DC细胞概述
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一个使用的关于 DC 的定义
这一定义其实包含了一群特性、分化/活化状态各异的 DCs。虽然 DCs 是以其特征性形态命名的,这显然是 不够的。DCs 的定义至少应该对它趋化,激发初始 T 细胞免疫应答的能力有所强调。一个比较妥当的定义 可能包括以下几点: 1. 激发初始 T 细胞免疫的能力。 2. 良好的运动性和胞突在体外 37 度条件下具备伸缩性;向 T 淋巴细胞依赖的淋巴结区域趋化的能力。 3. 相对特化的胞吞作用(体内)——DCs 的摄取胞外物质的能力很可能比目前估计的要大;活跃的胞饮 作用是 DCs 的特点之一。 4. 体外 37 度环境下能自发性的、快速的与 T 淋巴细胞蔟集。 5. 具有不同于其他白细胞,尤其是单核巨噬细胞和 B 细胞的细胞表面表型。 6. 依不同的分化/活化状态表达不同的 DC 相关性抗原。 7. 细胞化学反应不同于单核巨噬细胞。 另外两个特点,树突状的外形和 MHC-2 的高表达只有在其他细胞,尤其是 B 淋巴细胞和纤维母细胞能呈现 类似的外形时才可确认。DCs 的外形还要受温度的影响。注意:FDC,树突状内皮细胞和淋巴性 DCs(目 前为止)不包含在以上的原则之内。
分析比较还无法确认 DCs 的特异性抗原是什么。
小鼠 DCs
用 33D1 的单抗确认了一种低密度的脾脏 DCs 的抗原。这个抗体没有在低温下使 DCs 抗原显色并且不同 LC 发生反应。关于这一抗原的生化数据知之甚少。不过它被证明在小鼠脾脏 DCs 的补体介导的溶胞反应中起 着重要作用。 东欧大鼠单抗 N418 能与 β2 整合素家族的异聚二体 p150/95(CD11c)反应,后者在小鼠 DCs 有高密度表 达,在包括巨噬细胞在内的其他白细胞也有表达。 大鼠 NLDC-145 单抗由免疫小鼠淋巴组织的间质得到。它能使 T 淋巴细胞区域着上荧光,但不包括脾脏边 缘区或 LC。这一抗原亦表达在激活的巨噬细胞和胸腺皮质的上皮细胞。它已被分离并测序,发现与甘露糖 有类似。现在这一命名为 DEC-205 的分子被相信是抗原摄取的受体。
细胞化学特性
DCs 缺乏很多典型的单核巨噬细胞所具有的酶。细胞化学反应表明 DCs 缺乏髓过氧化物酶(MPO),只具 有低水平的 5-核苷酸酶、二肽酰基酞酶(DPPI)、和组织蛋白酶-B。其他胞内酶(如非特异性脂酶[NSE], 酸性磷酸酶)或溶酶体抗原(如 CD68)可能存在于 DCs 中但活性明显弱于单核巨噬细胞或分布有显著性 差异。NSE 染色在 DCs 活化是减弱。
但实际上当人们用sds猜测是一种电泳方法具体待查比较人扁桃体dcs和其他白细胞的蛋白时发现dcs的蛋白组成显著的不同于一般的白细胞尽管这一水平的分析比较还无法确认dcs的特异性抗原是什么
树突状细胞:一个独特的调控初始免疫反应的白细胞群落 ( wk.baidu.comy Derek N.J.Hart)
自从 1868 年 Langerhans 第一次描述了皮肤存在的树突状细胞以来,人类就开始了漫长的探索树突状细胞 的功能的征程。1973 年 Steinman 和 Cohn 确认了小鼠脾脏中的树突状细胞,并用一系列实验证明了淋巴 组织源性的树突状细胞是强有力的初始免疫反应的激发者。随后有学者发现类似的细胞在非淋巴组织中也 存在,它们都在心脏和肾脏移植的排斥反应中起着重要的作用,这进一步激发了人们研究树突状细胞的兴 趣。然而由于树突状细胞标记物的不足,很难把它从单核细胞或巨噬细胞中分离,在树突状细胞的纯化问 题上科学家举步唯艰。