溴百里酚蓝解离常数的测定

A Aa pKa pH lg Ab A
该模式下使空白试样 透光率100%
该模式下使空白试 样吸光度为0.000
拉动滑竿测定 样品的吸光度
酸度计的使用方法
1. 打开橡皮塞和电 极帽 2. 设置温度为室温 3. 以pH=4.00的缓 冲溶液定位（缓 冲溶液需浸没酸 度计玻璃电极） 4. 清洗电极，测试 所配溶液pH值。
四、实验步骤
1.按照下表配制溶液，并加水稀释至30mL左右。
2.用蒸馏水定容至50 mL，摇匀。
3.以蒸馏水为空白，对1号容量瓶(纯酸型HIn) 和7号容量瓶（纯碱型In-）两份溶液，在波长 450nm-650nm之间每间隔20nm测定一次，测定 不同波长下的吸光度;
波长/nm 450 470 490 510 530 550 570 590 610 630
编号
V(NH4H2PO4)/mL
V [(NH4)2HPO4]/ mL BTB/ mL
1
2
3
4
5
6
7
10.00 0.00 10.00
10.00 20.00 10.00 2.00 2.00 0.00 2.00 10.00 20.00 10.00 20.00 10.00 10.00 10.00 10.00 10.00 10.00 10.00
1号Aa 7号Ab
4.找出HIn与In-两溶液吸光度差别最大的 波长，并在此波长下准确测定1-7号各份溶 液的吸光度。
编号 A 1 2 3 4 5 6 7
5.用酸度计准确测定各份溶液的pH。
编号 pH 1 2 3 4 5 6 7
五、数据处理
• 将所测数据代入公式，计算每份BTB溶 液的pKa和Ka值，并计算平均值 。
Aa aa0
Ab ba0
溶液总活度
当溶液中同时存在HIn和In-时，其吸光度为 ：
A a aHIn b aIn a aHIn b (a0 aHIn )
aIn aHIn A Aa Ab A
A Aa pKa pH lg Ab A
容积光面对7200型分光光度计的使用方法该模式下使空白试样透光率100该模式下使空白试样吸光度为0000拉动滑竿测定样品的吸光度酸度计的使用方法以ph400的缓冲溶液定位缓冲溶液需浸没酸度计玻璃电极清洗电极测试所配溶液ph值
溴百里酚蓝解离常数的测定
一、实验目的
• 掌握用分光光度法测定溴百里酚兰解离常数 的原理与方法。 • 学会使用分光光度计和酸度计。
二、实验原理
• 溴百里酚兰（BTB）是一种弱酸，可用 HIn表示，在溶液中按照下式电离：
HIn H In
a(H )a(In ) Ka a(HIn)





a(In ) pKa pH lg a(HIn)
• HIn 和In-分别为BTB的酸型和碱型，其吸光 度A均服从朗伯—比耳定律：
三、仪器和试剂
• 仪器 分光光度计1台、酸度计1台、50mL容量瓶 7个、10mL移液管2支、2mL移液管2支。 • 试剂 0.005%BTB溶液、0.2 mol· L-1NH4H2PO4溶 液、0.2 mol· L-1 （NH4）2HPO4溶液。
7200型分光光度计的使用方法
¾容积
手握 毛面
光面对 准光路