六味地黄丸的质量分析(中药制剂检验课件)
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≤100
≤1000
≤100
≤30000 ≤30000
≤100 ≤100
≤100000
≤500
-16-
大肠埃希 菌
(个/g)
不得检出
大肠菌 群
(个/g)
沙门菌 (个/10g)
不得检出
不得检出
不得检出 不得检出Fra bibliotek≤100 ≤100
不得检出
不得检出 ≤100
五、含量测定
取莫诺苷对照品、马钱苷对照品和 丹皮酚对照品适量，精密称定，加 50%甲醇制成每1ml含莫诺苷与马钱 苷各40μg、含丹皮酚90μg的混合溶 液，即得。
供试品溶液的 制备
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各
测
10µl，注入液相色谱仪，测定，即得。
定
本品含酒萸肉以莫诺苷（C17H26O11 ) 和马
法
钱苷(C17H26O10) 的总量计，不得 少于
0.37mg；含牡丹皮以丹皮酚(C9H10O3) 计，
不得少于0.32mg。
-17-
-13-
四、检查
2 ·
重量差异
试验方法：以10丸为1份（丸重1.5g及1.5g以上的以1丸为1份），取 供试品10份，分别称定重量，再与每份标示重量（每丸标示量×称取 丸数）相比较（无标示重量的丸剂，与平均重量比较）。 标准规定：每丸重量与平均丸重相比较，超出重量差异限度的不得多 于2丸，并不得有1丸超出限度1倍。
淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直径24 µm，脐点短缝状 或人字状 （山药）。
-6-
2
熟地黄的鉴别
三、鉴别
薄层色谱法
供试品溶液的制备：取本品10g，研细，加水100ml，温热使充分溶 散，加热至沸，放冷，用脱脂棉滤过，取滤液，用乙酸乙酯振摇提取2 次（必要时离心），每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇 lml使溶解，作为供试品溶液。 对照药材溶液的制备：取熟地黄对照药材4g，加水60ml，煎煮30分 钟，放冷，用脱脂棉滤过，取滤液，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次 20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药 材溶液。 试验方法：照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液 3~5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二甲苯-乙酸乙酯（1:1）为 展开剂，展开，取出，晾干，2，4-二硝基苯肼乙醇试液。 检测结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同 颜色的主斑点。
-9-
5
山药的鉴别
三、鉴别
薄层色谱法
供试品溶液的制备： 取本品5g，研细，加水30ml，温热使充分溶 散，放冷，滤过，药渣用水30ml洗涤，用30%盐酸溶液50ml加热回流 1小 时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次25ml，合并三氯甲烷 液， 蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。 对照药材溶液的制备：取山药对照药材1g，加30%盐酸溶液50ml， 同 法制成对照药材溶液。 试验方法：照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各 5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮（9:1.5）为展开 剂，展开，取出，晾干， 置紫外光灯（365nm)下检视。 检测结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜 色的荧光斑点。
◎处方 ◎性状 ◎鉴别 ◎检查 ◎含量测定
一、处方
熟地黄120g、酒萸肉60g 、 牡丹皮 45g、山 药60g、 茯 苓 45g、泽 泻45g
-4-
二、性状
六味地黄丸
本品为棕褐色或亮黑色 的浓缩丸；味微甜、酸、 略苦。
-5-
1
显微鉴别
三、鉴别
显微鉴别
取本品，置显微镜下观察。 检测结果： 果皮表皮细胞橙黄色，表面观类多角形，垂周壁 略连珠状增厚（酒萸肉）。
-7-
3
山茱萸的鉴别
三、鉴别
薄层色谱法
供试品溶液的制备：取本品3g，研细，加甲醇25ml，超声处理30分 钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加水20ml使溶解，用正丁醇-乙 酸乙酯 （1 : 1)混合溶液振摇提取2次，每次20ml合并提取液，用氨 溶 液（1→10)20ml洗涤，弃去氨液，正丁醇-乙酸乙酯(1 : 1) 混合溶 液 回收溶剂至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。 对照品溶液的制备：另取莫诺苷对照品 、马钱苷对照品，加甲醇制成 每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。 试验方法：照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述供试品溶液 5μl、对照品溶液2μl，分别于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇 （3:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在 105°C加热至斑点显色清晰，在紫外光(365nm)下检视。 检测结果：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜 色的荧光斑点。
