BQ123 对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤的影响
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1 材料与方法
1.1 实验动物及模型复制
健康雄性 Wistar 大鼠 (200 ～ 250 g) 由郑 州大学医学部实验动物中心提供。实验中把 动物分成三个板块（n = 8）：对照 (Control) 组、 肢 体 缺 血 再 灌 注 (LIR) 组、BQ123+LIR 组。利用最常规的方法做出肢体缺血再灌注 损伤模型，乙醚浅麻醉下以橡皮带环绕结扎 大鼠双后肢近端，阻断血流 4 小时后松解， 大鼠称重后用 20% 乌拉坦（5ml/kg）腹腔麻 醉，左侧颈外静脉插管，恢复血流 4 小时收 集血液取肺组织于 -70℃储存。Control 组橡 皮带松弛环绕后肢不阻断血流。BQ123+LIR
组于松带前 20 分钟经左侧颈外静脉滴注 BQ123 (7ug/4ml/kg) 余操作同 LIR 组。药物溶于 生理盐水（NS）, 余组给予相应量的 NS（4ml/ kg）, 均在 15 分钟内滴完。
1.2 检测方法
1.2.1 肺呼吸功能的检测 抽少量后用自动血气分析仪检测动脉血
氧分压 (PaO2) 和二氧化碳分压 (PaCO2) 。 1.2.2 反映肺组织水肿的指标
显 升 高； PaO2 明 显 降 低。 与 LIR 组 相 比， BQ123+LIR 组 LI、W/D 均 明 显 降 低；PaO2 明显升高。差异均具有显著性。见 Tab 1
2. 2 各组大鼠血 MDA、NO 和 ET-1 变化
LIR 组与对照组比较各项指标均有不同 程 度 的 升 高 , BQ123+LIR 组 与 LIR 组 比 较 NO 含 量 增 加；MDA、ET-1 不 同 程 度 的 降 低但仍高于对照组。差异均具有显著性。见 Tab2
1.3 统计学处理方法
把统计出来的结果的平均数 ± 标准差登 记下来，组间比较用 One-Way ANOVA 分析， 采用 SPSS11.5 软件处理实验数据，采用 q 检 各组动物血气分析结果及 LI、W/D 的 变化
LIR 组 与 对 照 组 比 较，LI、W/D 均 明
肺系数 (LI，肺湿重 / 体重 ×100)：在气 管的分叉中 1cm 处，标记并剪断，测量肺湿重， 计算肺系数。肺湿干比（W/D）的测定：取 肺组织大约 300mg 左右的样子，再用滤级将 肺表面上的血吸干净然后再称重量，最后将 它放到 80℃烤箱烘干 72 小时后取出称干重， 计算其比值。 1.2.3 采用试剂盒 ( 南京建成生物制品公司 ) 测定各组动物血浆及肺组织中 NO 、丙二醛 ( malondialehy de, MDA ) 含量和肺组织髓过氧 化物酶 ( myeloperox ide, MPO) 活性，采用放 射免疫方法测定血浆和肺组织 ET-1 含量。
2. 3 各 组 大 鼠 肺 组 织 NO、ET-1、MPO、 MDA 的变化
LIR 组与对照组比较，各项指标均有不 同程度的升高；BQ123+LIR 组与 LIR 组比较， NO 高于 LIR 组，其他指标有不同程度的降 低但仍高于对照组。差异均具有显著性。见 Tab3 。
3 讨论
内皮素是 Yanagisawa 于 1988 年发现的， 它 是 目 前 已 知 的 最 强 的 缩 血 管 物 质 之 一。 ET-1 可以长时间收缩小血管、避免许多种炎 症发生，提高肺血管的阻力作用，也参加了 肺组织的损伤过程 [1, 2]。内皮素本身有较强 的缩血管功能，是因为它是由内皮细胞合成 并且分泌血管活性肽。肺脏可以降解这些物 质，有大约 50% 的 ET 在肺内就已经清除干 净了。临床和动物实验证实，在 ARDS 发病 过程中血浆内皮素 ET 明显高于正常，可能与 肺脏合成、分泌增加和清除减少有关。ET-1 可刺激多形核中性粒细胞 (polymorphonuclear neutrophil,PMN) 向内皮细胞黏附和聚集，增
临床研究
BQ123 对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤的影响
高洪波 1 郭文斌 2 张连元 3 1 包头医学院 内蒙古包头市 014040 2 包头职业技术学院 内蒙古包头市 014030
