第5章 双水相萃取
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双水相系统的相图可由实验测定： 双水相系统的相图可由实验测定
以此类推， 以此类推，由实验测定一系列双节线上 的系统组成点，以高聚物P浓度对高聚物 的系统组成点，以高聚物 浓度对高聚物 Q浓度作图，即可得到双节线 浓度作图， 浓度作图
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2.3 常用的双水相体系
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常用体系
双水相萃取中常采用的双聚合物系 统为PEG/Dex，该双水相的上相富 ， 统为 含PEG，下相富含 ，下相富含Dex。 。
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概述: §1. 概述
问题的提出： 问题的提出：常规的分离方法 1． 过滤和离心技术 ． 已被广泛地应用于固液分离工程中， 已被广泛地应用于固液分离工程中， 但这两种单元操作依赖于被分离颗粒的 尺寸或密度的差异， 尺寸或密度的差异，因此当希望收集微 生物的细胞器、分离去除细胞碎片、 生物的细胞器、分离去除细胞碎片、提 取和浓缩胞内物质时，普通的过滤和离 取和浓缩胞内物质时， 心技术就不合适。 心技术就不合适。
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(1)高聚物的分子量 高聚物的分子量
在高聚物浓度保持不变的前提下， 在高聚物浓度保持不变的前提下，降 低该高聚物的分子量， 低该高聚物的分子量，被分配的可溶性 生物大分子如蛋白质或核酸， 生物大分子如蛋白质或核酸，或颗粒如 细胞或细胞碎片和细胞器， 细胞或细胞碎片和细胞器，将更多的分 配于该相。 体系而言， 配于该相。对PEG – Dcxtran体系而言， 体系而言 Dextran分子量减小，分配系数会减小； 分子量减小， 分子量减小 分配系数会减小； PEG 的分于量减小，物质的分配系数会 的分于量减小， 增大(见表 见表2-13)，这是一条普遍规律。 增大 见表 ，这是一条普遍规律。
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双水相萃取技术的优点： 双水相萃取技术的优点：
作为一种新型的分离技术，克服 作为一种新型的分离技术， 了常规萃取有机溶剂对生物物质的 变性作用， 变性作用，提供了一个温和的活性 环境，在萃取过程中具有保持生物 环境，在萃取过程中具有保持生物 物质的活性及构象等明显的技术优 物质的活性及构象等明显的技术优 势。
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大部分生物制品的原液是低浓度 和有生物活性的， 和有生物活性的，需要在低温或常 温条件进行富集、分离， 温条件进行富集、分离，因而常规 的萃取技术在这些领域中的应用受 到限制。双水相体系就是考虑到这 到限制。 种现状， 种现状，基于液液萃取理论同时考 虑保持生物活性所开发的一种新型 的液液萃取分离技术。 的液液萃取分离技术。
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双水相系统的相图可由实验测定： 双水相系统的相图可由实验测定
将一定量的高聚物P浓溶液置于试管内， 将一定量的高聚物 浓溶液置于试管内， 浓溶液置于试管内 然后用已知浓度的高聚物溶液Q来滴定 来滴定。 然后用已知浓度的高聚物溶液 来滴定。 随着高聚物Q的加入 的加入， 随着高聚物 的加入，试管内溶液由均 相突然变混浊，记录Q的加量 的加量。 相突然变混浊，记录 的加量。然后再在 试管内加入l 水 溶液又澄清， 试管内加入 ml水，溶液又澄清，继续滴 加高聚物Q，溶液又变混浊， 加高聚物 ，溶液又变混浊，计算此时系 统的总组成。 统的总组成。
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(2)高聚物浓度 高聚物浓度——界面张力的影响 高聚物浓度 界面张力的影响
当成相系统的总浓度增大时，系 当成相系统的总浓度增大时， 统远离临界点，系线长度增加，两 统远离临界点，系线长度增加， 相性质的差别(疏水性等 增大， 疏水性等)增大 相性质的差别 疏水性等 增大，界面 张力也随着增大， 张力也随着增大，蛋白质分子的分 配系数将偏离临界点处的值(m=1)， 配系数将偏离临界点处的值 ， 即大于1或小于 或小于1。 即大于 或小于 。
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由于这些聚合物都是以水作为溶 剂;因此形成上述的两个相体系就称 因此形成上述的两个相体系就称 双水相体系。 双水相体系。
