多西紫杉醇与骨髓间充质干细胞联合干预对人肝癌细胞株SMMC-7721的影响

多西紫杉醇与骨髓间充质干细胞联合干预对人肝癌细胞株
SMMC-7721的影响
李京云;焦婷
【摘要】BACKGROUND:Docetaxel, a cel cycle specific anti-tumor drug, is a drug that is used primarily for treating breast cancer; however, its efficacy is low when used for treatment of cancer not sensitive to radiotherapy. Bone marrow mesenchymal stemcels have been shown to strengthen the effects of tumor-specific targeting chemotherapy drugs. OBJECTIVE:To investigate the effects of docetaxel combined with bone marrow mesenchymal stem cels (BMSCs) on human hepatoma cel line SMMC-7721. METHODS:BMSC cels were culturedin vitro. The logarithmic growth of SMMC-7721 hepatoma cels were randomly divided into blank control group, BMSCs group and combined treatment group (combined treatment of BMSCs and docetaxel). SMMC-7721 cel cycle was detected usingflow cytometry. Cel growth rate of SMMC-7721 was determined by MTT assay. mRNA and protein expressions of tumor suppressor genes PTEN and p53 were detected by reverse transcription polymerase chain reaction and western blot assay. RESULTS AND CONCLUSION:Combined treatment of docetaxel and BMSCs inhibited SMMC-7721 cell proliferation. Compared with the blank control group, the number of cells at the G0/G1 phase was significantly increased in BMSCs group and combined treatment group. The cell growth rate of SMMC-7721 was significantly inhibited in BMSCs group compared with the blank control group, and that was further
inhibited in combined treatment group (P< 0.05). mRNA and protein expressionof PTENandp53 were significantly increased in combined treatment group compared with BMSCs group and blank control group
(P< 0.05). Our results suggest that BMSCs inhibit the growth of SMMC-7721 cells,andcombined use of docetaxel and BMSCs strengthensthe antitumor effect of BMSCs.%背景：多西紫杉醇为细胞周期特异性抗肿瘤药，单药抗肿瘤具有较好的缓解率，但对于化疗相对不敏感的肿瘤，多西紫杉醇单一化疗有效率较低。

研究报道，利用骨髓间充质干细胞可以提高靶向药物局部富集肿瘤的能力。

目的：验证多西紫杉醇及骨髓间充质干细胞联合干预人肝癌细胞株SMMC-7721的作用。

方法：体外培养骨髓间充质干细胞，选取对数生长的 SMMC-7721肝癌细胞，将其随机分为空白组，骨髓间充质干细胞组及联合组(多西紫杉醇与骨
髓间充质干细胞联合)。

采用流式细胞技术检测肝癌SMMC-7721细胞的周期变化；利用MTT法检测肝癌SMMC-7721细胞的生长率；采用聚合酶链法及免疫印迹
法检测抑癌基因PTEN、p53的mRNA及蛋白表达情况。

结果与结论：①流式细
胞技术检测显示：多西紫杉醇及骨髓间充质干细胞联合干预可以抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖，与空白组比较，骨髓间充质干细胞组及联合组处于G0/G1期的
细胞明显增多；②MTT检测显示：干预48 h后，与空白组比较，骨髓间充质干细胞组肝癌SMMC-7721细胞的生长率得到抑制，与骨髓间充质干细胞组比较，联
合组肝癌 SMMC-7721细胞的生长率得到显著抑制(P <0.05)；③RT-PCR检测显示：抑癌基因PTEN、p53的mRNA表达量在联合组明显高于空白组及骨髓间充
质干细胞组；④Western blot检测显示：与其他2组比较，联合组明显上调抑癌基因PTEN、p53的蛋白表达量(P<0.05)；⑤结果提示，骨髓间充质干细胞能够抑制体外培养的肝癌SMMC-7721细胞的生长，联合多西紫杉醇干预后，肝癌SMMC-7721细胞的生长率可以得到显著抑制。

【期刊名称】《中国组织工程研究》
【年(卷),期】2016(020)024
【总页数】7页(P3555-3561)
【关键词】组织构建;组织工程;肝癌;SMMC-7721细胞;骨髓间充质干细胞;干预;干细胞;生长率;抑制
【作者】李京云;焦婷
【作者单位】河北大学附属医院放疗科，河北省保定市 071000;河北大学附属医院肿瘤内科，河北省保定市 071000
【正文语种】中文
【中图分类】R318
引用本文：李京云，焦婷. 多西紫杉醇与骨髓间充质干细胞联合干预对人肝癌细胞株SMMC-7721的影响[J].中国组织工程研究，2016，20(24):3555-3561.
文章快速阅读：
李京云，女，1977年生，河北省保定市人；汉族，2009年河北医科大学研究生学院毕业，硕士，主治医师，主要从事肿瘤放化疗研究。

