X射线晶体衍射测定蛋白质三维结构课件PPT
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1836 法拉第 发现阴极射线 1861 克鲁克斯 阴极射线管在放电时会产生亮光 干
版和光片有问题？ 1890 古德斯柏德 洗出了一张X射线的透视底片 照
片的冲洗药水或冲洗技术
发现X射线 本质的争论 X射线衍射
2021/3/10
9
2.X射线的发现及应用
1895年 伦琴（Roentgen）发现故称为伦琴射线。
E S
2021/3/10
7
2021/3/10
惠更斯—菲涅耳原理
惠更斯：光波阵面
上每一点都可以看 作新的子波源，以 后任意时刻，这些 子波的包迹就是该 时刻的波阵面。
——1690年
解释不了光强分布！
菲涅耳补充：从同
一波阵面上各点发 出的子波是相干波。
——1818年
8
2. X射线的发现历程及应用
失之交臂
结构。
2021/3/10
“中国蛋白质晶体学研究水平和世界发达国家一样高！ 胰岛素晶体最好的电子密度图在北京，不在牛津。” ——多萝西·霍奇金 ，1972
猪胰岛素(蛋白质编号4ins)的两条小链
70
2.菠菜捕光蛋白LHC II（膜、疏水，2.72Å）Nature, 2004, Mar.
LHC-II是绿色植物中含量最丰富的主要捕光复合物，这种复杂的分子体系 镶嵌在生物膜中，具有很强的疏水性，难以分离和结晶。对其晶体结构的 测定是国际公认的高难课题，也是一个国家结构生物学研究水平的重要标 志。03年利用北京同步辐射实验室生物大分子晶体学线站获得了该晶体的 高分辨率衍射数据，最终获得2.72Å分辨率的晶体结构。
2021/3/10
53
（2）晶体生长过程及影响因素
影响因素
❖ 物理因素：温度、压力、震动、溶剂清洁度、试剂
纯度、重力、外加物理场等
❖ 生物化学因素：pH、离子强度、沉淀剂/添加剂的
类型和浓度等
❖ 其他：溶液过饱和度、纯度等
“经验” “机器人”
2021/3/10
54
（3）结晶方法
批量结晶法 batch crystallization 透射法 crystallization by dialysis 液相扩散法 liquid diffusion 气相扩散法vapor diffusion 氢氘交换质谱技术 Enhanced amidehydrogen/deuterium-exchange mass
a ≠ b ≠ c = =90o ≠90o
2021/3/10
42
三斜格子
a ≠b ≠c ≠ ≠ ≠ 90o
2021/3/10
43
按结点位置，可有四种不同的类型： P—— 原始格子（角顶） C—— 底心格子（角顶、顶底面） I —— 体心格子（角顶、体心） F—— 面心格子（角顶、每个面）
2021/3/10
44
P—— 原始格子（角顶）
2021/3/10
45
C—— 底心格子（角顶、顶底面）
2021/3/10
46
I —— 体心格子（角顶、体心）
2021/3/10
47
F—— 面心格子（角顶、每个面）
2021/3/10
48
结构中代表各类等同点的结点在空间的排列方式来说， 格子的种类有、且只有十四种。
2021/3/10
20
2021/3/10
21
X射线晶体结构分析？
✓ 使用X射线作为物理工具，依赖X射线衍射现 象为物理原理，以晶体作为研究对象，晶体结 构作为研究结果的一种分析方法。
2021/3/10
22
5.X射线的获得：
X射线管
激光等离子体
2021/3/10
同步辐射
X射线激光
23
6.晶体基础
30
一维周期性结构与直线点阵
2021/3/10
31
二维周期性结构与平面点阵
2021/3/10
32
三维周期性结构与空间点阵
2021/3/10
33
晶胞(Unit cell)
✓ 空间点阵的单位（大小和形状完全相同的平行六面体）， 是晶体结构的最小单位。
✓ 同一个空间点阵，划分平行六面体的方式是多种多样的。 选择平行六面体的原则：
布拉克父子 X射线微粒论者
粒子具有旋转性
2021/3/10
18
4.X射线衍射
2021/3/10
19
X射线衍射的获得
波长范围：10—0.1埃 欲观察其衍射现象则衍射线度应与其波长差不多，晶体的晶格常
数恰是这样的线度 衍射波的两个基本特征—衍射线（束）在空间分布的方位（衍射
方向）和强度与晶体内原子分布规律（晶体结构）密切相关。
2021/3/10
5
1.光的衍射现象
‘光线’拐弯了！
S
?
