葡多酚与硫辛酸对 60Coγ致小鼠肝损伤拮抗作用

２ １２ 肝 细 胞 Ｇ Ｈ—Ｐ ．． Ｓ ｘ活 性 比较
—
表 １ 见，Ｐ 可 Ｇ Ｃ组 Ｇ Ｈ ｓ
Ｐ ｘ活性 低 于 阳性 对 照 组 （ Ｐ＜０ ０ ） Ｌ 组 Ｇ Ｈ —Ｐ ．１ ； Ａ Ｓ ｘ活 性 表 １可 见 ， （ Ｐ＜０ ０ ） ．１ 。
中国公共卫生 ２ ０ ０ ８年 １ Ｏ月第 ２ ４卷第 １ Ｏ期
Ｃ ｉ ｕ ｌ ａｔ ｃ ２ ０ ｏ ．４Ｎ ． Ｄ ｈｎＪＰ ｂｉ Ｈｅｌ Ｏ ｔ ０ ８ Ｖ １ ２ ｏ Ｊ ｃ ｈ
１２ ２９
文章编号 ：１０ ．５０（ｏ ８ ｌ．２ ９０ ０ １０ ８ ２ｏ ）Ｏ１ ２ ．２
氧化 物 歧 化 酶 （ Ｏ 、 胱 甘 肽 过 氧 化 物 酶 （ Ｓ Ｓ Ｄ） 谷 Ｇ Ｈ—Ｐ ） 化 ｘ催
２ １ １ 肝 细 胞 Ｓ Ｄ 活 性 比 较 表 １可 见 ， 过 ２ ５ ｙ的 ．． Ｏ 经 ．Ｇ
６ ｏ 线 照 射 的 小 鼠 肝 细 胞 与 抗 氧 化 剂 温 育 １ ０ ７ Ｃ ２ｈ后 ， Ｃ组 ＧＰ Ｓ Ｄ活性明显低 于阳性 对 照组 （ Ｏ Ｐ＜０ ０ ） Ｌ 组 Ｓ Ｄ 催 化 ．５ ； Ａ Ｏ
活性也低于阳性对照组（ Ｐ＜０ ０ ） ．５ 。
活性 和 过 氧 化 损 伤 产 物 丙 二 醛 （ Ａ） 量 变 化 。 ＭＤ 含
１ 材 料 与 方 法
表 １ 葡 多 酚 和 硫 辛 酸 对 小 鼠肝 细 胞 Ｓ ＯＤ、 Ｓ Ｇ Ｈ—Ｐ 活 性 ｘ 和 ＭＤＡ含 量 的 影 响 （ ｘ±ｓ ｌ
ｐ 至 ７ ２ 定容 到 １０ ０ｍｌ过 滤 除菌 ， 用 前 每 ８ 加 入 Ｈ ．， ０ ， 临 ０ｍ１ 新 生 小牛 血 清 ２ ， 霉 素 １ ０Ｕ ｒ ， 霉 素 １０￣ ／ ， Ｏｍｌ青 ０ ／ｎ 链 ｌ ０ ｇｍｌ胰
岛 素 ５“ ／ 。Ｓ ｇｍｌ ＯＤ、 Ａ、 Ｓ —Ｐ 检 测 试 剂 盒 （ 京 建 成 ＭＤ Ｇ Ｈ Ｘ 南 生 物工 程研 究所 ）其 余 试 剂 均 为 国产 分 析 纯 。 硫 辛 酸 （ 国 ； 美 Ｓｇ 公 司 ） ｉ ｍａ 。葡 多 酚 自制 。 新 鲜 干 燥 葡 萄 籽 用 乙醇 浸 提 法 将 提 取， 紫外分光法测定［ ， 度≥９ ％； 准 品（ 经 ３纯 ３ ９ 标 日本 岛 田株
中圉分类号 ：Ｒ １ ３ ８
文献 标志码 ： Ａ
【 实验 研 究】
葡 多酚 与硫 辛 酸对 ６ ｏ ０ ｙ致小 鼠肝 损伤 拮 抗 作 用 Ｃ
宗传 龙 周 白云 ，
葡 多 酚 （ ｒｐ ｒｃａ ｉ ｎ Ｇ Ｃ ， 称 葡 萄 原 花 青 素 ， ｇａｅｐｏｙｎｄ ， Ｐ ） 又 ｉ 是 从 葡 萄 籽 中提 取 的一 种 天 然 植 物 多 酚类 物 质 ， 有 抗 氧 化 、 具 抗 含 量和 Ｇ Ｈ—Ｐ Ｓ ｘ活性 的检 测 。 １３ 统 计 分 析 ． ２ 结 果 采 用 Ｓ Ｓ １０统 计 软 件 进 行 ｔ 验 。 Ｐ Ｓ１ ． 检
２ １３ 肝 细 胞 ＭＤ ．． Ａ含 量 变 化
