菠萝蛋白酶的含量测定

4、消炎作用
菠萝蛋白酶在各种组织中能有效地治疗炎症和水肿(包括血栓静脉炎、 骨骼肌损伤、血肿、口腔炎、糖尿病人溃疡及运动损伤)，菠萝蛋白酶具 有激活炎症反应的潜力。菠萝蛋白酶还可治疗腹泻。
5、增进药物吸收 将菠萝蛋白酶与各种抗生素(如四环素, 阿莫西林等)联用, 能提高其疗效。 相关研究表明, 它能促进抗生素在感染部位的传输, 从而减少抗生素的用
含量的测定 0.1M的牛血清蛋白
浓度mg/ml
标准蛋白（ml） 磷酸缓冲液（ml） 考马斯亮蓝（ml） 测A595
0 0.002 0.004 0.008 0.012 0.016 0.02
待测液
1
0
0.1
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1 4
0.9 4
0.8 4
0.6 4
0.4 4
0.2 4
0 4
0 4
实验结果记录
操作步骤
1.选取菠萝一个榨汁，用四层纱布过滤得果汁；
2.取果汁，加5%柠檬酸钠10ml，搅拌均匀； 3.4000r/min离心7min取上清液；
4.在上清液中加0.2%的单宁30ml，边加边搅拌15min，可见澄清析出，
静置40min； 5.除去上清液，以4000r/min离心5min丢掉上清液； 6.把提取的蛋白酶糊倒入烧杯中，加0.1%EDTA溶液100ml搅匀，再把 1.5%氯化钠溶液200ml倒入烧杯中搅匀，以4000r/min离心7min，倒掉 上清液，得到洗涤剂I酶复合沉淀物。
1.菠萝的质量： 2.所得沉淀的质量：
3.上清液在275nm波长OD值：
4.待测液在595nm波长下吸光度：
实验结果记录
浓度mg/ml 0 0.002 0.004 0.008 0.012 0.016 0.02 待测液
标准蛋白（ml）
0
0.1
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1
磷酸缓冲液（ml） 1
0.9
0.8
菠萝蛋白酶的来源与应用 菠萝蛋白酶主要来自于菠萝的茎叶皮儿。 菠萝蛋白酶的应用： 一、菠萝蛋白酶在食品加工业的应用 1、焙烤食品：将菠萝蛋白酶加入生面团中，可使面筋降解，生面团 被软化后易于加工。并能提高饼干与面包的口感与品质。
2、干酪：用于干酪素的凝结。
3、肉类的嫩化：菠萝蛋白酶将肉类蛋白质的大分子蛋白质水解为易 吸收的小分子氨基酸和蛋白质。可广泛地应用于肉制品的精加工。 4、菠萝蛋白酶在其它食品加工业中的应用，有人已经用菠萝蛋白酶 来增加豆饼和豆粉的PDI值和NSI值，从而生产出可溶性蛋白制品及 含豆粉的早餐、谷类食物和饮料。其它还有生产脱水豆类、婴儿食品 和人造黄油；澄清苹果汁；制造软糖；为病人提供可消化的食品；给
项目一
从菠萝中提取菠萝蛋白酶
菠萝蛋白酶编号：EC 3.4.22.33。一种来源于菠萝的多肽水解酶，属巯基
蛋白酶。简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤梨酵素)是从菠萝果茎、叶、皮提取 出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋 白酶。其外观为浅灰色粉末状，分子量为 33000 ，等电点为 9.55 。品质最佳 的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工,采用超滤方法进行过滤浓缩,低温冷冻干 燥而得的。产品已被广泛应用于食品、医药等行业。
药量。据推
进营养物质的吸收。 三、菠萝蛋白酶在美容化妆品业中的应用 菠萝蛋白酶具有嫩肤、美白去斑的优异功效。 基本作用原理：菠萝蛋白酶可作用于人体皮肤上的老化角质层，促使其 退化、分解、去除，促进皮肤新陈代谢，减少因日晒引起的皮肤色深现 象。使皮肤保养呈现良好白嫩状态。
日常食品添味等。
二、菠萝蛋白酶在医药、保健品业的应用 1、抑制肿瘤细胞的生长 经相关临床研究观察表明，菠萝蛋白酶能抑制肿瘤细胞的生长。 2、对心血管疾病的防治
菠萝蛋白酶作为蛋白水解酶对心血管疾病的防治是有益的。它能抑制
血小板聚集引起的心脏病发作和中风, 缓解心绞痛症状,缓和动脉收缩, 加速纤维蛋白原的分解。 3、用于烧伤脱痂 菠萝蛋白酶能选择性地除 皮, 使新皮移植得以尽早进行。动物实验证 明, 菠萝蛋白酶对邻近的正常皮肤无不良影响。局部使用抗生素不影响 菠萝蛋白酶的效果。
质量检测
1.得到洗涤剂I酶复合沉淀物后加磷酸缓冲液定溶至10ml； 2.以4000r/min离心5min收集上清液； 3.取1ml溶液酶加入0.9ml激活剂与37℃水浴中保温； 4.保温后，加同样预热的1%酪蛋白溶液，混匀，37℃下10min,加入8ml 1mol/ml氢氧化钠溶液，迅速摇匀，室温放置30min; 5.取上清液于275nm波长下测定OD值； 6.做考马斯亮蓝法测蛋白质含量的标准曲线。
0.6
0.4
0.2
0
0
考马斯亮蓝（ml） 4
4
4
4
4
4
4
4
测A595
0
实验结果讨论
1.所得粗产品占总菠萝的百分数=所得沉淀质量/菠萝总质量*100% 2.OD275= (在上述条件下，单位时间内光吸收单位的变化值为待测 溶液酶的活力）所得酶的活力：
3.在595nm下的吸光度：
由图和公式的蛋白的浓度：
四、菠萝蛋白酶制剂在饲料中的应用
将菠萝蛋白酶加入饲料配方或直接混合在饲料中，可以大大提高蛋白质 的利用率和转化率，并能开发更广的蛋白源，从而降低饲料成本。
提取工艺
压榨 菠萝下脚料
去杂质
加稳定剂 稳定液
加单宁 单宁沉淀物 溶液弃去
汁液 残渣 （弃去） 干燥 酶制品
澄清液
沉淀物（弃去）
洗脱 滤液
沉淀弃去
菠
萝
蛋
白
酶
名
片
物理性质
白色至浅棕黄色无定形粉末。溶于水，水溶液无色至淡黄色， 有时有乳白光，不溶于乙醇、氯仿和乙醚。属糖蛋白。 主要 作用原理：使多肽类水解为低分子量的肽类。尚有水解酰胺
基键和酯类的作用。
化学性质
分子量：约33000， 等电点pH值：9.35 最适pH值：6～8 最适温度：55℃。