2021/3/10
6
衍射现象：光波偏离直线传播而出现光强 不均匀 分布的现象
当缝的大小（或障碍物的大小）跟波长相差不多时就 发生明显的衍射现象．如果缝很宽，其宽度远大于波 长，则波通过缝后基本上是沿直线传播的，衍射现象 就很不明显了．
E S
2021/3/10
15
3.X射线本质的争论
2021/3/10
16
X射线本质的争论--波动说
巴克拉： X射线波动性
标识谱线：不管元素已化合成什么化合物，它们总是发射一种硬度的X射线， 当原子量增大时，标识X射线的穿透本领会随着增大。这说明X射线具有标识特 定元素的特性。
2021/3/10
17
X射线本质的争论—微粒说
26
晶体什么样（2）
2021/3/10
27
晶体什么样（3）
2021/3/10
28
晶体什么样（4）
2021/3/10
29
2.晶体和点阵结构
晶体的周期性结构使得我们可以把它抽象成 “点阵”来研究.
一维周期性结构与直线点阵 二维周期性结构与平面点阵 三维周期性结构与空间点阵
2021/3/10
2021/3/10
10
伦琴夫人的手的X射线照片
2021/3/10
11
X射线在医学上的应用
伦琴的新发现轰动了全世界, 不到三个月, 维也纳的一 家医院便拍出了应用于医疗的X射线照片.从此, X射线 拍片和射线透视成为医学诊疗中常用的手段。
为了防止各脏器成像发生的重叠给诊疗带来不便, 科 学家们进一步研究了成像更清晰、灵敏度更高的仪器。 1972年，英国科学家汉斯菲尔德运用计算机和图像重 建理论, 制成了电子计算机射线断层扫描成像装置, 也 就是已被广泛应用的CT。
2021/3/10
12
X射线与诺贝尔奖—物理学奖
伦琴因发现X射线而获得第一届诺贝尔物理学奖。 1903 年诺贝尔物理学奖。 1906 年的诺贝尔物理学奖。 劳厄获得了1914 年诺贝尔物理学奖。 英国的布拉格父子1915 年的诺贝尔物理学奖。 英国的巴克拉1917 年的诺贝尔物理学奖。 瑞典物理学家西格班1924 年诺贝尔物理学奖。 美国的康普顿1927 年诺贝尔物理学奖。 前苏联的切连科夫1958 年诺贝尔物理学奖; 美国的霍夫斯塔特1961 年诺贝尔物理学奖; 瑞典的西格巴恩1981 年的诺贝尔物理学奖。
①所选平行六面体的对称性应符合整个空间点阵的对称性。 ② 选择棱与棱之间直角关系为最多的平行六面体 ③ 所选平行六面体之体积应最小。 ④ 当对称性规定棱间的交角不能为直角关系时，应选择结点间距
小的行列作为平行六面体的棱，且棱间的交角接近于直角的平行六 面体。
2021/3/10
34
单位平行六面体，a、b、c 、、、 是表征它本身形状、 大小的一组参数，称为格子参数或点阵参数。
2021/3/10
49
衍射方向
2021/3/10
50
2021/3/10
51
二、X射线晶体结构测定基本过程
①蛋白质获取（提纯） ②晶体生长并经冷冻技术处理 ③重原子衍生物制备 ④衍射数据收集 ⑤衍生数据分析和改进 ⑥结构模型的获取（包括修正）
2021/3/10
52
（2）晶体生长过程及影响因素
晶核（尽量少） 微晶（可用作晶种） 晶体在数小时至数月后出现 2个问题： ① 是盐晶吗？ ② 能给出有用的衍射吗？（多晶/双晶）
56
（5）衍射数据收集
晶体的处理：低温液氮气冷流技术 数据收集仪：底片、面探测器
2021/3/10
57
衍射分析仪器的发展
射线种类：连续射线 特征射线 电子衍射 中子衍射
• 探测技术：胶片 闪烁体计数器（点） （IP）CCD探 测器（面）
2021/3/10
图2-22 石英的衍射仪计数器记录图（部分）
什么是晶体 晶体的周期排布 晶体的对称性
2021/3/10
24
3.1什么是晶体
固体物质 晶体
相当子、原子或分子这些微粒在三维空间中周期性重复 排列形成的、能够给出明锐衍射的固体结构。
2021/3/10
25
晶体什么样（1）
2021/3/10
2021/3/10
13
2021/3/10
14
化学奖
荷兰的物理化学家德拜1936 年诺贝尔化学奖。 美国著名化学家鲍林1954 年诺贝尔化学奖。 英国生物学家肯德鲁与佩鲁茨1962 年诺贝尔化学奖。 英国女化学家霍奇金1964 年诺贝尔化学奖。 美国化学家利普斯科姆1976 年诺贝尔化学奖。 英国化学家桑格和美国化学家吉尔伯特1980 年诺贝尔化学奖。 英国生物化学家克卢格因1982 年诺贝尔化学奖; 美国化学家豪普特曼和卡尔1985 年诺贝尔化学奖; 1988 年,米歇尔等三位德国生物化学家诺贝尔化学奖。
*右上角为石英的德拜图，衍射峰上方为（hkl）值，β代表Kβ衍射
