微生物接种流程规范版本
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一、痰液标本
1.痰液标本接种流程
1)接种编号:1401xx
2)接种培养基:血平板
中国蓝平板
嗜血巧克力平板
金黄色葡萄球菌显色板(CHRO)
附加:呼吸科,血液科,肿瘤科,ICU,感染科种沙保弱平板
3)培养条件:
35℃温箱:血平板、中国蓝平板、金黄色葡萄球菌显色板(CHRO)35℃ + 5%CO2温箱:嗜血巧克力平板
25℃温箱:沙保弱平板(装进塑料密封袋或纸胶带封口)
2.痰涂片及染色镜检流程
1)涂片编号:革兰氏染色:1404xx
抗酸染色:1406xx
2)一般细菌涂片镜检
A.涂片:挑取痰液均匀涂于玻片表面,风干备用。
B.革兰氏染色:龙胆紫(30S)→碘液(60S)→丙酮乙醇(30S)
→沙黄(30S)
C.痰样本质量评估:
上皮细胞≥25/LP,判定为不合格标本
上皮细胞≤25/LP,判定为合格标本
3.浓集法抗酸杆菌涂片镜检
1)痰标本制备:取全部标本于50ml离心管中,加等量84消毒液混
匀后静置15min, 3000rpm/min离心30min,弃上清取沉淀涂片
2)抗酸染色:石碳酸复红(5min)→盐酸酒精(60S)→亚甲蓝(30S)
3)结果判读:
二、咽拭子标本
1.咽拭子标本接种流程
接种编号:1401xx
接种培养基:血平板
培养条件:35℃温箱
一般细菌涂片镜检:同痰标本1404xx
三、尿液标本
1.尿液标本接种流程
接种编号:1402xx
接种培养基:血平板(1ul尿液标本均匀涂抹,行菌落计数)
中国蓝板(四区划线)
培养条件:35℃温箱
一般细菌涂片镜检(1404xx)
尿标本制备:取15ml标本3000rpm/min离心15min,取沉淀涂片
涂片染色:步骤同痰样本
四、生殖道分泌物标本
1. 生殖道分泌物标本接种流程
接种编号:1402xx
接种培养基:血平板
中国蓝平板
淋球菌TM平板
培养条件:
35℃温箱:血平板、中国蓝平板
35℃ + 5%CO2温箱:淋球菌TM平板
2. 一般细菌涂片镜检(1404xx)
同痰标本
五、宫颈分泌物(B族链球菌培养)
1.宫颈分泌物接种流程
接种编号:1402xx
接种培养基:血平板
B群链球菌筛选平板(STRB)[一块种六个标本] 培养条件:35℃温箱
六、脓液标本
1.开放性脓液标本接种流程
接种编号:1402xx
接种培养基:血平板
中国蓝平板
复合因子巧克力平板
培养条件:35℃温箱
2.封闭腔脓液标本接种流程
接种编号:1402xx
接种培养基:血平板
中国蓝平板
厌氧平板(放于厌氧产气袋GENbag anaer中)
培养条件:35℃温箱
3.一般细菌涂片镜检(1404xx)
同痰标本
七、无菌体液标本
1.无菌体液标本接种流程
接种编号:1407xx
接种瓶:取1-3ml标本直接注入儿童瓶增菌培养。
接种培养基:血平板
培养条件:35℃温箱
(送检标本如已接种培养瓶,置于血培养仪培养)
2. 一般细菌涂片镜检(1404xx)
取15ml标本置无菌试管中3500rpm/min离心15min,用无菌吸管吸取上清,取适量沉淀物涂片,待干后行革兰染色镜检。
8.粪便标本
1.粪便标本接种流程
接种编号:1405xx
接种培养基:a)60岁以下:
中国蓝平板
XLD平板
金黄色葡萄球菌(CHRO)平板
KAMALI弯曲菌平板
b)60岁以上:
中国蓝平板
XLD平板
金黄色葡萄球菌(CHRO)平板
培养条件:
中国蓝、XLD、CHRO平板35℃温箱
KAMALI弯曲菌平板微需氧42℃温箱
2. 一般细菌涂片镜检(1404xx)
9.脑脊液标本
1.脑脊液标本接种流程
接种编号:1407xx
接种瓶:标本混匀取1-3ml直接注入儿童瓶增菌培养。
接种培养基:3000rpm/min 离心15min ,留1ml沉渣接种培养基。
血平板
含复合因子巧克力平板
不含氯霉素沙保弱(SDA)平板
培养条件:血平板35℃温箱
巧克力平板35℃,5%CO2温箱
SDA装进塑料袋或纸胶带封口,25℃温箱
2.细菌涂片镜检(1404xx)
a) 革兰氏染色镜检
b) 抗酸染色镜检
c) 新型隐球菌墨汁染色
10 血液培养
1.血液培养瓶接种流程
接种编号:1407xx
血培养X1(收费代码306204) 儿童血培养瓶X2
血培养X2(收费代码306215) 需氧培养瓶X2
厌氧培养瓶X2
血培养X3(收费代码306216) 需氧培养瓶X2
厌氧培养瓶X2
结核+真菌培养瓶X2
导管血培养(306212,306213)需氧培养瓶X1
厌氧培养瓶X1
骨髓培养(306206)需氧培养瓶X1
厌氧培养瓶X1
11 组织标本
1 组织标本接种流程
接种编号:140Zxx
组织标本前处理:取适量组织标本于无菌研磨器中,滴加少量含硫无
菌肉汤进行研磨
接种培养基:
血平板2块
含复合因子巧克力平板
L-J罗琴氏结核杆菌培养管
不含氯霉素沙保弱平板(SDA)2块
土豆培养平板2块
培养条件:血平板1块、SDA1块、土豆1块、罗琴氏培养管35℃温箱
血平板1块、巧克力平板35℃,5%CO2温箱
SDA1块、土豆平板1块装进塑料袋或纸胶带封口,25℃温箱
2.细菌涂片镜检(140ZxxGL/TB/AG)
140ZxxGL 革兰染色
140ZxxTB 抗酸染色140ZxxAG 六胺银染色。