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2.1.2 定义 定义: 利用双水相的成相现象及待分离 组分在两相间分配系数的差异， 组分在两相间分配系数的差异，进行 组分分离或多水相提纯的技术就叫做 双水相萃取技术。 双水相萃取技术。
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§3 双水相萃取原理
3.1 双水相萃取的基本原理 双水相萃般与水-有机相萃取的 双水相萃般与水 有机相萃取的 原理相似， 原理相似，都是依据物质在两相间 的选择性分配， 的选择性分配，但萃取体系的性质 不同。 不同。
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当物质进入双水相体系后，由于表面 当物质进入双水相体系后， 性质、电荷作用和各种力(如憎水键、 性质、电荷作用和各种力 如憎水键、 如憎水键 氢键和离子键等)的存在和环境因素的 氢键和离子键等 的存在和环境因素的 影响，在上相和下相间进行选择性分配， 影响，在上相和下相间进行选择性分配， 这种分配关系与常规的萃取分配关系相 表现出更大或更小的分配系数。 比，表现出更大或更小的分配系数。
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当两种高分子聚合物之间存在相互 排斥作用时，由于相对分子质量较 排斥作用时，由于相对分子质量较 大，分子间的相互排斥作用与混合 过程的熵增加相比占主导地位，一 过程的熵增加相比占主导地位， 种聚合物分子的周围将聚集同种分 子而排斥异种分子，当达到平衡时， 子而排斥异种分子，当达到平衡时， 即形成分别富含不同聚合物的两相。 即形成分别富含不同聚合物的两相。
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在双水相体系中．两相的水分都占 在双水相体系中．两相的水分都占85 ％～95％， ％，且成相的高聚物和无机盐一 ％～ ％，且成相的高聚物和无机盐一 般都是生物相容的， 般都是生物相容的，生物活性物质或细 胞在这种环境中不仅不会失活， 胞在这种环境中不仅不会失活，而且还 会提高它们的稳定性， 会提高它们的稳定性，因此双水相萃取 体系正越来越多地被用于生物技术领域。 体系正越来越多地被用于成机理 2.1.1 概念 把两种或两种以上具有一定浓度 的亲水性聚合物溶液混合后静置， 的亲水性聚合物溶液混合后静置，这些 亲水性的高分子聚合物并不混为一相， 亲水性的高分子聚合物并不混为一相， 而是分成多个液相，这种现象称之为聚 而是分成多个液相，这种现象称之为聚 合物的不相容性。 合物的不相容性。
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第五章 双水相萃取
1. 教学内容 双水相分离理论； 双水相分离理论；双水相的形 相图与物质在两相中的分配； 成；相图与物质在两相中的分配；双 水相萃取技术的应用与发展。 水相萃取技术的应用与发展。
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2．教学基本要求 ． 了解双水相形成原理及在生物工 程领域中的应用； 程领域中的应用；掌握双水相相图 的应用；掌握分配系数的应用。 的应用；掌握分配系数的应用。 3．重点与难点 ． 重点： 重点：掌握双水相相图极其应用。
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2.1.3 双水相的成相原因 空间阻碍作用 双水相的成相原因:
根据热力学第二定律可知， 根据热力学第二定律可知，混合 是熵增加的过程，因而可自发进行。 是熵增加的过程，因而可自发进行。 另一方面， 另一方面，分子间存在相互作用 力，并且这种分子间相互作用力随 相对分子质量的增大而增大。 相对分子质量的增大而增大。
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(3)盐类 盐类
由于盐的正、 由于盐的正、负离子在两相间的 分配系数不同，两相间形成电势差， 分配系数不同，两相间形成电势差， 从而影响带电生物大分子的分配。 从而影响带电生物大分子的分配。
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适宜的工艺条件主要通过实验方 法得到。 法得到。 这些因素直接影响被分配物质在 两相的界面特性和电位差， 两相的界面特性和电位差，并间接 影响物质在两相的分配。 影响物质在两相的分配。通过选择 合适的萃取条件， 合适的萃取条件，可以提高生物物 质的收率和纯度， 质的收率和纯度，也可以通过改变 条件将生物物质从双水相体系中反 萃出来。 萃出来。