但还是有几个实验中心坚持不懈直至得出这样的结论:树突状细胞是一个专职的递 呈抗原,并能激发初始(和二次)T 细胞免疫反应的白细胞群体。 现在,人工培养树突状细胞以不成问题,第一个能与人树突状细胞结合的单克隆抗体也已获得。树突状细 胞的趋化很可能是在一大群中介分子完成。新近数据表明 T 细胞对树突状细胞的反馈作用使后者获得递呈 抗原的特异性。这些对树突状细胞功能的认识为其临床应用于骨髓移植、实质器官的移植及自身免疫性疾 病的治疗提供了契机。一套针对肿瘤抗原和感染因子的免疫方案正试图利用树突状细胞的特性来研制一种 最佳的治疗性疫苗。 血液学家面临的一个很实际的问题是目前为止还没有一个明确的关于树突状细胞的定义。再者,我们对它 的功能、发生、群体间相互作用知之甚少。另外,树突状细胞的功能、形态、表型都随其激活和分化状态 不同而改变。这些都给我们进一步认识树突状细胞制造了困难。这篇综述将主要探讨髓系树突状细胞,它 跟淋巴组织中的 T 细胞紧密相连,能将抗原递呈和激活特异性 T 细胞。滤泡状 DCs 存在于 B 淋巴滤泡,有 不同的表型,能长时间地保留抗原,因而重复刺激 B(或 T)细胞,在这里不做讨论。上皮源性的 DCs, 实质是一种 T 细胞的亚型,多见于小鼠上皮,有广泛的细胞膜突起,在这里也不做讨论。髓系 DCs 应该同 胸腺 DCs 区别。后者似乎起源于淋巴样干细胞,能清除成熟中的 T 细胞,并且可能有不同于髓系 DCs 的特 性。髓系 DCs 的主要共能包括:(1)摄取、加工和递呈抗原 (2)选择性趋化 (3)介导 T 细胞反应。树 突状细胞可能是唯一能激活处女型 T 细胞的 APC。此外,树突状细胞间存在通过膜突起的相互作用,这些 作用在其分化的后期有可能是必需的。正是凭借以上的特点来将树突状细胞从单核巨噬细胞中区分。
DCs 的分离
一篇系统性关于分离 DCs 的方法的综述已经见于报端。DCs 的纯化通常用两种方法。 第一种方法利用了 DCs 缺乏某些常见于其他白细胞的特异性标记物的事实。如,T 淋巴细胞(CD2、CD3), B 淋巴细胞(CD19、CD20、CD24),NK 细胞(CD16、CD56、CD57),巨噬细胞(高密度的 CD14),和 粒细胞(CD15)。针对这些抗原的单抗能把 DCs 从含有其他白细胞的血清或经酶消化的组织(如皮肤)中 分离出来。 第二种方法常用来分离体外长时间培养后低密度的 DCs。将外周血中的单核细胞(PBMC)体外培养(最好 用小牛血清在 37 度培养),能激活 DCs 并改变它的大小和密度,从而有助于利用其密度梯度分离 DCs。很 多梯度媒介曾被使用,最先的牛血清蛋白以被 metrizamide、Nycodenz 或者 Percoll 代替。其中 Nycodenz 是最有效的。这些梯度剂行使类似的功能,但它们所含的某些成分和渗透效应可能会不同程度的诱导 DCs 表型及功能的改变。例如,Kabel 等人已证实 metrizamide 可能使单核细胞向 DCs 方向改变。 用于提纯小鼠 DCs 的方法,如利用其暂时性黏附于塑料平面的特性,很难在人 DCs 的分离上奏效。人 DCs、 单核细胞、及其他细胞对塑料制品的黏附分离是可变的。黏附可以浓集人单核细胞,但并不增加刺激性细 胞。另外,黏附的材料可能会影响单核细胞(还可能包括 DCs)的表型。 淘析法曾被使用,但它的应用因设备不易得而受限。利用其他生理特性如胞吞,簇集作用来分离 DCs 的方 法效果还有待证实。 流式细胞仪和免疫磁珠选择系统已成为标准的 DCs 的分离方法。用 CD83 和 CMRF-44 阳性选择的方法使低 密度的 DCs 的分离成为可能。一个有效的提取 DCs 作免疫刺激的方法包括在一个标准梯度媒介上获得 PBMC, T 细胞的清除,与自体移植血清过夜共培养 16 小时,用 Nycodenz 梯度剂分离。然后可以用 CD83 或 CMRF-44 阳性选择分离 DCs。
