人教版教学课件微生物的分离与计数
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难以计数微小的细菌。 一般用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。
2、间接计数法：最常用稀释涂布平板计数法
应用：统计样品中活菌的数目
原理：当样品的稀释度足够高 时，培养基表面生长的一个菌 落，来源于样品稀释液中的 一个活菌，通过统计平板上的 菌落数，就能推测出样品中大 约含有多少活菌。
（注意）：一般选择菌落数在30-300的平
板 进行记数。 稀释度很重要，一般选择三个稀释度中的
第二稀释度到平板所出现的平均菌落数在50个 左右为最好。
操作：设置重复组，增强实验的说服力和准确性。 将待测样品经过一系列的稀释，然后选择三个稀释 度的菌液均匀涂布在平板上，然后培养。
（注意）：为了结果接近真实值，可将同一稀释 度菌液涂布到3个或3个以上的平板上，经培养，计 算出菌落的平均数。
人教版教学课件微生物的分离与计数
课题1我们学习了培养基的配 制以及微生物的培养（接种技术）。 下面我们来学习如何进行细菌的分 离，获得所需要的目的微生物，并 对目的微生物进行培养计数。
一、研究思路
筛选菌株
自然界筛选：根据它对生存环境的要求，到相应的 环境中去寻找。
实验室筛选：人为提供有利于目的菌株生长的条件 （包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其 他微生物生长。
选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微 生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长 的培养基。目的是从众多微生物中分离所需要的 微生物。
统计菌落数目
测定微生物数量的方法： 1、直接计数法：最常用的显微镜直接计数。
先将待测样品制成悬液，然后取 一定量的悬液放在显微镜下进行计数。根据在显 微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内 的微生物总数。 优点：设备简单、能观察微生物的形态特征。 缺点：不能区分死菌和活菌；
对照原则：判断培养基中是否有杂菌污染，将 未接种的培养基同时进行培养。
判断选择培养基是否具有筛选作用， 对照培养基接种后培养观察菌落数目。
计算公式：每克样品中的菌株数=（C/V）*M
三、结果分析与评价
（1） 对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助 生物化 学 的方法。
(2) 在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的 脲酶 将 尿素分解成了 氨 。氨会使培养基的碱性 增强 ，PH 升高 。 因此，我们可以通过检测培养基 pH 变化来判断该化学反 应是否发生。
• 下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( ) A. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿素、琼 脂、水 B. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、琼脂、水 C. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、琼脂、水 D. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋白胨、 琼脂、水
四、课堂总结、点评
土壤 中尿 素分 解菌 的分 离与 计数
分离筛选微生物的 原理
人为 有利于目的菌株生长 条件 抑制或阻止其他微生物生
长
微生物计数方法与 原理
对照设置与重复设置
稀释涂布 平板法
显微镜直接 计数法
实验设计
实验方案 实验操作 结果与分析
五、课余作业
活菌计数技术广泛应用于土气中微生物总数的检测 2、水中细菌总数的检测 3、牛奶中 细菌的分离与计数 4、土壤中真菌（或放线菌）的分离与 技术
练一练
用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的 数目，其结果与实际值相比（ ） A.比实际值高 B.比实际值低 C.和实际值一致 D.比实际值可能高也可能低
• 有些细菌含有尿素分解酶，能将尿素琼脂培养基中 的尿素分解生成氨，氨溶于水变成氢氧化铵，导致 培养基变成碱性，使酚红指示剂呈现红色。
(3) 在以 尿素 为唯一氮源的培养基中加入 酚红 指示剂。 培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变 红 ，说明该 细菌能够 分解尿素 。 [思考10]测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的 水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到 伊红美蓝 培养基上 培养，大肠杆菌菌落呈现 黑 色，通过记述得出水样中大 肠杆菌的数量。你认为在该实验中至少应取 三 个水样。
2、间接计数法：最常用稀释涂布平板计数法
应用：统计样品中活菌的数目
原理：当样品的稀释度足够高 时，培养基表面生长的一个菌 落，来源于样品稀释液中的 一个活菌，通过统计平板上的 菌落数，就能推测出样品中大 约含有多少活菌。
（注意）：一般选择菌落数在30-300的平
板 进行记数。 稀释度很重要，一般选择三个稀释度中的
第二稀释度到平板所出现的平均菌落数在50个 左右为最好。
操作：设置重复组，增强实验的说服力和准确性。 将待测样品经过一系列的稀释，然后选择三个稀释 度的菌液均匀涂布在平板上，然后培养。
（注意）：为了结果接近真实值，可将同一稀释 度菌液涂布到3个或3个以上的平板上，经培养，计 算出菌落的平均数。
人教版教学课件微生物的分离与计数
课题1我们学习了培养基的配 制以及微生物的培养（接种技术）。 下面我们来学习如何进行细菌的分 离，获得所需要的目的微生物，并 对目的微生物进行培养计数。
一、研究思路
筛选菌株
自然界筛选：根据它对生存环境的要求，到相应的 环境中去寻找。
实验室筛选：人为提供有利于目的菌株生长的条件 （包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其 他微生物生长。
选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微 生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长 的培养基。目的是从众多微生物中分离所需要的 微生物。
统计菌落数目
测定微生物数量的方法： 1、直接计数法：最常用的显微镜直接计数。
先将待测样品制成悬液，然后取 一定量的悬液放在显微镜下进行计数。根据在显 微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内 的微生物总数。 优点：设备简单、能观察微生物的形态特征。 缺点：不能区分死菌和活菌；
对照原则：判断培养基中是否有杂菌污染，将 未接种的培养基同时进行培养。
判断选择培养基是否具有筛选作用， 对照培养基接种后培养观察菌落数目。
计算公式：每克样品中的菌株数=（C/V）*M
三、结果分析与评价
（1） 对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助 生物化 学 的方法。
(2) 在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的 脲酶 将 尿素分解成了 氨 。氨会使培养基的碱性 增强 ，PH 升高 。 因此，我们可以通过检测培养基 pH 变化来判断该化学反 应是否发生。
• 下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( ) A. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿素、琼 脂、水 B. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、琼脂、水 C. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、琼脂、水 D. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋白胨、 琼脂、水
四、课堂总结、点评
土壤 中尿 素分 解菌 的分 离与 计数
分离筛选微生物的 原理
人为 有利于目的菌株生长 条件 抑制或阻止其他微生物生
长
微生物计数方法与 原理
对照设置与重复设置
稀释涂布 平板法
显微镜直接 计数法
实验设计
实验方案 实验操作 结果与分析
五、课余作业
活菌计数技术广泛应用于土气中微生物总数的检测 2、水中细菌总数的检测 3、牛奶中 细菌的分离与计数 4、土壤中真菌（或放线菌）的分离与 技术
练一练
用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的 数目，其结果与实际值相比（ ） A.比实际值高 B.比实际值低 C.和实际值一致 D.比实际值可能高也可能低
• 有些细菌含有尿素分解酶，能将尿素琼脂培养基中 的尿素分解生成氨，氨溶于水变成氢氧化铵，导致 培养基变成碱性，使酚红指示剂呈现红色。
(3) 在以 尿素 为唯一氮源的培养基中加入 酚红 指示剂。 培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变 红 ，说明该 细菌能够 分解尿素 。 [思考10]测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的 水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到 伊红美蓝 培养基上 培养，大肠杆菌菌落呈现 黑 色，通过记述得出水样中大 肠杆菌的数量。你认为在该实验中至少应取 三 个水样。