紫茎泽兰提取液作为植物源农药的应用[发明专利]

[19]
中华人民共和国国家知识产权局
[12]发明专利申请公布说明书
[11]公开号CN 101317588A [43]公开日2008年12月10日
[21]申请号200710110497.2[22]申请日2007.06.08
[21]申请号200710110497.2
[71]申请人中国农业科学院植物保护研究所
地址100094北京市海淀区圆明园西路2号植保
所
[72]发明人曹坳程 王秋霞 郭美霞 何兰 陈福良 [51]Int.CI.A01N 65/00 (2006.01)A01P 7/04 (2006.01)A01P 3/00 (2006.01)
A01P 13/00 (2006.01)
A01P 5/00 (2006.01)
权利要求书 1 页 说明书 10 页
[54]发明名称
紫茎泽兰提取液作为植物源农药的应用
[57]摘要
本发明将紫茎泽兰提取物质作为植物源农药应
用，该方法采用10％－100％的甲醇、乙醇、乙酸
乙酯、石油醚、氯仿水溶液作为提取溶剂提取紫茎
泽兰活性成分，并加工为植物源农药，作为杀虫剂、
杀菌剂、除草剂及杀线虫剂应用。

200710110497.2权 利 要 求 书第1/1页 1.提供的紫茎泽兰甲醇、乙醇、乙酸乙酯、石油醚及氯仿提取物作为植物源农药，步骤如下：
1)将紫茎泽兰鲜茎叶及干燥茎叶粉碎成粉末；
2)将步骤1)中得到的紫茎泽兰粉末，加入体积比分别为10％-100％的甲醇、乙醇、乙酸乙酯、石油醚及氯仿水溶液，浸泡48h后，过滤除去固体，采用减压蒸馏回收溶剂，得到黏稠状黑色溶液；
3)采用真空冷冻干燥装置将2)中得到的溶液干燥为固体；
4)将2)中得到的溶液及3)中得到的固体物质分别加工为水剂型。

然后作为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、杀线虫剂应用。

2、如权利要求1所述的紫茎泽兰作为植物源农药，其特征在于：所述步骤2)中提取紫茎泽兰中活性成份，采用10％-100％的甲醇水溶液做提取剂。

3、如权利要求1所述的紫茎泽兰作为植物源农药，其特征在于：所述步骤2)中提取紫茎泽兰中活性成份，采用10％-100％的乙醇水溶液做提取剂。

4、如权利要求1所述的紫茎泽兰作为植物源农药，其特征在于：所述步骤2)中提取紫茎泽兰中活性成份，采用10％-100％的乙酸乙酯水溶液做提取剂。

5、如权利要求1所述的紫茎泽兰作为植物源农药，其特征在于：所述步骤2)中提取紫茎泽兰中活性成份，采用10％-100％的石油醚水溶液做提取剂。

6、如权利要求1所述的紫茎泽兰作为植物源农药，其特征在于：所述步骤2)中提取紫茎泽兰中活性成份，采用10％-100％的氯仿水溶液做提取剂。

7、如权利要求1所述的紫茎泽兰作为植物源农药，其特征在于：所述步骤4)中把用各种溶剂提取的紫茎泽兰提取液及干燥固体加工为水剂，作为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、杀线虫剂应用。

200710110497.2说 明 书第1/10页
紫茎泽兰提取液作为植物源农药的应用
发明人：曹坳程王秋霞郭美霞何兰陈福良
申请人：中国农业科学院植物保护研究所
技术领域
本发明采用10％-100％甲醇、乙醇、乙酸乙酯、石油醚及氯仿水溶液作为提取溶剂提取出紫茎泽兰活性成分，通过加工后作为植物源农药即杀虫剂、杀菌剂、除草剂及杀线虫剂应用。

背景技术
紫茎泽兰(E u p a t o r i u m a d e n o p h o r u m S p r e n g)为菊科泽兰属多年生草本植物，原产墨西哥，20世纪50年代前后自缅甸和越南传入我国云南南部，因其生长及繁殖能力极强，已在云南省及其周边许多地区蔓延。

由于它对生态环境的破坏，给农林牧副业带来了严重危害。

鉴于紫茎泽兰已成为我国危害最为严重的外来入侵物种之一，各地在加强控制紫茎泽兰蔓延措施的同时，纷纷展开对其综合利用的研究，力图变害为宝。

胡觉等1研究了紫茎泽兰预处理后沼气连续发酵的产气潜力。

杨亚洲2在对紫茎泽兰化学组成、纤维形态和表面自由能研究的基础上，对紫茎泽兰中密度纤维板的生产工艺参数和物理力学性能及其影响因素的研究表明，实验条件下制造的紫茎泽兰中密度纤维板，经适当调节工艺条件，某些性能指标均能达到国家标准室内型中密度纤维板的要求。

