国家行业标准ALT、AST、ALP、GGT参考区间的验证试验

国家行业标准ALT、AST、ALP、GGT参考区间的验证试验黄妍;王甜甜;杜小霞;简娟;朱爱花;康佳妮;陈丰娟
【摘要】目的验证国产试剂ALT、AST、ALP、GGT的参考区间是否符合行业标准参考区间.方法按照国家行业标准WS/T 404.1-2012《临床常用生化检验项目参考区间第1部分:血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶和γ-谷氨酰基转移酶》参考人群筛选标准,于2013年9月筛选北京九强生物技术股份有限公司20～62岁健康体检者107名,其中男35名,女72名,使用非参数统计方法统计本研究人群的参考区间,与行标参考区间进行比较.结果使用金斯尔试剂ALT、AST、GGT、ALP得到的参考区间,与行业标准比较,基本一致.结论临床医院使用金斯尔品牌试剂可以.直接使用新行业标准推荐的参考区间.
【期刊名称】《标记免疫分析与临床》
【年(卷),期】2014(021)004
【总页数】3页(P471-473)
【关键词】丙氨酸氨基转移酶;天门冬氨酸氨基转移酶;碱性磷酸酶;γ-谷氨酰基转移酶;参考区间
【作者】黄妍;王甜甜;杜小霞;简娟;朱爱花;康佳妮;陈丰娟
【作者单位】北京九强生物技术股份有限公司,北京101400;北京九强生物技术股份有限公司,北京101400;北京九强生物技术股份有限公司,北京101400;北京九强生物技术股份有限公司,北京101400;北京九强生物技术股份有限公司,北京101400;北京九强生物技术股份有限公司,北京101400;北京九强生物技术股份有限公司,北京101400
【正文语种】中文
血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)和
γ-谷氨酰基转移酶(GGT)是临床常用的诊断指标，其参考区间主要用于帮助临床医生判断就诊者肝功能是否正常。

据钟堃等［1］对全国1000余家临床实验室进行
参考区间的调查，这四个项目参考区间来源广泛，各实验室使用不同的参考区间，不利于实验室检验结果认可工作的进行。

2012年12月卫生部发布了行业标准
WS/T 404.1-2012《临床常用生化检验项目参考区间第1部分:血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶和γ-谷氨酰基转移酶》［2］，本标准的颁发规范了全国范围的不同实验室参考区间使用，有利于临床应用。

本研究旨在验证国产试剂检测结果是否符合新颁发的行业标准中的参考区间。

对象与方法
1 对象
本研究受检个体按照WS/T 404.1-2012《临床常用生化检验项目参考区间第1部分:血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶和γ-谷氨酰基转
移酶》附录A中参考个体的选择要求进行筛选。

本研究健康个体来源于北京九强生物技术股份有限公司的体检员工共107名，全
部完成了问卷调查，体格检查，实验室检查，肝胆脾超声检查，其中男35名，年龄20～58岁，女72名，年龄22～62岁。

2 方法
2.1 仪器与试剂日立7180全自动生化分析仪，北京九强生物技术股份有限公司金斯尔试剂和Randox校准品，货号/批号:Cal2351/515UE，室内质控使用Randox 高、低值质控品，批号/货号:HN1530/740UN，HE1532/539UE。

2.2 标本采集早晨8:00至9:30采肘静脉血5mL于真空采血管中，取血当天空腹，
前一天无饮酒，无剧烈运动。

2.3 标本处理和测定所有样本在取血2h内离心，离心后4h内完成检测。

实验开
始时测定质控品，质控结果在质控品靶值±2倍标准差以内，若失控，查找原因直至在可控范围内方可进行实验。

将参考物质随机插入样本中进行检测，实测结果须与参考物质定值偏差在其不确定范围内。

3 统计学分析
使用SPSS16.0软件进行统计学分析，采用与行标相同的统计方法，非参数检验法，将参考个体的测定值按从小到大顺序排列，将这n个秩次分为100等分，与r%相应的数称为第r百分位数，以Pr表示。

以参考个体 P2.5和 P97.5分别做为本研
究的参考区间，和行标比较，观察与行标的一致性。

结果
1 Randox质控品结果
4个酶学指标，使用Randox高、低值质控品，实测结果均在均值±靶值范围内，变异系数CV均低于2%(表1)。

表1 各项目质控结果HN1530 HE1532靶值测值CV 靶值测值CV(U/L)(U/L) (U/L)(U/L)ALT 38 ±8 35.3 0.43% 133 ±27 133.0 0.76%AST 36 ±7 36.2 0.16% 150 ±30 154.2 0.93%GGT 54 ±8 53.3 1.14% 169 ±25 169.3 0.54%ALP 198
±29 199.3 0.28% 355 ±52 352.6 0.06%
2 各项目参考个体及行标参考区间
107名健康个体4个酶学指标结果，使用SPSS16.0，选用非参数检验方法，各项目参考个体的P2.5和 P97.5见表 2。

