高效薄层扫描法测定雷公藤搽剂中雷公藤内酯醇含量(精)

高效薄层扫描法测定雷公藤搽剂中雷公藤内酯醇含量更新日期：2009-12-21
点击：宁晓闽王宝奎刘锡钧提要运用高效薄层扫描法测定雷公藤搽剂中雷公藤内酯醇的含量，具有简便、快速、灵敏度高、重现性好等优点。

关
键词雷公藤搽剂；雷公藤内酯醇；薄层扫描法；含量测定 HPTLC Densitometric Determination of Triptolide (TL in Triptolide Liniment Ning Xiaomin, Wang Baokui, Liu Xijun Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command of PLA, Fuzhou350001 Abstract HPTLC densitometric determination of Triptolide (TL in Triptolide Liniment is simple, rapid, sensitive and reproductive. Key words Triptolide liniment;Triptolide (TL;HPTLC-Densitometric;Determination. 雷公藤搽剂是由雷公藤醋酸乙酯提取物配制成的透皮制剂，用于抗炎、镇痛、免疫抑制等。

雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤内酯醇是主要的有效成分，但也是主要的有毒成分［1］。

为了保证用药安全有效，探讨本品的内在质量，制定质控标准，本文采用高效薄层扫描法对雷公藤搽剂中的雷公藤内酯醇进行含量测定。

1实验部分 1.1仪器与试剂：CS-9000型薄层扫描仪(日本岛津公司，高效硅胶G板(青岛
海洋化工厂，定量毛细管(美国产；所用试剂均为分析纯；雷公藤内酯醇对照品(福建省医科所提供，雷公藤醋酸乙酯提取物，雷公藤搽剂(均自制。

1.2薄层层析及扫描条件：高效硅胶G板为吸附剂，氯仿－乙醚(2∶1为展开剂［2］，上行展开
约9 cm，取出晾干测定，用岛津CS-9000型薄层扫描仪定位，雷公藤内酯醇 Rf值为0.74，扫描条件为λS225 nm，反射锯齿扫描，摆幅12 mm，△Y 0.02，资料累
积数为1，寻峰参数为2。

1.3标准曲线的制备：精密称取减压干燥至恒重的雷公藤内酯醇对照品1.022 mg置10 ml容量瓶中，加无水乙醇溶解稀释至刻度，即得0.1022 μg/μl的对照品液。

在高效硅胶G板上，用定量毛细管点样，1、2、7、10 μl的对照品液(0.1022 μg/μl，以氯仿－乙醚(2∶1室温上行展开9 cm，取出晾干按
选定的扫描条件测定，结果见表1。

以点样量为横坐标，斑点积分值为纵坐标，在0.1～1.0 μg范围内呈线性关系，求得回归方程 Y=0.0776+3.8928×10-4 X.
γ=0.9999。

表1雷公藤内酯醇扫描积分值点样量(μl 积分面积 1 2457 2 4754 5 12796 7 17738 10 25449 1.4稳定性实验：取对照品溶液5 μl，按制备标准曲线的
方法点样，层析，取出晾干后扫描，0.5、12、24、48 h扫描，测定结果见表2。

实验表明稳定性好。

表2稳定性实验结果测定项 0.5h 12h 24h 48h 积分面积12831.574 12789.324 12789.283 13024.471 =12844.250； CV=0.97%
1.5雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤内酯醇含量测定：精密称取减压干燥恒重的雷公藤醋酸乙酯提取物5.005 mg置10 ml容量瓶中，无水乙醇溶解并稀释至刻度，作为供试液。

吸取供试液5 μl和对照品液2、5 μl点样，按选定的层析条件及扫描条件测定，外标2点法计算。

结果见表3。

表3雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤内酯醇含量测定点样量(μl 扫描面积样品中内酯醇测定量(μg/μl 醋酸乙酯提取物中内酯醇含量(% 5 7310 0.0579 0.1157 5 7290 0.0580 0.1159 5 7427 0.0594 0.1187 =0.1168%； CV=1.44% 1.6雷公藤醋酸乙酯提取物加样回收率测定：在供试液点样点上，加点雷公藤内酯醇对照品液(0.1022 μg/μl 2 μl或5 μl，测定。

结果见表4。

表4雷公藤醋酸乙酯提取物加样回收率测定样品中内酯醇含量(μg 加入内酯醇量(μg 测定量(μg 回收量(μg 回收率 (% 0.3127 0.2044 0.5101
0.1974 96.58 0.3084 0.5110 0.8139 0.5055 98.92 0.3244 0.5110 0.8114 0.4870 95.30
=96.93%； CV=1.89% 1.7雷公藤搽剂含量测定：用定量毛细管吸取搽剂10 μl，对照品液(0.1022 μg/μl 2、5 μl点样，按选定的层析及扫描条件测定，外标2点法计算含量。

结果见表5。

表5搽剂中雷公藤内酯醇含量测定点样量(μl 扫描面积样品中内酯醇含量(μg/μl 搽剂中内酯醇含量 (×10-3% 10 5934 0.0243 2.43 10 6012
0.0246 2.46 10 6084 0.0249 2.49 =2.46×10-3%； CV=1.22% 1.8雷公藤搽剂加样回收率测定：在搽剂点上加点对照品液(0.1022μg/μl 2、5 μl。

结果见表6。

表6
搽剂中加样回收率测定样品中含内酯醇(μg 加入酯醇量(μg 测定量(μg 回收量(μg 回收率 (% 0.3777 0.2044 0.5741 0.1964 96.09 0.3716 0.5110 0.8586 0.4870 95.30
0.3504 0.5110 0.8498 0.4994 97.74 =96.38%； CV=1.29% 2小结与讨论 2.1在高效硅胶G板上，用氯仿－乙醚(2∶1为展开剂上行展开约9 cm，雷公藤内酯醇被分离得较好， Rf值为0.74。

2.2经用岛津CS-9000型薄层扫描仪进行光谱测定，雷公藤内酯醇在225 nm处有最大吸收，故选用样品测定波长为225 nm，因干扰小，采用单波长扫描。

2.3雷公藤内酯醇斑点不经显色，用CS-9000型薄层扫描定位斑点在48 h内定时测定，结果稳定。

2.4本法灵敏、简便、快速、稳定性好，结果满意。

作者单位：宁晓闽，女，1950年生，主管药师作者单位：宁晓闽王宝
奎刘锡钧中国人民解放军南京军区福州总医院，福州350001 参考文献 1李瑞琳，舒达夫主编.雷公藤的研究与临床应用.北京：中国科学技术出版社，1989∶71 2郭信芳，王晓敏，李安娟，等.雷公勾藤醋酸乙酯
提取物及片剂中甲素的含量测定.中药通报，1986，11(8∶38。