田果廷等3利用紫茎泽兰作为原料栽培田头菇，同时利用稻草和棉籽壳为原料栽培田头菇作对照，研究结果表明，代料熟料栽培田头菇的培养基配方中，以紫茎泽兰为主要原料的配方效果最好，生物学效率比对照的稻草培养基平均增产80％以上。

孙启铭4研究了紫茎泽兰作为野生有机肥料的应用研究。

杨永红等5以紫茎泽兰为原料，用微生物发酵的方法生产木糖醇。

欧阳华、王厚德采用特殊的微生物发酵脱毒、甘露聚糖脱毒、无机吸附脱毒、中草药解毒与保健相结合德科学方法将紫茎泽兰开发为成功的植物蛋白饲料原料，并申请了专利6。

而本发明中我们提取紫茎泽兰的活性成分作为植物源农
药应用。

参考文献
1.胡觉，张无敌，尹芳，刘士清，官会林，紫茎泽兰连续发酵产沼气实验研究，农业与技术，2006，26(4)33-36
2.杨亚洲，紫茎泽兰制造中密度纤维板的研究，中国人造板，2006，10：13-16
3.田果廷，徐学忠，杨琼芬，徐雨然，利用紫茎泽兰栽培田头菇的研究，中国食用菌，23(4)：13-15
4.孙启铭，野生有机肥料资源紫茎泽兰的利用，农业科技通讯，2002，4：28-29
5.杨永红，李国权，紫茎泽兰微生物发酵生产木糖醇的工艺，植物资源与环境，1999，8(1)：61-6
2
6.欧阳华，王厚德，紫茎泽兰饲料的制备方法，申请(专利)号：CN02113759.5，公开(公告)号：CN1383731，2002-05-18
发明内容
本发明的目的在于开发新的植物源农药，该方法以紫茎泽兰为起始原料，采用10
％-100％甲醇、乙醇、乙酸乙酯、石油醚及氯仿水溶液作为提取溶剂提取出紫茎泽兰
活性成分，通过加工后作为植物源农药即杀虫剂、杀菌剂、除草剂及杀线虫剂应用。

可以将紫茎泽兰毒草为我所用，变害为宝，并且所开的是环境友好的农药，不会对环
境造成污染。

本发明的目的是通过如下的技术方案实现的：
本发明步骤如下：
1)将紫茎泽兰鲜茎叶及干燥茎叶粉碎成粉末；
2)将步骤1)中得到的紫茎泽兰粉末，加入10％-100％的甲醇或乙醇或乙酸乙
酯或石油醚或氯仿水溶液，浸泡48h后，过滤除去固体，采用减压蒸馏回收溶剂后，
得到黏稠状黑色溶液；
3)采用真空冷冻干燥装置将2)中得到的溶液干燥为固体粉末；
4)将2)中得到的溶液及3)中得到的固体物质分别加工为水制剂：该水制剂用
已知的方式制备，将紫茎泽兰提取液与表面活性剂、促渗透剂等组份充分混合均匀，
得到紫茎泽兰水剂。

该制剂含紫茎泽兰提取液70％～90％，优选为80％～90％。

另外
该组合物还包括5％～10％表面活性剂，促渗透剂5％～10％。

适合的表面活性剂为烷
基酚聚氧乙烯醚类，蓖麻油聚氧乙烯醚类，磺酸盐类等，选自0201B、0203B、0204C、2201、O P系列、农乳500号等具有良好乳化性能的非离子、阴离子和混合表面活性剂。

促渗透剂为氮酮、月桂醇醚硫酸钠、木质素磺酸钠、烷基酚聚氧乙烯醚等。

然后作为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、杀线虫剂应用。

附件：紫茎泽兰提取物质活性测定
1、杀虫活性测定
测定试虫选用难防治的重要农业害虫为棉铃虫、甜菜夜蛾，2龄和4龄幼虫。

分别采用浸液法、浸虫法进行测定。

浸叶法：将紫茎泽兰待用液作为生物活性测定液，设清水为空白对照。

将小油菜叶先用清水冲洗，晾干，然后用打孔器打成直径为15m m的小片，在药液中浸渍10s，晾干，再将其放于24孔培养盒中，每孔一片小叶片，在每孔接入1头幼虫，每个处理20头，3次重复。

24孔培养盒用保鲜膜封口保鲜，加盖后放入(27±0.5)℃光照培养箱中，24～48h后检查死亡率。

死亡判断标准为：用拨针轻触虫体，虫体完全无反应或反应不协调者为死亡。

浸虫法：将油菜用清水冲洗，晾干，然后用打孔器打成直径为15m m的小片，直接将其放于24孔培养盒中，每孔一片小叶片。

将幼虫在紫茎泽兰测定液中浸渍10s，让其在纸上爬行晾干，再接入24孔培养盒中。

其它步骤同浸叶法。

驱避试验：基本同浸叶法，但用指形管代替24孔试验盒，将浸药和不浸药叶片分别放置在一根指形管的两端，再将1头试验用的幼虫放于指形管中浸药的叶片上，48h 检查幼虫所处部位。