关于 DC 的定义
DC 细胞系的存在
初次描述小鼠脾脏树突状细胞的时候,人们注意到它不规则的外形,丰富的细胞突起和线粒体,以及稀少 的细胞器。其核内体和溶酶体是抗原加工所必需,近来日益受到重视。小鼠脾脏 DCs 开始能黏附于塑料平 面,但过夜培养后变为悬浮,再加上它们的低密度,使 DCs 得以从巨噬细胞中分离。进一步的分离要借助 于细胞化学反应,及 DCs 缺乏吞噬活性和 FcR、CR 的事实(一个未成熟 DCs 的特性)。研究表明 DCs 表达 MHC 分子,尤其是 MHC-2。无论在同种异体免疫还是在混合白细胞反应(MLR)中,DCs 都是初始 T 细胞 免疫反应的有效激动剂。 在大多数大鼠组织间质(除了免疫特赦区如大脑和睾丸),都能观察到具有不规则细胞突起和 MHC-2 高表 达的白细胞。这些间质 DCs 被证明是骨髓源性的,但吞噬功能稍弱,并具有类似淋巴组织来源的 DCs 的特 点。间质 DCs 能激发强烈的同种异体免疫,分离后也可刺激 T 淋巴细胞反应。人类的间质 DCs 最先在肾脏 中得到描述,然后在其他组织中陆续被发现。 最先过分强调它们类似巨噬细胞表达 FcR 和 CR 的特点,延迟了人们认识到朗罕氏细胞(LC)事实上代表 了 DCs 分化的一个阶段。电镜显示 LC 内的 Birbeck 颗粒是一种界限清楚的包涵体,在其它细胞少见。LC 体外培养后在形态或表型上都向淋巴组织来源的 DCs 靠拢。功能性研究证实 LC 能激发强有力的初始同种 异体 MLR,但在有些研究,这一现象只有在体外培养相当一端时间后才会出现。后来,人们认识到这些趋
DCs 表面和相关性分子 DCs 表达一些常见于其他白细胞的分子,如 MHC 分子,CD45(白细胞普遍表达)异构体,黏附分子等。 但人们致力于寻找 DCs 特异性单抗的努力还是发现了一些有用的新分子。
相对性 DC 特异性抗原
提纯 DCs 和抗体显示技术的不完善无疑限制了 DC 抗原的发现。主观的猜测似乎支持 DCs 不可能缺乏某些 很特异的膜抗原和细胞表面分子。但实际上,当人们用 SDS-PAGE(猜测是一种电泳方法,具体待查)比 较人扁桃体 DCs 和其他白细胞的蛋白时发现 DCs 的蛋白组成显著的不同于一般的白细胞,尽管这一水平的
化的 DCs 组成了引流淋巴结中的并指状 DCs(IDC)。 这样 DCs 存在一条与它的趋化、功能活化密切相关的生长和分化途径的概念被确立。即,骨髓前体细胞向 DCs 分化,小部分 DC 前体细胞(和成熟或再循环的的细胞)在血液中循环途中离开血流进入组织。这些 间质 DCs(其中 LC 在皮肤及其它组织中定居,成为一个亚型)有广泛的细胞突起,在暴露于抗原或炎症刺 激后能迁徙出组织进入向心性淋巴液,那儿的 DCs 被称为 veiled 细胞。一旦进入引流淋巴结,位于 T 淋巴 区域的 DCs 被称为 IDC。IDC 也见于扁桃体和脾脏的白髓区。脾脏的边缘区还存在 DCs 的第二个群体(如 红髓区来自血液的 DCs)。
DCs 的功能活动