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B相和 相质量之比等于系线上 与 相和C相质量之比等于系线上 相和 相质量之比等于系线上CA与 AB的线段长度之比。又由于两相密度 的线段长度之比。 的线段长度之比 相差很小(双水相体系上相和下相密度 相差很小 双水相体系上相和下相密度 常在1.0～ 之间)， 常在 ～1.1kg／dm3之间 ，故上下 ／ 相体积之比也近似等于系线上CA与 相体积之比也近似等于系线上CA与AB 线段长度之比， 线段长度之比，即：
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用A点代表体系总组成，B点和 点 点代表体系总组成， 点和C点 点代表体系总组成 点和 分别代表互相平衡的上相和下相组成， 分别代表互相平衡的上相和下相组成， 称为节点。 、 、 三点在一条直线 称为节点。A、B、C三点在一条直线 称为系线(tiellne)。系线的长度是 上，称为系线 。 衡量两相间相对差别的尺度， 衡量两相间相对差别的尺度，系线越 两相间的性质差别越大， 长，两相间的性质差别越大，反之则 越小。 越小。
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2．萃取 ．
是最常用的一种液液分离方法， 是最常用的一种液液分离方法，在 制药和化工行业应用极为普遍， 制药和化工行业应用极为普遍，但是 普通的有机溶剂萃取法由于以下原因 难于应用于蛋白质分离: 难于应用于蛋白质分离 (1)许多蛋白质都有极强的亲水性， 许多蛋白质都有极强的亲水性， 许多蛋白质都有极强的亲水性 不溶于有机溶剂; 不溶于有机溶剂 (2)蛋白质在有机溶剂相中易变性失 蛋白质在有机溶剂相中易变性失 活。
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2.2 相图
把双水相体系中的组成成分， 把双水相体系中的组成成分，分 别以不同的浓度相混， 别以不同的浓度相混，然后观察其 成相过程， 成相过程，把此过程以图的形式描 绘下来， 绘下来，即称为此种双水相体系的 相图。 相图。 不同的双水相体系， 不同的双水相体系，其成相条件 是不同的， 是不同的，相图常被用于研究不同 双水相体系中的成相现象。 双水相体系中的成相现象。
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其分配规律服从Nernst分配定律 其分配规律服从 分配定律
CT、CB分别代表上相、下相中的溶质 分别代表上相、 、 的浓度。研究表明，在相体系固定时， 的浓度。研究表明，在相体系固定时， 预分离物质在相当大的浓度范围内， 预分离物质在相当大的浓度范围内， 分配系数K为常数 与溶质的浓度无关， 为常数， 分配系数 为常数，与溶质的浓度无关， 只取决于被分离物质本身的性质和特 定的双水相体系。 定的双水相体系。
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生物分离过程的一般流程
原料液 细胞分离(离心，过滤) 细胞分离(离心，过滤) 路线一 路线二
细胞－ 细胞－胞内产物 路线一B 路线一B 包含体 溶解(加盐酸胍、 溶解(加盐酸胍、脲) 复性 细胞破碎 碎片分离
清液－ 清液－胞外产物
路线一A 路线一A
粗分离(盐析、萃取、超过滤等) 粗分离(盐析、萃取、超过滤等) 纯化(层析、电泳) 纯化(层析、电泳) 脱盐(凝胶过滤、超过滤) 脱盐(凝胶过滤、超过滤) 浓缩(超过滤) 浓缩(超过滤) 精制(结晶、干燥) 精制(结晶、干燥)
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3.2 影响物质分配平衡的因素
影响物质在双水相系统巾分配的 主要因素有： 主要因素有： 组成双水相体系的高聚物类型 高聚物类型； 组成双水相体系的高聚物类型； 高聚物的平均分子量 平均分子量和 高聚物的平均分子量和分子量分 布； 高聚物的浓度 浓度； 高聚物的浓度； 成相盐和非成相盐的种类 种类； 成相盐和非成相盐的种类；盐的 离子强度； 值 离子强度；pH值。
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双水相萃取技术缺点： 双水相萃取技术缺点：
易乳化、相分离时间长，成相聚合 易乳化、相分离时间长， 物的成本较高，水溶性高聚物大多 物的成本较高， 数黏度较大，不易定量控制； 数黏度较大，不易定量控制；水溶 性的高聚物难以挥发， 性的高聚物难以挥发，使反萃必不 可少，高聚物回收困难等。 可少，高聚物回收困难等。
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若A向双节线移动，B、C两点接近， 向双节线移动， 、 两点接近， 向双节线移动 两点接近 系线长度趋向于零时，即A点在双节线 系线长度趋向于零时， 点在双节线 K点时，体系变成一相，K称为临界点。 点时， 称为临界点。 点时 体系变成一相， 称为临界点 在同一系线上不同的点，总组成不同， 在同一系线上不同的点，总组成不同， 而上、下两相组成相同， 而上、下两相组成相同，只是两相体 不同， 积VT、VB不同，但它们均服从杠杆原 理。
