柞蚕败血病致病菌赛氏杆菌对柞蚕幼虫及成虫感染试验

幼 虫 经 皮 注 射 赛 氏杆 菌 ， 次 日， 处理 和对 照
资 助 项 目： 现代农业产业技术体系建设专项 （ Ｃ ＡＲ Ｓ － ２ ２ ） ； 辽宁省科技厅项 目（ ２ ０ １ ２ ２ ０ １ ０ ２ ４ — ６ — １ ） 作 者 简介 ： 赫英姿（ １ ９ ７ ３ 一） ， 女， 大 学本 科 ， 副研究员 。 通 信 作者 ： 宋策（ １ ９ ６ ６ 一） ， 男， 硕士 ， 研 究 员 。Ｅ － ｍａ ｉ ｌ ： ｓ ｏ ｎ ｇ ｃ ｅ ＠１ ６ ３ ． Ｃ Ｏ ｎ ｒ
３天 的发 病 率 达 到 ８ Ｏ 。成 虫 空 气 喷 洒 菌 液 ，
龄蚕 。
１ ） 经 口添食 。每 瓶 Ｉ头 蚕 ， 共 ３ ０头 蚕 。另
设 清 水 对 照 。选 取 大 小 均 匀 的 ３ Ｏ片 叶 片 ， 用 棉 球 蘸 取 制 备 好 的 赛 氏杆 菌 的菌 液 涂 布 叶 片 ， 以 叶片 涂 满 为 度 ， 阴干 。另 取 新 鲜 叶 片 用作 对 照 。
摘 要 柞蚕 败血 病在 室 内养蚕试 验 中 时常发 生 ， 尤其是 赛 氏杆 菌感 染致 死 蚕 （ 蛾） 呈现 鲜 艳 的玫 瑰红 色而容 易辨 别 。通过 试 验 表 明 ： 赛 氏 杆 菌在 柞 蚕 幼 虫之 间主 要 是 通 过 体 表 抓 伤 传
染， 在 蛾体 也是 以体 壁创 伤的 方 式感病 较重 。 关键 词 柞蚕 幼 虫 柞蚕 蛾 经 口添食 经皮 注射 感 染 赛 氏杆 菌
没 有 发 病 。结 果 见 表 ２ 。
表 １ 赛 氏杆 菌对柞 蚕三龄 幼 虫经 口添食 感染情 况
３ ． １ 通 常 发 生 在 柞 蚕 幼 虫 和 成 虫 期 的 柞
蚕败 血病 ， 以 细 菌 经 体 壁 伤 口侵 入 而 引 起 的 原
发性 感 染 发 病 为 重 。 以赛 氏 杆 菌 为 例 ， 三 龄 幼 虫 经 口添 食 ， １ ０天 的 发 病 率为 ２ Ｏ ； 经皮注射 ，
在柞 蚕 室 内试 验 中 ， 常 常 由于 饲 养 环 境 密
闭， 蚕 群 密 度 较 大 而 大 量 发生 柞 蚕败 血 病 ， 成 为 影 响试 验 结 果 的一 大 因素 。柞 蚕 幼 虫 和 成 虫 原 发性 败 血病 （ 细 菌 直 接 从 蚕 的 体 壁 伤 口侵 入 血 淋 巴 内 而 引起 发 病 ） 和 继 发性 败 血 病 （ 败 血 病 菌
１ 材 料 与方 法 １ ． １ 材 料
２ ） 经 皮 注 射 。取 ３ Ｏ头 三 龄柞 蚕 ， 每 养 虫 瓶 Ｉ头 ， 用 微 量 进 样 器 每 头 注 射 ５微 升 上 述 菌 液 ， 另有 ３ Ｏ头 注 射 无 菌 水 作 为 对 照 。 １ ． ２ ． ３ 对 柞 蚕 成 虫 的感 染 试 验
２ ． １ 幼 虫 感 染 结 果
幼 虫 经 口添 食赛 氏杆 菌 ， ５天 后 ， 有 ３头 蚕
发生败血病 ， 体 色微 红 ， 至 第 十 天 另 有 ３头 发 病， 清水 对 照始 终 没 有 发 病 。结 果 见 表 １ 。
１ ． ２ ． ２ 对ห้องสมุดไป่ตู้柞 蚕 幼 虫 感 染 试 验
春柞蚕种卵消毒 ， 收蚁 ， 饲 养 至二 眠起 即三
试 蚕 饥 饿 半 天 后 统 一 饲 喂 。２ ４ ｈ后 除 沙 ， 换 新
鲜 叶片 。
在 蚕 消 食 管 内繁 殖 ， 是 否 发 病 由蚕 发 育 状 况 决
定） 口 的 发 病 率 究 竟 怎 样 目前 还 未 见 报 道 。下
面仅 以 赛 氏 杆 菌感 染 为 例作 一 研 究 。
试验柞蚕成虫 ： 本 所 二 化 一 放 课 题 组 抗 大
品种母蛾 。
１ ） 空 气 喷 洒 菌 液 。取 ３ ０头 二 化 一 放 抗 大
品种 母 蛾 ， 每 养 虫 瓶 装 入 １头 ， 然 后 装 入 一 个 纸 箱， 用小 喷 壶 在 箱 内 喷 洒 菌 液 ， 然 后 盖 上 纸 箱 口。设 喷 清 水 对 照 。 ２ ） 蛾 体 注 射 菌 液 。取 ３ Ｏ头 母 蛾 ， 每 蛾 用 微
３ ２
北方蚕业 ２ ０ １ ６ ， ３ ７ （ ４ ）
・ 试验研究 ・
各有两头死蚕 ， 至 第 三 日处 理 死 蚕 体 色 变 成 粉 红色 ， 对 照 死 蚕 体 色 不 变 。第 三 天 处 理 区 ８ Ｏ
３ 结 论
蚕 死 亡 且 体色 发 红 ， 为赛 氏杆 菌 感 染 所 致 ， 对 照
试 验 蚕 ：本 课 题 组抗 大 ｘ ９ ９ ０ ６杂 交 种 卵 所 孵化幼虫 。
赛 氏杆 菌 病 原 菌 为本 课 题 组 保 存 。
１ ． ２ 方 法
量 进 样 器 注 射 ５微 升 上 述 菌 液 ， 另取 ３ ０头 注 射 无 菌 水 作 为 对 照 。室 温 ２ ３ ～３ Ｏ ℃。
・
试验研究 ・
北方蚕业 ２ ０ １ ６ ， ３ ７ （ ４ ）
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柞 蚕败 血病 致病 菌赛 氏杆 菌对 柞 蚕 幼 虫及 成 虫 感 染 试 验
赫英姿 刘孝 良 于庭洪 贾 姝 赵 种 左玲玲 宋 策
（ 辽宁省蚕业科学研究所 ， 辽宁凤凰蚕药专业技术创新平台， 辽宁省野蚕研究重点实验室 ， ｉ Ｔ ． 宁凤城 １ １ ８ １ ０ ０ ）
２ 结 果
１ ． ２ ． １ 赛 氏杆 菌 菌 悬 液 制 备 培养基配方 ： 氯化钠 ０ ． ５ ， 牛 肉膏 ０ ． ５ ， 蛋 白胨 １ ， 琼脂 ２ ， ｐ Ｈ７ ～７ ． ２ 。每 支 试 管 加 注 ５ ｍＬ培 养 基 ， 摆 成斜面 ， 接 菌 备 用 。取 若 干 支菌管 ， 刮下 斜 面 菌 落 ， 每管 加无菌 水 １ ０ ｍＬ， 收 集 到 三 角 瓶 中震 荡 备 用 。