蔗糖检测

蔗糖检测
1、检测方法依据标准GB/T5009.8-2008
2、原理：还原糖可使费林试剂中的Cu2+还原为砖红色的Cu+，稍多的还原糖将蓝色的亚甲蓝指示剂还原为无色，以此得出还原糖的含量。

在一定的酸性条件下，无还原性的双糖被水解为还原糖，然后进行测定，即可得出总糖含量。

总糖含量减掉还原糖含量，即得蔗糖含量。

3、备品：
3.1、碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g亚甲蓝，溶于水中并稀释至1000ml。

3.2、碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再
加入4g亚铁氰化钾，溶解后，用水稀释至1000ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。

3.3、乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌[Zn(CH3OO)2·2H2O]，加3ml冰醋酸，加水溶解并稀释至100ml。

3.4、10.6%亚铁氰化钾溶液。

3.5、6mol/L盐酸
3.6、葡萄糖标准液：准确称取1.000g干燥至恒重的纯葡萄糖（见说明），加水溶解后加入5ml盐酸，并以水稀释至1000ml。

此溶液每毫升相当于1mg葡萄糖。

3.7、甲基红指示剂：0.1%乙醇溶液。

称取0.1g甲基红溶于100ml60%乙醇中。

3.8、20%氢氧化钠溶液。

3.9、100ml白容量瓶1个
3.10、500ml白容量瓶2个 3.11、1000ml白容量瓶1个
3.12、125ml白细口瓶5个 3.13、1000ml白细口瓶2个
3.14、250ml锥形瓶8个 3.15、玻璃珠约50粒
3.16、5ml吸液管4支 3.17、10ml吸液管1支
3.18、50ml大肚吸液管1支 3.20、50ml酸式滴定管1支（配铁架台1个）3.21、2500W电热炉1个（配石棉网1片）
3.22、恒温水浴箱（室温～100℃可调）1台 3.23、1%电子天平1台
4、样品处理：
4.1、称取混合均匀的浓缩汁
5.00g，(非浓汁25g)置于250ml容量瓶中。

加50ml蒸馏水，充分摇匀。

4.2、慢慢加入乙酸锌及亚铁氢化钾溶液各5ml，加蒸馏水至刻度，充分混匀。

4.3、静置0.5h，干法过滤，收集滤液备用。

5、斐林试剂的标定：
5.1、分别吸取斐林试剂甲液、乙液各5.00ml，置于250ml锥形瓶内，加玻璃珠4粒、蒸馏水10ml从滴定管中放入9ml葡萄糖标准液。

将锥形瓶置于电热炉上，在2min内使溶液沸腾。

5.2、维持沸腾状态，以每2秒钟1滴的速度滴加滴定管内的葡萄糖标准液，至溶液的蓝色刚好褪去即为滴定终点。

记录葡萄糖标准液消耗量。

该操作平行操作三个平行样。

5.3、计算出三次滴定时葡萄糖标准液消耗量的算数平均值（v）。

5.4、按下式计算每10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量M（mg）：
M（mg）＝v×m
式中“m”代表1ml葡萄糖标准液中葡萄糖的含量（mg）
6、还原糖的检测：
6.1、样液准备：吸取50mL滤液，定溶至500mL容量瓶，待用。

6.2、预滴：吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各5.00ml，置于250ml锥形瓶中，加蒸馏水10ml、玻璃珠4粒，使其在2min内加热至沸。

趁沸以先快后慢的速度从滴定管中滴加样液，须始终保持溶液的沸腾状态，待溶液蓝色变浅时，以每2秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。

记录样品溶液消耗的体积。

6.3、检测：吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各5.00ml，置于250ml锥形瓶中，加蒸馏水10ml、玻璃珠4粒，从滴定管中加入比预测少1ml的样液，使其在2min内加热至沸。

趁沸以每2秒1滴的速度继续滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。

记录样品溶液消耗的体积。

同法平行操作3份，得出平均消耗体积（V）。

6.4、结果计算：浓缩汁、非浓缩汁的还原糖检测结果按下式计算
还原糖（%）＝250 M/ m2V
式中m2——称取待测样品质量(g)
V ——消耗体积(mL)
M ——每10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量M（mg）
7、总糖的检测：
7.1、用50ml移液管准确吸取样品滤液50.0ml，置于100ml容量瓶内，加入6N盐酸溶液5.0ml，充分混匀后，于（68～70）℃恒温水浴中加热水解15.0min。

取出后立即用流水冷却至室温。

冷却后，滴加甲基红指示剂2滴，用20%浓度的氢氧化钠溶液中和至中性（黄色），无损失转移至500mL容量瓶，然后定容至刻度。

7.2、以上述水解液为滴定液，与“还原糖检测”同法操作。

7.3、结果计算：
总糖（％）＝250M / m2V′
8、蔗糖含量的计算：按下式计算样品中的蔗糖含量。

浓汁蔗糖（%）＝（总糖－还原糖）×0.95
清汁蔗糖（%）＝（总糖－还原糖）×0.95×70.2÷清汁糖
注：没有客户特殊要求的，按此方法检测，如客户对检测方法有要求时按客户要求检测。