基因工程技术及其进展 (2) ppt课件
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酶连接起来→得到新的DNA分子。
1971年
1973年 科恩（Cohen S.）等进一步
将酶切DNA分子与质粒DNA
连接起来，并将重组质粒转
入E. cloi细胞中。
2021/8/2
4
1982年，美国食品卫生和医药管理局批准，用基因工程在
细菌中生产人的胰岛素投放市场。
1985年，转基因植物获得成功。
1986年，Mullis发明了PCR技术，专利转让达3亿美元，并
植物细胞→使质粒部分DNA包括目的基因，整合到植物
染色体，实现→遗传转化。
利用抗草甘磷(glyphosate) E. coli中分离克隆的
EPSP合成酶基因，已培育出高抗除草剂转基因植物。
2021/8/2
10
农杆菌转化烟草过程：
2021/8/2
11
2. 基因枪转化技术
以高压气体为动力，高速发射包裹有重组DNA
茄、烟草、南瓜和木瓜等50多种转基因作物已培育成功。
主要分布在美国（3570万hm2）、阿
根廷（1180万hm2）、加拿大（320
万hm2）和中国（150万hm2）等国。
自交系LAX9
高赖氨酸转基因玉米
蛋白质含量 15.1%，赖氨酸含量 0.42%
2021/8/2
27
2001年全世界转基因作物占相应作物种植总面积的比较
筛选培养基
1-2月
炼苗
1周
移栽至大田
2021/8/2
生根培养基
分化培养基
14
3. 受精卵细胞注射法
用于动物转基因:
目的基因+ 载体
→
重组DNA → 微量注射法
将重组DNA导入受体合子
细胞核→遗传转化。
2021/8/2
15
㈡、转化子的筛选
转化子：整合有外源基因的细胞、组织或个体。
筛选原理：
在构建转化质粒时，一般将外源基因与
转化。
1. 位于高压气体桶底部
的爆破片；
2. 载有重组DNA和金属
微粒的大载体；
3. 阻挡板；
4. 包裹有重组DNA
的金属微粒；
5. 被轰击样品。
2021/8/2
13
基因枪转化小麦幼胚愈伤组织过程：
诱导培养基
培养3-7天
3-7天
授粉后11-12天的
小麦品种幼胚
PDS1000/He基因枪转化
根长
3㎝
四、转基因的方法和技术
㈠、基因转化的方法
2021/8/2
9
1. 根癌农杆菌转化技术
根癌农杆菌介导的植物转化技术应用最早（双子叶植
物、单子叶植物）。
过程：将目的基因与启动子（花椰菜病毒35S）及终
止子组成嵌合DNA分子→插入到Ti衍生质粒RB与LB内构
成重组质粒→转化农杆菌细胞→利用重组农杆菌去感染
同胞鼠对照
35
4、工程菌
在环境工程中应用：
美国GE 公司构造成功具有巨大烃类分解能力的
工程菌，并获专利，用于清除石油污染。
喷洒工程菌清除
石油污染。
2021/8/2
36
无冰晶细菌帮助草莓抗霜冻
2021/8/2
37
谢谢大家。
2021/8/2
38
括：棉花、番茄、杨树、牵牛花、抗病毒木瓜和甜椒。
2021/8/2
32
3、转基因动物
转基因动物首先在小鼠获得成功。现在转基因
动物技术已用于牛、羊，使得从牛/羊奶中可以生产
蛋白质药物，称为“乳腺反应器”工程。这是生物
制药全新的生产模式，国际上已经成为生物技术领
域发展的重要方向。
➢ 美国开发了可生产人凝血酶原III的转基因羊；
选择标记基因串连在一起→两者一同进入宿
主细胞→根据标记基因在培养基中施加选择
压（加相应的化学物质） →未携带标记基
因的细胞死亡→携带有标记基因（同时也串
连有目的基因）的细胞存活→转化子。
水稻基因转化中，经潮霉素选
择后的愈伤组织状态，箭头所
示的为转化子愈伤组织。
2021/8/2
16
㈢、转基因个体再生和外源基因表达
2007年，转基因作物种植面积增加了12%（1230万公顷），
达到1.143亿公顷，成为过去五年来种植面积增加第二快的一
年。种植转基因作物的发展中国家数（12）超过了发达国家
数（11），前者的增长率是后者的三倍多（21%∶6%）。
研究显示，印度和中国转基因棉花产量已分别增加了50%
和10%，而杀虫剂的使用量已减少50%以上。印度转基因棉花
2021/8/2
28
2001年我国的转基因农作物和林木已达22种，
其中转基因棉花、大豆、马铃薯、烟草、玉米、
花生、菠菜、甜椒、小麦等进行了田间试验，转
基因棉花已经大规模商品化生产。
对照
2021/8/2
转基因抗棉铃虫品种
29
2006年转基因作物种植面积首次突破了1亿公顷大关
