LuminexxMAP技术介绍
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Luminex xMAP技术,又称流式荧光技术,又称悬浮阵列、液态芯片,该技术的核心是
把直径为5.6um的聚苯乙烯小球用荧光染色的方法进行编码,通过调节两种荧光染料的不同
配比获得最多可达100种具有不同特征荧光谱的微球,然后将每种编码微球共价交联上针
对特定检测物的抗原、抗体或核酸探针等捕获分子。
应用时,先把针对不同检测物的编码微
球混合,再加入微量待检样本,在悬液中靶分子与微球表面交联的捕获分子发生特异性结合,
在一个反应孔内可以同时完成多达100种不同的检测反应。
最后用Luminex?100进行分析,
仪器通过两束激光分别识别微球的编码和检测微球上报告分子的荧光强度。
Luminex xMAP 技术(液态芯片)有机地整和了荧光编码微球技术、激光分析技术、流
式细胞技术、高速数字信号处理技术、计算机运算法则等多项最新科技成果,具有自由组合、高通量、高速度、低成本、准确性高、重复性好、灵敏度高、线性范围广、无需洗涤、
操作简便、既能检测蛋白又能检测核酸等优点,代表着生命科学基础研究和医学诊断技术的
发展方向。
在临床诊断中引进流式荧光技术和产品,将极大地提高检测效率和降低检测成
早在1997年,〈〈临床化学》杂志就刊登专文介绍Luminex xMAP^术(液态芯片),并
将其誉为"真正的临床应用型生物芯片”。
随后,运用Luminex xMAP技术(液态芯片)进行临床诊断和基础研究成为生命科学研究领域的一大热点,相关的研究论文频频刊登在〈〈临
床化学》、〈〈临床与诊断免疫学》、〈〈临床微生物》、〈〈基因组研究》、〈〈蛋白质组研究》、〈〈癌症》等国际权威学术杂志上。
2001年7月27日,INOVA公司的ENA系列产品率先通过
美国FDA的严格认证,标志着Luminex xMAP^术(液态芯片)得到了美国官方的高度认可,并由此成为首个,也是目前唯一得到美国FDA许可用于临床诊断的多指标并行检测技术。
2005年6月9日,基于Luminex xMA哌术(液态芯片)的学术论文刊登在当日出版的〈〈自然》杂志上,这是学术界认可一项技术所能给予的最高荣誉。
2005年11月,为了表彰其
对临床诊断技术进步做出的革命性贡献,全球科技产业和行业研究的权威机构--- Frost & Sullivan ——授予Luminex xMAP技术(液态芯片)“2005年度国际临床诊断技术革新大奖” 标志着Luminex xMAP技术(液态芯片)在国际临床诊断技术领域的领军地位得到了最具权威的认可。
技术原理
Y
畛施抗体
1.编码微球:分别用不同配比的两种荧光染料将直径 5.6| im的聚苯乙烯微球(Beads)染
成不同的荧光色,从而获得多达100种经荧光编码的微球;
2.交联探针、抗体或抗原:把针对不同检测物的核酸探针、抗体或抗原以共价方式结合到
特定荧光编码的微球上;
3.检测反应:先把针对不同检测物的、用不同荧光色编码的微球混合,再加入被检测物。
悬液中的微球与被检测物特异性结合,结合物被标记上荧光物质;
4.激光分析:微球成单列通过两束激光,一束判定微球的荧光编码;另一束测定微球上的
报告分子的荧光强度
技术核心优势
Luminex xMAP 技术(液态芯片)是在后基因组时代发展起来的新一代标准化开放式通
用型多指标并行检测平台,它具有以下独特优点:
1.高通量:微量(10 l )标本,1次检测100个指标;
2.高速度:最快可达10 000测试/小时;
3.低成本:液芯联检试剂用量少,降低检测成本;
4.灵敏度高:检测低限可达0.01pg/ml ;
5.重复性好:每个指标有1000〜5000个反应单元,分析100次取平均值,CV值< 5%;
6.线性范围广:动态范围可达4〜6个数量级;
7.全过程无需洗涤:操作简便、省时省力;
8.组合灵活:可任选指标构建个性化组合液芯;
9.通用型生物芯片平台:唯一既能检测蛋白,又能检测核酸的多指标并行检测平台;
平台全开放、配套试剂多:国内外已有50多家公司在开发和推广液态芯片试剂,截止2005
年底,已有200多个项目得到了美国FDA的严格认证进入临床使用。
技术应用范围
准确性高、操作简便、功能强大、成本低廉等诸多优点,在临床诊断、健康体检、生物制药、生物医学(包括基因组学、蛋白质组学)研究等领域都有着广泛的应用,代表着生命科学基础研究和医学诊断技术的发展方向。
该技术平台一经推出,便在医学诊断与基础研究的各个
领域得到了迅速推广,成为临床诊断领域以及生命科学研究中的一大热点。
其主要应用范围如下:
1.免疫学或基于免疫学原理进行的分析
-肿瘤标志物检测
-细胞因子检测
-组织分型
-自身免疫病检测
-过敏原筛查
-心血管疾病标志物检测
-感染性疾病(如乙肝等)的检测
2.DNA杂交分析
-感染性疾病病原微生物(如HPV等)的检测
-SNP检测
-基因表达谱分析
3.基因及蛋白质表达谱分析
-蛋白质一蛋白质相互作用分析
-蛋白质一DNAffi互作用分析
4.高通量药物筛选平台
-高通量、大规模、并行进行药物筛选
-直接在蛋白水平寻找靶标
-解释药物的作用机理及毒副作用
5.受体-配体分析
-内分泌激素分析
6.酶与底物的相互作用的研究
-激酶和磷酸化分析 -金属蛋白酶类分析。