(2016)24-03555-07
稿件接受：2016-03-29
文题释义：
多西紫杉醇：是以紫杉树中的化学物质为基础而合成出来的一种药物。

药物作用机制与紫杉醇相似，即抑制微管的解聚，抑制细胞分裂。

适用于局部晚期非小细胞性肺癌或转移性乳腺癌的治疗。

间充质干细胞：是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层，属于多能干细胞，间充质干细胞最初在骨髓中发现，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。

背景：多西紫杉醇为细胞周期特异性抗肿瘤药，单药抗肿瘤具有较好的缓解率，但对于化疗相对不敏感的肿瘤，多西紫杉醇单一化疗有效率较低。

研究报道，利用骨髓间充质干细胞可以提高靶向药物局部富集肿瘤的能力。

目的：验证多西紫杉醇及骨髓间充质干细胞联合干预人肝癌细胞株SMMC-7721
的作用。

方法：体外培养骨髓间充质干细胞，选取对数生长的 SMMC-7721肝癌细胞，将其随机分为空白组，骨髓间充质干细胞组及联合组(多西紫杉醇与骨髓间充质干细
胞联合)。

采用流式细胞技术检测肝癌SMMC-7721细胞的周期变化；利用MTT
法检测肝癌SMMC-7721细胞的生长率；采用聚合酶链法及免疫印迹法检测抑癌
基因PTEN、p53的mRNA及蛋白表达情况。

结果与结论：①流式细胞技术检测显示：多西紫杉醇及骨髓间充质干细胞联合干预可以抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖，与空白组比较，骨髓间充质干细胞组及联
合组处于G0/G1期的细胞明显增多；②MTT检测显示：干预48 h后，与空白组比较，骨髓间充质干细胞组肝癌SMMC-7721细胞的生长率得到抑制，与骨髓间
充质干细胞组比较，联合组肝癌 SMMC-7721细胞的生长率得到显著抑制(P < 0.05)；③RT-PCR检测显示：抑癌基因PTEN、p53的mRNA表达量在联合组明显高于空白组及骨髓间充质干细胞组；④Western blot检测显示：与其他2组比较，联合组明显上调抑癌基因PTEN、p53的蛋白表达量(P < 0.05)；⑤结果提示，骨髓间充质干细胞能够抑制体外培养的肝癌SMMC-7721细胞的生长，联合多西
紫杉醇干预后，肝癌SMMC-7721细胞的生长率可以得到显著抑制。

组织构建；组织工程；肝癌；SMMC-7721细胞；骨髓间充质干细胞；干预；干
细胞；生长率；抑制
主题词：
肝肿瘤；间质干细胞；干细胞
BACKGROUND: Docetaxel, a cell cycle specific anti-tumor drug, is a drug that is used primarily for treating breast cancer; however, its efficacy is low when used for treatment of cancer not sensitive to radiotherapy. Bone marrow mesenchymal stem cells have been shown to strengthen the effects of tumor-specific targeting chemotherapy drugs. OBJECTIVE: To investigate the effects of docetaxel combined with bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) on human hepatoma cell line SMMC-7721.
METHODS: BMSC cells were cultured in vitro. The logarithmic growth of SMMC-7721 hepatoma cells were randomly divided into blank control group, BMSCs group and combined treatment group (combined treatment of BMSCs and docetaxel). SMMC-7721 cell cycle was detected using flow cytometry. Cell growth rate of SMMC-7721 was determined by MTT assay. mRNA and protein expressions of tumor suppressor genes PTEN and p53 were detected by reverse transcription polymerase chain reaction and western blot assay.
RESULTS AND CONCLUSION: Combined treatment of docetaxel and BMSCs inhibited SMMC-7721 cell proliferation. Compared with the blank control group, the number of cells at the G0/G1 phase was significantly increased in BMSCs group and combined treatment group. The cell growth rate of SMMC-7721 was significantly inhibited in BMSCs group compared
with the blank control group, and that was further inhibited in combined treatment group (P < 0.05). mRNA and protein expression of PTEN and
p53 were significantly increased in combined treatment group compared with BMSCs group and blank control group (P < 0.05). Our results suggest that BMSCs inhibit the growth of SMMC-7721 cells, and combined use of docetaxel and BMSCs strengthens the antitumor effect of BMSCs.
Subject headings: Liver Neoplasms; Mesenchymal Stem Cells; Stem Cells Cite this article: Li JY, Jiao T. Combined use of docetaxel and bone marrow mesenchymal stem cells in human hepatoma cell line SMMC-7721. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2016;20(24):3555-3561.
Li Jing-yun, Master, Attending physician, Department of Radiotherapy, Affiliated Hospital of Hebei University, Baoding 071000, Hebei Province, China
近些年来，肝癌的发病率见长，根据统计资料显示，在全球每年大概有60万的新发肝癌患者出现，中国也是肝癌高发国之一，可见肝癌已对人类的健康与生命造成很大威胁，值得国人高度关注和重视[1-3]。