农业生物技术应用国际服务组织（ISAAA）报告，全球
把重组DNA分子引入宿主受体细胞；
④．筛选重组子
具有重组DNA的无性繁殖系或个体；
⑤．外源基因在受体细胞中正常表达，翻译成蛋白质等基
因产物、回收；或筛选出获得定向性状变异的个体。
2021/8/2
6
二、目的基因的分离与鉴定
一般而言，一个基因→是编码一条多
肽链的一个DNA片段，包括启动子、终止
子及内含子等。
人的蛋白质的方法是在细
菌中表达人的胰岛素
(1982)。
基因工程生产人的胰
岛素的方法如图所示。
2021/8/2
21
现已在细菌中生产10
多种药品，例如表皮
生长因子、人生长激
素因子、干扰素、乙
型肝炎工程疫苗等。
目前，酵母菌、
植物悬浮细胞、植株
和动物培养细胞均成
功地应用于表达外源
蛋白。
基因工程应用大肠杆菌
并整合到植物基因组中稳定遗传和表达的过程。
农杆菌转化法和基因枪转化法应用最多。
利用抗草甘磷(glyphosate) E. coli中分离克隆的
EPSP合成酶基因，已培育出高抗除草剂转基因植物。
2021/8/2
抗除草剂转基因水稻
24
转基因作物已开始广泛种植：
1996年全世界转基因植物种植面积为170万公顷，1997年为1100万公顷，1998年
的金属颗粒→将目的基因直接导入植物细胞→整合到
染色体上。
转化的载体多以pUC系列质粒为基础构建→通
常具有细菌复制原点及抗性选择标记；可在植物中
表达的启动子、终止子及调控序列；植物抗性选择标
记(如除草剂、潮霉素等抗性)。
2021/8/2
12
不同基因枪类型的共同特点：是用一种动力系统
将金属微粒和包被DNA导入受体细胞或组织进行
基因工程技术及其进展
2021/8/2
1
一、基因工程概述
2021/8/2
转基因烟草
转基因果蝇
来自荧火虫的荧光素酶
转β –半乳糖苷酶基因
2
1、基因工程的概念
基因工程：在分子水平上，采取工程建设方式→按照
预先设计的蓝图→借助于实验室技术将某种生物的基因或
基因组转移到另一生物中去→使后者定向获得新遗传性状
的一门技术。
基因工程技术(重组DNA技术)的建
立，使实验生物学领域产生巨大变革。
2021/8/2
3
2、基因工程的发展
史密斯（Smith H. O.）等人从细菌中分离出的
一种限制性酶→酶切病毒DNA分子，标志着
DNA重组时代的开始。
1972年 伯格（Berg P.）等用限制性酶分别酶切猿猴
病毒和λ噬菌体DNA，将两种DNA分子用连接
农民采用生物技术种植农作物的势头继续迅猛增长，转基因
作物的种植面积增加1200万公顷，增幅13%，达到1.02亿公
顷。
在全球，从1996年到2006年，各项生物技术的应用达到
顶峰，实现了60倍的增长。种植转基因作物的农户数量迅猛
增长，首次超过了1000万户，从2005年的850万户增加到
1030万户。
获得了1993年诺贝尔化学奖。
1994年，延熟保鲜的转基因番茄商品生产。
1997年，Wilmut研究小组报道用胎儿细胞为核供体，获得
了表达治疗人血友病的凝血因子IX转基因克隆羊
“波莉” 。
2021/8/2
5
3.基因工程主要步骤
①．分离和鉴定目的基因；
②．构建的重组DNA分子
基因的体外重构；
③．转基因技术
每公顷增收250美元以上，印度全国农民收入从8.4亿美元增
加至17亿美元。中国每公顷收入平均增加220美元，全国增收
超过8亿美元。90%印度农民年年种植转基因棉花，中国则是
100%。
中国已报道种植了25万棵转基因白杨树，这些抗虫树有助
于促进再造林工程的进展。
2021/8/2
31
2008年全球转基因作物种植面积持续增加
生产人类生长激素
2021/8/2
22
基因工程创造的财富：
胰岛素
1000 磅牛胰
→
10 克胰岛素；
200 升发酵液 → 10 克胰岛素；
干扰素
1200 升人血 → 2－3 万美元/ 病人；
1 升发酵液
2021/8/2
→ 200－300
美元/ 病人；
23
2、植物基因工程
植物基因转化是指将外源基因转移到植物细胞内、
2008 年，全球一半以上人口生活在上述25个国家中，
共种植了1.25 亿公顷转基因作物，占全球15亿公顷种植
面积的8%。预计到 2015 年，种植转基因作物的国家将达
到甚至超过40个。
转基因作物的品种也不断增加。大多数国家转基因作
物以大豆、棉花、玉米为主。
中国转基因作物种植面积为世界第六位，作物品种包
中国有680万小型农户种植了350万公顷的抗虫棉。
