黄芩苷通过调控巨噬细胞M2 极化对脊髓损伤大鼠炎症反应的抑制作用

RAW264. 7 细胞中 IL-12 和 TNF-α 水平明显升高 （P<0. 05），IL-4 和 IL-10 水平明显降低 （P<0. 05），
p-JAK1 蛋 白 表 达 水 平 明 显 升 高 （P<0. 05）， p-STAT6、 Arg1 和 MRC1 蛋 白 表 达 水 平 明 显 降 低 （P<
黄芩苷通过调控巨噬细胞 极化对脊髓损伤大鼠 M2
炎症反应的抑制作用
许大勇, 李云朋, 魏景梅, 刘汝银 （河南省中医院脊柱科，河南 郑州 450002）
［摘 要］ 目的：探讨黄芩苷对大鼠脊髓损伤 （SCI） 的保护作用，阐明其作用机制。方法：体内实
验 应 用 改 良 Allen 氏 打 击 法 建 立 大 鼠 SCI 模 型 ， 50 只 健 康 SD 大 鼠 随 机 分 为 假 手 术 组 （给 予 生 理 盐
0. 05），iNOS 和 CCL-5 蛋白表达水平明显升高 （P<0. 05）。结论：黄芩苷通过促进巨噬细胞 M2 型极
化，激活 JAK1/STAT6 通路，对 SCI 大鼠炎症反应起到一定抑制作用。
［关键词］ 脊髓损伤；黄芩苷；炎症反应；Janus 激酶 1；信号转导及转录激活蛋白 6；信号通路
体外实验，与 M1 型 极 化 组 比 较 ， M1 型 极 化 + 黄 芩 苷 组 RAW264. 7 细 胞 中 iNOS 、 CCL-5 和
p-STAT1 蛋 白 表 达 水 平 明 显 降 低 （P<0. 05）， p-JAK1 和 p-STAT6 蛋 白 表 达 水 平 明 显 升 高 （P<
水）、模型组 （给予生理盐水，建立 SCI 模型）、黄芩苷组 （SCI 大鼠给予 200 mg·kg－1 黄芩苷）、黄芩
苷 +DMSO 组 （SCI 大 鼠 给 予 200 mg·kg－1 黄 芩 苷 和 0. 2% DMSO） 和 黄 芩 苷 +AS1517499 （STAT6
通 路 抑 制 剂） 组 （SCI 大 鼠 给 予 200 mg·kg－1 黄 芩 苷 和 10 mg·kg－1 AS1517499）， 每 组 10 只 。 造 模 成
中 炎 症 因 子 ［白 细 胞 介 素 12 （IL-12）、 TNF- α、 IL-4 和 白 细 胞 介 素 10 （IL-10） ］ 水 平 ， Western
blotting 法 检 测 大 鼠 脊 髓 组 织 和 RAW264. 7 细 胞 中 M1 型 巨 噬 细 胞 标 记 蛋 白 ［诱 导 型 一 氧 化 氮 合 酶
［中图分类号］ R285. 5; R651. 2
［文献标志码］ A
[收稿日期] [基金项目] [作者简介] [通信作者]
2020⁃07⁃17 河南省中医药拔尖人才培养项目 （2019ZYBJ18） 许大勇 （1973－），男，河南省郑州市人，副主任医师，医学硕士，主要从事脊柱损伤方面的研究。 许大勇，副主任医师 （E-mail： albertgates@）
第 47 卷 第 1 期
158
2021 年 1 月
吉 林 大 学 学 报 （医 学 版） Journal of Jilin University （Medicine Edition）
Vol. 47 No. 1 Jan. 2021
[文章编号] 1671⁃587Ⅹ(2021)01⁃0158⁃10
DOI：10. 13481/j. 1671⁃587Ⅹ．20210122
（iNOS） 和趋化因子 5 （CCL-5）］ 及 M2 型巨噬细胞标记蛋白 ［精氨酸酶 1 （Arg1）、甘露糖受体 C1
（MRC1） 和 Janus 激酶 1/信号转导及转录激活蛋白 6 （JAK1/STAT6） 通 路 相 关 蛋 白］ 表 达 水 平 。
结 果：体内实验，与模型组比较，黄芩苷组大鼠 BBB 评分明显升高 （P<0. 05），脊髓组织中 IL-12 和
（p-STAT6） 蛋 白 表 达 水 平 明 显 升 高 （P<0. 05 或 P<0. 01）； 与 黄 芩 苷 +DMSO 组 比 较 ， 黄 芩 苷 +
AS1517499 组大鼠脊髓组织中 IL-12 和 TNF-α 水平及 iNOS、CCL-5 和 p-STAT1 蛋白表达水平明显升
高 （P<0. 01）， IL-4 和 IL-10 水 平 及 Arg1、 MRC1 和 p-STAT6 蛋 白 表 达 水 平 明 显 降 低 （P<0. 01）。
TNF-α 水 平 及 iNOS、 CCL-5 和 磷 酸 化 信 号 转 导 及 转 录 激 活 蛋 白 1 （p-STAT1） 蛋 白 表 达 水 平 明 显 降
低 （P<0. 05）， IL-4 和 IL-10 水 磷 酸 化 STAT6
胞 介 素 4 （IL-4） 诱 导 RAW264. 7 细 胞 M2 型 极 化 。 RAW264. 7 细 胞 分 为 对 照 组 、 M1 型 极 化 组 、
M2 型极化组、M1 型极化+黄芩苷组、 M2 型极化+黄芩苷组、M1 型极化+黄芩苷+DMSO 组和 M1
型极化+黄芩苷+AS1517499 组。酶联免疫吸附试验 （ELISA） 检测大鼠脊髓组织和 RAW264. 7 细胞
功 后 用 贝 索 -比 蒂 -布 雷 斯 纳 汉 （BBB） 评 分 评 价 大 鼠 脊 髓 运 动 功 能 。 体 外 实 验 用 2. 5 μg·L－1 脂 多 糖
（LPS） 和 0. 125 μg·L－1 干 扰 素 γ （IFN-γ） 诱 导 巨 噬 细 胞 （RAW264. 7） M1 型 极 化 ， 10 μg·L－1 白 细
0. 05）； 与 M2 型 极 化 组 比 较 ， M2 型 极 化 + 黄 芩 苷 组 RAW264. 7 细 胞 中 Arg1 和 MRC1 蛋 白 表 达 水 平
明 显 升 高 （P<0. 05）； 与 M1 型 极 化 + 黄 芩 苷 +DMSO 组 比 较 ， M1 型 极 化 + 黄 芩 苷 +AS1517499 组