对于肝癌的发病机制还未十分明确，
目前认为，肝癌发病可能与肝癌细胞的过度增殖及细胞凋亡受抑有关。

因此，阻断肝癌细胞的增殖、抑制细胞凋亡可能会成为一种新的治疗策略[4-6]。

多西紫杉醇为细胞周期特异性抗肿瘤药，据相关研究报道，多西紫杉醇单药抗肿瘤的效果具有较好的缓解率[7-8]，但对于化疗相对不敏感的肿瘤，采用多西紫杉醇
单一化疗的有效率却较低，且临床使用过程中发现有许多不良反应出现，进而影响了多西紫杉醇的抗肿瘤效率。

研究报道称骨髓间充质干细胞具有分化为不同细胞及组织类型的潜能[9-10]，能够定向诱导分化向肝细胞移植，是细胞移植的理想来源。

另有研究发现体内移植骨髓细胞后，可发育为肝样细胞和肝干细胞[11-12]，且具
有肝细胞的功能特点，能促进受损肝组织的修复及肝细胞再生能力的恢复[13-14]。

另有研究报道，利用骨髓间充质干细胞作为荷载肿瘤治疗药物的工具，可以提高靶向药物局部富集肿瘤的能力[15]。

随着再生医学及组织工程的发展，人们不断探索新的治疗肝癌的手段，以提高预后。

骨髓间充质干细胞为这一目的展示了广阔的前景[16-17]，但目前关于骨髓间充质
干细胞治理肝癌还处于初级阶段。

实验旨在探讨骨髓间充质干细胞会对肝癌细胞生长的作用和影响，研究中将多西紫杉醇与骨髓间充质干细胞联合干预，探讨二者联合干预后对体外培养的肝癌SMMC-7721细胞的影响作用。

1.1 设计分组对照细胞学实验。

1.2 时间及地点实验于2014年2月至2015年9月在河北医科大学动物实验
室完成。

1.3 材料人肝癌细胞株SMMC-7721由北京大学肝病研究所惠赠；多西紫杉醇(赛诺菲-安万特生产，批号：H20030513)；胰蛋白酶(美国Promega公司)；
RT-PCR试剂盒、mRNA提取试剂盒(北京博大泰克公司)；Western blot试剂盒(北京天根生物科技有限公司)；B-actin引物(华美生物工程公司)；抗PTEN、p53兔抗人单克隆抗体及HRP标记羊抗兔Ig G二抗(北京全式金生物技术有限公司)；羊抗兔 IgG 抗体(美国Promega公司产品)；蛋白浓度测定BCA试剂盒(福州迈新公司)；Trizol RNA提取液(美国Pierce公司)；流式细胞仪(美国Promega公司)；倒置荧光显微镜(北京赛百盛基因技术有限公司)；紫外微量分光光度计(美国Amersharn Pharmacia Biotech公司)。

1.4 实验方法
1.4.1 体外培养骨髓间充质干细胞及肝癌SMMC-7721细胞采用原代培养后冻存的大鼠骨髓间充质干细胞(由河北大学附属医院实验室提供)，将冷冻管从液氮中取出。

