基因工程习题与考纲
基因工程考试大纲
《基因工程》考试大纲课程编号：15010094总学时数：51学时理论＋34学时实验学分：3学分（理论）＋2学分（实验）一、考试要求理论课考试要求掌握基因工程相关的基本概念，基因工程操作的基本流程，常规基因工程技术的基本原理、基本流程与主要应用，基因表达系统的原理，转基因植物与转基因动物的基本制作方法，基因治疗与蛋白质工程的基本原理等。
实验课考核结合平时实验进行。
二、理论课考试内容第一章基因工程概述基因工程的基本概念，基因工程的基本流程，基因工程诞生的条件与标志，基因工程的发展简史以及基因工程有哪些主要应用。
第二章基因工程的载体和工具酶基因工程载体必须满足的基本条件，质粒载体的主要特征和主要类型，噬菌体载体的类型和特点，不同载体的携带能力，人工微小染色体的概念，类型和获得途径。
穿梭载体的概念，表达载体的概念等等。
以及限制性内切核酸酶的特点与使用注意事项，DNA聚合酶和Klenow大片段的作用，DNA连接酶的作用及连接过程，碱性磷酸酶的作用及用途，末端脱氧核苷酸转移酶的用途和作用等。
第三章基因工程的常规技术琼脂糖凝胶电泳的原理和影响因素；核酸分子杂交的概念，探针的类型，探针标记方法；比较探针的间接标记与直接标记的优点；掌握Southern杂交、Northern杂、Western杂交及菌落（嗜菌斑）原位杂交的基本原理、流程与主要目的；PCR技术的基本原理；PCR反应体系的主要成分与主要程序；提高PCR反应特异性的因素和措施；逆转录PCR、巢式ＰＣＲ、反向PCR、多重PCR及荧光定量PCR的概念和应用；基因芯片技术的概念、原理和主要的应用；蛋白质芯片的概念和应用；基因组文库的概念和构建方法， cDNA文库的概念和构建流程，构建cDNA文库需要用到哪些工具酶，合成cDNA第二条链有哪些方法等等；酵母双杂交系统的基本原理和应用；Sanger双脱氧链终止法DNA测序和Maxam-Gilbert化学修饰法测序的基本原理，DNA自动测序的基本原理等等。
基因工程试题
基因工程试题基因工程是一门研究如何改变、操控和利用生物体的基因结构和功能的学科。
它可以通过改变生物体的基因组，从而改变其遗传性状，并对其进行精确的调控。
基因工程技术的广泛应用在医学、农业、环境、工业等领域具有重要作用。
下面是一些关于基因工程的试题，供大家参考和学习。
试题一：基因编辑技术基因编辑技术是一种通过直接修改生物体基因组DNA序列来实现精确遗传编辑的技术，请简要介绍CRISPR-Cas9系统及其应用。
试题二：转基因作物安全性评价转基因作物是指通过基因工程技术将外源基因导入植物的基因组中，使其获得一定的优势特性。
请简要介绍转基因作物的安全性评价内容和方法。
试题三：基因药物的开发与应用基因药物是通过基因工程技术制备的一类新型药物，具有针对性强、疗效持久等特点。
请以人类胰岛素为例，简要介绍基因药物的开发和应用。
试题四：基因工程在环境修复中的应用基因工程技术在环境修复中有着重要地位，可以利用生物体修复受到污染的土壤、水体等环境。
请以重金属污染土壤修复为例，简要介绍基因工程在环境修复中的应用。
试题五：基因工程在动物育种中的应用基因工程技术在动物育种中有着广泛的应用，可以加速优良基因的传播和培育出具有特定优势的新品种。
请以瘦肉型猪育种为例，简要介绍基因工程在动物育种中的应用。
试题六：基因工程伦理问题基因工程技术的发展也带来了一系列伦理问题，如基因改造的人类是否具有平等的生存权利等。
请简要讨论基因工程伦理问题，并提出你自己的观点。
试题七：基因工程在抗疾病治疗中的前景基因工程技术在抗疾病治疗中具有广阔的前景，包括基因治疗、基因诊断等。
请简要介绍基因工程在抗疾病治疗中的前景和应用。
试题八：基因工程与传统育种的比较基因工程技术与传统育种方法相比，具有许多优势和特点。
请以粮食作物的改良为例，比较基因工程技术和传统育种方法在作物改良中的差异和优势。
以上是关于基因工程的一些试题，希望能够帮助你了解和学习基因工程技术的相关知识。
基因工程试题及答案解析
基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。
答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。
答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。
在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。
2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。
四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。
重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。
然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。
高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)
高中生物《基因工程》练习题题号一二总分得分一、单选题（本大题共20小题，共20.0分）1.如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（）A. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶D. DNA连接酶、限制酶、解旋酶2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B. 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C. 选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快D. 只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达3.如图为基因表达载体的模式图。