虽然 DCs 没有实质性的吞噬活动,但这一点一直以来被过分强调了。缺乏吞噬活动只是分化后期的成熟 DCs 的一个特征,而分化早期的未成熟 DCs 具有选择性胞吞功能。体外实验表明,DCs 具备很强的细胞活 动性和伸缩膜突起的能力。 同种异体 MLR 已被广泛用来检验 DCs 的抗原递呈功能。尽管有一些特征并不是一个典型的真正的初始 T 细胞反应所具有,DCs 的对同种异体 MLR 的激发作用还是把它们从其它白细胞区别开来。体外激活的 B 细 胞也具有同种异体刺激作用,但这种刺激作用明显弱于 DCs。 DCs 具有的在体内或体外摄取递呈抗原去激活处女型 T 细胞的能力是它主要的特性。这一点在与单核细胞、 B 细胞比较是表现的更加明显。事实上 B 细胞在体内对初始免疫应答的贡献非常有限。DCs 对二次应答来 说也不啻为活跃的 APC,和巨噬细胞、内皮细胞、活化的 B 细胞相比毫不逊色。
定义 DCs 存在的问题
首先 CDs 存在显著的物种之间的差别。小鼠或大鼠的骨髓或血中的 DCs 前体细胞鲜有 MHC 抗原的表达, 是微弱的同种 MLR 的刺激剂。然而在人类,骨髓 DCs 前体细胞普遍具备同种异体免疫刺激活性,血中的 DCs 至少有几个群体是强有力的 MLR 的刺激剂。其他表面分子的表达也存在物种间的差别,如 CD11c、CD1。 纯系小鼠或大鼠有不同数目的 DCs 并且随年龄增加而降低。非正式的报道提出不同个体有不同数量的 DCs 在循环。 不同的提纯的方法对 DCs 的活化有显著影响,因为它们可能改变 DCs 的表型和功能。如何从人血液中提取 静息态的 DCs,排除少量淋巴细胞、造血干细胞、嗜碱性粒细胞、内皮细胞前体细胞的污染仍是一个尚未 解决的问题。同样的,其他细胞,特别是黏附细胞也可能被高度活化的 DCs 污染。以前的用黏附特性提取 的单核巨噬细胞做的 APC 研究显然没有考虑到 DCs 对它们的污染。直到用 CD14+阳性选择法将 DCs 排除 后提取单核细胞,人们才发现单核细胞的 APC 功能与 DCs 相比简直就是小巫见大巫。
这一定义其实包含了一群特性、分化/活化状态各异的 DCs。虽然 DCs 是以其特征性形态命名的,这显然是 不够的。DCs 的定义至少应该对它趋化,激发初始 T 细胞免疫应答的能力有所强调。一个比较妥当的定义 可能包括以下几点: 1. 激发初始 T 细胞免疫的能力。 2. 良好的运动性和胞突在体外 37 度条件下具备伸缩性;向 T 淋巴细胞依赖的淋巴结区域趋化的能力。 3. 相对特化的胞吞作用(体内)——DCs 的摄取胞外物质的能力很可能比目前估计的要大;活跃的胞饮 作用是 DCs 的特点之一。 4. 体外 37 度环境下能自发性的、快速的与 T 淋巴细胞蔟集。 5. 具有不同于其他白细胞,尤其是单核巨噬细胞和 B 细胞的细胞表面表型。 6. 依不同的分化/活化状态表达不同的 DC 相关性抗原。 7. 细胞化学反应不同于单核巨噬细胞。 另外两个特点,树突状的外形和 MHC-2 的高表达只有在其他细胞,尤其是 B 淋巴细胞和纤维母细胞能呈现 类似的外形时才可确认。DCs 的外形还要受温度的影响。注意:FDC,树突状内皮细胞和淋巴性 DCs(目 前为止)不包含在以上的原则之内。
分析比较还无法确认 DCs 的特异性抗原是什么。
小鼠 DCs
用 33D1 的单抗确认了一种低密度的脾脏 DCs 的抗原。这个抗体没有在低温下使 DCs 抗原显色并且不同 LC 发生反应。关于这一抗原的生化数据知之甚少。不过它被证明在小鼠脾脏 DCs 的补体介导的溶胞反应中起 着重要作用。 东欧大鼠单抗 N418 能与 β2 整合素家族的异聚二体 p150/95(CD11c)反应,后者在小鼠 DCs 有高密度表 达,在包括巨噬细胞在内的其他白细胞也有表达。 大鼠 NLDC-145 单抗由免疫小鼠淋巴组织的间质得到。它能使 T 淋巴细胞区域着上荧光,但不包括脾脏边 缘区或 LC。这一抗原亦表达在激活的巨噬细胞和胸腺皮质的上皮细胞。它已被分离并测序,发现与甘露糖 有类似。现在这一命名为 DEC-205 的分子被相信是抗原摄取的受体。