3 河北联合大学 河北省唐山市 063009
【摘 要】目的：观察并探讨内皮素受体拮抗剂 BQ123 对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤的影响。方法：将雄性 Wistar 大鼠 随机分为 3 组（n=8）：对照组 (Control)，肢体缺血再灌注组 (LIR)，BQ123+LIR 组。分别测定肢体缺血 4 h 再灌注 4 h 的动 脉血氧分压（PaO2) 和二氧化碳分压（PaCO2)，肺湿干比（W/D）、肺系数（LI)，血浆及肺组织丙二醛（MDA)、一氧化氮（NO）、 内皮素（ET-1），以及肺组织髓过氧化物酶（MPO）含量。 结果：大鼠 LIR 后 4 h ,PaO2 明显降低； W/D、L I、血浆及肺组 织的 MDA、NO、ET-1 和肺组织 MPO 活性均明显增加 , 与 LIR 组比较 , BQ123+LIR 组各项损伤指标明显降低。结论：BQ123 可 以减轻大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤。
【关键词】内皮素；BQ123；肺；再灌注；肢体
肢 体 缺 血 再 灌 注 损 伤（limb ischemia reperfusion，LIR）是骨科领域常见的病理过程 , 如外伤后骨筋膜室综合征、四肢手术和血管 损伤时止血带止血、断肢移植、游离肌瓣转 移等。LIR 会导致一些局部组织的受到严重 损伤，情况严重的话还致使部位较远的器官 同样的受到一些伤害。肺脏就是一个典型的 例子，经常因此而受累，它的主要表现形式 有急性肺损伤，如果情况严重的话可能会导 致急性呼吸窘迫综合症。内皮素 ( endothelin, ET) 受体有 ETA 、ETB 两类 ,ETA 受体存在 于平滑肌上 , 被 ET 激活后引起血管收缩反应， 内皮上有 ETB 的受体，ET 通过这个受体从 而释放内源性一氧化氮（nitric oxide, NO ) 或 前列环素 ( prostacyclin,PGI2 ) 等参与血管舒 张反应。BQ123 是一种 ETA 受体拮抗剂，本 研究观察 ETA 受体拮抗剂 BQ123 对大鼠双后 肢缺血再灌注后肺损伤的影响。
1.1 实验动物及模型复制
健康雄性 Wistar 大鼠 (200 ～ 250 g) 由郑 州大学医学部实验动物中心提供。实验中把 动物分成三个板块（n = 8）：对照 (Control) 组、 肢 体 缺 血 再 灌 注 (LIR) 组、BQ123+LIR 组。利用最常规的方法做出肢体缺血再灌注 损伤模型，乙醚浅麻醉下以橡皮带环绕结扎 大鼠双后肢近端，阻断血流 4 小时后松解， 大鼠称重后用 20% 乌拉坦（5ml/kg）腹腔麻 醉，左侧颈外静脉插管，恢复血流 4 小时收 集血液取肺组织于 -70℃储存。Control 组橡 皮带松弛环绕后肢不阻断血流。BQ123+LIR
组于松带前 20 分钟经左侧颈外静脉滴注 BQ123 (7ug/4ml/kg) 余操作同 LIR 组。药物溶于 生理盐水（NS）, 余组给予相应量的 NS（4ml/ kg）, 均在 15 分钟内滴完。
1.2 检测方法
1.2.1 肺呼吸功能的检测 抽少量后用自动血气分析仪检测动脉血
氧分压 (PaO2) 和二氧化碳分压 (PaCO2) 。 1.2.2 反映肺组织水肿的指标
显 升 高； PaO2 明 显 降 低。 与 LIR 组 相 比， BQ123+LIR 组 LI、W/D 均 明 显 降 低；PaO2 明显升高。差异均具有显著性。见 Tab 1
2. 2 各组大鼠血 MDA、NO 和 ET-1 变化
LIR 组与对照组比较各项指标均有不同 程 度 的 升 高 , BQ123+LIR 组 与 LIR 组 比 较 NO 含 量 增 加；MDA、ET-1 不 同 程 度 的 降 低但仍高于对照组。差异均具有显著性。见 Tab2
1.3 统计学处理方法
把统计出来的结果的平均数 ± 标准差登 记下来，组间比较用 One-Way ANOVA 分析， 采用 SPSS11.5 软件处理实验数据，采用 q 检 各组动物血气分析结果及 LI、W/D 的 变化
LIR 组 与 对 照 组 比 较，LI、W/D 均 明