下列有关基因工程的说法错误的是（）A. 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B. 任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C. 图中启动子和终止子不同与起始密码子和终止密码子D. 抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了载体4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者，而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避限制酶的降解。
下列在动物体内发生的过程中，与上述细菌行为相似的是（）A. 巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体B. T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子C. 组织液中抗体与抗原的特异性结合D. 疫苗诱导机体产生对病原体的免疫5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒作为载体（）A. B.C. D.6.下图是研究人员利用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。
下列相关叙述正确的是（）A. 酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键B. Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞C. 筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测D. 上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术7.下列关于基因工程技术的说法，正确的是（）A. 切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列B. PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制8.在其他条件具备的情况下，在试管中进入物质X和物质Z，可得到相应产物Y．下列叙述正确的是（）A. 若X是DNA，Y是RNA，则Z是逆转录酶B. 若X是DNA，Y是mRNA，则Z是脱氧核苷酸C. 若X是RNA，Y是DNA，则Z是限制性内切酶D. 若X是mRNA，Y是核糖体上合成的大分子，则Z是氨基酸9.下图表示的是三种黏性末端，下列说法正确的是A. 甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的B. 若甲中的G处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C. 乙中的酶切位点在A与G之间D. 目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物10.如图是利用基因工程技术生产可使用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。
基因工程复习提纲
1. 基因工程概念：基因工程是一门以分子遗传学为理论基础、以分子生物学和微生物学的现代技术方法为手段的新兴交叉学科，它诞生于1973年，其发展十分迅速，新知识、新概念、新技术不断涌现，并广泛渗透到生命科学的各个领域，带动了整个生命科学的发展，是现代生物技术中的核心技术。
它为人类创造新生物开辟了新天地。
2. 基因工程的定义：基因工程是将不同来源的基因（DNA分子），按照工程学的方法进行设计，在体外构建成杂种DNA分子，然后导入受体细胞，并在受体细胞内复制、转录、表达的操作。
基因工程又称DNA重组技术。
3. 基因工程的特点及实施条件：基因工程的最大特点是分子水平上的操作，细胞水平上的表达。
其实施包括四个必要条件：工具酶、基因、载体和受体细胞。
4. 基因工程的基本步骤：（1）分离制取带有目的基因的DNA片段；（2）DNA片段和载体DNA 在体外连接；（3）将重组DNA分子导入合适的受体细胞，并扩增繁殖；（4）从大量的细胞繁殖群体中，筛选出获得了重组DNA分子的重组体克隆；（5）外源基因的表达和产物的分离纯化。
5. DNA复制的特点：（1）DNA的复制是从特定的复制起始点开始并按5’-3’的方向进行；（2）DNA 分子的半保留复制；（3）DNA分子的半不连续复制；（4）DNA分子复制是通过DNA聚合酶及各种相关酶蛋白、蛋白因子的协同有序的工作完成的；（5）DNA分子复制具有高度的精确性和准确性。
6. DNA的变性、复性与杂交：在高温、强碱及某些试剂存在的条件下，双链DNA分子氢键断裂，两条链完全分离，形成单链DNA分子，这种情况称为DNA变性。
DNA的复性是指变性DNA在适当的条件下，二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象，它是变性的逆转过程。
热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性，此过程称之为“退火”。
杂交的基本原理是应用核酸分子的变性和复性的性质，使来源不同的DNA（或RNA）片段按碱基互补关系形成杂交双链分子。
高中基因工程试题及答案