-10-
6
茯苓的鉴别
三、鉴别
薄层色谱法
供试品溶液的制备：取本品10g，研细，加乙醚50ml，加热回流1小 时，滤过，滤液蒸干，残渣加正己烷 0.5ml 使溶解，作为供试品溶 液。 对照药材溶液的制备： 取茯苓对照药材2g，加乙醚30ml，加热回流 1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加正己烷 1ml使溶解，作为对照药材 溶液。 试验方法：照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液20μl、 对照药材溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚 （60~90°C）-乙醚（3:2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光 灯(365nm)下检视。 检测结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同 颜色的荧光斑点。
壹 一清颗粒的质量分析 贰 安神胶囊的质量分析 叁 小儿消食片的质量分析 肆 小柴胡片的质量分析
精诚制药 本草济民
陆 六味地黄丸（浓缩丸）的质量分析 柒 抗病毒口服液的质量分析 捌 老鹳草软膏的质量分析 玖 化痣栓的质量分析
精诚制药 本草济民
项目七 中药制剂质量分析综合实训
陆
任务六 六味地黄丸的质量分析
-11-
7
泽泻的鉴别
三、鉴别
薄层色谱法
供试品溶液的制备：取本品10g，研细，加水100ml，温热使充分溶 散，加热至沸，放冷，用脱脂棉滤过，滤液用石油醚（60~90°C) 振 摇提取3次，每次50ml( 必要时离心），合并石油醚提取液，蒸干， 残渣加石油醚 （60~ 90°C)1ml使溶解，作为供试品溶液。 对照品溶液的制备： 取泽泻对照药材2g，加水50ml，煎煮30分钟， 放冷，用脱脂棉滤过，同法制成对照药材溶液。 试验方法：照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液 10~20μl、对照药材溶液10μl，分别于同一硅胶G薄层板上，以石油 醚（60~90°C）-三氯甲烷-乙酸乙酯（2:1:2）为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以5%磷钼酸乙醇溶液，在 110°C加热至斑点显色清 晰。 检测结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同 颜色的主斑点。
-14-
3
溶散 时限
四、检查
吊篮法
试验方法：将吊篮通过上端的不锈钢轴悬挂于金属支架上，浸入1000ml烧杯 中，并调节吊篮位置使其下降时筛网距烧杯底25mm，烧杯内盛有温度为 37℃±1℃的水，调节液面高度使吊篮上升时筛网在液面下15mm处。取供试 品6丸，选择适当孔径筛网的吊篮(丸剂直径在2.5mm以下的用孔径约0. 42mm的筛网；在2. 5〜3. 5mm之间的用孔径约1.0mm的筛网；在3.5mm 以上的用孔径约2.0mm的筛网），分别置上述吊篮的玻璃管中，每管各加1 丸，加挡板，立即启动崩解仪进行检查。 标准规定：小蜜丸、水蜜丸和水丸应在1 小时内全部溶散。操作过程中如供试 品黏附挡板妨碍检查时，应另取供试品6 丸，以不加挡板进行检査。上述检 査，应在规定时间内全部通过筛网。如有细小颗粒状物未通过筛网，但已软 化且无硬心者可按符合规定论。
-12-
1
水分
四、检查
甲苯法
试验方法：取供试品适量（约相当于含水量1-4m1），精 密称定，置A瓶中，加甲苯约200ml，将仪器各部分连接， 自冷凝管顶端加入甲苯，至充满B管的狭细部分。将A瓶置 电热套中或用其他适宜的方法缓缓加热，待甲苯开始沸腾时， 调节温度，使每秒钟馏出2滴。待水分完全馏出，即测定管 刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗， 再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜的方法，将管壁上附着的甲 苯推下，继续蒸馏5分钟，放凉至室温，拆卸装置，如有水 黏附在B管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置，使水 分和甲苯完全分离。检读水量，并计算供试品中的含水量。 标准规定：除另有规定外，浓缩蜜丸中所含水分不得过 15.0%。
丸剂重量差异限度
标示重量/平均重量 重量差异限度 标示重量/平均重量 重量差异限度
0.05g及0.05g以下 0.05g以上至0.1g 0.1g以上至0.3g
0.3g以上至1.5g
±12％ ±11％ ±10％ ±9％
1.5g以上至3g 3g以上至6g 6g以上至9g 9g以上
±8％ ±7％ ±6％ ±5％
除另有规定外，大蜜丸及研碎、嚼碎后或用开水、黄酒等分散后服用的 丸剂不检査溶散时限。
-15-
4
微生物 限度
四、检查
标准规定
丸剂的原料 组成
