母种的制作

平菇母种的制作
一、目的要求
掌握马铃薯葡萄糖等半组合培养基的制备方法。

掌握平菇等食用菌母种的制作和接种方法。

二、基本原理
培养基是按照生物生长繁殖所需要的各种营养，用人工方法配制而成的营养基质。

根据营养物质来源的不同，培养基可分为天然、半合成和合成培养基三类。

天然培养基是以自然界原有的有机物为材料经灭菌后制成，如马铃薯、胡萝卜、水果、大麦粒、高粱粒等。

半合成培养基中既有一些天然的有机物质，又有一些成分简单或明确的化合物。

如常用的马铃薯葡萄糖培养基（PDA），肉汁胨培养基（NA）等。

合成培养基是由一些成分明确的化合物配制而成的，没有任何成分不明确的物质，常用于研究微生物的生理生化性状，如查氏（Czapek）培养基等。

在食用菌栽培中，最常用培养基有马铃薯葡萄糖培养基（PDA），主要用于分离培养霉菌。

在PDA培养基配方中也可用蔗糖代替葡萄糖，这样配制的培养基也称为PSA培养基。

三、材料、试剂与仪器
1．材料马铃薯。

2．试剂葡萄糖、琼脂等。

3．仪器与用品高压蒸汽灭菌锅、pH试纸（或酸度计）、试管、铝锅、搅拌棒、三角瓶、烧杯、漏斗、量筒、纱布、棉花、天平等。

四、操作步骤
PDA培养基（马铃薯葡萄糖培养基）配方
去皮马铃薯200g 葡萄糖20g
琼脂15～20g 蒸馏水1000ml
自然pH
五、实验步骤
1．称量称量去皮马铃薯100g，蔗糖10g，琼脂7.5-10g 。

2．将马铃薯切成小块，放入锅中，加水500ml，煮沸15min。

用4层纱布滤去马铃薯残渣。

3．将马铃薯滤液放回锅中，加入琼脂，加热熔化。

4．加入葡萄糖。

葡萄糖容溶解后，加入适量的水以补充加热过程中损失的水分，定容至500ml。

5．分装根据不同的实验目的，可将配制的培养基分装于试管内或三角瓶内。

分装试管，其量为管高的1/5，灭菌后制成斜面。

6．灭菌将上述培养基以0.103Mpa，121C, 高压蒸气灭菌
20min。

7．搁置斜面将灭菌的试管培养基冷至50C左右（以防斜面上冷凝水太多），将试管口端搁在玻棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。

8. 接种平菇母种。

六、思考题
什么是天然培养基？什么是合成培养基？。