高中基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然选择B. 基因的人工选择C. 基因的人工重组D. 基因的自然重组答案：C2. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体答案：A3. 基因枪法属于哪种基因转移技术？A. 化学法B. 物理法C. 生物法D. 机械法答案：B4. 以下哪个不是基因工程的步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的自然选择答案：D5. 基因工程在医学领域的应用不包括：A. 基因治疗B. 基因检测C. 基因编辑D. 基因克隆答案：D二、填空题6. 基因工程的核心技术是________。
答案：重组DNA技术7. 基因工程中常用的受体细胞有________和________。
答案：大肠杆菌、酵母菌8. 基因工程在农业上的应用包括________和________。
答案：转基因作物、基因改良9. 基因工程在环境保护中的应用包括________和________。
答案：生物修复、污染物降解10. 基因工程在工业生产中的应用包括________和________。
答案：生物催化剂、生物制药三、简答题11. 简述基因工程的基本原理。
答案：基因工程的基本原理是利用分子生物学技术，将目的基因从一种生物体中提取出来，然后通过重组DNA技术将其插入到另一种生物体的基因组中，使其在新的宿主细胞中表达，从而获得具有特定性状的生物体或生产特定的生物产品。
12. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括基因治疗，通过将正常基因导入患者体内以治疗遗传性疾病；基因检测，用于疾病诊断和风险评估；基因编辑，通过修改基因序列来治疗疾病；以及生产生物药物，如胰岛素、干扰素等。
四、论述题13. 论述基因工程的伦理问题及其解决途径。
答案：基因工程的伦理问题主要包括对人类基因组的修改可能带来的未知风险、基因歧视、生物多样性的减少等。
基因工程原理练习题及其答案
基因工程复习题题型：名词解释（10个）30分；填空（每空1分） 20分；选择题（每题1分）10分；简答题（4个）20分；论述题（2个）20分。
第一章绪论1.名词解释：基因工程：按照预先设计好的蓝图，利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造，将一种生物（供体）的基因转移到另外一种生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。
遗传工程广义：指以改变生物有机体性状为目标，采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作，以改良品质或创造新品种。
包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。
狭义：基因工程。
克隆：无性(繁殖)系或纯系。
指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。
2．什么是基因克隆及基本要点?3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。
A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现（标志着DNA重组时代的开始）；B) 载体的使用；C) 1970年，逆转录酶及抗性标记的发现。
4.基因工程研究的主要内容是什么？基础研究：基因工程克隆载体的研究基因工程受体系统的研究目的基因的研究基因工程工具酶的研究基因工程新技术的研究应用研究：基因工程药物研究转基因动植物的研究在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究第二章基因克隆的工具酶1.名词解释：限制性核酸内切酶：一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。
回文结构：双链DNA中的一段倒置重复序列，当该序列的双链被打开后，可形成发夹结构。
同尾酶：来源不同、识别序列不同，但产生相同粘性末端的酶。
同裂酶：不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列黏性末端：DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合，这样的DNA末端，称为粘性末端。
平末端：DNA片段的末端是平齐的。
基因工程考试大纲
第一章概论1 基因工程（genetic engineering）：利用DNA体外重组或PCR扩增技术从某种生物基因组中分离感兴趣的基因，或是用人工合成的方法获取基因，然后经过一系列切割，加工修饰，连接反应形成重组DNA分子，再将其转入适当的受体细胞，以期获得基因表达的过程。
第二章基因工程的酶学基础1 DNA操作酶根据其催化反应的类型分为5大类：(1)核酸酶：切开、切除或降解；核酸酶通过打断DNA链中连接相邻核苷酸的磷酸二酯键来水解DNA分子。
两种:外切核酸酶(exonuleases)：从DNA分子的末端一个个地切除核苷酸。
内切核酸酶(endonuleases)：在一个DNA分子内部打开磷酸二酯键。
限制性内切酶：能够在有限的特定位点切开双链DNA。
(2)连接酶：将核酸分子连接起来；修复单链上的切口;还能够连接两条双链DNA片段。
(3)聚合酶：复制核酸分子；能够合成一条与已知模板DNA或RNA互补的新DNA链。
DNA 聚合酶I; DNA聚合酶I是典型的具备双重酶活性酶：既具备DNA合成酶活性也具备DNA 水解酶活性。
Klenow片段; Taq DNA聚合酶; 逆转录酶所用到的模板是RNA而非DNA。
(4)修饰酶：去除或添加化学基团；通过添加或删除化学基团来修饰DNA分子的酶，统称为DNA修饰酶。
碱性磷酸酶;多核苷酸激酶;末端脱氧核苷酰转移酶(5)拓扑异构酶：向共价闭合环状DNA中引入或消除超螺旋。
