兰索拉唑杂质C参考溶液(0.01mg/ ml)，分别采用上述参考溶液20μl。

兰索拉唑峰面积的RSD为0.17%，杂质A的RSD
峰面积为0.09%，杂质B的RSD峰面积为0.16%，杂质C的RSD峰面积为0.06%。

测试结果表明，兰索拉唑和各杂质参考溶液在12小时内稳定。

3.6有关物质和含量测定
避光操作，精密称取注射用兰索拉唑适量(相当于兰索拉唑50mg)，置于棕色25ml容量瓶中，加入流动相溶解，稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

精密量
取1ml的贮备液液，置于100ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，作为对照溶液，精密量取供试品溶液与对照溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。

结束语
概括地说，HPLC在测定注射用兰索拉唑中的应用具有准确性、简便性和良好
重现性等优点，值得推广应用。

参考文献
[1]郭水柱,王姣,车彦忠.HPLC测定注射用兰索拉唑中兰索拉唑的含量[J].中
医临床研究,2018,6(17):137-140.
[2]刘秀霞,鲍加佳,钱瑞瑛,崔猛,顾孝红.HPLC法测定注射用兰索拉唑的有关
物质及主药含量[J].中国药师,2018,16(07):1079-1081.
[3]刘志红,曲衎衎,邬玉玉,袁慧雅,陈晓辉,李伟.HPLC法测定注射用兰索拉唑有关物质的含量[J].沈阳药科大学学报,2018,30(05):346-350.
[4]浦锡娟,何峰.HPLC法测定注射用兰索拉唑中主药及有关物质的含量[J].中国药房,2018(13):1013-1014.
[5]杨艳,谢俊霞,李冰,孙英华,方金玲,刘艳,何仲贵.HPLC测定注射用兰索拉唑中兰索拉唑的含量和有关物质[J].中国药学杂志,2018(07):538-540.。