药物的含量测定方法与验证
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示例一 计算Vc的滴定度T
碘量法测定Vc含量[M(C6H6O6)=176.13]，C(I26 2HI
Mb=0.05mol/L
a 1 T =m× ×M=0.05× ×176.13=8.806(mg/ml) b 1
1 MA=176.13
对于固体制剂: Cx D W 100% W B W : 制剂平均重量 (装量); 标示量(%) B : 制剂的标示量 ;
示例1：取盐酸吗啡片20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于 盐酸吗啡10mg)置100ml量瓶中，加水溶解至刻度，摇匀，滤过，精密量 取续滤液15ml，置50ml量瓶中，加0.2mol/L氢氧化钠25ml，用水稀释至 刻度，摇匀，UV法测定。另取吗啡对照品适量，精密称定，用0.2mol/L 氢氧化钠稀释至每ml中约含20μg的溶液，同法测定。计算，结果乘以 1.317，即得C17H19NO3· HCl· 3H2O的含量。(规格5mg)
0 B S B
没有药物存在时，滴定液 A全部与滴定液B反应 药物存在时，剩余滴定液 A全部与滴定液B反应
示例四 司可巴比妥钠的含量测定 取本品约0.1g，精密称定，置250ml碘瓶中，加水 10ml，振摇使溶解，精密加溴滴定液(0.05mol/L) 25ml，再加盐酸5ml，立即密塞，并振摇1min，在暗 处放置15min后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml， 立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L) 滴定，至终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消 失，并将滴定得的结果用空白试验校正。
Ax C R Cx AR C x 供试品溶液浓度 ; C R 对照品溶液浓度 ; Ax , AR 对应吸光度;
紫外可见分光度法含量测定方法 对照品比较法
对原料药: C D 测得量 100% x 100% 称样量 W C x : 供试品浓度 ; 含量(%) D : 稀释体积 ; W : 供试品的量 ;
密塞，振摇后暗处放置10min 碘量法 Sb5 2I Sb3 I 2 Sb5+——2S2O32I 2 2S2 O32 2I S4O 6 2
a 1 T (mg / ml ) m M 0.1 121.76 6.088(mg / ml ) b 2
示例五 剩余碘量法测定异烟肼含量
异烟肼在弱碱性溶液中，加定量过量的碘滴定液(0.05mol/L) 氧化，反应完成后，酸化，剩余碘滴定液用硫代硫酸钠滴定液 (0.1mol/L)滴定(以淀粉为指示剂)。
CONHNH2
+ 2
COOH I2
+ 5
NaHCO3
+
N I2
+ 2
N2
+ 4
NaI
+ 5 CO2 + 4 H2O
特点
1、方法简便易行：所用仪器价廉易得，操 作简便快速 2、方法耐用性高：影响测定的试验条件与 环境因素少 3、测定结果准确：误差低于0.2%，满足准 确度高样品 4、方法专属性差：对相近杂质干扰缺少选 择，适用于主成分含量较高的样品分析
适用 范围
广泛应用于化学原料的 测定，较少应用于药物 制剂的测定。
Na2S2O3
Na2S4O6
+ 2
NaI
1 I 2 : 异烟肼 2： 1 TI 2 0.1 134.14 6.858(mg/ml) 2 (VI 2 FI 2 - VNa 2S2O3 FNa 2S2O3 ) TI 2 含量% 100 W
习题
非那西丁含量测定
精密称取本品0.3630g加稀盐酸回流1小时后，放冷， 用亚硝酸钠液（0.1010mol/L）滴定，用去20.00ml。 每1ml亚硝酸钠液（0.1mol/L）相当于17.92mg的 C10H13O2N，请计算非那西丁的含量。
取样量
第一节 定量分析方法的分类与特点