58
底片（外森堡相机、徘循相机）
优点： ✓ 多点同时收集 ✓ 容易保存 ✓ 价格便宜
缺点 o 存在“化学雾”背景和X射线散射背景 o 费时、费力
2021/3/10
59
计数管（四圆衍射仪）
将X射线光子强度转换为电信号，信号放大后 再转换成数字存入计算机随时调用
c
b
a
单位平行六面体参数
2021/3/10
35
单位平行六面体与坐标轴的关系：棱交角＝坐标轴之间交角。
a、b、c ＝轴单位。
a、b、c、、、 关系有七种情况，与单位平行六面体七种格 子相对应。
立方格子 a=b=c == =90o
2021/3/10
36
三方格子
a=b=c == ≠90o，
60， 109o28'16 "
X射线晶体衍射的工作流程较长。
2021/3/10
68
2021/3/10
Last update: Tuesday Oct 20, 2009 at 5 PM PDT
69
五、应用实例
1.胰岛素
于1971年和1972年分别得到分辨率为 2.5埃和1.8埃的猪胰岛素晶体测定， 这是中国阐明的第一个蛋白质的三维
逐点收集数据 优缺点与底片相反
2021/3/10
60
面探技术-SMART APEX-CCD衍射仪
Smart CCD Overview
SMART APEX-CCD探测器
2021/3/10
61
面探技术-SMART APEX-CCD衍射仪
金属丝构成的面板，可同时多点收集 将X射线光子强度转换为电信号 集计数管的精确和底片的多点收集效率
2021/3/10
62
图像板image plate
面探测器的改进 由化学材料构成，整块板子密度一致 高分辨率 可见光下可测量 集底片和面探测器的优点于一身
2021/3/10
63
（6）数据分析
电子密度修饰 电子密度图诠释 结构模型精化
数据处理软件：Denzo, Scalepack
2021/3/10
spectrometry, DXMS 生物玻璃bioglass
2021/3/10
55
（4）晶体的初步鉴定
边界 硬度 脱水 溶解性 偏光性 染色性 漂浮性
小分子晶体
蛋白质晶体
完整，漂亮
常不完整，易出现多晶
偏硬，易碎成2瓣或几瓣 偏软，易碎成粉
不变化
因脱水而变坏
慢
快
强
相对弱
弱
强
下沉
漂浮
2021/3/10
2021/3/10
37
菱面体格子中α为特殊角度时，演变成的三种立方体格子
2021/3/10
38
四方格子
a=b ≠ c == =90o
2021/3/10
39
六方格子
a=b≠c ==90o =120o
2021/3/10
40
正交格子
a ≠ b ≠ c == =90o
2021/3/10
41
单斜格子
蛋白质结构测定
2021/3/10
2011-3-30 1
蛋白质三维结构测定方法及数量
2021/3/10
2
蛋白质三维结构测定年增长图
2021/3/10
3
第一节：X-射线衍射技术用于蛋白质晶体结构测定
原理 基本过程 优缺点 应用实例
2021/3/10
4
一、相关原理
光的衍射现象 X射线的发现及应用 本质的争论 X射线衍射的发现 晶体学基础知识 X射线晶体衍射
64
2021/3/10
65
2021/3/10
66
三、X射线晶体结构测定优点
分辨率高 不损伤样品 无污染 相对快捷 能得到晶体完整性的大量信息
2021/3/10
67
四、X射线晶体结构测定存在问题
晶体构象是静态的，不能测定不稳定的过渡态 的构象；
很多蛋白质很难结晶，或者很难得到用于结构 分析的足够大的单晶；（瓶颈）
版和光片有问题？ 1890 古德斯柏德 洗出了一张X射线的透视底片 照
片的冲洗药水或冲洗技术
发现X射线 本质的争论 X射线衍射
2021/3/10
9
2.X射线的发现及应用
1895年 伦琴（Roentgen）发现故称为伦琴射线。
E S
2021/3/10
7
2021/3/10
惠更斯—菲涅耳原理
惠更斯：光波阵面
上每一点都可以看 作新的子波源，以 后任意时刻，这些 子波的包迹就是该 时刻的波阵面。
——1690年
解释不了光强分布！
菲涅耳补充：从同
一波阵面上各点发 出的子波是相干波。
——1818年
8
2. X射线的发现历程及应用
失之交臂
结构。
2021/3/10
“中国蛋白质晶体学研究水平和世界发达国家一样高！ 胰岛素晶体最好的电子密度图在北京，不在牛津。” ——多萝西·霍奇金 ，1972
猪胰岛素(蛋白质编号4ins)的两条小链
70
2.菠菜捕光蛋白LHC II（膜、疏水，2.72Å）Nature, 2004, Mar.
