有机化学实验 薄层色谱对APC各组分的分离和定性分析

风干 红外灯下烘干冰醋酸
层析板
5. 显色、鉴定
显色⑤ ：将烘干的层析板放入 254nm 紫外分析仪中照射 显色，可清晰地看到展开得到的粉红色斑点。其中 APC 是三个点。
定位：定出所有点的相对位置。量出斑点中心到原始点 的距离及展开剂原始点中心到前沿的距离。
测定Rf 值： 斑点中心到原始点的距离
展开
以广口瓶作展开器，加入展开剂, 其量以液面高度0.5 cm 为宜。将点过样 的薄层板斜置于其中，使点样一端朝下 保持点样斑点在展开剂液面之上，盖上 盖子。
当展开剂上升至离薄层板上端约 1cm处时，将薄层板取出，并用铅笔标 出展开剂的前沿位置。
注意事项
点样
点样前，先用铅笔在层析板上距末端 1cm处轻轻画一 横线，然后用毛细管吸取样液在横线上轻轻点样。
点样动作要轻快敏捷，否则易使斑点过大，产生拖尾 扩散等现象，影响分离效果。
如果要重新点样，一定要等前一次点样残余的溶剂挥 发后再点样，以免点样斑点过大。一般斑点直径不大 于2mm。
如果在同一块薄层板上点两个样，两斑点间距应保持 1-1.5cm为宜。
如用单一溶剂不易使混合物分离，就需要采用混合溶剂 作展开剂。混合展开剂的极性常介于几种纯溶剂的极性 之间。
快捷寻找合适的展开剂可以按如下方式操作：先在一块 薄层板上点上待分离样品的几个斑点，斑点间留有1cm以 上间距。用滴管将不同溶剂分别点在不同的斑点上，这 些斑点将随溶剂向周边扩展形成大小不一的同心圆环。 观察这些圆环的层次间距，即可大致判断溶剂的适宜性
除了煅石膏外，羧甲基纤维素钠也是常用的粘合剂 由于氧化铝的极性较强，因而它适合于分离极性较弱的化
合物(如烃、醚、卤代烃等)。而硅胶的极性相对较小，它适 合于分离极性较大的化合物(如羧酸、醇、胺等)。
展开剂
展开剂的极性差异对混合物的分离有显著影响。当被分 离物各组分极性较强，经过层析后，如果混合物中各组 分的斑点全部随溶剂爬升至最前沿，那么该溶剂的极性 太强；相反，如果混合物中各组分的斑点完全不随溶剂 的展开而移动，则该溶剂的极性太弱。
非那西丁
0.60
249
134-136
咖啡因
0.30
273
234-237
展开剂： 苯∶乙醚∶冰醋酸∶甲醇 = 120∶60∶18∶1
实验步骤
样品液的准备
点样
展开
显色、定位
鉴定
2. 样品液的制备
阿司匹林 + CH2Cl2 咖啡因 + CH2Cl2
镇痛药-APC
研细
分液
有机层
加入 CH2Cl2 和 H2O 充分搅拌
乙酰水杨酸（A）0.22克 非那西丁（P）0.15克 咖啡因（C）0.035克
COOH OCOCH3
A
NHCOCH3
OC2H5 P
O
CH3 N
O
N
CH3
C
CH3 N
N
本实验用薄层层析法分离测定APC各组分。
主要试剂及产物的物理常数
化合物
Rf 值
λmax
熔点（℃）
阿司匹林
0.81
276
135-138
在玻璃板上均匀铺上一薄层吸附剂，制成薄层板 用毛细管将样品溶液点在起点处，把此薄层板置 于盛有展开剂的容器中，待溶液到达前沿后取出， 晾干，显色，测定色斑的位置。
吸附剂
常用：硅胶和氧化铝 硅胶H —不含粘合剂的硅胶 硅胶G —掺有粘合剂如煅石膏（CaSO4.1/2H2O）的硅胶 硅胶HF254 —含荧光物质的硅胶，可在254 nm紫外光下观察 荧光，附着在光亮的荧光薄板上的有机物呈暗色斑点 硅胶GF254 —既含煅石膏又含荧光物质的硅胶 氧化铝G、氧化铝HF254、氧化铝GF254
薄层色谱对APC 各组分的分离和定性分析
实验目的
1、学习色谱法的概念； 2、掌握薄层色谱法分离鉴定有机化合物
的原理和方法； 3、对APC各组分进行分离和定性分析。
实验原理
薄层色谱法（Thin Layer Chromatography, 缩写TLC) 快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实 验技术，也用于跟踪反应进程。
混合液
干燥 样品液
药片-APC中除了含有效成分外，还含有大量淀粉及碱 性物质（氢氧化铝、氢氧化钙），淀粉可溶于水，APC则 溶于溶剂二氯甲烷中。
阿司匹林、非那西丁、咖啡因、淀粉……
CH2Cl2 + H2O 分液
水层(上) 淀粉、H2O
有机层(下)
阿司匹林、非那西丁、咖啡因、(H2O)
无水MgSO4干燥
过滤
滤渣 MgSO4.H2O
滤液 阿司匹林、非那西丁、咖啡因
3. 点样③
在一块层析板上划一条线：起始线，距下端约1cm. 在起始线上点三个样品： 1. 阿司匹林（乙酰水杨酸）
2. 复方阿司匹林（镇痛药-APC）*
3. 咖啡因（茶叶中提取物）
每片药片中含APC有效成分是很低的。如乙酰水杨酸（A） 0.22克，非那西丁（P）0.15克，咖啡因（C）0.035克
Rf = 展开剂前沿到原始点中心的距离
确定组分：
通过Rf 值，从文献中可查到相应化合物的名称，从 而可确定相应的组分。
根据所得的实验数据，确定镇痛药APC的成分。
D
d2
×
APC
Hale Waihona Puke d1× 阿司 匹林× 咖啡因
Rf咖啡因 = d1 / D R = f阿司匹林 d2 / D
复方APC： Rf1 Rf2 Rf3
COOH OCOCH3
A
NHCOCH3
OC2H5 P
O
CH3 N
O
N
CH3
C
CH3 N
N
4. 展 开④
展开缸： 标本缸带有磨砂玻璃及盖子，或用广口瓶
展开剂※： 苯∶乙醚∶冰醋酸∶甲醇 = 120∶60∶18∶1
展开：
展开缸 展开剂
盖好玻璃盖 放入点好样品的层析板 盖好盖子
展开剂上升到预定位置时 立即取出用铅笔划一记号
显色
待薄层板干燥后，便可观察斑点的位置。 碘蒸气法：如果斑点无颜色，可将薄层板置放在装有几粒 碘晶的广口瓶内盖上瓶盖。当薄层板上出现明显的暗棕色 斑点后，即可将其取出，并马上用铅笔标出斑点的位置。
荧光法：如果薄层板上掺有荧光物质，则可直接在紫外灯 下观察,化合物会因吸收紫外光而呈黑色斑点。
市售的止痛药片—复方阿司匹林（APC），每片药片 中含一定的有效成分：