中国国家农业转基因生物安全委员会批准了抗番木瓜环
斑病毒（PRSV）的转基因番木瓜的种植。
之前，中国批准商业化种植的还有转基因矮牵牛、转基因
番茄、转基因辣椒和转基因抗虫杨。
2021/8/2
30
2007年转基因作物种植面积保持两位数增长
农业生物技术应用国际服务组织（ISAAA）报告显示，
对照
2021/8/2
三个基因
仅前二个基因
19
五、基因工程的发展现状
目前，基因工程研究发展迅速，已取得一系列重大
突破。基因工程技术已广泛用于工业、农业、畜牧业、
医学、法学等领域，为人类创造了巨大的财富。
转At7基因陆地棉在人
工接种病圃对黄萎病的
抗性表现
2021/8/2
20
1、基因工程工业
最早应用基因工程生产
转基因个体的产生：
植物：愈伤组织诱导，分化成苗。
动物：胚胎移植，发育成个体。
来自荧火虫
的荧光素酶
基因的烟草
2021/8/2
转基因鼠胚，
牛乳糖酶基因
特异表达
17
外源基因表达：
重组DNA 分子进入寄
主细胞后，目的基因能否
表达，表达效率高低，还
有很大差别。表达通常是
指目的基因编码的蛋白质
合成。生物反应器中基因
工程的最后一个步骤，是
把所获得的蛋白质分离纯
化，得到蛋白质产品。
2021/8/2
生产基因工程产品的
生物反应器
18
金稻的产生：Ye, et al., 2000, SCIENCE ，287:303-305
应用转基因技术把番茄红素合成酶、去饱和酶和环化
酶基因同时导入水稻，将β-胡萝卜素（维生素A前体）
的合成途径引入水稻的胚乳中。
额就将达到近400亿美元；
2010年，所有基因工程药物中利用生物反应器生产的份
额将达到所有生物制药总量的95%，超过1000亿美元。
分泌人类生长因子Ⅸ
的转基因羊
“Polly” 。
(Wilmut等，Nature
385, 1997)
2021/8/2
34
转移有人类生长激素
转基因鼠
人类生长激素
转基因猪
2021/8/2
26
2005年全球转基因作物种植面积达13亿亩。
2001年种植面积>100万公顷的转基因作物：
大豆（3330万hm2，占全世界转基因作物的63%，均为抗
除草剂大豆）、玉米（980万hm2 ，占19%）、棉花（680
万hm2 ，占13% ）、油菜（270万hm2 ，占5% ）；其它还
有水稻、小麦、花生、向日葵、亚麻、 甘蓝、马铃薯等，番
分离目的基因的方法和策略有很多：主要有从基因中分离、PCR同源扩增等方法。
2021/8/2
7
三、DNA分子体外重组
➢体外通过限制性内切酶进行DNA修剪；
➢目标DNA分子+ 载体DNA，用连接酶进行共价连接；
➢获得重组DNA分子；
➢转化细菌、繁殖重组DNA分子→进一步构建基因。
2021/8/2
8
➢ 英国PPL制药公司也培育出可制造人抗胰蛋白酶
和人类生长因子Ⅸ的转基因羊；
➢ 荷兰制药公司制备了可大量生产人乳铁蛋白和促
红细胞生成素（EPO）的转基因牛。
2021/8/2
33
生物高科技技术所带来的直接经济效益相当可观，并且
每年大幅度快速增长。根据预测：
2005年，仅是美国的乳腺生物反应器生产的药物年销售
2780万公顷，1999年3990万公顷，2000年4420万公顷，2001年5260万公顷，2002年
5000万公顷。
到2003年，全球种植转基因作物面积连续七年保持了10％以上的增长率。1996年
至2002年，增长了35倍，是排在生物技术成果采用率最高的产业之一。
2021/8/2
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1971年
1973年 科恩（Cohen S.）等进一步
将酶切DNA分子与质粒DNA
连接起来，并将重组质粒转
入E. cloi细胞中。
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1982年，美国食品卫生和医药管理局批准，用基因工程在
细菌中生产人的胰岛素投放市场。
1985年，转基因植物获得成功。
1986年，Mullis发明了PCR技术，专利转让达3亿美元，并
植物细胞→使质粒部分DNA包括目的基因，整合到植物
染色体，实现→遗传转化。
利用抗草甘磷(glyphosate) E. coli中分离克隆的
EPSP合成酶基因，已培育出高抗除草剂转基因植物。
2021/8/2
10
农杆菌转化烟草过程：
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2. 基因枪转化技术