立即投入38-40 ℃水浴中，充分摇动，使其迅速熔化，冷冻管的顶部保持
在水面以上以避免污染，不定时搅拌加速解冻。

融化后采用含体积分数70%乙醇
的消毒棉消毒冷冻管，将骨髓间充质干细胞球悬液转移至4 ℃预冷的完全培养液中，以1 000 r/min，离心15 min。

机械吹打，将骨髓间充质干细胞球分散为单
细胞。

加入PBS洗涤，1 000 r/min，离心10 min，弃去上清，加入含有体积分
数10%胎牛血清的DMEM培养液，调整细胞浓度为1×109L-1接种于培养瓶中，于37 ℃，体积分数5%CO2，饱和湿度条件下培养。

24 h后全量更换培养基，去除未贴壁细胞，以后每3 d全量更换新鲜培养液。

当细胞生长至80%-90%融合时，予消化传代。

以1∶3比例进行传代，并记为P1，传代时使用 D-Hank’s液冲洗培养瓶3-5次，适度消化后离心收集细胞。

大鼠骨髓间充质干细胞鉴定参考文献[12]中的方法进行。

人肝癌细胞株采用含体积分数10%胎牛血清的RPMIl640培养液，1 mmol/L L-glutamine，100 U/mL青霉素，100 mg/L链霉素培养基置于37 ℃、体积分数5%CO2细胞培养箱中培养。

取对数生长期细胞，经0.25%胰酶消化成单细胞悬液，分瓶传代培养。

1.4.2 流式细胞技术检测肝癌SMMC-7721细胞的周期变化实验随机分为空白组(5 mL SMMC-7721细胞5×106L-1)，骨髓间充质干细胞组(4 mL SMMC-7721细胞5×106L-1+1 mL骨髓间充质干细胞5×106L-1干预)及联合组(在骨髓骨髓间充质干细胞组干预的基础上加入多西紫杉醇剂量25 μmmol/L)。

收集3组
的肝癌SMMC-7721细胞，并将细胞浓度调整为1×106L-1，利用PBS清洗细胞
2遍后，加入体积分数70%冷乙醇(4 ℃)1 mL，于4 ℃下固定过夜；采用冷PBS
清洗2遍，以体积分数70%的冷乙醇(4 ℃)将细胞沉淀后混匀，备用，洗涤细胞后再将细胞浓度调整为1×106L-1(用PBS)与含50 mg/L RNA 酶的Tris-HCl缓冲液(pH 7.4)共同孵育20 min。

置入100 mg/L PI液(1∶1)，放置避光环境下于4 ℃
孵育30 min；以300目筛网过滤细胞悬液，弃去粘连的细胞；经流式细胞仪测算
DNA含量分布，并进行G0/G1、S、G2/M各期的细胞数及所占比例的分析。

1.4.3 MTT法检测肝癌SMMC-7721细胞的生长率对数生长期的肝癌SMMC-7721细胞，经胰酶消化，按3.0×107L-1细胞浓度接种于96 孔板，每个样本做
3个复孔，4 h后，待SMMC-7721肝癌细胞全部贴壁后，加入MTT 20 μL/孔(两种药物按体积1∶1加入，总体积一样)，空白对照为只加入完全培养基，继续
放入培养箱中培养4 h，弃上清，加入10%的SDS(十二烷基磺酸钠)200 μL，过夜。

振荡至MTT完全溶解，置于酶联免疫检测仪上，检测490 nm处的吸光度值(A值)，按公式计算细胞生长率，生长率=实验组平均A值/对照组平均A值
×100%。

取4孔平均数，重复实验3次，取均值。

1.4.4 RT-PCR检测抑癌基因PTEN、p53的mRNA的表达选取处于对数生长期的肝癌SMMC-7721细胞，接种于10 cm2培养皿，置于37 ℃，体积分数
5%CO2、饱和湿度的培养箱至90%左右，根据TRIzol法提取总RNA；依据cDNA合成试剂盒反转录合成cDNA。

反应结束后将产物cDNA作为PCR反应模板，置于-20 ℃冰箱保存备用。

分别扩增PTEN、p53和内参GAPDH。

PCR仪反应参数为：93 ℃预变性5 min，94 ℃变性30 s，55 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，33个循环后终末延伸72 ℃、6 min。

通过2%的琼脂糖凝胶电泳提取PCR产物，电泳后置GDSS000凝胶自动成像仪上显像拍照保存图像，紫外线灯
下观测电泳结果，Image-ProPlus 8.0 软件分析条带灰度值，用PTEN、
p53/GAPDH代表PTEN、p53 mRNA的相对表达量。