容量分析法
定义
将已知浓度的滴定液（标准物质溶液），由滴定管滴加到 被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反应完全（通 过适当方法指示），然后根据滴定液消耗的浓度和被消耗 的体积，按化学计量关系式计算出被测药物的含量。
亦称
滴定法
通过指示剂颜色 变化，或者电子 设备的电位或电 流突变来指示滴 定终点
一、容量分析法
定义
将已知浓度的滴定液（标准物质溶液），由滴定管滴加到 被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反应完全（通 过适当方法指示），然后根据滴定液消耗的浓度和被消耗 的体积，按化学计量关系式计算出被测药物的含量。
亦称
滴定法
通过指示剂颜色 变化，或者电子 设备的电位或电 流突变来指示滴 定终点
特点
1、方法简便易行：所用仪器价廉易得，操 作简便快速 2、方法耐用性高：影响测定的试验条件与 环境因素少 3、测定结果准确：误差低于0.2%，满足准 确度高样品 4、方法专属性差：对相近杂质干扰缺少选 择，适用于主成分含量较高的样品分析
适用 范围
广泛应用于化学原料的 测定，较少应用于药物 制剂的测定。
本法用溴与司可巴比妥钠反应，再用硫代硫酸钠反滴定 溴，属反滴定法，并用空白试验校正,滴定液A为溴，B 为硫代硫酸钠，含量计算只需先求溴滴定度，再求出硫 代硫酸钠空白试验V0体积与样品测定体积Vs
示例四 司可巴比妥钠的含量测定 已知： 司可巴比妥钠M=260.23; 司可巴比妥钠与溴反应摩尔=1:1； W=0.1022 g； 硫代硫酸钠浓度校正因子=1.038 ； 供试品滴定Vs=15.73ml ; 空白试验滴定V0 =23.21ml; a 1 T (mg / ml) m M 0.05 260.27 13.01(mg / ml) b 1
间接滴定法
生成物 滴定法
剩余量 滴定法
被测药物与化合物A作 用生成 化合物B，再用 滴定液滴定化合物B
也称回滴法，本法先加入定量过量滴定 液A与药物作用，再用滴定液B与剩余 的滴定液A反应，然后再进行含量计算
间接滴定法的 生成物滴定法
先计算T
注意滴定度 T的计算
正确求a和b
a T(mg / ml) m M b
第一节 定量分析方法的分类与特点
容量分析法有 关计算 滴定度：每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测药 物质量。《中国药典》用毫克（mg）表示。 例如：用碘量法测定维生素C的 含量时，《中国药典》规定：每 1ml碘滴定液（0.05mol/L）相当 于8.806mg的维生素C（C2H8O6）
第一节 定量分析方法的分类与特点
请读取
V T F 含量 (%) 100 % W
请校正
间接滴定法的 剩余量滴定法
也称回滴法，先加入定量过 量滴定液A与药物作用，再用 滴定液B与剩余的滴定液A反 应，然后再进行含量计算
计算的关键在于求出滴定液 A应用于药物反应的实际量
(VA FA VB FB ) TA 含量 (%) 100 % W
滴定度计算 容量分析法 有关计算
aA bB cC dD
被测药物 滴定液
被测药物反应的质量
被测药物的摩尔质量
WA WB = aMA bMB
滴定液反应的质量
滴定液的摩尔质量
WB a WA αMA n B MA bMB b
a m B VB M A b
a T(mg / ml) m M b
1.317=M3H2O/M=375.85/285.34
标示量（%）=
A样×20/1000×100 ×50/15 ×1.317 ×片重 A对×称样量×5
再计算含量
V T F 含量 (%) 100 % W
示例三 葡萄糖酸锑钠的含量测定
本法先用葡萄糖酸锑钠与碘离子反应生成碘，再用碘与硫代 硫酸钠反应生成碘离子，相当于是用硫代硫酸钠滴定葡萄糖 酸锑钠，因此要找出它们两者的量反应关系，也就是a和b
0.3g供试品＋水100ml＋盐酸15ml＋碘化钾试液10ml
1
