关于杜仲降压片的质量标准研究

水洗 至流 出液近无 色 ， 弃去水液 ， 再 以２ ｍｏ ｌ ／ Ｌ氨 溶液４ Ｏ ａＬ ｒ 洗脱 ， 收集洗 脱液 ， 水浴 蒸千 ， 残 渣加 甲醇 １ ｍＬ使溶 解 ， 作为供 试品 溶液 。按处方 比例 及制 法制 备缺 益母草 的 阴性对照 品 ， 按供试 品溶 液的制备 方法 同法 制成 阴性对 照溶 液。 另取 盐酸 水苏碱 对照 品适量 ， 加 甲醇 制成 ｌ ｍｇ ／ ｍＬ 的溶 液 ， 作 为对 照品溶 液 。 按 照 中国药典 ２ ０ ０ ５ 年 版一 部附录 ＶＩ Ｂ薄层 色谱法 ， 吸取上 述溶 液各 ｌ ０ Ｌ， 分 别点 于同一 以羧 甲基 纤维素钠 为 黏合剂 的硅 胶 Ｇ薄 层板 上 ， 以正丁 醇 一盐 酸 一醋酸 乙脂（ ８： ３： １ ） 为 展开剂 ， 展开， 取 出． 晾干， 喷 以稀碘化 铋钾 试剂 结 果供 试 品色谱 中 ， 在 与对 照品色谱相 应的位置 上 ， 显 相同颜 色的斑 点 ， 阴性 对照 色谱 在 相应 位置上 无斑 点 ， 即阴性无 干扰 。 ２ ２ 钩藤 薄层 色谱 鉴别 钩藤主 要成 分为生 物碱 ， 我们根 据生 物碱的性 质 ， 参照 文献 的方法 来制 备 样 品溶 液和 阴性 对照 溶液 ， 与钩 藤对 照药材对 照 。 参照 文献 方法进 行展 开和 显 色。取 本品 ２ ０片 ， 去包 衣 ， 研细 ， 称取６ ｇ ， 加８ ０ ％ 乙醇 １ ０ ０ ｍＬ， 置 水浴上 加热 回流 ３ ０ ａｉ ｒ ｎ， 滤过 ， 残 留物加 １ ％盐酸 ５ ｍＬ 使 溶解 ， 滤过 ， 滤液 用氨 水调 ｐ Ｈ至 ９ ． 用 氯仿 萃取 ２ 次， 每次 １ ０ ｍＬ ， 氯 仿液 浓缩 至千 ， 加０ ． ５ ｍＬ乙醇 溶解 作为供 试 品溶 液。 按处方 比例及 制法 制备缺 钩藤 的阴性样 品 ， 按供 试品 溶液 的制备 方 法 同法 制成 阴性对 照溶 液 。另取钩 藤对照 药材 ２ ｇ， 同法 制成 对照 药材 溶液 。 参 照 中国药典 ２ ０ ０ ５ 年 版一部 附录 ＶＩ Ｂ薄层 色谱法 ， 吸取上 述 ３ 种溶液 各 ｌ Ｏ ｕ Ｌ， 分 别点于 同一硅 胶 Ｇ薄 层板上 ， 以氯仿 一甲醇 一氨 水（ ２ ０： １ ： １ ） 下层溶 液为 展 开 剂， 展开， 取 出， 晾干 ， 喷以稀 碘化铋 钾试 剂。 结 果供试 品 色谱 中 ， 在与对 照 药 材色谱 相应 的位置 上 ， 显相 同的两 个橙 红色斑 点 ， 阴性对 照色 谱在 相应 的位 置 上无 斑点 。 ２ ． ３ 黄 芩苷 的含 量测定 （ １ ） 色谱分 析条 件 用 十八烷 基硅烷 键合 硅胶 为填 充剂 ， 甲醇 一水 －磷酸 （ ４ ５： ５ ５： ０ ． ２ ） 为流动 相， 流速 １ ． ０ ｍＬ ／ ｍｉ ｎ ， 检 测波长 为 ３ １ ５ ｎ ｍ 理论塔 板数 按黄 芩苷 峰计 算应
不低 于 ２ ０ ０ ０ 。
以外 标法计 算黄 芩苷含 量 。 ３ 讨论 杜 仲降压 片的君 药为 杜仲 ， 主含 木 脂素 ，环烯 醚萜类 及杜 仲胶等 成分 ， 降 压成 分为松脂 醇一 二葡 萄糖苷 ， 但 中 国药品生 物制 品检定 所未能提供 相应对 照 品， 故无 法进 行定量 测定 。黄芩 为方 中 臣药 ， 采用 ＨＰ Ｌ Ｃ法 测定制 剂 中黄 芩苷 含量 ， 方法 简单 ， 重复 性好 ， 可 以作为 含量 测定指 标 。 参 考 文 献 【 ｌ 】国家 药典 委员 会 ． 中华 人民共 和 国药典 ［ Ｍ】 ． 北京 ： 化学 工 业 出版社 ，
