猪伪狂犬病病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

猪伪狂犬病病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应
用
徐凯文;廖帆;雷磊;谭磊
【期刊名称】《养猪》
【年(卷),期】2022()6
【摘要】当前猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)仍是猪场常见的病原之一,给我国生猪养殖业造成了巨大的经济损失。

为建立一种基于SYBR Green的PRV实时荧光定量PCR检测方法,以PRV-gE基因序列为靶标,构建pUCmT-gE重组质粒(并作为阳性质粒),针对该基因设计特异性引物,并评估该方法的灵敏性、特异性和可重复性等指标。

结果表明,该方法检测下限为4.545拷贝/μL,而普通PCR 检测下限为4.545×10^(2)拷贝/μL;在90.0℃出现单一的溶解峰,并与PCV2(圆环病毒2型)、PPV(细小病毒)、PRRSV(蓝耳病病毒)、PEDV(流行性腹泻病毒)和TGEV(传染性胃肠炎病毒)等不产生交叉反应。

此外,该方法对15份疑似感染伪狂犬病的临床样品检出率为20%(3/15),高于常规PCR检出率(13.33%,2/15)。

因此,该方法较传统PCR具有更高灵敏性,更适合用于PRV的临床早期诊断。

【总页数】4页(P97-100)
【作者】徐凯文;廖帆;雷磊;谭磊
【作者单位】湖南农业大学动物医学院
【正文语种】中文
【中图分类】S858.285.3
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