a T(mg / ml) m M b
示例二 异烟肼的滴定度 溴酸钾法测定异烟肼含量[M(C6H7N3O)=137.14]， C溴酸钾=0.01667mol/L
3C6H7 N3O 2KBrO3 3C6H5 NO2 3N2 2KBr 3H2O
a 3 ×M=0.01667× T =m× ×137.14=3.429(mg/ml) b 2
适用 范围
较少应用于原料药的含 量测定，可用于制剂的 含量测定，更多的应用 于药物制剂的定量检查
1% cm
紫外可见分光度法
对溶剂的要求
有机溶剂通常均具有很强的末端吸收。 以空气为空白（空白光路中不置任何物质）测定溶
剂的吸光度
溶剂的吸光度在220～240nm范围内不超过0.4，在 ,41～250nm范围内不超过0.2，在251～300nm范围内
不超过0.1，在300nm以上不超过0.05。
紫外可见分光度法
含量测定方法
4种方法
对照品 比较法
吸收 系数法
计算 光度法
比色法
紫外可见分光度法含量测定方法 对照品比较法
分别配制供试品溶液和对照品溶液,对照品溶液中 所含被测药物的量应为供试品溶液中被测成分规定 量的100±10%,所用溶剂量两者相同,在规定的波 长下测定吸光度。按下式计算结果
间接滴定法的剩余量滴定法
常涉及化学反应、加热、 分取等操作等步骤，使 测定误差显著增加 计算的关键在于求出滴定液 A应用于药物反应的实际量
空白试验校正 计算公式相应修正如下：
没有药物存在时的滴定，方 法步骤与有药物存在时相同
浓度校正作用
(V V ) FB TA 含量(%) 100% W
三种 分析 方法 光谱分 析法
适用于专属 性和灵敏度 要求较高的 复杂样品
容量分 析法
色谱分 析法 特点
灵敏度与专属性 都高，有一定的 准确度，但结果 需要对照品
特点
操作简单、结 果准确，耐用 性高，但专属 性差
特点
简便快速、灵 敏度高，有一 定的准确度， 但专属性稍差
第一节 定量分析方法的分类与特点
b a
含量计算方法
直接滴定法
直接滴定法 间接滴定法
V T 含量 (%) 100 % W
在实际工作中，滴定液的浓度可能与药典规定的浓度并不一 致，所以应该进行校正
实际摩尔浓度 F 规定摩尔浓度
实际摩尔浓度 F ×规定摩尔浓度
直接滴定法的 含量计算方法
直接读取
药典规定
自己标定
V T F 含量 (%) 100 % W
第一节 定量分析方法的分类与特点
二、光谱分析法 药典 收载
红外分光 度法 火焰光度 法 紫外可见 分光度法
荧光分析 法
原子吸收分 光光度法
本章 讲叙
紫外可见 分光度法
荧光分析 法
紫外可见分光度法
基于物质对紫外区 (200~400nm)和可见光区 (400~760nm)的单色光辐射 建立起来的光谱分析法
(VB0 VBS ) FB TA 含量(%) 100% W
间接滴定法的剩余量滴定法
本公式适用于 空白校正情形
0 B S B
见上例
(V V ) FB TA 含量(%) 100% W
本公式适用于没有 做空白校正情形 见下例
(VA FA VB FB ) TA 含量 (%) 100 % W
第四章 药物的含量测定方法
药物的含量 定 义
指药物中所含的主成分的量，是 评价药物质量的重要指标。
药物的含量测定
基于化学或 物理学原理 的含量测定
目 标
基于生物学 原理的效价 测定
基 础
本章的目标 含量测定
生物检定法 ，微生物检 定法，酶法
药物的含量测定
适用于准确 度与精确度 要求较高的 样品测定 适用于灵敏 度要求较高， 样本量较大 的分析项目
基 础 朗伯-比尔定律
1 A lg Ecl T
A c( g / 100m l) 1% E1cm
紫外可见分光度法
本法紫外区须选用石英比色皿，比色 皿一般为1cm，吸光度在0.3~0.7之 间为宜，选用最大吸收光波长。 特点
1、简便易行：使用的仪器价格比较低廉， 操作简单，易于普及 2、灵敏度高：本法灵敏度可达10-7~10-4 g/ml，适用于低浓度试样分析 3、准确度较高：误差在2%~5%之间，适用 于对测定结果的准确度要求较高的样品 4、专属性较差：本法通常不受一般杂质的 干扰，但对结构相近的有关物质缺乏选择性。