卫 生 与健 康
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关 于杜 仲 降压 片 的质 量 标 准 公司 ） ［ 摘 要］ 目的 ： 探 讨并 制定杜 仲 降压片 的质量 标准 。方 法 ： 采 用 ＴＣ Ｌ法对 杜仲 降压片 中的 益母草 、钩 藤进行 定 性鉴 别 ， 采 用 ＨＰ ＬＣ法 测定黄 芩 苷的含量 。 结 果 ：益母 草 ，钩藤 薄层 色谱 图斑点 清晰 ， 重 现性 好 ， 无干 扰 。黄芩 营在 Ｏ ． ２ ５ ｇ －２ ｇ之 间呈 良好 的线性 关 系（ ｒ ＝０ ． ９ ９ ９ ９ ） 。结论 ： 所建 立的方 法 准确可
肾、平肝 、清热之 功效 ， 用于 肾虚 肝旺 之高血压 症 。 本 实验对 该制 剂 中的益 母 草 、钩藤进行 了薄 层鉴别 ， 并采用 ＨＰ Ｌ Ｃ法 测定该 制剂 中黄芩 营 的含量 ， 现将
结 果 报道如 下 。 １实验材 料 １ １药 品与试 剂 实验 用药材 购 自医药公 司， 经 检验符 合药典 规定 ｔ 杜仲 降压片 由贵州百 花 医药集 团有 限公司 生产 ， 批号 ０ ６ ０ ５ １ ６ Ｉ 钩藤对 照药 材（ １ ２ １ １ ９ ０ — ２ ０ ０ ４ ０ ２ ） 、 盐酸 水 苏碱（ １ １ ０ ７ １ ２ —２ ０ ０ ３ ０ ６ ） ， 黄 芩苷（ １ １ ０ ７ １ ５ － ２ ０ ０ ２ １ ２ ） 对照 品 由中国药 品生 物制品 检 定所提 供 。实验 所 用试剂 除另有规 定 外， 均 为分析 纯 ， 色谱 用试 剂 乙腈为 色谱
间处 未见 干扰 。 （ ５ ） 标 准曲线 的制备 精 密称取 黄芩 苷对照 品 ， 制 成浓度 为 ０ ． １ ｍｇ ／ ｍＬ的样 品 ， 分 别进样 ２ ． ５ Ｌ 、５ ． ０ Ｌ、１ ０ Ｌ，１ ５ ｕ Ｌ、２ ０ Ｌ测定 峰面积 ， 以峰面 积积分 值 为纵 坐标 ， 黄芩苷进 样量为 横坐标 绘制标 准 曲线 ， 得 回归方程 Ｙ ＝１ ８ ５ ７ ５ ５ Ｘ＋ ２ ３ １ ３ ６ ， ｒ ＝Ｏ ． ９ ９ ９ ９ 。表 明黄芩 苷在 ０ ． ２ ５ ｇ ２ ｇ之 间呈 良好 的线性 关 系。 （ ６ ） 精密 度测 定试验 取 同一对 照 品溶液 ｌ ０ Ｌ， 注入 高效 液相 色谱 仪 ， 重复进 样 ５ 次， 测 定黄芩 营 峰面积 ， 并计算相 对标 准偏 差 Ｒ Ｓ Ｄ为 Ｉ ． ２ ３ ％。 （ ７ ） 稳 定性试 验 取 同一 供试 品溶 液 ， 每隔２ ｈ进样 一次 ， 共进 样 ５ 次， 按上述 色谱 条件 测 定 黄芩 苷峰面 积 ， 并计 算黄 芩 苷峰 面积 积分 值的 相对标 准 偏差 Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ８ ％ （ ｎ ＝ ５ ） ， 表 明供试 品溶液 在 ８ ｈ内基本 稳定 。 （ ８ ） 重 现性实 验 取 同一 批号 （ 批号： ０ ６ ０ ５ １ ６ ） 供试品， 按供 试 品溶液 制备方 法制 备 ５份供试 液， 分别测 定黄芩苷 峰 面积 ， 并计 算黄 芩苷含 量 和相对 标准偏 差 。