糖原染色Schiff法-检验科临检室作业书

糖原染色Schiff法
1.实验原理
过碘酸是氧化剂，使含有乙二醇基（－CHOH—CHOH）的多糖类物质（糖原粘多糖、粘蛋白、糖蛋白及糖脂等）氧化，形成双醛基（—CHO—CHO）。

醛基与雪夫试剂中的无色品红结合，使无色的品红变成紫红色化合物，定位于含有多糖类的细胞内。

2.标本采集
2.1病人准备：了解病人是否对局麻药有过敏史。

凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病，穿刺部位有炎症或有畸形，晚期妊娠妇女作骨髓穿刺时要慎重。

2.2标本种类：新鲜抽取的骨髓穿刺液
2.3标本采集要求
2.3.1高压消毒的穿刺针，一次性无菌手套和抽取骨髓液的无菌注射器。

2.3.2临床上首选穿刺部位为髂后上棘；翻身困难，需多部位穿刺患者可选择髂前上棘为穿刺部位。

小于3岁的小儿还可选择胫骨头内侧为穿刺部位。

3.标本储存：滴加固定液盖满血膜5分钟，水洗待干室温避光保存。

4.标本运输：室温运输
5.标本拒收的标准：溶血、稀释标本不能作测定
6.试剂
6.1试剂名称：血细胞PAS染色测定
6.2试剂生产厂家：上海太阳生物技术公司
6.3试剂组成
试剂1：PAS固定液，10％甲醛甲醇溶液。

2℃-8℃避光保存，有效期六个月。

试剂2：PASⅠ液，10g/L（1％）过碘酸溶液。

2℃-8℃避光保存，有效期六个月。

试剂3：PASⅡ液，又称Schiff氏液。

2℃-8℃避光保存，有效期六个月。

试剂4：苏木素复染液。

2℃-8℃避光保存，有效期六个月。

7.操作步骤
7.1涂片滴加固定液5-8滴，盖满血膜即可，5分钟，水洗待干。

7.2滴加Ⅰ液10分钟，水洗待干。

7.3置入Ⅱ液内室温（20～25℃左右为宜）暗处放置30分钟，然后流水冲洗数分钟。

7.4苏木素复染1～2分钟，水洗待干，镜检。

8.结果判断
8.1阳性结果—细胞内出现红色沉淀物，定位于胞质。

8.2阴性结果—细胞内无红色沉淀物。

9.临床意义
9.1粒细胞系统自早幼粒阶段以下均可呈阳性，且随细胞分化而加强。

9.2单核细胞系统可呈弥散状弱阳性伴细颗粒状。

9.3淋巴系统可呈快状或粗颗粒状阳性。

9.4巨核细胞系统（血小板）可呈粗块状或团块状阳性。

9.5红细胞系统正常情况下呈阴性，当某些疾病时可呈阳性，如MDS，AML-M6时。

10.操作性能：快速简便，特异性强，灵敏度高。

11.方法局限性
11.1标本应新鲜，且未受其他化学物品污染。

11.2滴加Ⅰ液后水洗应充分，然后待涂片完全干燥后才能置入Ⅱ液内。

11.3PASⅡ液保存不当或时间过久将会变红，并使阳性强度降低，且不能反复使用。

12.参考文献
谭齐贤主编﹒临床血液学和血液检验﹒人民卫生出版社，2002，北京：50-51。