1.4.5 Westem blot检测抑癌基因PTEN、p53的蛋白的表达细胞经胰酶消化
后收集，细胞经弃掉培养液后以PBS冲洗3次，进行总蛋白的提取，采用BCA法检测蛋白质浓度，吸取50 μg总蛋白。

加入4%体积的BME (β-Mercaptoethenal)，一起煮沸。

然后在4 ℃下，
12 000×g离心5 min。

蛋白上样，经由10%SDS-PAGE分离胶分离，转印至
PVDF膜上。

将PVDF膜取出后浸泡入5%脱脂奶粉FIBS液中封闭，于37 ℃下孵育2 h。

分别加入1∶1 000稀释的PTEN、p53兔抗人单克隆抗体，4 ℃过夜，次日加入HRP标记羊抗兔IgG二抗，37 ℃摇床孵育60 min。

PBS洗涤，采用ECL法检测。

暗室曝光X射线片，通过GDSS000凝胶自动成像系统摄像，采用Quantity one图像进行分析研究，PTEN、p53与GAPDH的灰度积分的比值进行分析，作为PTEN、p53蛋白表达的量。

以PTEN、p53/GAPDH代表代表PTEN、p53的相对表达量。

1.5 主要观察指标①SMMC-7721细胞生物学形态；②细胞周期检测结果；
③MTT法检测肝癌SMMC-7721细胞的生长率；④RT-PCR检测沉默PTEN、
p53 mRNA的表达；⑤Westem blot 检测沉默PTEN、p53蛋白的表达。

1.6 统计学分析采用SPSS 17.0软件包处理数据，计量资料均用±s表示，组间均数比较用单因素方差分析，P < 0.05为差异有显著性意义。

2.1 SMMC-7721细胞生物学形态观察空白组中，SMMC-7721细胞呈现椭圆形或梭形，成片排列；在骨髓间充质干细胞组中，部分细胞皱缩变圆，细胞黏附力降低，极易悬浮，呈典型的凋亡改变；联合组中，缩小变圆的凋亡细胞数量进一步增加。

见图1。

2.2 细胞周期检测结果流式细胞技术检测结果表明，多西紫杉醇及骨髓间充质干细胞联合干预可以抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖，与空白组比较，骨髓间充质干细胞组及联合组处于G0/G1期的细胞明显增多，S期细胞减少，提示肝癌SMMC-7721细胞被阻滞于G0/G1期，差异有显著性意义(P < 0.05)。

各组肝癌MMC-7721细胞周期变化比较见表1，图2。

2.3 MTT法检测肝癌SMMC-7721细胞的生长率MTT 检测结果显示，干预48 h后，与空白组比较，骨髓间充质干细胞组肝癌SMMC-7721细胞的生长率得到抑制，与骨髓间充质干细胞组比较，联合组肝癌SMMC-7721细胞的生长率得到
显著抑制，差异有显著性意义(P < 0.05)，各组肝癌MMC-7721细胞生长率比较
见表2，图3。

2.4 RT-PCR检测沉默PTEN、p53 mRNA的表达与空白组及骨髓间充质干细
胞组比较，PTEN、p53mRNA表达在联合组的条带呈明显变宽，说明抑癌基因PTEN、p53的mRNA表达量在联合组明显高于空白组及骨髓间充质干细胞组；
差异有显著性意义(P < 0.05)。

见表3，图4。

2.5 Westem blot检测沉默PTEN、p53蛋白的表达与空白组及骨髓间充质干细胞组比较，PTEN、p53蛋白表达在联合组的条带呈明显变宽，说明抑癌基因PTEN、p53的蛋白表达量，与空白组及骨髓间充质干细胞组比较，联合组明显上调，各组比较统计学差异显著(P < 0.05)。