碘量法测定Vc含量[M(C6H6O6)=176.13]，C(I26 2HI
Mb=0.05mol/L
a 1 T =m× ×M=0.05× ×176.13=8.806(mg/ml) b 1
1 MA=176.13
对于固体制剂: Cx D W 100% W B W : 制剂平均重量 (装量); 标示量(%) B : 制剂的标示量 ;
示例1：取盐酸吗啡片20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于 盐酸吗啡10mg)置100ml量瓶中，加水溶解至刻度，摇匀，滤过，精密量 取续滤液15ml，置50ml量瓶中，加0.2mol/L氢氧化钠25ml，用水稀释至 刻度，摇匀，UV法测定。另取吗啡对照品适量，精密称定，用0.2mol/L 氢氧化钠稀释至每ml中约含20μg的溶液，同法测定。计算，结果乘以 1.317，即得C17H19NO3· HCl· 3H2O的含量。(规格5mg)
0 B S B
没有药物存在时，滴定液 A全部与滴定液B反应 药物存在时，剩余滴定液 A全部与滴定液B反应
示例四 司可巴比妥钠的含量测定 取本品约0.1g，精密称定，置250ml碘瓶中，加水 10ml，振摇使溶解，精密加溴滴定液(0.05mol/L) 25ml，再加盐酸5ml，立即密塞，并振摇1min，在暗 处放置15min后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml， 立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L) 滴定，至终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消 失，并将滴定得的结果用空白试验校正。
Ax C R Cx AR C x 供试品溶液浓度 ; C R 对照品溶液浓度 ; Ax , AR 对应吸光度;
紫外可见分光度法含量测定方法 对照品比较法
对原料药: C D 测得量 100% x 100% 称样量 W C x : 供试品浓度 ; 含量(%) D : 稀释体积 ; W : 供试品的量 ;
密塞，振摇后暗处放置10min 碘量法 Sb5 2I Sb3 I 2 Sb5+——2S2O32I 2 2S2 O32 2I S4O 6 2
a 1 T (mg / ml ) m M 0.1 121.76 6.088(mg / ml ) b 2
示例五 剩余碘量法测定异烟肼含量
异烟肼在弱碱性溶液中，加定量过量的碘滴定液(0.05mol/L) 氧化，反应完成后，酸化，剩余碘滴定液用硫代硫酸钠滴定液 (0.1mol/L)滴定(以淀粉为指示剂)。
CONHNH2
+ 2
COOH I2
+ 5
NaHCO3
+
N I2
+ 2
N2
+ 4
NaI
+ 5 CO2 + 4 H2O
特点
1、方法简便易行：所用仪器价廉易得，操 作简便快速 2、方法耐用性高：影响测定的试验条件与 环境因素少 3、测定结果准确：误差低于0.2%，满足准 确度高样品 4、方法专属性差：对相近杂质干扰缺少选 择，适用于主成分含量较高的样品分析
适用 范围
广泛应用于化学原料的 测定，较少应用于药物 制剂的测定。
Na2S2O3
Na2S4O6
+ 2
NaI
1 I 2 : 异烟肼 2： 1 TI 2 0.1 134.14 6.858(mg/ml) 2 (VI 2 FI 2 - VNa 2S2O3 FNa 2S2O3 ) TI 2 含量% 100 W
习题
非那西丁含量测定
精密称取本品0.3630g加稀盐酸回流1小时后，放冷， 用亚硝酸钠液（0.1010mol/L）滴定，用去20.00ml。 每1ml亚硝酸钠液（0.1mol/L）相当于17.92mg的 C10H13O2N，请计算非那西丁的含量。
取样量
第一节 定量分析方法的分类与特点
容量分析法
定义