不含药材原 粉
含动物组织 或其提取物
含药材原粉
含动物药材 粉末(蜂蜜、 王浆、角、 阿胶除外)
含豆豉、神 曲等发酵成 分
细菌数 (个/g)
≤1000
霉菌、酵母 菌数 (个/g)
-8-
三、鉴别
4
牡丹皮的鉴别
薄层色谱法
供试品溶液的制备：取本品5g，研细，加乙醚20ml，加热回流1小时，滤 过，滤液挥干，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。 对照品溶液的制备：取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml含1mg的溶液。 试验方法：照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5~10μl， 分别于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（3:1)为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以盐酸酸性5%三氯化铁乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清 晰。 检测结果：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑 点。
液对 的照 制品 备溶
取本品适量，研细，取约0.5g，精密称定 ，置 具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密 塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定 重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇勻，滤 过，取续滤液，即得。
色谱条件与系统适用性试验
色谱柱：ODS 流动相：乙腈、0.3%磷酸溶液（梯 度洗脱） 检测波长：莫诺苷和马钱苷检测波 长为240nm，丹皮酚检测波长为 274nm 理论板数：按莫诺苷 、马钱苷峰计 算应不低于4000
≤1000
≤100
≤30000 ≤30000
≤100 ≤100
≤100000
≤500
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大肠埃希 菌
(个/g)
不得检出
大肠菌 群
(个/g)
沙门菌 (个/10g)
不得检出
不得检出
不得检出 不得检出Fra bibliotek≤100 ≤100
不得检出
不得检出 ≤100
五、含量测定
取莫诺苷对照品、马钱苷对照品和 丹皮酚对照品适量，精密称定，加 50%甲醇制成每1ml含莫诺苷与马钱 苷各40μg、含丹皮酚90μg的混合溶 液，即得。
供试品溶液的 制备
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各
测
10µl，注入液相色谱仪，测定，即得。
定
本品含酒萸肉以莫诺苷（C17H26O11 ) 和马
法
钱苷(C17H26O10) 的总量计，不得 少于
0.37mg；含牡丹皮以丹皮酚(C9H10O3) 计，
不得少于0.32mg。
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四、检查
2 ·
重量差异
试验方法：以10丸为1份（丸重1.5g及1.5g以上的以1丸为1份），取 供试品10份，分别称定重量，再与每份标示重量（每丸标示量×称取 丸数）相比较（无标示重量的丸剂，与平均重量比较）。 标准规定：每丸重量与平均丸重相比较，超出重量差异限度的不得多 于2丸，并不得有1丸超出限度1倍。
淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直径24 µm，脐点短缝状 或人字状 （山药）。
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熟地黄的鉴别
三、鉴别
薄层色谱法
供试品溶液的制备：取本品10g，研细，加水100ml，温热使充分溶 散，加热至沸，放冷，用脱脂棉滤过，取滤液，用乙酸乙酯振摇提取2 次（必要时离心），每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇 lml使溶解，作为供试品溶液。 对照药材溶液的制备：取熟地黄对照药材4g，加水60ml，煎煮30分 钟，放冷，用脱脂棉滤过，取滤液，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次 20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药 材溶液。 试验方法：照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液 3~5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二甲苯-乙酸乙酯（1:1）为 展开剂，展开，取出，晾干，2，4-二硝基苯肼乙醇试液。 检测结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同 颜色的主斑点。
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山药的鉴别
三、鉴别
薄层色谱法
