第19章 生物素-亲合素系统
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第十九章
生物素-亲合素系统及其 在免疫检测技术中的应用
医学技术学院免疫教研室
熟悉：生物素-亲和素系统特点及应
用。
了解：其他。
生物素——亲合素系统 （ biotin-avidin system,BAS）
生物素与亲合素是一对具有高度亲合力 的分子，其结合迅速、专一、稳定。 既能偶联抗原、抗体等生物活性物质， 又能被酶、荧光素、胶体金等示踪物标 记，具有桥联抗原抗体系统和示踪物指 示系统的作用。
4.在生物素分子中可连接生物大分子(Ag/Ab) 的部位是(
D
)
A.戊酸侧链
B.咪唑铜环 C.噻吩环
E.苯环
D.侧链末端羧基
5.1mg亲和素的活性单位是( C )
A.3-5U D.15-18U B.5-8U E.20-30U C.13-15U
6.1mg链霉亲和素的活性单位是( D ) A.5U B.8U C.15U D.18U E.20U
7.生物素-亲和素系统中ABC的含义是( E )
A.生物素-抗体 B.生物素-亲和素抗体复合物
C.生物素-酶复合物
D.亲和素-酶复合物
E.亲和素-生物素化酶复合物 8.不属于BAS特点的是（ D ） A.特异型好 B.敏感性高 C.稳定性好 D.两者结合易受酸碱条件的影响 E.实用性强
端羧基经化学修
了解
饰后制成带各种
活性基团的衍生
物－活化生物素
(生物素化衍生物)
了解
生 物 素 活 化
活化生物素 易与抗原、 抗体偶联形 成生物素化 标记物
标记蛋白质氨基的活化生物素
标记蛋白质醛基的活化生物素
标记蛋白质巯基的活化生物素
标记核酸的活化生物素
第二节
亲合素和链霉亲合素的特性
亲合素和链霉亲合素是生物素
省却了加B-E的步骤。
1.每个亲和素能结合多少个分子的生物素( D) A.1 B.2 C.3 D.4 E.5 2.生物素分子中与亲和素结合的主要部位是( B) A.噻吩环 B.咪唑酮环 C.苯环
D.羰基
E.-NH-
3.亲和素分子中结合生物素分子的基团是( D) A.戊酸侧链 B.末端羧基 C.缬氨酸残基 D.色氨酸残基 E.赖氨酸残基
的天然结合物，可与几乎所有用 于标记的物质结合。
熟悉
亲合素（A） 链霉亲合素(SA)
结构 PI 结合位 生物素 活性 四亚基糖蛋白 10.5 色氨酸 4 13～15 四肽链蛋白无糖基 6 色氨酸 4 18
第三节 生物素与亲合素结合 反应的特点
熟悉
1.高特异性 2.高敏感性 3.稳定性强 4.适用性广、实用性强 成本低
熟悉
（一）生物素-亲合素-生物素模式
1.生物素-亲合素-生物素法（BAB法） 2.亲合素-生物素-过氧化酶复合物法 （ABC法）
1.生物素-亲合素-生物素法
BAB法：
Ag+B·Ab
B·E
熟悉
Ag-Ab·B
A
Ag-Ab·B-A
Ag-Ab·B-A-B·E
特点：以游离A分别连接B-Ab和B-E
原理 *ELISA-BAB法： 桥连亲和素-标记生物素法
第一节
生物素的特性
熟悉
一、 生物素理化性质
维生素H（维生素B7） I环为咪唑酮环，可与亲合 素结合 动、植物组织中广泛 Ⅱ环为噻吩环，环上戊酸 分布,卵黄和肝含量高 侧链的未端羧基是结合生 MW 244.31kD. 物大分子的唯一结构
I 咪唑酮环
羧基
Ⅱ
噻吩环
二、活化生物素
生物素侧链的末
ABC法 ⑴ A+B·E A-B·E ABC ⑵ Ag+B·Ab Ag-Ab·B ABC Ag-Ab·B-ABC 特点: 将BAB法中的A先与B-E结合，制备成 复合物ABC
（二）生物素-亲合素模式
BA法：
Ag+B·Ab Ag-Ab·B Ag-Ab·B-A-B·E
A·E
了解
特点：
以A-E/SA-E代替BAB法中的A
第四节 生物素-亲合素系统 在免疫检测技术中的应用
一、固相载ห้องสมุดไป่ตู้的包被
优点：增加抗原（抗体）包被数量，
BAS在ELISA中的应用 均相酶免疫定
减少空间位阻，提高利用率
生物素-亲合素系统在
1.生物素-链霉亲合素-生物素化 了解 抗体（或抗原）包被法