双水相系统的相图可由实验测定： 双水相系统的相图可由实验测定
以此类推， 以此类推，由实验测定一系列双节线上 的系统组成点，以高聚物P浓度对高聚物 的系统组成点，以高聚物 浓度对高聚物 Q浓度作图，即可得到双节线 浓度作图， 浓度作图
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2.3 常用的双水相体系
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常用体系
双水相萃取中常采用的双聚合物系 统为PEG/Dex，该双水相的上相富 ， 统为 含PEG，下相富含 ，下相富含Dex。 。
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概述: §1. 概述
问题的提出： 问题的提出：常规的分离方法 1． 过滤和离心技术 ． 已被广泛地应用于固液分离工程中， 已被广泛地应用于固液分离工程中， 但这两种单元操作依赖于被分离颗粒的 尺寸或密度的差异， 尺寸或密度的差异，因此当希望收集微 生物的细胞器、分离去除细胞碎片、 生物的细胞器、分离去除细胞碎片、提 取和浓缩胞内物质时，普通的过滤和离 取和浓缩胞内物质时， 心技术就不合适。 心技术就不合适。
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(1)高聚物的分子量 高聚物的分子量
在高聚物浓度保持不变的前提下， 在高聚物浓度保持不变的前提下，降 低该高聚物的分子量， 低该高聚物的分子量，被分配的可溶性 生物大分子如蛋白质或核酸， 生物大分子如蛋白质或核酸，或颗粒如 细胞或细胞碎片和细胞器， 细胞或细胞碎片和细胞器，将更多的分 配于该相。 体系而言， 配于该相。对PEG – Dcxtran体系而言， 体系而言 Dextran分子量减小，分配系数会减小； 分子量减小， 分子量减小 分配系数会减小； PEG 的分于量减小，物质的分配系数会 的分于量减小， 增大(见表 见表2-13)，这是一条普遍规律。 增大 见表 ，这是一条普遍规律。
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双水相萃取技术的优点： 双水相萃取技术的优点：
作为一种新型的分离技术，克服 作为一种新型的分离技术， 了常规萃取有机溶剂对生物物质的 变性作用， 变性作用，提供了一个温和的活性 环境，在萃取过程中具有保持生物 环境，在萃取过程中具有保持生物 物质的活性及构象等明显的技术优 物质的活性及构象等明显的技术优 势。
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大部分生物制品的原液是低浓度 和有生物活性的， 和有生物活性的，需要在低温或常 温条件进行富集、分离， 温条件进行富集、分离，因而常规 的萃取技术在这些领域中的应用受 到限制。双水相体系就是考虑到这 到限制。 种现状， 种现状，基于液液萃取理论同时考 虑保持生物活性所开发的一种新型 的液液萃取分离技术。 的液液萃取分离技术。
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双水相系统的相图可由实验测定： 双水相系统的相图可由实验测定
将一定量的高聚物P浓溶液置于试管内， 将一定量的高聚物 浓溶液置于试管内， 浓溶液置于试管内 然后用已知浓度的高聚物溶液Q来滴定 来滴定。 然后用已知浓度的高聚物溶液 来滴定。 随着高聚物Q的加入 的加入， 随着高聚物 的加入，试管内溶液由均 相突然变混浊，记录Q的加量 的加量。 相突然变混浊，记录 的加量。然后再在 试管内加入l 水 溶液又澄清， 试管内加入 ml水，溶液又澄清，继续滴 加高聚物Q，溶液又变混浊， 加高聚物 ，溶液又变混浊，计算此时系 统的总组成。 统的总组成。
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(2)高聚物浓度 高聚物浓度——界面张力的影响 高聚物浓度 界面张力的影响
当成相系统的总浓度增大时，系 当成相系统的总浓度增大时， 统远离临界点，系线长度增加，两 统远离临界点，系线长度增加， 相性质的差别(疏水性等 增大， 疏水性等)增大 相性质的差别 疏水性等 增大，界面 张力也随着增大， 张力也随着增大，蛋白质分子的分 配系数将偏离临界点处的值(m=1)， 配系数将偏离临界点处的值 ， 即大于1或小于 或小于1。 即大于 或小于 。
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由于这些聚合物都是以水作为溶 剂;因此形成上述的两个相体系就称 因此形成上述的两个相体系就称 双水相体系。 双水相体系。