2切割DNA的酶—限制性内切酶基因克隆要求DNA分子以准确并可重复的方式被切割; 每一个载体都必须在一个单一位点被切割，以使新DNA插入;每个载体分子必须在环中的同一位置被切割，不能随机切割;限制性内切酶I和Ⅲ结构复杂，在基因工程中只承担很少的角色；限制性内切酶Ⅱ是基因克隆中用到、非常重要的酶。
限制性内切酶Ⅱ（简称为限制性内切酶）核心特征：每种酶都有一段特定的识别序列，在这段序列上它们才能够切割DNA分子。
基因工程试题
基因工程试题A一、名词解释（每题2分，共20分）1、转染:2、质粒不亲和性:3、cDNA 文库:4、RACE:5、基因工程:6、RT-PCR7、插入失活:8、S-D 序列:9、穿梭质粒载体:10、多克隆位点:二、选择题（每题1分，共15分）1（）基因工程操作的三大基本元件是:(I 供体 II 受体 III 载体 IV 抗体 V 配体)Ａ I + II + IIIＢ I + III + IVＣ II + III + IVＤ II + IV + VＥ III + IV + V2（）基因工程的单元操作顺序是Ａ增，转，检，切，接Ｂ切，接，转，增，检Ｃ接，转，增，检，切Ｄ检，切，接，增，转Ｅ切，接，增，转，检3( )生物工程的上游技术是Ａ基因工程及分离工程Ｂ基因工程及发酵工程Ｃ基因工程及酶工程Ｄ基因工程及细胞工程Ｅ基因工程及蛋白质工程4( )下列对逆转录酶描述正确的是：A 依赖于RNA的DNA聚合酶或称为RNA指导的DNA聚合酶B 依赖于cDNA的DNA聚合酶或称为cDNA指导的DNA聚合酶C 依赖于DNA的DNA聚合酶或称为DNA指导的DNA聚合酶D 依赖于RNA的RNA聚合酶或称为rNA指导的RNA聚合酶5( )下列对限制性内切酶描述正确的是Ａ限制性内切酶可识别任一的DNA序列Ｂ使用限制性内切酶时，有时可出现星活性Ｃ限制性内切酶可识别碱基数不超过5个Ｄ限制性内切酶切割碱基序列产生都是黏性末端6 ( )T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是Ａ 2' -OH 和 5' -PＢ 2' -OH 和 3' -PＣ 3' -OH 和 2' -PＤ 3' -OH 和 5' -PＥ 5' -OH 和 3' -P7( )下列有关连接反应的叙述，错误的是Ａ连接反应的最佳温度为12—16℃Ｂ连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10%Ｃ连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mMＤ连接酶通常应过量 2-5 倍Ｅ DTT 在反应中可加也可不加8（）下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大"A质粒B黏粒C酵母人工染色体(YAC)Dλ噬菌体9（）载体的功能是(I 运送外源基因高效进入受体细胞 II 为外源基因提供复制能力 III 为外源基因提供整合能力)Ａ IＢ I + IIＣ I + IIIＤ II + IIIＥ I + II + III10( )考斯质粒（cosmid）是一种Ａ天然质粒载体Ｂ由入-DNA 的 cos 区与一质粒重组而成的载体Ｃ能裂解受体细胞的烈性载体Ｄ具有溶原性质的载体Ｅ能在受体细胞内复制并包装的载体11( )下列有关基因的描述，错误的是Ａ蛋白质是基因表达唯一的产物Ｂ基因是DNA链上具有编码功能的片段Ｃ基因也可以是RNAＤ基因突变不一定导致其表达产物改变结构12（）关于cDNA的最正确的提法是：A 同mRNA互补的单链DNAB 同mRNA互补的双链DNAC 以mRNA为模板合成的双链DNA D以上都正确13（）*一重组 DNA （ 6.2 kb ）的载体部分有两个 SmaI 酶切位点。
基因工程测试题及答案
基因工程测试题及答案一、选择题（每题2分，共10分）1. 基因工程中常用的限制酶主要来源于：A. 病毒B. 细菌C. 真菌D. 植物答案：B2. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的降解答案：D3. 基因工程中常用的载体不包括：A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 病毒答案：D4. 基因工程中，用于连接目的基因和载体的酶是：A. 限制酶B. DNA连接酶C. DNA聚合酶D. 反转录酶答案：B5. 基因工程中，用于将重组DNA导入受体细胞的方法不包括：A. 转化B. 转染C. 转导D. 转录答案：D二、填空题（每题2分，共10分）1. 基因工程中，将外源基因导入植物细胞的方法主要有______和______。
答案：农杆菌介导法；基因枪法2. 在基因工程中，______是将目的基因插入到载体DNA分子中的关键步骤。
答案：克隆3. 基因工程中，______是将重组DNA导入受体细胞的常用方法。
答案：转化4. 基因工程中，______是将目的基因表达成蛋白质的步骤。
答案：表达5. 在基因工程中，______是检测目的基因是否成功表达的重要手段。
答案：分子杂交三、简答题（每题5分，共20分）1. 简述基因工程在医学领域的应用。
答案：基因工程在医学领域的应用包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断、疫苗开发等。
2. 描述基因工程中目的基因的获取方法。
答案：目的基因的获取方法包括从基因文库中筛选、利用PCR技术扩增、人工合成等。
3. 解释基因工程中载体的作用。
答案：载体在基因工程中的作用是携带目的基因进入受体细胞，并在其中复制和表达。
4. 阐述基因工程中转化过程的重要性。
答案：转化过程是将重组DNA导入受体细胞的关键步骤，它决定了目的基因能否在受体细胞中稳定存在和表达。
四、论述题（每题10分，共20分）1. 论述基因工程在农业领域的应用及其可能带来的问题。
基因工程操作复习提纲
