药理学实验系列仪器培训教程20110810

操作规程
（1）将圆形反应水箱与固定支架放置在适当位置，将摄象头固定 在圆形水箱垂直上方。在水池中注入清水，然后注入适量新鲜牛 奶或奶粉，使水池成为不透明的乳白色。 （2）将平台置于某一象限中央，且使水面高于平台0.5～2cm（根 据实验动物的大小决定），使动物无法凭视觉辨别水中平台的位 置。将实验动物（大小鼠）用实验室常见的苦味酸在实验动物的 头部和背部涂抹成较大相连的区域作为标记色。 （3）将摄像头用视频信号电缆与计算机上的捕捉卡相联接。完成 加密狗和软件系统的安装。启动软件，进入软件主界面。 （4）调整摄象镜头位置和焦距，使视频显示范围刚好覆盖整个容 器水区域。以屏幕上的黑色基准线为准，移动水容器使容器上的 标记点与准线相重合。（若屏幕上未出现黑色基准线则可通过选 择屏幕右侧的“显示基准”显示）。 （5）点击“新建项目”开始新的实验项目， 点击“场景设定” 来进行实验场景的设定：按住鼠标左键在左侧标记点按下不放， 拖动鼠标沿着左侧标记点到右侧标记点放开鼠标。然后按住鼠标 左键在上侧标记点按下不放，拖动鼠标沿着上侧标记点到下侧标 记点放开鼠标。则系统自动根据以上标记画出场景
1. FT-200型动物跑步机
设备名称：动物跑步机 规格型号：FT-200型 生产厂家：成都泰盟科技有限公司 产品简介：FT-200动物跑步机配备有动物跑道，通过 后端一个刺激装置来强迫动物持续奔跑，仪器自动记录动物所 受电击次数和跑道上的奔跑总时间。可用于疲劳实验、运动协 调实验、中枢神经抑制实验、骨骼肌松弛实验研究，观察药物 对受试动物运动及协调能力的影响，也可用于大、小鼠抗疲劳 实验，评测药物对动物体能的影响。
注意事项
（1）成年标准体重的大小鼠为宜，大鼠体重200g 左右，小鼠体重20g左右； （2）在通风、安静、相对昏暗的环境下进行实验。 （3）实验动物体能较好者电击次数相对较少，而 奔跑时间相对较长。
2.MT-200型Morris水迷宫视频跟踪分析系统
设备名称：Morris水迷宫视频跟踪分析系统 规格型号：MT-200型 生产厂家：成都泰盟科技有限公司 产品简介：大小鼠厌恶处于水中的状态，同时游泳对于大 小鼠来说十分消耗体力，因此在水中它们会本能的寻找水 中的休息场所。寻找休息场所的行为涉及到一个复杂的记 忆过程，包括收集与空间定位有关的视觉信息，再对这些 信息进行处理、整理、记忆、加固、然后再取出，目的是 能成功的航行并且找到隐藏在水中的站台，最终从水中逃 脱。Morris水迷宫（Morris water maze, MWM）实验是 一种强迫实验动物（大鼠、小鼠）游泳，学习寻找隐藏在 水中平台的一种实验，主要用于测试实验动物对空间位置 感和方向感（空间定位）的学习记忆能力。
Байду номын сангаас
操作规程
（1）实验前一周，在喂食30分钟后，先进行跑步机适应训练； （2）将实验动物（大鼠或小鼠）放入跑步带上，盖上玻璃盖； 打开电源开关；设定好“定时时间”、“转速”和“大/小鼠” 的工作模式及调节刺激电流旋钮，按下“启/停”按钮，系统 自动开始记录； （3）末次给药后30、60分钟，将实验动物放在跑步机上，设 置实验参数，按“启/停”按钮进行动物体能测试。 提示：可采用逐渐增加速度与坡度的方法使动物奔跑直至力竭 (exhaustion)，参数设置可参考下表(Bedford et al., 1979) 所列。若鼠落入电击区，而经过多次电击仍无法起身往前跑即 判定已经力竭，记录开始跑步至力竭的跑步时间。