以高压气体为动力，高速发射包裹有重组DNA
茄、烟草、南瓜和木瓜等50多种转基因作物已培育成功。
主要分布在美国（3570万hm2）、阿
根廷（1180万hm2）、加拿大（320
万hm2）和中国（150万hm2）等国。
自交系LAX9
高赖氨酸转基因玉米
蛋白质含量 15.1%，赖氨酸含量 0.42%
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2001年全世界转基因作物占相应作物种植总面积的比较
筛选培养基
1-2月
炼苗
1周
移栽至大田
2021/8/2
生根培养基
分化培养基
14
3. 受精卵细胞注射法
用于动物转基因:
目的基因+ 载体
→
重组DNA → 微量注射法
将重组DNA导入受体合子
细胞核→遗传转化。
2021/8/2
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㈡、转化子的筛选
转化子：整合有外源基因的细胞、组织或个体。
筛选原理：
在构建转化质粒时，一般将外源基因与
转化。
1. 位于高压气体桶底部
的爆破片；
2. 载有重组DNA和金属
微粒的大载体；
3. 阻挡板；
4. 包裹有重组DNA
的金属微粒；
5. 被轰击样品。
2021/8/2
13
基因枪转化小麦幼胚愈伤组织过程：
诱导培养基
培养3-7天
3-7天
授粉后11-12天的
小麦品种幼胚
PDS1000/He基因枪转化
根长
3㎝
四、转基因的方法和技术
㈠、基因转化的方法
2021/8/2
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1. 根癌农杆菌转化技术
根癌农杆菌介导的植物转化技术应用最早（双子叶植
物、单子叶植物）。
过程：将目的基因与启动子（花椰菜病毒35S）及终
止子组成嵌合DNA分子→插入到Ti衍生质粒RB与LB内构
成重组质粒→转化农杆菌细胞→利用重组农杆菌去感染
同胞鼠对照
35
4、工程菌
在环境工程中应用：
美国GE 公司构造成功具有巨大烃类分解能力的
工程菌，并获专利，用于清除石油污染。
喷洒工程菌清除
石油污染。
2021/8/2
36
无冰晶细菌帮助草莓抗霜冻
2021/8/2
37
谢谢大家。
2021/8/2
38
括：棉花、番茄、杨树、牵牛花、抗病毒木瓜和甜椒。
2021/8/2
32
3、转基因动物
转基因动物首先在小鼠获得成功。现在转基因
动物技术已用于牛、羊，使得从牛/羊奶中可以生产
蛋白质药物，称为“乳腺反应器”工程。这是生物
制药全新的生产模式，国际上已经成为生物技术领
域发展的重要方向。
➢ 美国开发了可生产人凝血酶原III的转基因羊；
选择标记基因串连在一起→两者一同进入宿
主细胞→根据标记基因在培养基中施加选择
压（加相应的化学物质） →未携带标记基
因的细胞死亡→携带有标记基因（同时也串
连有目的基因）的细胞存活→转化子。
水稻基因转化中，经潮霉素选
择后的愈伤组织状态，箭头所
示的为转化子愈伤组织。
2021/8/2
16
㈢、转基因个体再生和外源基因表达
2007年，转基因作物种植面积增加了12%（1230万公顷），
达到1.143亿公顷，成为过去五年来种植面积增加第二快的一
年。种植转基因作物的发展中国家数（12）超过了发达国家
数（11），前者的增长率是后者的三倍多（21%∶6%）。
研究显示，印度和中国转基因棉花产量已分别增加了50%
和10%，而杀虫剂的使用量已减少50%以上。印度转基因棉花
2021/8/2
28
2001年我国的转基因农作物和林木已达22种，
其中转基因棉花、大豆、马铃薯、烟草、玉米、
花生、菠菜、甜椒、小麦等进行了田间试验，转
基因棉花已经大规模商品化生产。
对照
2021/8/2
转基因抗棉铃虫品种
29
2006年转基因作物种植面积首次突破了1亿公顷大关
农业生物技术应用国际服务组织（ISAAA）报告，全球
把重组DNA分子引入宿主受体细胞；
④．筛选重组子
具有重组DNA的无性繁殖系或个体；
⑤．外源基因在受体细胞中正常表达，翻译成蛋白质等基
因产物、回收；或筛选出获得定向性状变异的个体。
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二、目的基因的分离与鉴定
一般而言，一个基因→是编码一条多
肽链的一个DNA片段，包括启动子、终止
子及内含子等。
人的蛋白质的方法是在细
菌中表达人的胰岛素