供试品溶液的制备： 取本品5g，研细，加水30ml，温热使充分溶 散，放冷，滤过，药渣用水30ml洗涤，用30%盐酸溶液50ml加热回流 1小 时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次25ml，合并三氯甲烷 液， 蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。 对照药材溶液的制备：取山药对照药材1g，加30%盐酸溶液50ml， 同 法制成对照药材溶液。 试验方法：照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各 5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮（9:1.5）为展开 剂，展开，取出，晾干， 置紫外光灯（365nm)下检视。 检测结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜 色的荧光斑点。
◎处方 ◎性状 ◎鉴别 ◎检查 ◎含量测定
一、处方
熟地黄120g、酒萸肉60g 、 牡丹皮 45g、山 药60g、 茯 苓 45g、泽 泻45g
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二、性状
六味地黄丸
本品为棕褐色或亮黑色 的浓缩丸；味微甜、酸、 略苦。
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1
显微鉴别
三、鉴别
显微鉴别
取本品，置显微镜下观察。 检测结果： 果皮表皮细胞橙黄色，表面观类多角形，垂周壁 略连珠状增厚（酒萸肉）。
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3
山茱萸的鉴别
三、鉴别
薄层色谱法
供试品溶液的制备：取本品3g，研细，加甲醇25ml，超声处理30分 钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加水20ml使溶解，用正丁醇-乙 酸乙酯 （1 : 1)混合溶液振摇提取2次，每次20ml合并提取液，用氨 溶 液（1→10)20ml洗涤，弃去氨液，正丁醇-乙酸乙酯(1 : 1) 混合溶 液 回收溶剂至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。 对照品溶液的制备：另取莫诺苷对照品 、马钱苷对照品，加甲醇制成 每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。 试验方法：照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述供试品溶液 5μl、对照品溶液2μl，分别于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇 （3:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在 105°C加热至斑点显色清晰，在紫外光(365nm)下检视。 检测结果：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜 色的荧光斑点。
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6
茯苓的鉴别
三、鉴别
薄层色谱法
供试品溶液的制备：取本品10g，研细，加乙醚50ml，加热回流1小 时，滤过，滤液蒸干，残渣加正己烷 0.5ml 使溶解，作为供试品溶 液。 对照药材溶液的制备： 取茯苓对照药材2g，加乙醚30ml，加热回流 1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加正己烷 1ml使溶解，作为对照药材 溶液。 试验方法：照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液20μl、 对照药材溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚 （60~90°C）-乙醚（3:2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光 灯(365nm)下检视。 检测结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同 颜色的荧光斑点。
壹 一清颗粒的质量分析 贰 安神胶囊的质量分析 叁 小儿消食片的质量分析 肆 小柴胡片的质量分析
精诚制药 本草济民
陆 六味地黄丸（浓缩丸）的质量分析 柒 抗病毒口服液的质量分析 捌 老鹳草软膏的质量分析 玖 化痣栓的质量分析
精诚制药 本草济民
项目七 中药制剂质量分析综合实训
陆
任务六 六味地黄丸的质量分析
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泽泻的鉴别
三、鉴别
薄层色谱法