（10）在软件主界面右方中部有“实验设置”面板，其中有“定位航行实 验”，“空间搜索实验”，两种实验类型可根据实验需求选择，系统默认 为“定位航行实验”。 ①定位航行实验观察和记录小鼠寻找并爬上平台的路线图及所需时间，即 记录其潜伏期和游泳速度，无设定时间限制。 ②空间搜索实验要求动物在设定时间内能否能够找到平台，用于测量动物 对平台空间位置记忆的保持能力。 （11）在 “动物编号”选择框中选择本次实验的小鼠编号，然后放入实验 动物（小鼠、大鼠），点击“开始实验”进行实验。 （12）训练： ①每日将动物头朝池壁按东、南、西、北4个入水点分别放入水池，将站 台置于某一象限中央，实验过程保持站台位置不变。 ②每次实验以120s为限，系统自动记录动物从入水点到达站台所需时间 以及在这段时间内的游泳路程，以所需时间作为学习和记忆成绩，若设定 时间内未找到站台，计算机停止跟踪，记录时间为120s。 ③训练中若动物在120s内找到站台，让其在站台上停留20s，若动物未找 到站台，将其放在站台上使其停留20s。20S后将其从平台上拿下，休息一 分钟后再次开始训练。一般正常动物经5～6个训练日可学会以最快最佳的 轨迹找到平台的正确位置。
操作规程 （1）预热接通仪器相关设备连线，打开开关进行预热 仪器5分钟； （2）实验前，请将测量烧杯装满130ml左右清水，并 放在工作面上，盖上保护盖。 （3）设置实验参数，根据液晶屏提示踩下脚踏开关或 按下清零键，完成清零操作。 （4）用记号笔在大小鼠后肢踝关节周围作上记号，测 量时拉直放入量杯，使记号线与与量杯水位线相平， 稳定后等仪器发出“滴滴”提示音后，踩下脚踏开关 或按测量按钮得出结果。
（6）场景设置完成后，用户可点击“确定平台”按键进行平 台位置和大小的设置。第一次实验时实平台和虚平台的位置和 大小是一致的，以后每次实验点击该按键时所确定的为实平台 的位置，虚平台自动设为第一次实验时的设置，不用再设定。 （7）将有标记色的小鼠放在摄像头下，点击“目标选取”， 屏幕上出现了红色色块，如果色块不明显或与实际标记的部分 相差太大说明阈值设置不合适或摄像头设置不当。可通过“调 节阈值”调节到出现合适形状为止（确保屏幕上只有实验动物 标记的地方为红色，这样实验过程中的追踪才准确可靠）。 （8）点击“清除屏幕”按钮，恢复到正常显示状态。点击 “保存设置”按钮，保存当前合适的颜色配置为默认值。 （9）设置系统坐标参数，点击“系统定标”，本系统使用的 实验桶已设定了四个标记点，只需移动鼠标到相应标记点，按 住鼠标左键拖动鼠标到其对应标记点松开即可，此时系统弹出 一个对话框，在其中选择正确的单位即完成本项操作。 完成以上步骤后，即可开始实验。
物的效应。
操作规程
（1）预热：打开主机电源，按“开始”键点亮刺激光源，预 热３０秒，按下“设置”按钮设置实验参数，例如组别、实验 停止时间，光照强度等。 （2）选择体重200g左右的大鼠或体重20g左右的小鼠，分别放 入实验平台上的鼠盒内，待动物适应保持安静后开始实验。 （3）移动平台下方的热辐射刺激筒至大小鼠后足部位，使光 源发射中心正对动物足底，按下刺激筒上的开始按钮，仪器开 始计时，并发射出红外光刺激动物后足部位，动物受刺激抬起 或移动后足，仪器自动感应此动作立即停止计时，实验结束。 （4）自照射开始至迅速抬起后肢的潜伏期时间（s）作为该鼠 的痛阈值。一般连测2次，取其平均值作为基础痛阈（对照潜 伏期）。
注意事项 （1）须在动物安静状态下开始实验，大鼠安静时间一 般为２min，小鼠一般要５～１０min。 （2）实验时注意对准动物后足底部中心区域； （3）照射强度的调节使得实验结果应该一般为１０秒 为宜； （4）不要在短时间内重复照射同一只动物的同一部位； （5）设定恰当的照射停止时间，到设定时间后仪器自 动停止照射可防止对痛觉不敏感动物足底造成损伤。
注意事项 （1）在训练时，动物需要利用实验室内的固有环境 和设施的空间定位作为参照物来综合判断安全位置 或途径，所以实验时，实验室内的一切设备的位置 （包括仪器、工作台、门窗、灯具、椅子等）以及 实验者的位置都需保持相对固定，以减小实验误差。 （2）动物上平台后，让其环顾四周20秒时间，让其 辨别记忆空间线索。 （3）实验结束后注意动物的除湿保暖。
3.PL-200型热刺痛仪