基因工程操作复习提纲一、考试题型选择题、判断题、填空题、问答题二、提纲（重点在于理解、熟悉操作过程原理，了解操作注意事项）什么是基因工程、基因工程主要操作流程、基因工程的主要应用？基因工程：是将不同来源的基因（DNA分子），按照工程学的方法进行设计，在体外构建成杂种DNA分子，然后导入受体细胞，并在受体细胞内复制、转录、表达的操作。
基因工程又称DNA重组技术。
操作流程：（1）目的基因的获取：从复杂的生物基因组中，经过酶切消化或PCR 扩增等步骤，分离出带有目的基因的DNA片断。
（2）重组体的制备：将目的基因的DNA片断插入到能自我复制并带有选择性标记（抗菌素抗性）的载体分子上。
（3）重组体的转化：将重组体（载体）转入适当的受体细胞中。
（4）克隆鉴定：挑选转化成功的细胞克隆（含有目的基因）。
（5）目的基因表达：使导入寄主细胞的目的基因表达出我们所需要的基因产物。
应用：医药业：疾病的预防;病的诊断;病的治疗农业及食品工业: 提高作物抗性;改良作物品质;延长果实货架期;用农作物生产药物畜牧业;加工食品环境: 环境检测;环境净化什么是基因？是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。
什么是质粒？质粒的分类和性质？质粒是一种裸露的,结构简单,独立于细菌DNA之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
分类：两种复制类型：紧密控制型和松弛控制型克隆质粒载体；多功能质粒载体；穿梭质粒载体性质：质粒DNA的分子特性；质粒的复制类型；质粒的不亲和性；转移性。
碱法提取大肠杆菌中质粒的操作步骤、注意事项及使用试剂的用途？步骤：1. 培养细菌扩增质粒将携带pBR322质粒的大肠杆菌接种于含2 ~ 5mL 氯霉素的LB液体培养基中，37℃摇床培养24h左右。
2. 收集菌体和裂解细菌（1）取1.5mL培养液置Eppendorf管内，离心，10000r/min，5min，弃去上清，保留菌体沉淀。
《基因工程》复习大纲
《基因工程》复习大纲一、考试性质基因工程研究生入学考试科目是为我校招收生物工程专业硕士研究生而实施的水平考试，选拔具有较全面的基因工程理论知识和操作技术的学生。
其指导思想是有利于国家对高层次人才的选拔，促进基因工程课程教学质量的提高。
考试对象为2011年起参加我校硕士研究生入学基因工程考试的考生。
二、考试基本要求要求学生比较系统的理解和掌握基因工程的基本原理、单元操作和应用战略，掌握基因的高效表达原理、重组表达产物的活性回收原理、基因工程菌（细胞）的稳定生产原理、DNA的切接反应、重组DNA分子的转化、转化子的筛选与重组子的鉴定等内容，能综合运用所学知识分析和解决以大肠杆菌、酵母等基因工程受体系统为主线的实验案例，并熟悉蛋白质工程和代谢工程的基本原理和应用。
笔试内容包括具体实验方法。
三、考试方法和考试时间硕士研究生入学基因工程考试为笔试，总分150，考试时间为3小时。
四、参考书《基因工程（第2版）》张惠展主编，高等教育出版社（2010年1月出版）或《基因工程》张惠展主编，华东理工大学出版社（2005年8月出版）五、试题类型1、单项选择题（每题2分，共20分）2、填空题（每空1分，共25分）3、名词解释（每题5分，共30分）4、简答题（每题6分，共30分）5、综合题（每题15分，共45分）六、考试内容、考试要求第一部分DNA重组克隆的单元操作（40%）掌握：质粒载体；限制性核酸内切酶、DNA分子重组的方法；重组DNA转化的基本概念、转化方法、转化率及其影响因素、转化细胞的扩增；基于载体遗传标记的筛选与鉴定、基于克隆片段序列的筛选与鉴定；PCR扩增法、基因文库的构建。
熟悉：噬茵体DNA载体；T4-DNA连接酶、DNA切接反应的影响因素；受体细胞的选择；基于外源基因表达产物的筛选与鉴定；鸟枪法、cDNA法、化学合成法。
第二部分大肠杆菌及其它原核生物基因工程（30%）掌握：启动子、终止子、SD序列、密码子、质粒拷贝数；细菌生长的动力学原理、发酵过程的最优化控制、基因工程菌的高密度发酵；基因工程菌的遗传不稳定性及其对策；利用重组菌生产氨基酸、有机酸等生物基产品。
高中生物《专题1 基因工程》复习提纲 苏教版选修3
江苏省灌南高级中学高中生物《专题1基因工程》复习提纲苏教版选修3一、基因工程1、（a）基因工程的诞生（一）基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过，赋予生物以，创造出。
基因工程是在上进行设计和施工的，又叫做。
2、（a）基因工程的原理及技术原理：技术：（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——（1）来源：主要是从中分离纯化出来的。
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开，因此具有性。
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：和。
2.“分子缝合针”——(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合。
②区别：E·coliDNA连接酶来源，只能将双链DNA片段互补的之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合，但连接平末端的之间的效率较。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。
DNA连接酶是连接的末端，形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——（1）载体具备的条件：①②③（2）最常用的载体是,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有分子。
（3）其它载体：(二)基因工程的基本操作程序第一步：1.目的基因是指：。