2、杀菌活性测定
供试病原菌为：镰孢霉菌属(F u s a r i u m s p.)、葡萄孢属菌(B o t r y t i s s p.)、尾孢霉菌属(C e r c o s p o r a s p.)、梨孢霉属菌(P y r i c u l a r i a s p.)，菌种均来源于本实验室。

试验采用菌丝生长速率测定法。

即将紫茎泽兰提取液浸膏称量后，用有机溶剂溶解，按1∶5000和1∶10000的比例，加入到马铃薯葡萄糖琼胶培养基(P D A)中，然后分到3个90m m的培养皿中，用1∶5000的溶剂作对照。

待培养基凝固后，在培养皿中央处接入直径为3m m的不同病原菌菌块，放入(25±1)℃的培养箱中，待对照皿的菌丝即将长满培养皿时，测量各药剂处理皿的菌丝体直径。

用下式计算抑制率。

抑制率(％)＝(1-处理皿菌丝平均直径2/对照皿菌丝平均直径2)×100
3、杀线虫活性测定
称取紫茎泽兰提取液的浸膏0.04g，用少量溶剂溶解后，加入20g含根结线虫的土壤中，混匀，用相同量的溶剂与土壤混合后作对照，72h后调查调查结果。

土样中的线虫分离采用直接过筛法：即将土样充分混合均匀，称取200g放在塑料桶内。

加水约1000m l左右，用力搅动使土块分散，沉降10s后，将上面的悬浮液通过20目的筛子倒在第二个小桶内。

网筛上的残余物和第一个桶底的泥沙用水洗后弃去。

按照上述步骤，顺序用100、200和325网目筛处理后，3个筛上的残余物洗在容量约250ml的烧杯中，然后取样检查和记数。

4、除草活性测定
试验采用琼脂水法。

即将提取的浸膏准确称量后，用有机溶剂溶解，然后用1％琼脂水进行稀释成不同的浓度梯度，然后分倒入3个90m m的培养皿中，待琼脂水冷却后，接入刚萌发的马唐和反枝苋，放入(27±1)℃培养箱中培养。

96h后调查试材的根长，将处理的根长与对照根长进行比较，计算抑制率。

二、试验结果及分析
(一)杀虫活性测定结果
测定结果见下表。

从下面4个表中可看出，紫茎泽兰提取液对棉铃虫、甜菜夜蛾和小菜蛾均有一定的杀虫活性，特别是浸虫法处理棉铃虫、甜菜夜蛾和小菜蛾，表现出了很高的杀虫活性。

用甲醇和乙酸乙酯提取液比较其对小菜蛾的杀虫活性，明显看出紫茎泽兰的杀虫活性成分主要在甲醇提取液中。

紫茎泽兰提取液中含有明显的驱避物质，棉铃虫和甜菜夜蛾幼虫对浸药叶片的选择性明显低于不浸药叶片。

用这两种重要的农业害虫测定的初步结果说明紫茎泽兰中含有一些重要的杀虫或驱避次生物质，因此，拟继续深入细致的研究，以便为开发紫茎泽兰的新的应用途径提供实验依据。

2龄幼虫，48h
表2紫茎泽兰不同部位不同提取液对甜菜夜蛾的活性(死亡率％)
表3紫茎泽兰提取液对甜菜夜蛾的杀虫生物活性
2龄幼虫，24h
3龄幼虫，48h浸虫法
表5紫茎泽兰提取液对棉铃虫和甜菜夜蛾的驱避生物活性
2龄幼虫，48h
(二)杀菌活性测定结果
表6紫茎泽兰植物提取液对花生褐斑病菌的抑制活性测定
接种日期：2004.2.16 检查日期：2004.2.21 25℃培养
表7紫茎泽兰植物提取液对灰霉病菌的抑制活性测定
接种日期：2004.2.16 检查日期：2004.2.20 25℃培养表8紫茎泽兰植物提取液对镰刀菌的抑菌活性测定
接种日期：2004.2.16 检查日期：2004.2.22 25℃培养
表9紫茎泽兰植物提取液对稻瘟病菌的抑制活性测定
接种日期：2004.2.16 检查日期：2004.2.22 25℃培养
(三)杀线虫活性测定结果
表10紫茎泽兰提取液杀线虫的效果
试验线虫总数(20g土)：处理时间：2004.1.12 调查时间：2004.1.17 (四)除草活性测定结果
表11紫茎泽兰提取液稀释10000倍时对供试植物的抑制作用
表11可见，四种提取液对禾本科杂草马唐均有较高的抑制作用，而正丁醇抑制作用较差。

所有提取液对阔叶植物黄瓜基本无抑制作用。