设备名称：热刺痛仪 规格型号：PL-200型 生产厂家：成都泰盟科技有限公司 产品简介：利用一定强度的温热刺激动物躯体某一部 分，从而产生疼痛反应，以刺激开始至出现反应的潜 伏期作为测痛指标评价药物疼痛能力，适用于筛选作 用较强的镇痛药物。PL-200热刺痛仪采用高聚光灯产 生可变强度的辐射光束，经过红外滤光镜聚焦照射大 小鼠后肢足底中心处皮肤，以大小鼠迅速抬起后肢作 为疼痛反应指标，给药前、后痛阈值的变化来测定药
4.PV-200型足趾容积测量仪
设备名称：足趾容积测量仪 规格型号：PV-200型 生产厂家：成都泰盟科技有限公司 产品简介：用一定剂量的致炎剂，注入大小鼠后肢足 趾或踝部皮下，造成足趾和关节肿胀，通过测量鼠类 足趾致炎肿胀后消肿过程中的体积改变以及比较给药 组和对照组足趾或踝关节肿胀抑制率来评价抗炎药物 疗效。本仪器亦可用于抗炎类药物的药理研究以及药 物产生致炎副作用的检测。
药理学实验系列仪器使用技术教程
吉林大学国家级生物实验教学示范中心 王德利 20110816
药理学实验的目的和任务
药理学是生物学、医学和药学的桥梁学科之一，具有
很强的实验依赖性。 药理学实验教学不仅是药理学教学的补充，而且是培 养学生思维、锻炼学生技能的实践性课程。 目的是通过实验使同学们所学的基本理论和基本知识 得到进一步验证和理解，培养同学们严肃的科学态度 和严谨的科学作风。 任务是通过实验课使同学们掌握研究药理学的基本实 验技能和实验方法，为今后从事科学研究工作打下良 好的基础。 实验仪器设备的使用技能是药理学实验必不可少的， 极其重要的环节。 下面就介绍几种常用的药理实验仪器：
注意事项
（1）用体重120~150g的健康大鼠或18~25g的健康小鼠 对致炎剂最敏感，肿胀度高，差异性小。 （2）动物后足碰到量杯中的凉水会缩足影响实验，采 用温水可便于测量操作。 （3）测量时量杯的上方应盖上保护盖，同时避免风扇 等直接吹压量杯，导致无法测量； （4）测量时动物足趾注意不要碰触量杯杯壁，以免测 量不准。 （5）由同一人观察，多次测量取平均值为宜。
5.RB-200型智能热板仪
设备名称：智能热板仪 规格型号：RB-200型 生产厂家：成都泰盟科技有限公司 产品简介：利用一定强度的温热刺激动物躯体某一部分，从而 产生疼痛反应，以刺激开始至出现反应的时间为潜伏期作为测 痛指标评价药物抗疼痛能力，适用于筛选作用较强的镇痛药物。 热刺激强度在45～55℃，在这一范围内动物可产生明显的痛反 应，又不致造成皮肤灼伤，此为热刺激法。RB-200热板仪就是 利用上述原理，将大小鼠放到预先加热到55°C左右的金属板 上，以舔后足作为疼痛反应指标，测定潜伏期，观察给药前、 后痛阈值的变化。
坡度 (%) 0 5 10 10 11
速度 (mph) 8.2 15.2 19.3 26.8 30.3
持续时间 (分) 3 3 3 3 3
（4）当实验动物在跑步带一头落下时，液晶显示器上对 应的该通道将停止计时，同时动物落带次数加1。实验动 物会因受电击后离开刺激源，继续在跑步带上活动，此时 通道计时继续累加。实验用时到达设定时间后，实验停止。
（13）测试： 第7日开始可将平台转移到另一象限，记录动物入水后找到迁移后的平台的 潜伏期，在原来平台位置所逗留的时间以及动物找到迁徙后的平台的路径。 （14）数据的导出： ①轨迹的导出 当一次或多次实验结束后，点击“数据查看”切换到实验结果显示窗口， 此时模式为“图像模式”，窗口中显示的为实验的轨迹图像。窗口正下方 有一轨迹选择框，可用鼠标选择需显示的轨迹，此时点击“导出”按钮将 窗口中的图像保存为一幅位图(后缀名为.BMP)。可用“画笔”或PHOTOSHOP 等图像软件打开进行修正和打印等操作。 ②实验结果的导出 在点击“数据查看”后点击“数据模式”则切换到实验结果数据显示窗口， 此时窗口中显示的为本项目中所有实验的结果数据信息。点击“导出”则 可将这些信息保存为一个EXCEL文件（扩展名为.CSV）。这个文件可用 EXCEL打开进行统计打印。