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2.1.2 定义 定义: 利用双水相的成相现象及待分离 组分在两相间分配系数的差异， 组分在两相间分配系数的差异，进行 组分分离或多水相提纯的技术就叫做 双水相萃取技术。 双水相萃取技术。
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§3 双水相萃取原理
3.1 双水相萃取的基本原理 双水相萃般与水-有机相萃取的 双水相萃般与水 有机相萃取的 原理相似， 原理相似，都是依据物质在两相间 的选择性分配， 的选择性分配，但萃取体系的性质 不同。 不同。
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当物质进入双水相体系后，由于表面 当物质进入双水相体系后， 性质、电荷作用和各种力(如憎水键、 性质、电荷作用和各种力 如憎水键、 如憎水键 氢键和离子键等)的存在和环境因素的 氢键和离子键等 的存在和环境因素的 影响，在上相和下相间进行选择性分配， 影响，在上相和下相间进行选择性分配， 这种分配关系与常规的萃取分配关系相 表现出更大或更小的分配系数。 比，表现出更大或更小的分配系数。
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当两种高分子聚合物之间存在相互 排斥作用时，由于相对分子质量较 排斥作用时，由于相对分子质量较 大，分子间的相互排斥作用与混合 过程的熵增加相比占主导地位，一 过程的熵增加相比占主导地位， 种聚合物分子的周围将聚集同种分 子而排斥异种分子，当达到平衡时， 子而排斥异种分子，当达到平衡时， 即形成分别富含不同聚合物的两相。 即形成分别富含不同聚合物的两相。
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在双水相体系中．两相的水分都占 在双水相体系中．两相的水分都占85 ％～95％， ％，且成相的高聚物和无机盐一 ％～ ％，且成相的高聚物和无机盐一 般都是生物相容的， 般都是生物相容的，生物活性物质或细 胞在这种环境中不仅不会失活， 胞在这种环境中不仅不会失活，而且还 会提高它们的稳定性， 会提高它们的稳定性，因此双水相萃取 体系正越来越多地被用于生物技术领域。 体系正越来越多地被用于成机理 2.1.1 概念 把两种或两种以上具有一定浓度 的亲水性聚合物溶液混合后静置， 的亲水性聚合物溶液混合后静置，这些 亲水性的高分子聚合物并不混为一相， 亲水性的高分子聚合物并不混为一相， 而是分成多个液相，这种现象称之为聚 而是分成多个液相，这种现象称之为聚 合物的不相容性。 合物的不相容性。
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第五章 双水相萃取
1. 教学内容 双水相分离理论； 双水相分离理论；双水相的形 相图与物质在两相中的分配； 成；相图与物质在两相中的分配；双 水相萃取技术的应用与发展。 水相萃取技术的应用与发展。
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2．教学基本要求 ． 了解双水相形成原理及在生物工 程领域中的应用； 程领域中的应用；掌握双水相相图 的应用；掌握分配系数的应用。 的应用；掌握分配系数的应用。 3．重点与难点 ． 重点： 重点：掌握双水相相图极其应用。
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2.1.3 双水相的成相原因 空间阻碍作用 双水相的成相原因:
根据热力学第二定律可知， 根据热力学第二定律可知，混合 是熵增加的过程，因而可自发进行。 是熵增加的过程，因而可自发进行。 另一方面， 另一方面，分子间存在相互作用 力，并且这种分子间相互作用力随 相对分子质量的增大而增大。 相对分子质量的增大而增大。
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(3)盐类 盐类
由于盐的正、 由于盐的正、负离子在两相间的 分配系数不同，两相间形成电势差， 分配系数不同，两相间形成电势差， 从而影响带电生物大分子的分配。 从而影响带电生物大分子的分配。
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适宜的工艺条件主要通过实验方 法得到。 法得到。 这些因素直接影响被分配物质在 两相的界面特性和电位差， 两相的界面特性和电位差，并间接 影响物质在两相的分配。 影响物质在两相的分配。通过选择 合适的萃取条件， 合适的萃取条件，可以提高生物物 质的收率和纯度， 质的收率和纯度，也可以通过改变 条件将生物物质从双水相体系中反 萃出来。 萃出来。
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B相和 相质量之比等于系线上 与 相和C相质量之比等于系线上 相和 相质量之比等于系线上CA与 AB的线段长度之比。又由于两相密度 的线段长度之比。 的线段长度之比 相差很小(双水相体系上相和下相密度 相差很小 双水相体系上相和下相密度 常在1.0～ 之间)， 常在 ～1.1kg／dm3之间 ，故上下 ／ 相体积之比也近似等于系线上CA与 相体积之比也近似等于系线上CA与AB 线段长度之比， 线段长度之比，即：