结 果黄芩 菅 平 均含 量为 ５ ． ７ ８ ｍｇ ／片 ， Ｒ Ｓ Ｄ为 １ ． ８ ８ ％。 （ ９ ） 加样 回收率试 验 取 同一批号 已知含 量供 试 品（ 批号 ： ０ ６ ０ ５ １ ６ ‘ 黄芩 苷含量 ５ ． ７ ８ ａｇ ｒ ／片） ２ ０ 片， 去包衣 ， 研碎， 混 匀， 取０ ． １ ２ ５ ｇ ， 精密 称定 ， 共取５ 份， 均加入 黄芩 昔对照 品 ２ ． ４ ｍｇ． 按照供 试品溶 液制 备方 法制 备供 试 液 ， 进样量 １ ０ ｕ Ｌ， 测定 黄芩 菅 峰面积 ， 计算黄 芩苷 含量 ， 并计算 加样 回收 率 。 （ １ Ｏ ） 样 品含量 测定 分 别吸取对 照 品溶液 及供试 品 溶液各 ｌ Ｏ ｕ Ｌ注入 色谱仪 ， 测得峰 面积 ，
靠， 可用于 该制 剂的质 量控 制 。 ［ 关键词］ 杜 仲降压 片 ＴＬ Ｃ ＨＰ Ｌ Ｃ 质量 标准 中图分类号 ： Ｘ一 ６ ５ ｌ 文献标 识码 ： Ａ
文 章编 号 ： １ ０ ０ ９ — ９ １ ４ Ｘ（ ２ ０ １ ２ ） ２ ７ — ０ ２ ８ ７ 一 Ｏ ｌ
杜仲 降压片 由杜 仲 、益母草 ，夏 枯草 ，黄芩 、钩 藤 ５ 味 中药组 成 ， 具有 补
甲醇使 溶解 ， 并稀释 至刻度 ， 摇匀 ， 即得（ 每毫 升含 黄芩苷 ０ ． １ ｍｇ ） 。 （ ４ ） 阴性 对照 溶液制 备与 测定 按处 方 比例及 制法制备 缺黄芩 的阴性对 照品 ， 按供 试 品溶 液的制备方法 同 法制 成阴性对 照溶 液。经进 样检 测 阴性对 照 图谱 中在 与黄芩 苷峰相 同保 留时
纯， 水 为重蒸 水。 １ ． ２实 验仪 器 日立 一 ２ １ ３ ０ 高压 恒 流输液泵 、 日立 － ２ ４ ０ ０ 紫 外可 变 波长检 测器 由 日立分 析仪 器有限公 司生产 ． Ｎ２ ０ ０ ０ 色谱 数据 处理 工作 站 由浙江 大学 智达 信息工 程有 限公 司生产 。 ２ 方法 与结 果 ２ ． １ 益母草 薄层 色谱 鉴别 益母草 中含有 盐酸 水苏碱 ， 参照 《 中国药典 》２ ０ ０ ５ 年版 一部 益母草 膏项 下薄 层鉴 别方法 ： 取本品４ ０ 片， 去 包衣 ， 研细 ． 称取 １ ０ ｇ ， 加水２ Ｏ ｍＬ， 搅拌， 加 稀盐 酸调节 ｐ Ｈ值 为 １ ～２ ， 离心 ， 取 上清液 加在强 酸性 阳离子 交换 树脂 柱上 ， 以
２ ０ ０ ５．
［ ２ １王宝 琴 ． 中成药 质量 标准 与标 准物 质研 究［ Ｍ】 ． 北京 ： 中国 医药科 技 出
版社， １ ９ ９ ４ ： ２ ０ ９ － ２ １ １ ．
（ ２ ） 供试 品溶 液的 制备与 测定 取 本品 ｌ Ｏ片 ， 去包 衣 ， 研碎， 混匀， 取约０ ． ２ ５ ｇ ， 精密 称定 ， 置于 ５ ０ ｍＬ具 塞锥 形瓶 中 ， 精 密 加入 ７ ０ ％ 乙醇 ３ ０ ｍＬ， 密闭 ， 超 声处 理 ３ ０ ａｉ ｒ ｎ ， 摇匀 ， 滤过 ， 滤液 置 ５ ０ ｍＬ容 量瓶 中 ， 药渣 及滤 器用 ７ ０ ％乙醇 适量洗 涤 ， 洗 液 并入 同一 容 量瓶 中 ， 加７ ０ ％ 乙醇稀 释至 刻度 ， 摇匀， 滤过 ， 即得 。 （ ３ ） 对 照 品溶 液 的制备 与测 定 精密称 取减压 干 燥 ４ ｈ的黄芩 苷对 照品 １ ０ ｍｇ ． 置１ ０ ０ ｍＬ容量瓶 中 ， 加 科技博览 Ｉ ２ ８ ７