对 照组 （ Ｐ＜０ ０ ） ．１。
量 低 于 阳性 对 照 组 （ Ｐ＜０ ０ ） Ｌ 组 ＭＤ 含 量 也 低 于 阳 性 ．１ ； Ａ Ａ ３ 讨 论
１２ １ 肝 细胞 分 离 培 养 ．．
取新 生小鼠 １ ０只 。 头 放 血 ， 菌 断 无
条 件 下 分 离 肝 脏 并 置 Ｈａｋ 中 ， 注 冲 洗 至 灰 白 色 ， 成 １ ｎ ｓ液 灌 剪 ｍｍ ×１ｍ ×１ｍｍ 左 右 的 组 织 块 ， ａ ｋ 冲 洗 数 次 ， 入 ｍ Ｈ ｎ ｓ液 加 ０ ８ｇ Ｌ胰 蛋 白酶 １ １３ ． ／ ０ｍ ，７℃ 孵 育 １ ｎ 加 入 数 滴 血 清 终 ２ｍｉ， 止 消化 ， 滴 管轻 吹 打 成 细 胞 悬 液 。 ２ ０尼 龙 筛 网 过 滤 后 ， 用 经 ０ 用 培 养 液 洗 ２次 ， ０ ／ ｉ 心 ５ｒｉ， 集 肝 细 胞 ， 盼 １０ ０ ｒｒ ｎ离 ａ ｎ收 ａ 台 蓝 活 细 胞 计 数 ＞８ ％ ， １ ０ ／ ， 种 于 ２ ５ 按 ×１ 个 Ｌ 接 ４和 ９ ６孔 板 中 ，７℃ ， ％ Ｃ） 条 件 下 培 养 。 ３ ５ Ａ２
光 学五 厂 ）离 心 机 （ 海 医 用 设 备 三 厂 Ｔ １ Ｇ） 昆 明种 小 ； 上 ＧＬ ６ 。 鼠 ， 周 龄 乳 鼠 ， 雄 不 分 ， 重 １ ～２ ， 洁 级 （ 东 省 中 １ 雌 体 ８ ２ｇ 清 山 医药 大 学 实 验 动 物 管 理 中 心 ） 。
１ ２ 方 法 ．
注 ： 阳性对照组 比较， 与 ａＰ＜０ ０ ， ．５ ｂＰ＜０ ０ ； ．５ 与阴性 对照组 比
较 ， ｃＰ＜０ ０ 。 ．５
式 会社 ） 半 自动型 生 化 分 析 仪 （ 海 三 科 Ｂ Ｓ ５ 型 ） Ｃ ２ 。 上 Ｔ １Ａ ； ０ 培 养 箱 （ 海 三 科 ＨＨ． Ｐ一０ 上 Ｃ １型 ） ７２型 分 光 光 度 计 （ 海 ；２ 上
辐射 、 抗突变等生 物学 功效 ［ 。硫辛 酸 （ｐ ｉ ａｉ， Ａ） 为 １ ］ １ ｏ ｃ Ｌ 作 ｉ ｃ ｄ
一
种细胞线粒体的抗氧 化剂， 能有效 清除 内源性 自由基多 发
２ １ Ｇ Ｓ和 Ｌ 对 小 鼠 肝 细 胞 影 响 （ １ ． Ｐ Ａ 表 ）
的 线粒 体 所 输 出 的 自 由 基 ， 而 避 免 自 由 基 对 细 胞 结 构 造 成 从 的氧 化 损 伤 ［ 。本 研 究 观 察 Ｇ Ｃ和 Ｌ 对 电 离 辐 射 损 伤 的 Ｐ Ａ 拮 抗 作 用 。用 ６ （ 线 进 行 照 射 小 鼠肝 原 代 培 养 细 胞 ， 定 超 ０） ． Ｃｙ 测
１１ 材 料 ．
将 ０ ８ｇ Ｌ胰 蛋 白 酶 用 Ｈａｋ 溶 解 ， 滤 除 ． ／ ｎｓ 液 过
菌 ， ｐ 至 ７２ 分 装 ， ０℃ 保 存 。 基 础 培 养 液 Ｒ Ｍ Ｉ 调 Ｈ ．， 一３ Ｐ 一
１４ ６ ０培养 基 １ ， 超 净 水 ９ ０ ｍ 溶 解 ， ．％ Ｎａ Ｃ ３调 ０ｇ用 ０ ｌ ５６ Ｈ Ｏ