2.人工合成目的基因的常用方法有_和_。
3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：（2）过程：第一步：加热至90～95℃；第二步：冷却到55～60℃，；第三步：加热至70～75℃，第二步：1.目的：使目的基因在受体细胞中，并且可以，使目的基因能够。
2.组成：＋＋＋（1）启动子：是一段有特殊结构的，位于基因的，是识别和结合的部位，能驱动基因，最终获得所需的。
（2）终止子：也是一段有特殊结构的，位于基因的。
（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中，从而将筛选出来。
常用的标记基因是。
基因工程考试试题题库
基因工程考试试题题库一、选择题1. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 所有以上选项2. 基因枪法是一种：A. 基因克隆技术B. 基因测序技术C. 基因转移技术D. 基因表达技术3. 以下哪个不是基因工程中常用的限制性内切酶？A. EcoRIB. BamHIC. Taq酶D. HindIII4. 基因工程中，目标基因的克隆通常需要以下哪个步骤？A. 基因测序B. 基因表达C. 基因扩增D. 基因编辑5. 转基因生物的安全性问题不包括：A. 环境安全B. 食品安全C. 经济安全D. 社会安全二、填空题1. 基因工程的核心技术是_________，它允许科学家将一个生物体的基因转移到另一个生物体中。
2. 基因工程中，常用的基因表达载体包括_________、_________等。
3. 基因工程在医学领域的应用包括_________、_________等。
4. 基因工程在农业领域的应用包括_________、_________等。
5. 基因工程中，_________是将目的基因导入受体细胞的关键步骤。
三、简答题1. 简述基因工程的基本操作步骤。
2. 解释什么是转基因生物，并举例说明其在日常生活中的应用。
3. 讨论基因工程在环境保护方面的潜在应用。
四、论述题1. 论述基因工程在提高作物产量和改良作物品质方面的应用及其可能带来的问题。
2. 分析基因工程对生物多样性的影响，并提出相应的管理策略。
五、案例分析题阅读以下关于基因编辑技术CRISPR-Cas9的案例，并回答问题：- 描述CRISPR-Cas9技术的工作原理。
- 讨论CRISPR-Cas9技术在医学研究和治疗中的应用前景。
- 分析CRISPR-Cas9技术可能引发的伦理和社会问题。
请注意，以上内容仅为示例，实际考试试题应根据具体的教学大纲和课程内容进行设计。
基因工程1-2节 复习提纲
专题一基因工程1、基因工程的原理是，是在水平上进行设计和施工。
2、限制酶主要是从生物中分离纯化出来的。
3、限制酶能够识别双链DNA分子的某种，并且使每一条链中部位的两个核苷酸之间的键断开。
4、限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：和。
5、DNA连接酶可分为和两大类。
二者都缝合键，但是前者只能连接末端。
6.运载体具备的条件：①有一个至多个，以便于。
②能进行，以便于保持遗传信息的连续性。
③有特殊的，以便于。
7、基因工程中使用的载体有：、和等。
其中最常用的是。
8、质粒本质上是小型环状的。
9、基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：、、、。
10、利用PCR技术扩增目的基因的原理是11、基因工程操作程序的核心步骤是12、构建好的基因表达载体包括、、和四部分。
13、启动子是一段有特殊结构的，是识别和结合的部位，能驱动基因。
终止子也是一段有特殊结构的，位于基因的。
14、标记基因的作用：；常用的标记基因是。
15、将目的基因导入植物细胞时受体细胞既可以是也可以是。
采用最多的方法是，其次还有和等。
16、将目的基因导入动物细胞时最常用的方法是。
此方法的受体细胞必须是。
17、原核生物细胞作为基因工程受体细胞的原因是，其转化方法中要先用处理受体细胞，使其成为细胞，18、目的基因的检测与鉴定(1)首先要检测目的基因是否插入受体细胞染色体DNA上，方法是采用技术。
(2)其次还要检测，方法是采技术。
(3)最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是采用。
19、探针本质上是用放射性同位素标记的含有基因的一段DNA单链。
1。
基因工程作业复习提纲
基因工程作业复习提纲基因工程作业复习提纲一、名词解释基因工程、基因克隆、显性质粒、质粒DNA、染色体DNA、Southern 印迹、Western印迹、PCR技术、限制性内切酶、相容性末端、部分酶切、标记基因、T克隆、表达载体、基因组文库、目的基因、RT-PCR、受体细胞、感受态细胞、外植体、基因工程药物、核酸疫苗、转基因动物、基因治疗、表达系统、包涵体蛋白、星活性、结构基因、cDNA 文库、启动子、酶单位、定量PCR、电穿孔转化法、基因枪法。
基因工程：在体外将目的基因片段插入载体上，构建重组DNA （基因的新组合),并使之进入到原先没有这类分子的受体细胞内，而能持续稳定的增殖和表达的过程。
基因工程又名：遗传工程(genetic engineering) 重组DNA技术(recombination DNA technique) 分子克隆(molecular cloning) 基因克隆(gene cloning)基因克隆：基因工程的核心内容是基因克隆和基因表达染色体DNA：分离目的基因和基因表达调控因子的主要材料，也可提供构建染色体和染色体基因整合平台系统之用标记基因：当载体进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。
这才介于克隆操作。