LHC-II是绿色植物中含量最丰富的主要捕光复合物，这种复杂的分子体系 镶嵌在生物膜中，具有很强的疏水性，难以分离和结晶。对其晶体结构的 测定是国际公认的高难课题，也是一个国家结构生物学研究水平的重要标 志。03年利用北京同步辐射实验室生物大分子晶体学线站获得了该晶体的 高分辨率衍射数据，最终获得2.72Å分辨率的晶体结构。
2021/3/10
53
（2）晶体生长过程及影响因素
影响因素
❖ 物理因素：温度、压力、震动、溶剂清洁度、试剂
纯度、重力、外加物理场等
❖ 生物化学因素：pH、离子强度、沉淀剂/添加剂的
类型和浓度等
❖ 其他：溶液过饱和度、纯度等
“经验” “机器人”
2021/3/10
54
（3）结晶方法
批量结晶法 batch crystallization 透射法 crystallization by dialysis 液相扩散法 liquid diffusion 气相扩散法vapor diffusion 氢氘交换质谱技术 Enhanced amidehydrogen/deuterium-exchange mass
a ≠ b ≠ c = =90o ≠90o
2021/3/10
42
三斜格子
a ≠b ≠c ≠ ≠ ≠ 90o
2021/3/10
43
按结点位置，可有四种不同的类型： P—— 原始格子（角顶） C—— 底心格子（角顶、顶底面） I —— 体心格子（角顶、体心） F—— 面心格子（角顶、每个面）
2021/3/10
44
P—— 原始格子（角顶）
2021/3/10
45
C—— 底心格子（角顶、顶底面）
2021/3/10
46
I —— 体心格子（角顶、体心）
2021/3/10
47
F—— 面心格子（角顶、每个面）
2021/3/10
48
结构中代表各类等同点的结点在空间的排列方式来说， 格子的种类有、且只有十四种。
2021/3/10
20
2021/3/10
21
X射线晶体结构分析？
✓ 使用X射线作为物理工具，依赖X射线衍射现 象为物理原理，以晶体作为研究对象，晶体结 构作为研究结果的一种分析方法。
2021/3/10
22
5.X射线的获得：
X射线管
激光等离子体
2021/3/10
同步辐射
X射线激光
23
6.晶体基础
30
一维周期性结构与直线点阵
2021/3/10
31
二维周期性结构与平面点阵
2021/3/10
32
三维周期性结构与空间点阵
2021/3/10
33
晶胞(Unit cell)
✓ 空间点阵的单位（大小和形状完全相同的平行六面体）， 是晶体结构的最小单位。
✓ 同一个空间点阵，划分平行六面体的方式是多种多样的。 选择平行六面体的原则：
布拉克父子 X射线微粒论者
粒子具有旋转性
2021/3/10
18
4.X射线衍射
2021/3/10
19
X射线衍射的获得
波长范围：10—0.1埃 欲观察其衍射现象则衍射线度应与其波长差不多，晶体的晶格常
数恰是这样的线度 衍射波的两个基本特征—衍射线（束）在空间分布的方位（衍射
方向）和强度与晶体内原子分布规律（晶体结构）密切相关。
2021/3/10
5
1.光的衍射现象
‘光线’拐弯了！
S
?