与行标的参考区间比较，均有较好的一致性(表2)。

表2 各项目参考个体的P2.5和P97.5及行标参考区间(U/L)注:*去除一例GGT高
值个体，经调查该个体平时喝酒比较多男性女性项本研究结果行标参考本研究
结果行标参考区间目区间P2.5 P97.5 下限上限 P2.5 P97.5下限上限ALT 8.7 57.7 9 50 6.0 40.1 7 40 AST 10.7 30.3 15 40 11.9 29.8 13 35 ALP 46.0 109.8 45 125 38.0115.4 35 100(20 ～49 岁)50 135(50～79岁)GGT 10.4 94.4 10 60 7.4 32.0 7 4510.4 54.1*
讨论
4个酶学指标是我国临床检验开展最多的项目，对于肝病的正确诊断至关重要，同时也影响检验结果的互认。

卫生部临检中心首次在全国范围内调查不同的实验室所使用常规生化临床检验参考区间的来源［1］，发现来源各异，主要来源于全国临床检验操作规程、实验室自己确定及试剂厂家说明书，参考区间上下限也存在很大的差异。

2012年12月25日卫生部颁发了行业标准WS/T 404.1-2012《临床常
用生化检验项目参考区间第1部分:血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶和γ-谷氨酰基转移酶》［1］，该标准在范围中明确规定了使用范围，适用于医疗卫生机构实验室对这4个酶检验结果的报告和解释，有关体外诊
断厂商也可参照使用。

通过万方数据和维普数据搜索，未找到对新行标的验证文献，原因可能是该行标发布时间较短，并且不是强制执行行标，尚未引起医疗单位的重视。

北京九强生物技术股份有限公司是生产临床生化试剂的厂家，密切关注行业发展，检测结果能否符合行标的要求不仅是临床医院的需求，也是反映检验常规试剂检测结果准确性的一个很好的衡量标准。

根据行标WS/T 404.1-2012 中条款
5.2.3 规定［2］，验证参考范围筛选合格参考个体不少于20名，本研究按照行标筛选标准要求筛选了男性35名，女性72名健康个体，符合行标规定。

行标规定
了参考区间通过验证的标准，如参考个体多于20个，超出参考区间的数据不超过10%通过验证。

ALT，本研究35名男性，超过行标上限50U/L的个体4例，4例个体其它三个肝功指标AST，ALP，GGT都在行标参考范围内，没有偏高趋势，所以将4例个体
纳入了统计，统计结果低限与行标一致，高限高于行标，超出参考区间的数据为11.4%，不符合行标不超过10%的规定，原因之一可能是纳入的研究样本例数少，拟在2014年度公司体检中再次验证此项目。

本研究女性72例，研究结果与行标
一致，没有超出参考区间的数据，通过验证。

AST，不论男性还是女性群体，本研究结果的P2.5均低于行标参考区间，男性有
3例低于参考区间下限15U/L，其中有两例大于14U/L;女性有6例低于参考区间
下限13U/L，最低一例是11.9U/L。

不论男性还是女性，超出参考区间的数据均
低于10%，通过验证。

ALP，不论男性还是女性群体，本研究结果的P2.5和P97.5均在行标参考区间内，没有超出参考区间的数据，通过验证。

GGT，本研究35 名男性统计结果，P97.5明显高于行标参考区间上限(94.4＆60)，进一步调查高值样本，发现此例个体虽然其它肝功指标正常，但是存在经常饮酒的历史，一直存在GGT偏高的现象，去除此例样本，重新进行统计，GGT 的 P2.5
和 P97.5均在行标参考区间内，没有超出参考区间的数据，和行标相符，通过验证。

WS/T 404.1-2012《临床常用生化检验项目参考区间第1部分:血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶和γ-谷氨酰基转移酶》中的检测方法
溯源至IFCC参考方法。

本公司于2010年筹建了参考实验室，建立了IFCC参考
方法，连续3年参加了RELA比对［3］，卫生部酶学参考实验室间比对结果，二者都取得了良好的成绩。

同时，我们利用参考方法系统和常规方法系统比对，建立了常规方法的完善溯源体系，常规方法的检测结果溯源至IFCC参考方法，其中利用γ-谷氨酰转移酶参考方法建立溯源体系的文章已经发表［4］。

血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶和γ-谷氨酰基转移酶，通过检测各参考个体，按照非参数检验方法统计，与WS/T 404.1-2012《临
床常用生化检验项目参考区间第1部分:血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶和γ-谷氨酰基转移酶》给出的参考区间基本相符，临床医院使用金斯尔品牌试剂可以直接使用新的行业标准推荐的参考区间。

参考文献
【相关文献】
［1］钟堃，王治国，王薇，等.全国临床常规生化检验项目参考区间调查研究分析.中华医学检验杂志，2011，32(2):273-274.WS/T 404.1-2012临床常用生化检验项目参考区间第1部分:血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶和γ-谷氨酰基转移酶［S］.
［3］http://www.dgkl-rfb.de:81［DB/OL］
［4］黄妍，简娟，康佳妮，等.应用血清γ-谷氨酰转移酶参考方法实现开放检测系统的溯源性.中国卫生检验杂志，2012，22(11):2636-2638.。