细胞化学特性
DCs 缺乏很多典型的单核巨噬细胞所具有的酶。细胞化学反应表明 DCs 缺乏髓过氧化物酶(MPO),只具 有低水平的 5-核苷酸酶、二肽酰基酞酶(DPPI)、和组织蛋白酶-B。其他胞内酶(如非特异性脂酶[NSE], 酸性磷酸酶)或溶酶体抗原(如 CD68)可能存在于 DCs 中但活性明显弱于单核巨噬细胞或分布有显著性 差异。NSE 染色在 DCs 活化是减弱。
但实际上当人们用sds猜测是一种电泳方法具体待查比较人扁桃体dcs和其他白细胞的蛋白时发现dcs的蛋白组成显著的不同于一般的白细胞尽管这一水平的分析比较还无法确认dcs的特异性抗原是什么
树突状细胞:一个独特的调控初始免疫反应的白细胞群落 ( wk.baidu.comy Derek N.J.Hart)
自从 1868 年 Langerhans 第一次描述了皮肤存在的树突状细胞以来,人类就开始了漫长的探索树突状细胞 的功能的征程。1973 年 Steinman 和 Cohn 确认了小鼠脾脏中的树突状细胞,并用一系列实验证明了淋巴 组织源性的树突状细胞是强有力的初始免疫反应的激发者。随后有学者发现类似的细胞在非淋巴组织中也 存在,它们都在心脏和肾脏移植的排斥反应中起着重要的作用,这进一步激发了人们研究树突状细胞的兴 趣。然而由于树突状细胞标记物的不足,很难把它从单核细胞或巨噬细胞中分离,在树突状细胞的纯化问 题上科学家举步唯艰。但还是有几个实验中心坚持不懈直至得出这样的结论:树突状细胞是一个专职的递 呈抗原,并能激发初始(和二次)T 细胞免疫反应的白细胞群体。 现在,人工培养树突状细胞以不成问题,第一个能与人树突状细胞结合的单克隆抗体也已获得。树突状细 胞的趋化很可能是在一大群中介分子完成。新近数据表明 T 细胞对树突状细胞的反馈作用使后者获得递呈 抗原的特异性。这些对树突状细胞功能的认识为其临床应用于骨髓移植、实质器官的移植及自身免疫性疾 病的治疗提供了契机。一套针对肿瘤抗原和感染因子的免疫方案正试图利用树突状细胞的特性来研制一种 最佳的治疗性疫苗。 血液学家面临的一个很实际的问题是目前为止还没有一个明确的关于树突状细胞的定义。再者,我们对它 的功能、发生、群体间相互作用知之甚少。另外,树突状细胞的功能、形态、表型都随其激活和分化状态 不同而改变。这些都给我们进一步认识树突状细胞制造了困难。这篇综述将主要探讨髓系树突状细胞,它 跟淋巴组织中的 T 细胞紧密相连,能将抗原递呈和激活特异性 T 细胞。滤泡状 DCs 存在于 B 淋巴滤泡,有 不同的表型,能长时间地保留抗原,因而重复刺激 B(或 T)细胞,在这里不做讨论。上皮源性的 DCs, 实质是一种 T 细胞的亚型,多见于小鼠上皮,有广泛的细胞膜突起,在这里也不做讨论。髓系 DCs 应该同 胸腺 DCs 区别。后者似乎起源于淋巴样干细胞,能清除成熟中的 T 细胞,并且可能有不同于髓系 DCs 的特 性。髓系 DCs 的主要共能包括:(1)摄取、加工和递呈抗原 (2)选择性趋化 (3)介导 T 细胞反应。树 突状细胞可能是唯一能激活处女型 T 细胞的 APC。此外,树突状细胞间存在通过膜突起的相互作用,这些 作用在其分化的后期有可能是必需的。正是凭借以上的特点来将树突状细胞从单核巨噬细胞中区分。
DCs 的分离