2021/3/10
6
衍射现象：光波偏离直线传播而出现光强 不均匀 分布的现象
当缝的大小（或障碍物的大小）跟波长相差不多时就 发生明显的衍射现象．如果缝很宽，其宽度远大于波 长，则波通过缝后基本上是沿直线传播的，衍射现象 就很不明显了．
E S
2021/3/10
15
3.X射线本质的争论
2021/3/10
16
X射线本质的争论--波动说
巴克拉： X射线波动性
标识谱线：不管元素已化合成什么化合物，它们总是发射一种硬度的X射线， 当原子量增大时，标识X射线的穿透本领会随着增大。这说明X射线具有标识特 定元素的特性。
2021/3/10
17
X射线本质的争论—微粒说
26
晶体什么样（2）
2021/3/10
27
晶体什么样（3）
2021/3/10
28
晶体什么样（4）
2021/3/10
29
2.晶体和点阵结构
晶体的周期性结构使得我们可以把它抽象成 “点阵”来研究.
一维周期性结构与直线点阵 二维周期性结构与平面点阵 三维周期性结构与空间点阵
2021/3/10
2021/3/10
10
伦琴夫人的手的X射线照片
2021/3/10
11
X射线在医学上的应用
伦琴的新发现轰动了全世界, 不到三个月, 维也纳的一 家医院便拍出了应用于医疗的X射线照片.从此, X射线 拍片和射线透视成为医学诊疗中常用的手段。
为了防止各脏器成像发生的重叠给诊疗带来不便, 科 学家们进一步研究了成像更清晰、灵敏度更高的仪器。 1972年，英国科学家汉斯菲尔德运用计算机和图像重 建理论, 制成了电子计算机射线断层扫描成像装置, 也 就是已被广泛应用的CT。
2021/3/10
12
X射线与诺贝尔奖—物理学奖
伦琴因发现X射线而获得第一届诺贝尔物理学奖。 1903 年诺贝尔物理学奖。 1906 年的诺贝尔物理学奖。 劳厄获得了1914 年诺贝尔物理学奖。 英国的布拉格父子1915 年的诺贝尔物理学奖。 英国的巴克拉1917 年的诺贝尔物理学奖。 瑞典物理学家西格班1924 年诺贝尔物理学奖。 美国的康普顿1927 年诺贝尔物理学奖。 前苏联的切连科夫1958 年诺贝尔物理学奖; 美国的霍夫斯塔特1961 年诺贝尔物理学奖; 瑞典的西格巴恩1981 年的诺贝尔物理学奖。
①所选平行六面体的对称性应符合整个空间点阵的对称性。 ② 选择棱与棱之间直角关系为最多的平行六面体 ③ 所选平行六面体之体积应最小。 ④ 当对称性规定棱间的交角不能为直角关系时，应选择结点间距
小的行列作为平行六面体的棱，且棱间的交角接近于直角的平行六 面体。
2021/3/10
34
单位平行六面体，a、b、c 、、、 是表征它本身形状、 大小的一组参数，称为格子参数或点阵参数。
2021/3/10
49
衍射方向
2021/3/10
50
2021/3/10
51
二、X射线晶体结构测定基本过程
①蛋白质获取（提纯） ②晶体生长并经冷冻技术处理 ③重原子衍生物制备 ④衍射数据收集 ⑤衍生数据分析和改进 ⑥结构模型的获取（包括修正）
2021/3/10
52
（2）晶体生长过程及影响因素
晶核（尽量少） 微晶（可用作晶种） 晶体在数小时至数月后出现 2个问题： ① 是盐晶吗？ ② 能给出有用的衍射吗？（多晶/双晶）
56
（5）衍射数据收集
晶体的处理：低温液氮气冷流技术 数据收集仪：底片、面探测器
2021/3/10
57
衍射分析仪器的发展
射线种类：连续射线 特征射线 电子衍射 中子衍射
• 探测技术：胶片 闪烁体计数器（点） （IP）CCD探 测器（面）
2021/3/10
图2-22 石英的衍射仪计数器记录图（部分）
什么是晶体 晶体的周期排布 晶体的对称性
2021/3/10
24
3.1什么是晶体
固体物质 晶体
相当子、原子或分子这些微粒在三维空间中周期性重复 排列形成的、能够给出明锐衍射的固体结构。
2021/3/10
25
晶体什么样（1）
2021/3/10
2021/3/10
13
2021/3/10
14
化学奖
