荧光定量PCR检测血清HBV-DNA含量及在乙型肝炎诊断中的应用

荧光定量PCR检测血清HBV-DNA含量及在乙型肝炎诊断中的应用
摘要：目的：分析和研究荧光定量PCR检测血清HBV-DNA含量在乙型肝炎诊断中的应用价值。

方法：对2021年1月到2022年9月前来我院就诊的乙型肝炎患者122例的血清标本进行监测，应用荧光定量PCR检测HBV-DNA的数量予以对比，并且应用ELISA法监测乙型肝炎标志物，分析检测结果。

结果：不同病型乙型肝炎和其HBV－DNA含量没有显著的相关性；49例HBsAg（＋）／HBeAg（＋）／HBcAb（＋）患者，HBV－DNA检出率100%（49／49）；48例HBsAg（＋）／HBeAb（＋）／HBcAb（＋）患者，HBV－DNA检出率是66.67%（32／48）；6例HBsAg（＋）／HBcAb（＋）患者，HBV－DNA检出率是66.67%（4／6）。

结论：乙肝病型和血清HBV－DNA水平没有相关性，和HBV－M表现模式有一定的关联；通过荧光定量PCR能够将HBV实际感染及复制状况检测出来，为诊断及治疗乙型肝炎提高参考依据。

关键词：荧光定量PCR检测；血清HBV-DNA含量；乙型肝炎；诊断价值
Abstract: Objective: To analyze and study the value of fluorescence quantitative PCR to detect serum HBV-DNA content in the diagnosis of hepatitis B. Methods: The serum samples of 122 patients with hepatitis B who came to our hospital from January 2021 to September 2022 were monitored, and the amount of HBV-DNA was detected by fluorescence quantitative PCR to compare, and the hepatitis B markers were monitored by ELISA, and the detection results were analyzed. Results: There was no significant correlation between HBV-DNA content and different hepatitis B types. In 49 HBsAg (+)/HBeAg (+)/HBcAb (+) patients, HBV-DNA detection rate was 100% (49/49). In 48 HBsAg (+)/HBeAb (+)/HBcAb (+) patients, the detection rate of HBV-DNA
was 66.67% (32/48). In 6 HBsAg (+)/HBcAb (+) patients, the detection rate of HBV-DNA was 66.67% (4/6). Conclusion: There is no correlation between hepatitis B type and serum HBV-DNA level, and there is a
certain correlation with HBV-M expression pattern. The actual
infection and replication status of HBV can be detected by
fluorescence quantitative PCR, which can improve the reference for diagnosis and treatment of hepatitis B.
Key words: fluorescence quantitative PCR detection; Serum HBV-DNA content; Hepatitis B; Diagnostic value
乙肝属于临床中比较常见的疾病，在感染乙型肝炎病毒（HBV）时候，患者
外周血内的HBV DNA属于病毒复制活动非常可靠与直接的标志，血清拷贝量于疾
病进展、转归和治疗中有非常重要的作用【1-2】。

此次就2021年1月到2022
年9月前来我院就诊的乙型肝炎患者122例，探析荧光定量PCR检测血清HBV-DNA含量及在乙型肝炎诊断中的作用，具体如下：
1 资料与方法
1.1一般资料
将2021年1月到2022年9月前来我院就诊的乙型肝炎患者122例作为研究
对象，包括男性67人，女性55人，年龄最小值是29岁，最大值是67岁，均值（45.05±3.56）岁，其中有无症状HBV携带者37例，慢性乙型肝炎43例，原
发性肝癌28例，乙肝后肝硬化4例。

纳入标准：均为本院收治的乙型肝炎患者；掌握此研究目的并签署同意书；高依从性；排除标准：全身感染疾病；严重器官
障碍性疾病；精神病或交流不畅；严重慢性疾病。

1.2方法
应用FQD-33A型号的荧光定量PCR仪（日本博日公司生产）及HBV-DNA定量
检测试剂盒（中山医科大学达安基因诊断中心提供）；通过ELISA法检测试剂盒
对血清HBV标志物进行检测。

1.3 统计学分析
数据利用软件SPSS25.0处理，计量、计数资料用x±s、（n，%）表示，
差异性对应t 、2检验；依据：P＜0.05有差异，存在统计学意义。

2 结果
2.1 分析HBV-DNA定量检测和乙肝病型的关系
不同病型乙型肝炎病毒感染者的HBV－DNA定量之间没有明显的差异，见表1：表1 乙肝病型和HBV－DNA检测的关联性
样本来源n HBe
Ag阳性
数
DNA
阳性数
（%）
平均HBV-
DNA/
（copies/ml）
平均HBV-
DNA对数/
（Igcopies/ml）
HBV 携带者
3
7
2428
（75.68）
1.5×1088.1±1.23
慢性乙型肝炎
4
3
2932
（74.42）
0.63×1087.9±1.42
肝炎肝硬化
2
8
1618
（64.29）
0.36×1087.61±1.38
原发性肝炎423
（75.00）
0.052×10
8
6.70±1.34
2.2 明确常见的HBV-M模式和HBV－DNA检测结果对比
HBV－DNA的水平和HBeAg的存在具有一定的关联，证实HBeAg的出现能够有效的反映出HBV复制的程度。

3 讨论
乙肝病毒即乙型肝炎病原，是一种去氧核糖核酸病毒，是由乙型肝炎病毒感染机体后所引起的疾病【3】。

乙型肝炎病毒是一种嗜肝病毒，主要存在于肝细胞内并损害肝细胞，引起肝细胞炎症、坏死、纤维化。

中国的乙型肝炎病毒携带者约有1亿人以上，该病毒诱发的慢性乙肝在不断的进展之后，会进展为肝硬化和肝功能衰竭，也可能会引发肝癌的发生。

会对患者的身心造成严重的影响，因而及时有效的诊断非常重要，对疾病后续的治疗和预后状况有重要的作用。

通过HBV-DNA可以呈现出乙肝病毒存在、活动性复制和有传染性的重要指标【4】。

荧光定量PCR属于以核酸生物化学为主的分子生物学诊断技术，其的特异性和敏感性比较高，结合力荧光探针和PCR技术的优势，能够探测PCR过程荧光引号的改变情况，通过PCR反应的酶动力学特征，取得DNA模板的准确定量结果。

但是通过常规的ELISA法对HBV标志物进行检测用于HBV感染的诊断，其主要对机体HBV免疫反应状态进行检测，经过为各种病型乙型肝炎病毒感染者HBV-DNA检测，证实乙型肝炎病毒含量和乙肝病型并未显著的关联，其HBV-NDA阳性率没有较大的差异，并且检测HBV标志物明确到，HBeAg阳性率和HBV-DNA定量阳性率属于正相关，而少数的HBeAg阴性患者HBV-DNA表现为阳性，证实应该和前c区变异存在一定的关联【5-6】。

综上所述，将HBV-DNA检测应用在抗病毒治疗及疗效观察中有一定的作用，可以在临床中进行推广和应用。

【参考文献】
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