肺系数 (LI，肺湿重 / 体重 ×100)：在气 管的分叉中 1cm 处，标记并剪断，测量肺湿重， 计算肺系数。肺湿干比（W/D）的测定：取 肺组织大约 300mg 左右的样子，再用滤级将 肺表面上的血吸干净然后再称重量，最后将 它放到 80℃烤箱烘干 72 小时后取出称干重， 计算其比值。 1.2.3 采用试剂盒 ( 南京建成生物制品公司 ) 测定各组动物血浆及肺组织中 NO 、丙二醛 ( malondialehy de, MDA ) 含量和肺组织髓过氧 化物酶 ( myeloperox ide, MPO) 活性，采用放 射免疫方法测定血浆和肺组织 ET-1 含量。
2. 3 各 组 大 鼠 肺 组 织 NO、ET-1、MPO、 MDA 的变化
LIR 组与对照组比较，各项指标均有不 同程度的升高；BQ123+LIR 组与 LIR 组比较， NO 高于 LIR 组，其他指标有不同程度的降 低但仍高于对照组。差异均具有显著性。见 Tab3 。
3 讨论
内皮素是 Yanagisawa 于 1988 年发现的， 它 是 目 前 已 知 的 最 强 的 缩 血 管 物 质 之 一。 ET-1 可以长时间收缩小血管、避免许多种炎 症发生，提高肺血管的阻力作用，也参加了 肺组织的损伤过程 [1, 2]。内皮素本身有较强 的缩血管功能，是因为它是由内皮细胞合成 并且分泌血管活性肽。肺脏可以降解这些物 质，有大约 50% 的 ET 在肺内就已经清除干 净了。临床和动物实验证实，在 ARDS 发病 过程中血浆内皮素 ET 明显高于正常，可能与 肺脏合成、分泌增加和清除减少有关。ET-1 可刺激多形核中性粒细胞 (polymorphonuclear neutrophil,PMN) 向内皮细胞黏附和聚集，增
临床研究
BQ123 对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤的影响
高洪波 1 郭文斌 2 张连元 3 1 包头医学院 内蒙古包头市 014040 2 包头职业技术学院 内蒙古包头市 014030
3 河北联合大学 河北省唐山市 063009
【摘 要】目的：观察并探讨内皮素受体拮抗剂 BQ123 对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤的影响。方法：将雄性 Wistar 大鼠 随机分为 3 组（n=8）：对照组 (Control)，肢体缺血再灌注组 (LIR)，BQ123+LIR 组。分别测定肢体缺血 4 h 再灌注 4 h 的动 脉血氧分压（PaO2) 和二氧化碳分压（PaCO2)，肺湿干比（W/D）、肺系数（LI)，血浆及肺组织丙二醛（MDA)、一氧化氮（NO）、 内皮素（ET-1），以及肺组织髓过氧化物酶（MPO）含量。 结果：大鼠 LIR 后 4 h ,PaO2 明显降低； W/D、L I、血浆及肺组 织的 MDA、NO、ET-1 和肺组织 MPO 活性均明显增加 , 与 LIR 组比较 , BQ123+LIR 组各项损伤指标明显降低。结论：BQ123 可 以减轻大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤。
【关键词】内皮素；BQ123；肺；再灌注；肢体
肢 体 缺 血 再 灌 注 损 伤（limb ischemia reperfusion，LIR）是骨科领域常见的病理过程 , 如外伤后骨筋膜室综合征、四肢手术和血管 损伤时止血带止血、断肢移植、游离肌瓣转 移等。LIR 会导致一些局部组织的受到严重 损伤，情况严重的话还致使部位较远的器官 同样的受到一些伤害。肺脏就是一个典型的 例子，经常因此而受累，它的主要表现形式 有急性肺损伤，如果情况严重的话可能会导 致急性呼吸窘迫综合症。内皮素 ( endothelin, ET) 受体有 ETA 、ETB 两类 ,ETA 受体存在 于平滑肌上 , 被 ET 激活后引起血管收缩反应， 内皮上有 ETB 的受体，ET 通过这个受体从 而释放内源性一氧化氮（nitric oxide, NO ) 或 前列环素 ( prostacyclin,PGI2 ) 等参与血管舒 张反应。BQ123 是一种 ETA 受体拮抗剂，本 研究观察 ETA 受体拮抗剂 BQ123 对大鼠双后 肢缺血再灌注后肺损伤的影响。