即带有筛选标记或抗药基因T A克隆载体：用耐热DNA聚合酶经PCR法扩增基因片段时、将PCR产物的3’端加上了一个A。
根据这一特点研制出一种线性质粒，其5’端突出的T，它们之间可以连接，即TA 克隆。
表达载体：原核表达载体表达载体中含有复制起始位点、抗性基因、克隆位点、启动子、核糖体结合位点和转录终止信号。
基因组文库: 某种生物的基因组的全部遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌中的群体之中，这个群体极为该生物的基因组文库。
目的基因: 优良性状相关的基因，即用于克隆的基因受体细胞: 能够接受外源DNA并使其稳定维持的细胞，也指具有应用价值和理论研究的细胞.电穿孔转化法: 将待转化的质粒或DNA重组连接液加在电穿孔转化仪的样品池中，两极施加高压电场。
基因工程(答题模板)
基因工程体外DNA重组和转基因技术新的遗传特性更符合人们需要的新的生物类型和生物产品 DNA分子水平 DNA重组技术限制性核酸内切酶（限制酶）原核生物特定的核苷酸序列磷酸二酯键黏性末端平末端 DNA连接酶磷酸二酯键黏性末端两种末端单个核苷酸两个DNA片段载体 DNA聚合酶 PCR技术耐高温能在受体细胞中复制并稳定保存具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择质粒基因选择性表达裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子噬菌体的衍生物、动植物病毒目的基因的获取编码蛋白质的结构基因直接分离人工合成反转录法化学合成法 DNA双链复制 DNA解链引物结合到互补DNA链热稳定DNA 聚合酶从引物起始互补链的合成基因表达载体的构建稳定存在遗传至下一代表达和发挥作用目的基因启动子终止子标记基因DNA片段首端 RNA聚合酶转录出mRNA 蛋白质 DNA片段尾端是否含有目的基因含有目的基因的细胞抗生素基因将目的基因导入受体细胞是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术受精卵繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少大肠杆菌 Ca2+ 感受态细胞重组表达载体DNA分子含有基因表达载体受体细胞标记基因是否表达目的基因的检测和表达转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因 DNA分子杂交技术目的基因是否转录出了mRNA 用标记的目的基因作探针与mRNA杂交目的基因是否翻译成蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交个体生物学水平转基因抗虫植物是否出现抗虫性状抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系基因修饰或基因合成改造新的蛋白质自然界已存在的蛋白质细胞工程细胞全能性细胞核具有全能性植物组织培养生根胚状体细胞分裂素 2、4-D 激素脱分化再分化受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞植物细胞＞动物细胞离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织试管苗植物体单倍体微型繁殖作物脱毒制造人工种子单倍体育种染色体加倍细胞产物的工厂化生产转基因植物植物体细胞杂交离心、振动、电刺激聚乙二醇（PEG）克服了远缘杂交不亲和的障碍组织单个细胞培养基生长和繁殖动物胚胎或幼龄动物的器官或组织胰蛋白酶或胶原蛋白酶细胞悬液原代培养传代贴附在瓶壁上细胞贴壁相互抑制停止分裂增殖细胞的接触抑制无菌、无毒的环境无菌抗生素代谢产物积累对细胞自身造成危害糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等血清、血浆适宜温度 36.5℃＋0.5℃ 7.2～7.4 95%空气5%CO2 细胞代谢维持培养液的pH 制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞胚胎细胞核移植体细胞核移植促进排卵卵(母)细胞去核的卵细胞卵(母)细胞比较大，容易操作卵(母)细胞细胞质多，营养丰富加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育保护濒危物种，增大存活数量生产珍贵的医用蛋白作为异种移植的供体用于组织器官的移植等健康问题遗传和生理缺陷细胞杂交两个或多个杂交瘤细胞细胞融合聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激远缘杂交的不亲和性细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育特异性抗体产量低、纯度低、特异性差无性繁殖专一的抗体特异性强，灵敏度高，并能大量制备作为诊断试剂抗原一定抗原准确、高效、简易、快速用于治疗疾病和运载药物癌症治疗生物导弹缩短育种周期胚胎工程早期胚胎或配子原始性腺细胞胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养胚胎雌性动物体内输卵管上段有丝分裂并不增加，或略有减小桑椹胚全能细胞分化全能性仍比较高内细胞团囊胚腔原肠胚三胚层囊胚腔原肠腔早期胚胎或从原始性腺胚胎细胞体积小，细胞核大，核仁明显发育的全能性增殖分化冷冻保存遗传改造个体发生和发育规律细胞分化分化诱导因子细胞分化和细胞凋亡人类的某些顽疾新的组织细胞坏死或退化体外诱导分化人造组织器官器官移植免疫排斥促性腺激素输卵管冲取卵子屠宰母畜的卵巢活体动物的卵巢卵母细胞培养成熟获能的精子获能获能溶液专用的受精溶液发育培养液受精状况和受精卵的发育能力受精卵具有全能性维生素、激素、氨基酸、核苷酸血清受体移植冷冻保存桑椹胚或囊胚 4个细胞同种的、生理状态相同的供体受体转基因核移植体外受精胚胎移植技术胚胎工程的最后一道工序供体本身的繁殖周期雌性优良个体的繁殖能力生理变化是相同的相同的生理环境游离胚胎的收集提供了可能免疫排斥反应胚胎在受体的存活提供了可能生理和组织遗传特性遗传信息对供、受体的选择和处理遗传特性和生产性能健康的体质和正常繁殖能力同一同期发情处理促性腺激素超数排卵配种或人工授精对胚胎的收集、检查、培养或保存胚胎移植是否妊娠早期胚胎 2等份、4等份同卵双胎或多胎的技术相同的遗传物质无性繁殖全能性仍很高内细胞团分割后胚胎的恢复和进一步发育提高优良母畜的繁殖力。