荷兰的物理化学家德拜1936 年诺贝尔化学奖。 美国著名化学家鲍林1954 年诺贝尔化学奖。 英国生物学家肯德鲁与佩鲁茨1962 年诺贝尔化学奖。 英国女化学家霍奇金1964 年诺贝尔化学奖。 美国化学家利普斯科姆1976 年诺贝尔化学奖。 英国化学家桑格和美国化学家吉尔伯特1980 年诺贝尔化学奖。 英国生物化学家克卢格因1982 年诺贝尔化学奖; 美国化学家豪普特曼和卡尔1985 年诺贝尔化学奖; 1988 年,米歇尔等三位德国生物化学家诺贝尔化学奖。
*右上角为石英的德拜图，衍射峰上方为（hkl）值，β代表Kβ衍射
58
底片（外森堡相机、徘循相机）
优点： ✓ 多点同时收集 ✓ 容易保存 ✓ 价格便宜
缺点 o 存在“化学雾”背景和X射线散射背景 o 费时、费力
2021/3/10
59
计数管（四圆衍射仪）
将X射线光子强度转换为电信号，信号放大后 再转换成数字存入计算机随时调用
c
b
a
单位平行六面体参数
2021/3/10
35
单位平行六面体与坐标轴的关系：棱交角＝坐标轴之间交角。
a、b、c ＝轴单位。
a、b、c、、、 关系有七种情况，与单位平行六面体七种格 子相对应。
立方格子 a=b=c == =90o
2021/3/10
36
三方格子
a=b=c == ≠90o，
60， 109o28'16 "
X射线晶体衍射的工作流程较长。
2021/3/10
68
2021/3/10
Last update: Tuesday Oct 20, 2009 at 5 PM PDT
69
五、应用实例
1.胰岛素
于1971年和1972年分别得到分辨率为 2.5埃和1.8埃的猪胰岛素晶体测定， 这是中国阐明的第一个蛋白质的三维
逐点收集数据 优缺点与底片相反
2021/3/10
60
面探技术-SMART APEX-CCD衍射仪
Smart CCD Overview
SMART APEX-CCD探测器
2021/3/10
61
面探技术-SMART APEX-CCD衍射仪
金属丝构成的面板，可同时多点收集 将X射线光子强度转换为电信号 集计数管的精确和底片的多点收集效率
2021/3/10
62
图像板image plate
面探测器的改进 由化学材料构成，整块板子密度一致 高分辨率 可见光下可测量 集底片和面探测器的优点于一身
2021/3/10
63
（6）数据分析
电子密度修饰 电子密度图诠释 结构模型精化
数据处理软件：Denzo, Scalepack
2021/3/10
spectrometry, DXMS 生物玻璃bioglass
2021/3/10
55
（4）晶体的初步鉴定
边界 硬度 脱水 溶解性 偏光性 染色性 漂浮性
小分子晶体
蛋白质晶体
完整，漂亮
常不完整，易出现多晶
偏硬，易碎成2瓣或几瓣 偏软，易碎成粉
不变化
因脱水而变坏
慢
快
强
相对弱
弱
强
下沉
漂浮
2021/3/10
2021/3/10
37
菱面体格子中α为特殊角度时，演变成的三种立方体格子
2021/3/10
38
四方格子
a=b ≠ c == =90o
2021/3/10
39
六方格子
a=b≠c ==90o =120o
2021/3/10
40
正交格子
a ≠ b ≠ c == =90o
2021/3/10
41
单斜格子
蛋白质结构测定
2021/3/10
2011-3-30 1
蛋白质三维结构测定方法及数量
2021/3/10
2
蛋白质三维结构测定年增长图
2021/3/10
3
第一节：X-射线衍射技术用于蛋白质晶体结构测定
原理 基本过程 优缺点 应用实例
2021/3/10
4
一、相关原理
光的衍射现象 X射线的发现及应用 本质的争论 X射线衍射的发现 晶体学基础知识 X射线晶体衍射
64
2021/3/10
65
2021/3/10
66
三、X射线晶体结构测定优点
分辨率高 不损伤样品 无污染 相对快捷 能得到晶体完整性的大量信息
2021/3/10
67
四、X射线晶体结构测定存在问题
晶体构象是静态的，不能测定不稳定的过渡态 的构象；
很多蛋白质很难结晶，或者很难得到用于结构 分析的足够大的单晶；（瓶颈）