2.链霉亲合素-生物素化抗体 （或抗原）包被法
二、检测系统的信号放大
生物素-亲合素系统及其 在免疫检测技术中的应用
医学技术学院免疫教研室
熟悉：生物素-亲和素系统特点及应
用。
了解：其他。
生物素——亲合素系统 （ biotin-avidin system,BAS）
生物素与亲合素是一对具有高度亲合力 的分子，其结合迅速、专一、稳定。 既能偶联抗原、抗体等生物活性物质， 又能被酶、荧光素、胶体金等示踪物标 记，具有桥联抗原抗体系统和示踪物指 示系统的作用。
4.在生物素分子中可连接生物大分子(Ag/Ab) 的部位是(
D
)
A.戊酸侧链
B.咪唑铜环 C.噻吩环
E.苯环
D.侧链末端羧基
5.1mg亲和素的活性单位是( C )
A.3-5U D.15-18U B.5-8U E.20-30U C.13-15U
6.1mg链霉亲和素的活性单位是( D ) A.5U B.8U C.15U D.18U E.20U
7.生物素-亲和素系统中ABC的含义是( E )
A.生物素-抗体 B.生物素-亲和素抗体复合物
C.生物素-酶复合物
D.亲和素-酶复合物
E.亲和素-生物素化酶复合物 8.不属于BAS特点的是（ D ） A.特异型好 B.敏感性高 C.稳定性好 D.两者结合易受酸碱条件的影响 E.实用性强
端羧基经化学修
了解
饰后制成带各种
活性基团的衍生
物－活化生物素
(生物素化衍生物)
了解
生 物 素 活 化
活化生物素 易与抗原、 抗体偶联形 成生物素化 标记物
标记蛋白质氨基的活化生物素
标记蛋白质醛基的活化生物素
标记蛋白质巯基的活化生物素
标记核酸的活化生物素
第二节
亲合素和链霉亲合素的特性
亲合素和链霉亲合素是生物素
省却了加B-E的步骤。
1.每个亲和素能结合多少个分子的生物素( D) A.1 B.2 C.3 D.4 E.5 2.生物素分子中与亲和素结合的主要部位是( B) A.噻吩环 B.咪唑酮环 C.苯环
D.羰基
E.-NH-
3.亲和素分子中结合生物素分子的基团是( D) A.戊酸侧链 B.末端羧基 C.缬氨酸残基 D.色氨酸残基 E.赖氨酸残基
的天然结合物，可与几乎所有用 于标记的物质结合。
熟悉
亲合素（A） 链霉亲合素(SA)
结构 PI 结合位 生物素 活性 四亚基糖蛋白 10.5 色氨酸 4 13～15 四肽链蛋白无糖基 6 色氨酸 4 18
第三节 生物素与亲合素结合 反应的特点
熟悉
1.高特异性 2.高敏感性 3.稳定性强 4.适用性广、实用性强 成本低
熟悉
（一）生物素-亲合素-生物素模式
1.生物素-亲合素-生物素法（BAB法） 2.亲合素-生物素-过氧化酶复合物法 （ABC法）
1.生物素-亲合素-生物素法
BAB法：
Ag+B·Ab
B·E
熟悉
Ag-Ab·B
A
Ag-Ab·B-A
Ag-Ab·B-A-B·E
特点：以游离A分别连接B-Ab和B-E
原理 *ELISA-BAB法： 桥连亲和素-标记生物素法
第一节
生物素的特性
熟悉
一、 生物素理化性质
维生素H（维生素B7） I环为咪唑酮环，可与亲合 素结合 动、植物组织中广泛 Ⅱ环为噻吩环，环上戊酸 分布,卵黄和肝含量高 侧链的未端羧基是结合生 MW 244.31kD. 物大分子的唯一结构
I 咪唑酮环
羧基
Ⅱ
噻吩环
二、活化生物素
生物素侧链的末
ABC法 ⑴ A+B·E A-B·E ABC ⑵ Ag+B·Ab Ag-Ab·B ABC Ag-Ab·B-ABC 特点: 将BAB法中的A先与B-E结合，制备成 复合物ABC
（二）生物素-亲合素模式
BA法：
Ag+B·Ab Ag-Ab·B Ag-Ab·B-A-B·E
A·E
了解
特点：
以A-E/SA-E代替BAB法中的A
第四节 生物素-亲合素系统 在免疫检测技术中的应用
一、固相载ห้องสมุดไป่ตู้的包被
优点：增加抗原（抗体）包被数量，
BAS在ELISA中的应用 均相酶免疫定
减少空间位阻，提高利用率
生物素-亲合素系统在
1.生物素-链霉亲合素-生物素化 了解 抗体（或抗原）包被法
2.链霉亲合素-生物素化抗体 （或抗原）包被法
二、检测系统的信号放大