一篇系统性关于分离 DCs 的方法的综述已经见于报端。DCs 的纯化通常用两种方法。 第一种方法利用了 DCs 缺乏某些常见于其他白细胞的特异性标记物的事实。如,T 淋巴细胞(CD2、CD3), B 淋巴细胞(CD19、CD20、CD24),NK 细胞(CD16、CD56、CD57),巨噬细胞(高密度的 CD14),和 粒细胞(CD15)。针对这些抗原的单抗能把 DCs 从含有其他白细胞的血清或经酶消化的组织(如皮肤)中 分离出来。 第二种方法常用来分离体外长时间培养后低密度的 DCs。将外周血中的单核细胞(PBMC)体外培养(最好 用小牛血清在 37 度培养),能激活 DCs 并改变它的大小和密度,从而有助于利用其密度梯度分离 DCs。很 多梯度媒介曾被使用,最先的牛血清蛋白以被 metrizamide、Nycodenz 或者 Percoll 代替。其中 Nycodenz 是最有效的。这些梯度剂行使类似的功能,但它们所含的某些成分和渗透效应可能会不同程度的诱导 DCs 表型及功能的改变。例如,Kabel 等人已证实 metrizamide 可能使单核细胞向 DCs 方向改变。 用于提纯小鼠 DCs 的方法,如利用其暂时性黏附于塑料平面的特性,很难在人 DCs 的分离上奏效。人 DCs、 单核细胞、及其他细胞对塑料制品的黏附分离是可变的。黏附可以浓集人单核细胞,但并不增加刺激性细 胞。另外,黏附的材料可能会影响单核细胞(还可能包括 DCs)的表型。 淘析法曾被使用,但它的应用因设备不易得而受限。利用其他生理特性如胞吞,簇集作用来分离 DCs 的方 法效果还有待证实。 流式细胞仪和免疫磁珠选择系统已成为标准的 DCs 的分离方法。用 CD83 和 CMRF-44 阳性选择的方法使低 密度的 DCs 的分离成为可能。一个有效的提取 DCs 作免疫刺激的方法包括在一个标准梯度媒介上获得 PBMC, T 细胞的清除,与自体移植血清过夜共培养 16 小时,用 Nycodenz 梯度剂分离。然后可以用 CD83 或 CMRF-44 阳性选择分离 DCs。
关于 DC 的定义
DC 细胞系的存在
初次描述小鼠脾脏树突状细胞的时候,人们注意到它不规则的外形,丰富的细胞突起和线粒体,以及稀少 的细胞器。其核内体和溶酶体是抗原加工所必需,近来日益受到重视。小鼠脾脏 DCs 开始能黏附于塑料平 面,但过夜培养后变为悬浮,再加上它们的低密度,使 DCs 得以从巨噬细胞中分离。进一步的分离要借助 于细胞化学反应,及 DCs 缺乏吞噬活性和 FcR、CR 的事实(一个未成熟 DCs 的特性)。研究表明 DCs 表达 MHC 分子,尤其是 MHC-2。无论在同种异体免疫还是在混合白细胞反应(MLR)中,DCs 都是初始 T 细胞 免疫反应的有效激动剂。 在大多数大鼠组织间质(除了免疫特赦区如大脑和睾丸),都能观察到具有不规则细胞突起和 MHC-2 高表 达的白细胞。这些间质 DCs 被证明是骨髓源性的,但吞噬功能稍弱,并具有类似淋巴组织来源的 DCs 的特 点。间质 DCs 能激发强烈的同种异体免疫,分离后也可刺激 T 淋巴细胞反应。人类的间质 DCs 最先在肾脏 中得到描述,然后在其他组织中陆续被发现。 最先过分强调它们类似巨噬细胞表达 FcR 和 CR 的特点,延迟了人们认识到朗罕氏细胞(LC)事实上代表 了 DCs 分化的一个阶段。电镜显示 LC 内的 Birbeck 颗粒是一种界限清楚的包涵体,在其它细胞少见。LC 体外培养后在形态或表型上都向淋巴组织来源的 DCs 靠拢。功能性研究证实 LC 能激发强有力的初始同种 异体 MLR,但在有些研究,这一现象只有在体外培养相当一端时间后才会出现。后来,人们认识到这些趋
