HPLC法测定金菊五花茶颗粒中芦丁和蒙花苷的含量

HPLC法测定金菊五花茶颗粒中芦丁和蒙花苷的含量
舒金富;罗红梅
【摘要】目的建立金菊五花茶颗粒中芦丁和蒙花苷的含量测定方法.方法采用高
效液相色谱法,色谱柱Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm× 150 mm,5μm),流动相为甲
醇(A)-乙腈(B)-0.1％磷酸溶液(C),梯度洗脱,流速1.0mL·min-1;检测波长334 nm；柱温30℃.结果芦丁线性范围在21.22～339.58μg,r=0.999 4,样品加样平均回收
率为100.0％(RSD=1.10％)；蒙花苷线性范围在1.75 ～28.08μg,r =0.999 3,样
品加样平均回收率为99.2％(RSD=1.17％).结论该方法简便、准确,可用于制剂的
质量控制.
【期刊名称】《药学研究》
【年(卷),期】2014(033)002
【总页数】3页(P80-81,102)
【关键词】高效液相色谱法;金菊五花茶颗粒;芦丁;蒙花苷;含量测定
【作者】舒金富;罗红梅
【作者单位】衢州市食品药品检验所,浙江衢州324000;衢州市食品药品检验所,浙
江衢州324000
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
金菊五花茶颗粒是由金银花、木棉花、葛花、野菊花、槐花、甘草等组成，具有清热利湿，凉血解毒，清肝明目的功效。

芦丁为槐花的主要成分，蒙花苷为野菊花的
主要成分，因此有必要对此两种成分进行质量控制，本文采用高效液相色谱法测定其芦丁和蒙花苷的含量，进行了质量控制。

1.1 仪器 Agilent 1200型高效液相色谱仪，二极管阵列检测器（DAD）；Mettler XP205电子天平；超声仪（250 W，华南超声设备厂）。

1.2 药品与试剂芦丁对照品（批号：100080－200707，含量90.5%），蒙花苷
对照品（批号：111528－2000606，含量86.7%）、均由中国药品生物制品检定所供；甲醇、乙腈为色谱纯，乙醇为分析纯，水为屈臣氏蒸馏水；金菊五花茶颗粒样品3批（广东嘉应制药股份有限公司）。

2.1 色谱条件色谱柱：Eclipse XDB－C18（4.6 mm×150mm，5μm）；柱温30℃；流动相：甲醇（A）－乙腈（B）－0.1%磷酸溶液（C），梯度洗脱［0～4 min，4%（A）：14%（B）：82%（C）；4～10 min，7%（A）：20%（B）：73%（C）；10～28 min，10%（A）：25%（B）：65%（C）］；流速1.0 mL·min－1；检测波长334 nm；进样量20μL。

2.2 对照品溶液制备精密称取芦丁对照品58.62 mg，置25 mL量瓶中，加甲醇
溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照贮备液（1）。

精密称取蒙花苷对照品10.12 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照贮备液（2）。

精取上述两种对照品贮备液各2 mL，置与50 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，
摇匀，即得对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备精密称取样品约2 g，置100 mL量瓶中，精密加入甲醇
50 mL，称定重量，超声30 min，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得供试品溶液。

2.4 阴性对照溶液制备取除去槐花、野菊花以外的其他药材，按金菊五花茶颗粒
生产过程所得阴性样本，再按样品制备方法制成阴性溶液。

2.5 线性关系考察分别各精密吸取“2.2”项下的对照品贮备液（1）、（2）各
0.25、0.50、1.0、2.0、4.0 mL分别置于25 mL量瓶中，加甲醇稀至刻度，摇匀，各取20μL注入液相色谱仪中测定，以峰面积为纵坐标，对照品浓度为横坐标，进行线性回归。

芦丁回归方程为Y＝17.197X－85.006 r＝0.999 4，可见芦丁在21.22～
339.58μg范围内线性关系良好。

蒙花苷回归方程为Y＝41.818X＋11.055，r＝0.999 3，可见蒙花苷在1.75～28.08μg范围内线性关系良好。

2.6 精密度试验精密吸取对照品溶液20μL重复进样6次，记录对照品峰面积，计算芦丁RSD为1.65%，蒙花苷RSD为1.46%，表明本实验精密度良好。

2.7 稳定性试验取供试品溶液，在上述色谱条件下，分别在溶液制备后的0、1、
3、5、7、9 h进行测定，以峰面积计算芦丁RSD为1.58%，蒙花苷RSD为
1.75%，表明供试品溶液在9 h内基本稳定。

2.8 重现性实验取同一批样品6份，精密称定，按上述供试液的制备方法和色谱
条件进行测定，芦丁及蒙花苷的RSD分别为1.36%和1.51%，结果表明本方法的重现性良好。

2.9 加样回收率实验精密称取已知含量的同一批样品9份，每份约1 g，按低、中、高三个剂量分别各加入0.8、1.0、1.2 mL的上述两种对照品贮备液，每个剂量平
行3次，按“2.3”项下制成供试品溶液，测定其中的芦丁和蒙花苷的含量，并计
算回收率。

芦丁平均回收率为100.0%，RSD为1.10%，蒙花苷平均回收率为99.2%，RSD为1.17%。

结果见表1，2。

2.10 样品的含量测定取样品3批，按照供试品溶液的制备方法制成供试品溶液，分别精取对照品溶液和供试品溶液和20μL，按上述色谱条件测定蒙花苷和芦丁的含量，结果见表3。

3.1 在流动相的选择中，采用了甲醇－0.1%磷酸溶液，乙腈－0.1%磷酸溶液，甲
醇－乙腈－0.1%磷酸溶液，甲醇－0.2%磷酸溶液等不同梯度不同流动相组成的实验中，结果采用甲醇－乙腈－0.1%磷酸溶液的本方法梯度较为合适。

3.2 对芦丁和蒙花苷分别进行紫外扫描两者的最大吸收波长分别为325 nm（蒙花苷）和359 nm（芦丁），考虑蒙花苷在325 nm和334 nm测得响应值变化不
大而芦丁的含量比蒙花苷大近20倍，因此选择334 nm作为测定波长。

【相关文献】
［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版（一部）［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：295.
［2］中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂（第十册）［S］.Z10－92.
［3］王琳.HPLC测定金菊五花茶冲剂中芦丁的含量［J］，中国实用医药.2007，2（21）：50－51.。