(1982)。
基因工程生产人的胰
岛素的方法如图所示。
2021/8/2
21
现已在细菌中生产10
多种药品，例如表皮
生长因子、人生长激
素因子、干扰素、乙
型肝炎工程疫苗等。
目前，酵母菌、
植物悬浮细胞、植株
和动物培养细胞均成
功地应用于表达外源
蛋白。
基因工程应用大肠杆菌
并整合到植物基因组中稳定遗传和表达的过程。
农杆菌转化法和基因枪转化法应用最多。
利用抗草甘磷(glyphosate) E. coli中分离克隆的
EPSP合成酶基因，已培育出高抗除草剂转基因植物。
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抗除草剂转基因水稻
24
转基因作物已开始广泛种植：
1996年全世界转基因植物种植面积为170万公顷，1997年为1100万公顷，1998年
的金属颗粒→将目的基因直接导入植物细胞→整合到
染色体上。
转化的载体多以pUC系列质粒为基础构建→通
常具有细菌复制原点及抗性选择标记；可在植物中
表达的启动子、终止子及调控序列；植物抗性选择标
记(如除草剂、潮霉素等抗性)。
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不同基因枪类型的共同特点：是用一种动力系统
将金属微粒和包被DNA导入受体细胞或组织进行
基因工程技术及其进展
2021/8/2
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一、基因工程概述
2021/8/2
转基因烟草
转基因果蝇
来自荧火虫的荧光素酶
转β –半乳糖苷酶基因
2
1、基因工程的概念
基因工程：在分子水平上，采取工程建设方式→按照
预先设计的蓝图→借助于实验室技术将某种生物的基因或
基因组转移到另一生物中去→使后者定向获得新遗传性状
的一门技术。
基因工程技术(重组DNA技术)的建
立，使实验生物学领域产生巨大变革。
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2、基因工程的发展
史密斯（Smith H. O.）等人从细菌中分离出的
一种限制性酶→酶切病毒DNA分子，标志着
DNA重组时代的开始。
1972年 伯格（Berg P.）等用限制性酶分别酶切猿猴
病毒和λ噬菌体DNA，将两种DNA分子用连接
农民采用生物技术种植农作物的势头继续迅猛增长，转基因
作物的种植面积增加1200万公顷，增幅13%，达到1.02亿公
顷。
在全球，从1996年到2006年，各项生物技术的应用达到
顶峰，实现了60倍的增长。种植转基因作物的农户数量迅猛
增长，首次超过了1000万户，从2005年的850万户增加到
1030万户。
获得了1993年诺贝尔化学奖。
1994年，延熟保鲜的转基因番茄商品生产。
1997年，Wilmut研究小组报道用胎儿细胞为核供体，获得
了表达治疗人血友病的凝血因子IX转基因克隆羊
“波莉” 。
2021/8/2
5
3.基因工程主要步骤
①．分离和鉴定目的基因；
②．构建的重组DNA分子
基因的体外重构；
③．转基因技术
每公顷增收250美元以上，印度全国农民收入从8.4亿美元增
加至17亿美元。中国每公顷收入平均增加220美元，全国增收
超过8亿美元。90%印度农民年年种植转基因棉花，中国则是
100%。
中国已报道种植了25万棵转基因白杨树，这些抗虫树有助
于促进再造林工程的进展。
2021/8/2
31
2008年全球转基因作物种植面积持续增加
生产人类生长激素
2021/8/2
22
基因工程创造的财富：
胰岛素
1000 磅牛胰
→
10 克胰岛素；
200 升发酵液 → 10 克胰岛素；
干扰素
1200 升人血 → 2－3 万美元/ 病人；
1 升发酵液
2021/8/2
→ 200－300
美元/ 病人；
23
2、植物基因工程
植物基因转化是指将外源基因转移到植物细胞内、
2008 年，全球一半以上人口生活在上述25个国家中，
共种植了1.25 亿公顷转基因作物，占全球15亿公顷种植
面积的8%。预计到 2015 年，种植转基因作物的国家将达
到甚至超过40个。
转基因作物的品种也不断增加。大多数国家转基因作
物以大豆、棉花、玉米为主。
中国转基因作物种植面积为世界第六位，作物品种包
中国有680万小型农户种植了350万公顷的抗虫棉。
中国国家农业转基因生物安全委员会批准了抗番木瓜环
斑病毒（PRSV）的转基因番木瓜的种植。