将已知浓度的滴定液（标准物质溶液），由滴定管滴加到 被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反应完全（通 过适当方法指示），然后根据滴定液消耗的浓度和被消耗 的体积，按化学计量关系式计算出被测药物的含量。
亦称
滴定法
通过指示剂颜色 变化，或者电子 设备的电位或电 流突变来指示滴 定终点
一、容量分析法
定义
将已知浓度的滴定液（标准物质溶液），由滴定管滴加到 被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反应完全（通 过适当方法指示），然后根据滴定液消耗的浓度和被消耗 的体积，按化学计量关系式计算出被测药物的含量。
亦称
滴定法
通过指示剂颜色 变化，或者电子 设备的电位或电 流突变来指示滴 定终点
特点
1、方法简便易行：所用仪器价廉易得，操 作简便快速 2、方法耐用性高：影响测定的试验条件与 环境因素少 3、测定结果准确：误差低于0.2%，满足准 确度高样品 4、方法专属性差：对相近杂质干扰缺少选 择，适用于主成分含量较高的样品分析
适用 范围
广泛应用于化学原料的 测定，较少应用于药物 制剂的测定。
本法用溴与司可巴比妥钠反应，再用硫代硫酸钠反滴定 溴，属反滴定法，并用空白试验校正,滴定液A为溴，B 为硫代硫酸钠，含量计算只需先求溴滴定度，再求出硫 代硫酸钠空白试验V0体积与样品测定体积Vs
示例四 司可巴比妥钠的含量测定 已知： 司可巴比妥钠M=260.23; 司可巴比妥钠与溴反应摩尔=1:1； W=0.1022 g； 硫代硫酸钠浓度校正因子=1.038 ； 供试品滴定Vs=15.73ml ; 空白试验滴定V0 =23.21ml; a 1 T (mg / ml) m M 0.05 260.27 13.01(mg / ml) b 1
间接滴定法
生成物 滴定法
剩余量 滴定法
被测药物与化合物A作 用生成 化合物B，再用 滴定液滴定化合物B
也称回滴法，本法先加入定量过量滴定 液A与药物作用，再用滴定液B与剩余 的滴定液A反应，然后再进行含量计算
间接滴定法的 生成物滴定法
先计算T
注意滴定度 T的计算
正确求a和b
a T(mg / ml) m M b
第一节 定量分析方法的分类与特点
容量分析法有 关计算 滴定度：每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测药 物质量。《中国药典》用毫克（mg）表示。 例如：用碘量法测定维生素C的 含量时，《中国药典》规定：每 1ml碘滴定液（0.05mol/L）相当 于8.806mg的维生素C（C2H8O6）
第一节 定量分析方法的分类与特点
请读取
V T F 含量 (%) 100 % W
请校正
间接滴定法的 剩余量滴定法
也称回滴法，先加入定量过 量滴定液A与药物作用，再用 滴定液B与剩余的滴定液A反 应，然后再进行含量计算
计算的关键在于求出滴定液 A应用于药物反应的实际量
(VA FA VB FB ) TA 含量 (%) 100 % W
滴定度计算 容量分析法 有关计算
aA bB cC dD
被测药物 滴定液
被测药物反应的质量
被测药物的摩尔质量
WA WB = aMA bMB
滴定液反应的质量
滴定液的摩尔质量
WB a WA αMA n B MA bMB b
a m B VB M A b
a T(mg / ml) m M b
1.317=M3H2O/M=375.85/285.34
标示量（%）=
A样×20/1000×100 ×50/15 ×1.317 ×片重 A对×称样量×5
再计算含量
V T F 含量 (%) 100 % W
示例三 葡萄糖酸锑钠的含量测定
本法先用葡萄糖酸锑钠与碘离子反应生成碘，再用碘与硫代 硫酸钠反应生成碘离子，相当于是用硫代硫酸钠滴定葡萄糖 酸锑钠，因此要找出它们两者的量反应关系，也就是a和b
0.3g供试品＋水100ml＋盐酸15ml＋碘化钾试液10ml
1
a T(mg / ml) m M b
