一株锦鲤疱疹病毒的分离与鉴定

一株锦鲤疱疹病毒的分离与鉴定
朱霞;李新伟;王好;吕文亮;周井祥
【期刊名称】《中国预防兽医学报》
【年(卷),期】2011(033)005
【摘要】本实验对患病鲤鱼进行病毒分离及鉴定,将表现典型锦锂疱疹病毒(KHV)病症状的鲤鱼肾细胞与单层框镜鲤鱼鳍细胞(KFC)共培养,5d～6d后出现典型的KHV细胞病变,即细胞体积增大并出现空泡化;在电镜下观察到典型的KHV病毒粒子;并应用PCR方法扩增获得KHV ORF25基因的849bp基因片段,连接至
pMD18-T载体中,经酶切鉴定后序列分析表明,与GenBank登录的3株KHV同源性均为99.9%,命名为KHV-cj.基因进化比较显示,与KHV-J株关系较近.将病毒培养物(10-6.75TCID50)腹腔注射接种实验鱼可使其100%发病,并且症状和病理变化与自然感染KHV的鱼一致,死亡率为75%.表明本研究在国内首次分离到KHV.%A Koi herpesvirus (KHV) was isolated from carp suffering gill necrosis by co-cultivation of the affceted kidney cells with carp fin cells (CFC).Cytopathic effects (CPE) were presented 5 days to 6 days post co-cultivation.The KHV particles were observed under electron microscope by negatively stained the sediment of virus culture with 0.5％ phosphotungstate.A 849 bp DNA fragment of ORF25 gene was amplified by PCR and sequencing result indicated that the sequence of nucleotide acid homology was 99.9％ with the reference strains of KHV in GenBank.The some clinic signs as nature infection were presented in fish artificially infected with 10-6.75 TCID50 by intraperitoneal injection and the morbility and mortality were 100％ and
75％,respectively.This result demonstrated that the KHV was isolated for the first time from the naturally infected fish in China.
【总页数】4页(P340-343)
【作者】朱霞;李新伟;王好;吕文亮;周井祥
【作者单位】吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室,吉林,长春,130118;吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室,吉林,长春,130118;吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室,吉林,长春,130118;吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室,吉林,长春,130118;吉林农业大学动物科技学院,吉林,长春,130118
【正文语种】中文
【中图分类】S852.65
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