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第一章
1、基因工程的含义及其基本环节包括哪些
2、基因工程的基本条件及各自的作用有哪些
3、基因工程的基本技术策略及其具体实施方案
第二章
1、限制修饰系统及其在基因工程中的应用
2、限制性内切酶含义及其类型
3、限制性内切酶II为何是DNA重组技术中最常用的工具酶？它具有哪些特性？
4、同切点酶、同尾酶的含义及其在基因工程中的应用
5、限制性内切酶的星活性及其在使用过程中如何加以避免
6、DNA分子的完全酶切消化和部分酶切消化含义及其应用
7、DNA连接酶含义及其催化的连接反应特点有哪些
8、大肠杆菌DNA聚合酶I有哪些不同的酶活力特性，各有何利用价值？
9、Klenow片段和DNA poly I 有何异同
10、为什么说反转录酶是一种特殊的DNA聚合酶，其主要作用是什么
11、末端脱氧核苷酸转移酶、T4多核苷酸激酶以及碱性磷酸酶的含义及其在基因工程中的应用
12、核糖核酸酶H的含义及其应用
13、如何正确利用各种核酸酶从mRNA获得双链cDNA
第三章
1、载体的含义及其功能类型
2、克隆载体的基本条件及其主要类型
3、根据质粒在宿主细胞中的拷贝数，可将质粒的复制方式分为哪些类型，在应用上有何区别？
4、质粒的不相容性的含义
5、天然质粒往往需要哪些方面的改造才能成为合适的克隆载体
6、指出常用质粒载体pBR322与PUC18之间的差异，并列出pUC18载体的优点
7、TA载体的含义及其应用
8、λ噬菌体载体类型及其应用上的差别
9、cosmid载体由哪些要素组成，如何使用该载体？
10、表达载体的含义及其主要类型
11、原核表达载体包括哪些表达元件，各有何作用
12、穿梭载体的含义，为什么说真核表达载体多为穿梭载体
13、Ti质粒表达载体的含义以及双元Ti质粒表达载体的使用程序
14、RNAi的含义以及转基因RNAi载体和VIGS载体结构上有哪些不同，
第四章
1、凝胶电泳的含义及其影响因素
2、聚丙烯酰胺凝胶电泳与脉冲电场凝胶电泳的含义以及二者之间的主要差异
3、核酸分子杂交的含义及其意义
4、如何采用切口平移法均匀标记探针
5、在核酸分子杂交中，非放射性标记物有哪些，如何进行检测
6、Southern杂交与Northern杂交的含义及其异同点
7、PCR技术原理及其基本成分与基本过程如何
8、PCR平台效应及其影响因素
9、引物的含义与设计原则
10、逆转录PCR、锚定PCR、反向PCR、巢式PCR、原位PCR、多重PCR、不对称PCR、实时定量PCR的含义
11、Sanger双脱氧链终止法测序的基本原理
12、基因定点诱变的含义以及重组PCR定点突变的具体过程
13、酵母单杂交系统、凝胶阻滞试验、DNAaseI足迹试验
第五章
1、简并序列的含义以及如何减低一段氨基酸序列的简并度
2、基因文库的含义及两种不同基因文库类型之间的区别
3、构建基因组文库时为何要考虑基因组信息的可重建性以及如何才能满足这一条件。
4、λ噬菌体载体文库的构建应包括哪些步骤，λDNA离体包装蛋白是怎样制备的，为什么包装蛋白要分成两个部分
5、已知某一个DNA的部分核苷酸序列，如何从含有百万个重组克隆的基因组文库中筛选一个含有特定目的基因的重组克隆？
6、如果已知了某一蛋白的氨基酸序列，请设计几种方法分离该蛋白质的cDNA序列。
7、具体描述一种根据基因差异表达获得目的基因的方法
第六章
1、DNA体外重组的含义
2、如何将一平末端的DNA与BamHI形成的粘性末端连接
3、某一质粒载体有Tet r和amp r的表型，在Amp r中有一个EcoRI的酶切位点，先用EcoRI 切割载体进行基因重组，那么如何用抗性变化筛选含有插入片段的重组体
第七章
1、启动子、增强子、沉默子、终止子、衰减子、核基质结合区以及SD序列
2、启动子和增强子有哪些异同点
3、能影响染色体上DNA结构的三种顺式作用元件是什么，能影响基因转录起始的顺式作用元件是哪些，影响基因转录终止的顺式作用元件是哪些
4、什么是密码子的偏爱性，在外源基因的表达中有什么应用
5、按功能和作用方式分，启动子可以分为几种类型，每一种类型的启动子各有什么特点
第十章
1、基因漂移、生物安全性评价、实质等同性原则、个案分析原则
基因漂移：指转基因生物中的目标基因，在生物的个体、种群甚至是物种间自发移动的过程。
生物安全：指转基因技术及遗传修饰体对动植物、人类健康及遗传资源和环境造成不利影响甚至危害的安全问题。
实质等同性原则：是安全评价的起点，是指以有安全食用历史的传统食品为
基础，要求转基因食品和它所替代的传统食品至少要同样安全。
个案分析原则：个案分析原则主要针对不同基因、不同转化事件、不同环境条件的个案分析。
2、什么是生物安全管理？目前有哪些管理模式，各有什么特点
转基因技术及遗传修饰体会对动植物、人类健康及遗传资源和环境造成不利影响甚至危害，为了预防和控制这些不利影响采取的一系列措施就是生物安全管理。
①宽松型的管理模式：以美国和加拿大为代表，其管理原则是转基因生物及其产品与非转基因生物及其产品没有本质的区别。
②严厉性的管理模式：以欧盟国家为代表，其管理原则是首先假定转基因生物及其产品有潜在的危险，所有与其有关的活动都要进行严格的管理，并针对基因工程技术制定新的法规。
③中庸型的管理模式：除上述国家外，世界上大多数国家的管理法则和条例处于正在逐步建立的过程中，既不宽松也不严厉。