供试品溶液的制备：取本品10g，研细，加水100ml，温热使充分溶 散，加热至沸，放冷，用脱脂棉滤过，滤液用石油醚（60~90°C) 振 摇提取3次，每次50ml( 必要时离心），合并石油醚提取液，蒸干， 残渣加石油醚 （60~ 90°C)1ml使溶解，作为供试品溶液。 对照品溶液的制备： 取泽泻对照药材2g，加水50ml，煎煮30分钟， 放冷，用脱脂棉滤过，同法制成对照药材溶液。 试验方法：照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液 10~20μl、对照药材溶液10μl，分别于同一硅胶G薄层板上，以石油 醚（60~90°C）-三氯甲烷-乙酸乙酯（2:1:2）为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以5%磷钼酸乙醇溶液，在 110°C加热至斑点显色清 晰。 检测结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同 颜色的主斑点。
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溶散 时限
四、检查
吊篮法
试验方法：将吊篮通过上端的不锈钢轴悬挂于金属支架上，浸入1000ml烧杯 中，并调节吊篮位置使其下降时筛网距烧杯底25mm，烧杯内盛有温度为 37℃±1℃的水，调节液面高度使吊篮上升时筛网在液面下15mm处。取供试 品6丸，选择适当孔径筛网的吊篮(丸剂直径在2.5mm以下的用孔径约0. 42mm的筛网；在2. 5〜3. 5mm之间的用孔径约1.0mm的筛网；在3.5mm 以上的用孔径约2.0mm的筛网），分别置上述吊篮的玻璃管中，每管各加1 丸，加挡板，立即启动崩解仪进行检查。 标准规定：小蜜丸、水蜜丸和水丸应在1 小时内全部溶散。操作过程中如供试 品黏附挡板妨碍检查时，应另取供试品6 丸，以不加挡板进行检査。上述检 査，应在规定时间内全部通过筛网。如有细小颗粒状物未通过筛网，但已软 化且无硬心者可按符合规定论。
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水分
四、检查
甲苯法
试验方法：取供试品适量（约相当于含水量1-4m1），精 密称定，置A瓶中，加甲苯约200ml，将仪器各部分连接， 自冷凝管顶端加入甲苯，至充满B管的狭细部分。将A瓶置 电热套中或用其他适宜的方法缓缓加热，待甲苯开始沸腾时， 调节温度，使每秒钟馏出2滴。待水分完全馏出，即测定管 刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗， 再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜的方法，将管壁上附着的甲 苯推下，继续蒸馏5分钟，放凉至室温，拆卸装置，如有水 黏附在B管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置，使水 分和甲苯完全分离。检读水量，并计算供试品中的含水量。 标准规定：除另有规定外，浓缩蜜丸中所含水分不得过 15.0%。
丸剂重量差异限度
标示重量/平均重量 重量差异限度 标示重量/平均重量 重量差异限度
0.05g及0.05g以下 0.05g以上至0.1g 0.1g以上至0.3g
0.3g以上至1.5g
±12％ ±11％ ±10％ ±9％
1.5g以上至3g 3g以上至6g 6g以上至9g 9g以上
±8％ ±7％ ±6％ ±5％
除另有规定外，大蜜丸及研碎、嚼碎后或用开水、黄酒等分散后服用的 丸剂不检査溶散时限。
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微生物 限度
四、检查
标准规定
丸剂的原料 组成
不含药材原 粉
含动物组织 或其提取物
含药材原粉
含动物药材 粉末(蜂蜜、 王浆、角、 阿胶除外)
含豆豉、神 曲等发酵成 分
细菌数 (个/g)
≤1000
霉菌、酵母 菌数 (个/g)
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三、鉴别
4
牡丹皮的鉴别
薄层色谱法
供试品溶液的制备：取本品5g，研细，加乙醚20ml，加热回流1小时，滤 过，滤液挥干，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。 对照品溶液的制备：取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml含1mg的溶液。 试验方法：照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5~10μl， 分别于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（3:1)为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以盐酸酸性5%三氯化铁乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清 晰。 检测结果：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑 点。
液对 的照 制品 备溶
取本品适量，研细，取约0.5g，精密称定 ，置 具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密 塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定 重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇勻，滤 过，取续滤液，即得。
色谱条件与系统适用性试验
色谱柱：ODS 流动相：乙腈、0.3%磷酸溶液（梯 度洗脱） 检测波长：莫诺苷和马钱苷检测波 长为240nm，丹皮酚检测波长为 274nm 理论板数：按莫诺苷 、马钱苷峰计 算应不低于4000