高效液相色谱法测定柑橘皮中新橙皮苷

高效液相色谱法测定柑橘皮中新橙皮苷
徐旭耀;苏欣;汪秋安
【摘要】提出了高效液相色谱法测定柑橘皮中新橙皮苷含量的方法。

样品用甲醇超声提取,定容至50mL。

以SinoChrom ODS-BP色谱柱
（250mm×4.6mm,10μm）为分离柱,以甲醇-水（36＋64）溶液作为流动相,用紫外检测器在波长283nm处进行测定。

新橙皮苷质量浓度在0.005 3～0.32g.L-1范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限（3S/N）为0.6mg.L-1。

方法的平均回收率为90.3%,相对标准偏差（n=6）为1.7%。

%HPLC was applied to the determination of neohesperidin in citrus peels.The Sample was ultrasonically extracted with methanol,and made up to 50 mL.SinoChrom ODS-BP（250 mm×4.6 mm,10 μm） column was used as stationary phase,a mixture of methanol and water mixed in the ratio of 36 to 64（by volume） was used as mobile phase;UV-detection at 283 nm was used in the determination.Linear relationship between values of peak area and mass concentration of neohesperidin was obtained in the range of 0.005 3-0.32 g·L-1,with limit of detection（3S/N）of 0.6 mg·L-1.Values of average recovery and RSD（n=6） found were 90.3% and 1.7% respectively.
【期刊名称】《理化检验-化学分册》
【年(卷),期】2012(048)003
【总页数】3页(P342-344)
【关键词】高效液相色谱法;新橙皮苷;柑橘皮
【作者】徐旭耀;苏欣;汪秋安
【作者单位】湖南大学化学化工学院,长沙410082／湛江师范学院化学科学与技术学院,湛江524048;湛江师范学院化学科学与技术学院,湛江524048;湖南大学化学化工学院,长沙410082
【正文语种】中文
【中图分类】O652.63
柑橘是重要的经济作物之一，在全世界的年产量达1亿多吨，国际年贸易额逾65亿美元［1］。

我国拥有丰富的柑橘资源，栽培面积为世界第一位，产量为世界第三位，仅次于巴西和美国。

其年产量为1 100万t左右，并呈进一步快速增长态势［2］。

柑橘果皮占整果质量的20%，且含有许多有用的成分，如精油、桔皮色素、果胶物质、类黄酮物质、柠檬苦素类物质和纤维素等［3］。

这些物质具有巨大的应用前景，若不加以利用而丢弃掉，不仅浪费资源，而且对环境有污染。

新橙皮苷与橙皮苷具有相同的分子式C28H34O15，相对分子质量为610.55。

新橙皮苷的分子结构式见图1。

新橙皮苷与柚皮苷的性质相似，新橙皮苷微溶于水，溶于丙酮、乙醇、热乙酸和热水，不溶于乙醚、己烷和氯仿［4］。

新橙皮苷具有抗过敏和抗氧化作用，其氢化后得到的二氢查尔酮（NHDC）是查尔酮的衍生物，甜度是蔗糖的1 100倍（以质量计），是一种新型甜味剂［5－7］。

新橙皮苷属于类黄酮化合物，类黄酮化合物可采用光谱分析法、高效液相色谱法、毛细管电泳法和色谱－质谱联用等方法进行测定［8］。

本工作采用高效液相色谱法测定柑橘皮中的新橙皮苷含量。

P 260型高效液相色谱仪，配UV 200II紫外可变波长检测器和P 260型恒流泵。

新橙皮苷对照品溶液：称取新橙皮苷对照品1.6mg，用甲醇溶解后，转移至5mL 容量瓶中，并用甲醇稀释至刻度。

所用试剂均为色谱纯，试验用水为蒸馏水。

SinoChrom ODS－BP 色谱柱（250mm ×4.6mm，10μm），流动相为甲醇－水（36＋64）溶液，流量为1mL·min－1，柱温为室温，进样量为20μL，测定波长为283nm［4，9］。

将所购夏橙橙皮剪成小块薄片，于60℃干燥8h至恒重，用料理机粉碎成粉末。

称取干橙皮粉末约0.500 0g于50mL锥形瓶中，加入甲醇30mL，超声提取
90min，冷却后，定容至50mL，用0.45μm微孔滤膜过滤，待用。

试验考察了流动相中甲醇与水以不同的体积比混合时对测定的影响，结果表明：随着流动相中甲醇的比例增大，新橙皮苷的保留时间缩小，但峰形变差，易出现拖峰现象。

当流动相中甲醇与水的体积比为36比64时，新橙皮苷的保留时间合适，
且峰形较好。

试验选择甲醇－水（36＋64）溶液为流动相。

对照品和样品的色谱
图见图2。

取同一份样品溶液，置于室温下，间隔不同时间进行测定，结果表明：样品溶液的测定值42h内比较稳定。

平行称取样品0.500 0g，共4份，按试验方法进行操作，在色谱条件下进行测定，计算测定结果的相对标准偏差为2.0%。

表明方法重复性好。

按试验方法对新橙皮苷对照品溶液系列进行测定，新橙皮苷的质量浓度在0.005 3～0.32g·L－1范围内与峰面积呈线性关系，线性回归方程为y＝6.253 3×107ρ
＋623.08，相关系数为0.999 1。

方法的检出限（3S／N）为0.6mg·L－1。

称取样品3份，分别加入一定量的新橙皮苷对照品，按试验方法进行测定，结果
见表1。

按试验方法对柠檬、新奇士橙、胡柚、巴西柑、精品橙、蜜柑进行测定，测得新橙皮苷的质量分数依次为4.08，7.00，5.52，11.6，10.3，8.74mg·g－1。

［1］方修贵，黄振东，林媚，等.柑桔果皮功能性物质及其联产工艺［J］.食品工业科技，2002，23（12）：75－77.
［2］孙志高，黄学根，焦必宁，等.柑桔果实主要苦味成分的分布及橙汁脱苦技
术研究［J］.食品科学，2005，26（6）：146－148.
［3］叶兴乾，刘东红.柑橘加工与综合利用［M］.北京：中国轻工业出版社，2005.
［4］申严.枳实黄酮类成分的研究与开发［D］.北京：首都师范大学，2004：12－14.
［5］冯宝民，蒋革，贾景明，等.柚皮苷和新橙皮苷抗过敏作用的研究［J］.大连大学学报，2005，26（4）：63－64.
［6］ MAJO D D，GIAMMANCO M，GUARDIA M L，et al.Flavanones in citrus fruit：structure－antioxidant activity relationships［J］.Food Research International，2005，38：1161－1166.
［7］王晓莹.天然抗氧化剂抗氧化活性的测定及应用［D］.西安：西北大学，2007：35－39.
［8］吴桂苹，苏学素，焦必宁，等.柑橘活性成分检测技术研究进展［J］.食品与发酵工业，2006，32（9）：116－121.
［9］黄爱华，曾元儿，迟玉广，等.正交试验优选枳实中新橙皮苷的提取工艺［J］.中药新药与临床药理，2009，20（6）：580－582.
［10］汤建国，汪秋安，单杨.从柑橘皮中超声提取橙皮甙［J］.精细化工，2004，21（3）：171－173.
【相关文献】
取同一份样品溶液，稀释10倍。

按色谱条件连续重复进样6次，相对标准偏差（RSD）为1.7%。