之前，中国批准商业化种植的还有转基因矮牵牛、转基因
番茄、转基因辣椒和转基因抗虫杨。
2021/8/2
30
2007年转基因作物种植面积保持两位数增长
农业生物技术应用国际服务组织（ISAAA）报告显示，
对照
2021/8/2
三个基因
仅前二个基因
19
五、基因工程的发展现状
目前，基因工程研究发展迅速，已取得一系列重大
突破。基因工程技术已广泛用于工业、农业、畜牧业、
医学、法学等领域，为人类创造了巨大的财富。
转At7基因陆地棉在人
工接种病圃对黄萎病的
抗性表现
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1、基因工程工业
最早应用基因工程生产
转基因个体的产生：
植物：愈伤组织诱导，分化成苗。
动物：胚胎移植，发育成个体。
来自荧火虫
的荧光素酶
基因的烟草
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转基因鼠胚，
牛乳糖酶基因
特异表达
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外源基因表达：
重组DNA 分子进入寄
主细胞后，目的基因能否
表达，表达效率高低，还
有很大差别。表达通常是
指目的基因编码的蛋白质
合成。生物反应器中基因
工程的最后一个步骤，是
把所获得的蛋白质分离纯
化，得到蛋白质产品。
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生产基因工程产品的
生物反应器
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金稻的产生：Ye, et al., 2000, SCIENCE ，287:303-305
应用转基因技术把番茄红素合成酶、去饱和酶和环化
酶基因同时导入水稻，将β-胡萝卜素（维生素A前体）
的合成途径引入水稻的胚乳中。
额就将达到近400亿美元；
2010年，所有基因工程药物中利用生物反应器生产的份
额将达到所有生物制药总量的95%，超过1000亿美元。
分泌人类生长因子Ⅸ
的转基因羊
“Polly” 。
(Wilmut等，Nature
385, 1997)
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转移有人类生长激素
转基因鼠
人类生长激素
转基因猪
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2005年全球转基因作物种植面积达13亿亩。
2001年种植面积>100万公顷的转基因作物：
大豆（3330万hm2，占全世界转基因作物的63%，均为抗
除草剂大豆）、玉米（980万hm2 ，占19%）、棉花（680
万hm2 ，占13% ）、油菜（270万hm2 ，占5% ）；其它还
有水稻、小麦、花生、向日葵、亚麻、 甘蓝、马铃薯等，番
分离目的基因的方法和策略有很多：主要有从基因中分离、PCR同源扩增等方法。
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三、DNA分子体外重组
➢体外通过限制性内切酶进行DNA修剪；
➢目标DNA分子+ 载体DNA，用连接酶进行共价连接；
➢获得重组DNA分子；
➢转化细菌、繁殖重组DNA分子→进一步构建基因。
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➢ 英国PPL制药公司也培育出可制造人抗胰蛋白酶
和人类生长因子Ⅸ的转基因羊；
➢ 荷兰制药公司制备了可大量生产人乳铁蛋白和促
红细胞生成素（EPO）的转基因牛。
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生物高科技技术所带来的直接经济效益相当可观，并且
每年大幅度快速增长。根据预测：
2005年，仅是美国的乳腺生物反应器生产的药物年销售
2780万公顷，1999年3990万公顷，2000年4420万公顷，2001年5260万公顷，2002年
5000万公顷。
到2003年，全球种植转基因作物面积连续七年保持了10％以上的增长率。1996年
至2002年，增长了35倍，是排在生物技术成果采用率最高的产业之一。
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