DCs 表面和相关性分子 DCs 表达一些常见于其他白细胞的分子,如 MHC 分子,CD45(白细胞普遍表达)异构体,黏附分子等。 但人们致力于寻找 DCs 特异性单抗的努力还是发现了一些有用的新分子。
相对性 DC 特异性抗原
提纯 DCs 和抗体显示技术的不完善无疑限制了 DC 抗原的发现。主观的猜测似乎支持 DCs 不可能缺乏某些 很特异的膜抗原和细胞表面分子。但实际上,当人们用 SDS-PAGE(猜测是一种电泳方法,具体待查)比 较人扁桃体 DCs 和其他白细胞的蛋白时发现 DCs 的蛋白组成显著的不同于一般的白细胞,尽管这一水平的
化的 DCs 组成了引流淋巴结中的并指状 DCs(IDC)。 这样 DCs 存在一条与它的趋化、功能活化密切相关的生长和分化途径的概念被确立。即,骨髓前体细胞向 DCs 分化,小部分 DC 前体细胞(和成熟或再循环的的细胞)在血液中循环途中离开血流进入组织。这些 间质 DCs(其中 LC 在皮肤及其它组织中定居,成为一个亚型)有广泛的细胞突起,在暴露于抗原或炎症刺 激后能迁徙出组织进入向心性淋巴液,那儿的 DCs 被称为 veiled 细胞。一旦进入引流淋巴结,位于 T 淋巴 区域的 DCs 被称为 IDC。IDC 也见于扁桃体和脾脏的白髓区。脾脏的边缘区还存在 DCs 的第二个群体(如 红髓区来自血液的 DCs)。
DCs 的功能活动
虽然 DCs 没有实质性的吞噬活动,但这一点一直以来被过分强调了。缺乏吞噬活动只是分化后期的成熟 DCs 的一个特征,而分化早期的未成熟 DCs 具有选择性胞吞功能。体外实验表明,DCs 具备很强的细胞活 动性和伸缩膜突起的能力。 同种异体 MLR 已被广泛用来检验 DCs 的抗原递呈功能。尽管有一些特征并不是一个典型的真正的初始 T 细胞反应所具有,DCs 的对同种异体 MLR 的激发作用还是把它们从其它白细胞区别开来。体外激活的 B 细 胞也具有同种异体刺激作用,但这种刺激作用明显弱于 DCs。 DCs 具有的在体内或体外摄取递呈抗原去激活处女型 T 细胞的能力是它主要的特性。这一点在与单核细胞、 B 细胞比较是表现的更加明显。事实上 B 细胞在体内对初始免疫应答的贡献非常有限。DCs 对二次应答来 说也不啻为活跃的 APC,和巨噬细胞、内皮细胞、活化的 B 细胞相比毫不逊色。
定义 DCs 存在的问题
首先 CDs 存在显著的物种之间的差别。小鼠或大鼠的骨髓或血中的 DCs 前体细胞鲜有 MHC 抗原的表达, 是微弱的同种 MLR 的刺激剂。然而在人类,骨髓 DCs 前体细胞普遍具备同种异体免疫刺激活性,血中的 DCs 至少有几个群体是强有力的 MLR 的刺激剂。其他表面分子的表达也存在物种间的差别,如 CD11c、CD1。 纯系小鼠或大鼠有不同数目的 DCs 并且随年龄增加而降低。非正式的报道提出不同个体有不同数量的 DCs 在循环。 不同的提纯的方法对 DCs 的活化有显著影响,因为它们可能改变 DCs 的表型和功能。如何从人血液中提取 静息态的 DCs,排除少量淋巴细胞、造血干细胞、嗜碱性粒细胞、内皮细胞前体细胞的污染仍是一个尚未 解决的问题。同样的,其他细胞,特别是黏附细胞也可能被高度活化的 DCs 污染。以前的用黏附特性提取 的单核巨噬细胞做的 APC 研究显然没有考虑到 DCs 对它们的污染。直到用 CD14+阳性选择法将 DCs 排除 后提取单核细胞,人们才发现单核细胞的 APC 功能与 DCs 相比简直就是小巫见大巫。