见表3，图5。

癌细胞的扩散是肿瘤形成及发展过程中最危险的步骤，如果癌细胞在远处形成克隆时，常常会致使机体产生严重的后果。

对癌细胞的生长、复发及迁移进行研究具有重要意义。

许多实验研究证明骨髓间充质干细胞能够迁移且优先在肿瘤部位成活和扩增，并整合至肿瘤组织作为前体细胞发挥修复作用[18-20]。

另有研究表明骨髓
间充质干细胞接种到皮下黑色素瘤后，可直接诱发癌细胞凋亡及毛细血管退化，进而抑制肿瘤生长。

研究利用骨髓间充质干细胞抑制肿瘤生长的这一特点，将其与多西紫杉醇联用，探讨了它们联合后对肝癌细胞株SMMC-7721的影响作用[21-22]。

癌症的发生和发展与癌细胞的凋亡失调密切关联，但目前对于癌细胞凋亡机制尚未明确，可能与凋亡蛋白、抗凋亡蛋白、癌基因及抑癌基因的表达相关[23-24]。

抑
癌基因的缺失及突变是细胞发生癌变和恶性肿瘤形成及发展的重要机制之一。

实验对抑癌基因p53及PTEN进行了研究。

p53作为一种抑癌基因，在癌细胞周期变
化及细胞凋亡调控中有着重要意义。

实验研究发现，p53基因可以在不同生理条
件下启动细胞凋亡，因此被当作癌细胞凋亡机制中关键步骤[25-27]。

由于 p53蛋白的半衰期较短，在细胞内的降解速度非常快，因而 p53在正常细胞中的表达是
极弱的，而在肿瘤细胞中呈现高表达[28-29]。

抑癌基因PTEN(phosphatase and tensin homologon chromosome ten)是近两年从染色体10q23．3区带分离到的一个新的肿瘤抑制基因，又名MMACl或TEPl，参与细胞重组及细胞转移，研究发现，在癌细胞中 PTEN基因突变可致其磷酸酶活性增加，进而增强癌细胞的恶性增殖能力，此外，PTEN突变失活，会导致癌细胞凋亡途径受抑制[30-33]。

可见PTEN基因及蛋白的表达变化，与癌细胞的发展、迁移有着密切关系[34-37]。

多西紫杉醇是是紫杉醇的衍生物，从短叶紫杉的树皮中提取，具有很高的抗癌活性作用，其主要通过作用与细胞的微管系统，干扰微管系统、阻止细胞的有丝分裂，增强其细胞毒性作用，促使肿瘤细胞凋亡，最发挥抗肿瘤作用[36，38-39]。

近年来临床研究发现紫杉醇对多种癌症如胃癌、卵巢癌、肺癌、乳腺癌、头颈部鳞癌、恶性黑色素瘤等具有很好疗效[40-42]。

研究通过流式细胞技术、MTT法、RT-PCR法及Western blot法对肝癌SMMC-7721细胞进行了实验研究，其结果显示：①流式细胞技术检测结果表明，多西紫杉醇及骨髓间充质干细胞联合干预可以抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖，与空白组比较，骨髓间充质干细胞组及联合组处于G0/G1期的细胞明显增多，提示多西紫杉醇及骨髓间充质干细胞联合干预可以将肝癌SMMC-7721细胞阻滞于G0/G1期；②MTT 检测结果显示，干预48 h后，与空白组比较，骨髓间充质干细胞组肝癌SMMC-7721细胞的生长率得到抑制，与骨髓间充质干细胞组比较，联合组肝癌SMMC-7721细胞的生长率得到显著抑制；③RT-PCR技术检测结果显示，抑癌基因PTEN、p53的m RNA表达量在联合组明显高于空白组及骨髓间充质干细胞组；④Western blot技术检测结果显示，抑癌基因PTEN、p53的蛋白表达量，与空白组及骨髓间充质干细胞组比较，联合组明显上调，各组比较统计学差异显著。

以上结果均可证明骨髓间充质干细胞干预可以抑制肝癌SMMC-7721细胞
的生长，联合多西紫杉醇作用后效果更佳。

对于骨髓间充质干细胞对肝癌的作用，目前国内外的研究还较少，且骨髓间充质干细胞对肿瘤发挥作用的机制与多种因素有关，研究结果可能会存在差异性，因此，研究仅对骨髓间充质干细胞用于体外培养的肝癌SMMC-7721细胞的影响作用进行了研究，相信还会有许多机制影响肝癌SMMC-7721细胞的生长及转移。

作者贡献：设计为第一作者、实施为第一作者与通讯作者、评估者分别为第一作者与通讯作者。

是盲法评估。

利益冲突：所有作者共同认可文章内容不涉及相关利益冲突。

伦理问题：没有与相关伦理道德冲突的内容。

文章查重：文章出版前已经过CNKI反剽窃文献检测系统进行3次查重。

文章外审：文章经国内小同行外审专家双盲外审，符合本刊发稿宗旨。

作者声明：第一作者对研究和撰写的论文中出现的不端行为承担责任。

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