示例二 异烟肼的滴定度 溴酸钾法测定异烟肼含量[M(C6H7N3O)=137.14]， C溴酸钾=0.01667mol/L
3C6H7 N3O 2KBrO3 3C6H5 NO2 3N2 2KBr 3H2O
a 3 ×M=0.01667× T =m× ×137.14=3.429(mg/ml) b 2
适用 范围
较少应用于原料药的含 量测定，可用于制剂的 含量测定，更多的应用 于药物制剂的定量检查
1% cm
紫外可见分光度法
对溶剂的要求
有机溶剂通常均具有很强的末端吸收。 以空气为空白（空白光路中不置任何物质）测定溶
剂的吸光度
溶剂的吸光度在220～240nm范围内不超过0.4，在 ,41～250nm范围内不超过0.2，在251～300nm范围内
不超过0.1，在300nm以上不超过0.05。
紫外可见分光度法
含量测定方法
4种方法
对照品 比较法
吸收 系数法
计算 光度法
比色法
紫外可见分光度法含量测定方法 对照品比较法
分别配制供试品溶液和对照品溶液,对照品溶液中 所含被测药物的量应为供试品溶液中被测成分规定 量的100±10%,所用溶剂量两者相同,在规定的波 长下测定吸光度。按下式计算结果
间接滴定法的剩余量滴定法
常涉及化学反应、加热、 分取等操作等步骤，使 测定误差显著增加 计算的关键在于求出滴定液 A应用于药物反应的实际量
空白试验校正 计算公式相应修正如下：
没有药物存在时的滴定，方 法步骤与有药物存在时相同
浓度校正作用
(V V ) FB TA 含量(%) 100% W
三种 分析 方法 光谱分 析法
适用于专属 性和灵敏度 要求较高的 复杂样品
容量分 析法
色谱分 析法 特点
灵敏度与专属性 都高，有一定的 准确度，但结果 需要对照品
特点
操作简单、结 果准确，耐用 性高，但专属 性差
特点
简便快速、灵 敏度高，有一 定的准确度， 但专属性稍差
第一节 定量分析方法的分类与特点
b a
含量计算方法
直接滴定法
直接滴定法 间接滴定法
V T 含量 (%) 100 % W
在实际工作中，滴定液的浓度可能与药典规定的浓度并不一 致，所以应该进行校正
实际摩尔浓度 F 规定摩尔浓度
实际摩尔浓度 F ×规定摩尔浓度
直接滴定法的 含量计算方法
直接读取
药典规定
自己标定
V T F 含量 (%) 100 % W
第一节 定量分析方法的分类与特点
二、光谱分析法 药典 收载
红外分光 度法 火焰光度 法 紫外可见 分光度法
荧光分析 法
原子吸收分 光光度法
本章 讲叙
紫外可见 分光度法
荧光分析 法
紫外可见分光度法
基于物质对紫外区 (200~400nm)和可见光区 (400~760nm)的单色光辐射 建立起来的光谱分析法
(VB0 VBS ) FB TA 含量(%) 100% W
间接滴定法的剩余量滴定法
本公式适用于 空白校正情形
0 B S B
见上例
(V V ) FB TA 含量(%) 100% W
本公式适用于没有 做空白校正情形 见下例
(VA FA VB FB ) TA 含量 (%) 100 % W
第四章 药物的含量测定方法
药物的含量 定 义
指药物中所含的主成分的量，是 评价药物质量的重要指标。
药物的含量测定
基于化学或 物理学原理 的含量测定
目 标
基于生物学 原理的效价 测定
基 础
本章的目标 含量测定
生物检定法 ，微生物检 定法，酶法
药物的含量测定
适用于准确 度与精确度 要求较高的 样品测定 适用于灵敏 度要求较高， 样本量较大 的分析项目
基 础 朗伯-比尔定律
1 A lg Ecl T
A c( g / 100m l) 1% E1cm
紫外可见分光度法
本法紫外区须选用石英比色皿，比色 皿一般为1cm，吸光度在0.3~0.7之 间为宜，选用最大吸收光波长。 特点
1、简便易行：使用的仪器价格比较低廉， 操作简单，易于普及 2、灵敏度高：本法灵敏度可达10-7~10-4 g/ml，适用于低浓度试样分析 3、准确度较高：误差在2%~5%之间，适用 于对测定结果的准确度要求较高的样品 4、专属性较差：本法通常不受一般杂质的 干扰，但对结构相近的有关物质缺乏选择性。