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用A点代表体系总组成，B点和 点 点代表体系总组成， 点和C点 点代表体系总组成 点和 分别代表互相平衡的上相和下相组成， 分别代表互相平衡的上相和下相组成， 称为节点。 、 、 三点在一条直线 称为节点。A、B、C三点在一条直线 称为系线(tiellne)。系线的长度是 上，称为系线 。 衡量两相间相对差别的尺度， 衡量两相间相对差别的尺度，系线越 两相间的性质差别越大， 长，两相间的性质差别越大，反之则 越小。 越小。
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2．萃取 ．
是最常用的一种液液分离方法， 是最常用的一种液液分离方法，在 制药和化工行业应用极为普遍， 制药和化工行业应用极为普遍，但是 普通的有机溶剂萃取法由于以下原因 难于应用于蛋白质分离: 难于应用于蛋白质分离 (1)许多蛋白质都有极强的亲水性， 许多蛋白质都有极强的亲水性， 许多蛋白质都有极强的亲水性 不溶于有机溶剂; 不溶于有机溶剂 (2)蛋白质在有机溶剂相中易变性失 蛋白质在有机溶剂相中易变性失 活。
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2.2 相图
把双水相体系中的组成成分， 把双水相体系中的组成成分，分 别以不同的浓度相混， 别以不同的浓度相混，然后观察其 成相过程， 成相过程，把此过程以图的形式描 绘下来， 绘下来，即称为此种双水相体系的 相图。 相图。 不同的双水相体系， 不同的双水相体系，其成相条件 是不同的， 是不同的，相图常被用于研究不同 双水相体系中的成相现象。 双水相体系中的成相现象。
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其分配规律服从Nernst分配定律 其分配规律服从 分配定律
CT、CB分别代表上相、下相中的溶质 分别代表上相、 、 的浓度。研究表明，在相体系固定时， 的浓度。研究表明，在相体系固定时， 预分离物质在相当大的浓度范围内， 预分离物质在相当大的浓度范围内， 分配系数K为常数 与溶质的浓度无关， 为常数， 分配系数 为常数，与溶质的浓度无关， 只取决于被分离物质本身的性质和特 定的双水相体系。 定的双水相体系。
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生物分离过程的一般流程
原料液 细胞分离(离心，过滤) 细胞分离(离心，过滤) 路线一 路线二
细胞－ 细胞－胞内产物 路线一B 路线一B 包含体 溶解(加盐酸胍、 溶解(加盐酸胍、脲) 复性 细胞破碎 碎片分离
清液－ 清液－胞外产物
路线一A 路线一A
粗分离(盐析、萃取、超过滤等) 粗分离(盐析、萃取、超过滤等) 纯化(层析、电泳) 纯化(层析、电泳) 脱盐(凝胶过滤、超过滤) 脱盐(凝胶过滤、超过滤) 浓缩(超过滤) 浓缩(超过滤) 精制(结晶、干燥) 精制(结晶、干燥)
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3.2 影响物质分配平衡的因素
影响物质在双水相系统巾分配的 主要因素有： 主要因素有： 组成双水相体系的高聚物类型 高聚物类型； 组成双水相体系的高聚物类型； 高聚物的平均分子量 平均分子量和 高聚物的平均分子量和分子量分 布； 高聚物的浓度 浓度； 高聚物的浓度； 成相盐和非成相盐的种类 种类； 成相盐和非成相盐的种类；盐的 离子强度； 值 离子强度；pH值。
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双水相萃取技术缺点： 双水相萃取技术缺点：
易乳化、相分离时间长，成相聚合 易乳化、相分离时间长， 物的成本较高，水溶性高聚物大多 物的成本较高， 数黏度较大，不易定量控制； 数黏度较大，不易定量控制；水溶 性的高聚物难以挥发， 性的高聚物难以挥发，使反萃必不 可少，高聚物回收困难等。 可少，高聚物回收困难等。
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若A向双节线移动，B、C两点接近， 向双节线移动， 、 两点接近， 向双节线移动 两点接近 系线长度趋向于零时，即A点在双节线 系线长度趋向于零时， 点在双节线 K点时，体系变成一相，K称为临界点。 点时， 称为临界点。 点时 体系变成一相， 称为临界点 在同一系线上不同的点，总组成不同， 在同一系线上不同的点，总组成不同， 而上、下两相组成相同， 而上、下两相组成相同，只是两相体 不同， 积VT、VB不同，但它们均服从杠杆原 理。