鱼肉寄生虫学检疫的方法

检查方法
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涂片法
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用解剖镊刮取体表的粘液或直接取血液于载 玻片上，加上盖玻片,进行显微镜检。适用于 粘液性样品的检查,如血液、粘液。
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浓缩法
肠道内容物刮下来，放在培养皿里,加入生 理盐水冲洗搅匀,1000 r/min~1500 r/min,
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离心10min~15min,反复加生理盐水离心3
次,取沉淀物镜检。
检查，如果体表有大的病原体，如嗜子宫线虫、
猫头蚤、鱼虱等，用肉眼就可看出。
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பைடு நூலகம்
体表有大量粘液并带有污泥，或头、口、 鳍条等处腐烂往往与一些车轮虫、斜管虫、
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三代虫寄生有关。
0 检查鳃
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鳃为鱼类的主要呼吸器官，在水中不停地 收缩，极易被水污染，因而鳃是重点检查
的部位，而鳃中的鳃丝又是检查重点中的
重点。
0 检查鳃丝
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（1）样品制备
鱼片、鱼块：厚度小于10 mm时直接用于观察,大于10 mm,用刀切成薄片， 使薄片厚度小于10mm后检查。 碎鱼肉:如果是冷冻结成块状，取2个冰冻的块状物,解冻，沥干,制成15个样, 每个样200 g左右;如果是非冰冻的,随机抽取15份200g碎鱼肉进行检测。 称量并记录样品的实际质量。
检查方法
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水浸片
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取一点受检的组织(如:鳃丝、体表溃疡处、消化道的内含物、 体表附着物或粘液等)于载玻片上,加上一滴清水,用镊子将组 织分散,加上盖玻片,稍加压平，解剖镜下观察。 受检组织不 能放置于玻片上太多、太厚和互相重叠。
压片法 03
一条或一块鲤科淡水鱼放在洁净的器械盘中，用手术刀 和镊子刮去脊背处的鱼鳞，撕去鱼皮，从鱼的背部镊取 一小块肌肉(绿豆粒大小，绝大部分囊蚴分布在背部及肛 区至尾鳍的基部)放在两张载玻片之间，用力压薄，用棉 线扎紧玻片两端，放在低倍镜下检查。
（2）样品检查 每次取大约25 ml沉淀物于玻璃盘中，加水 稀释至半透明(大约375mI水)。首先肉眼检 查,然后在366nmUV光下观察(紫外光观察 时应带上紫外线防护眼罩，并避免裸露皮 肤的照射),寄生虫发出蓝色或黄绿色荧光。 重复上述操作。直至检查完全部样品为止, 固定有代表性的寄生虫。
4.消化法
（2） 检查
白光烛光法:把鱼肉放在透光台上观察,靠近鱼肉表面的寄生虫一般呈红色、 棕褐色、乳白色或白色；而深层肉的寄生虫显现阴影，选择有代表性的寄 生虫进行固定，并进一步鉴定 紫外光烛光法:用UV光在暗房中观察鱼块的各个部位(紫外光观察时应带上 紫外线防护眼罩,并避免裸露皮肤的照射)。寄生虫发出蓝或绿色荧光，鱼骨 和结缔组织也会发出蓝色荧光,但我们可以通过其部位和形态加以区分,用针 刺时，鱼骨头是硬的
（2）在条件许可的情况下应察看现场，测量池 中的水温及pH值，察看水色、水源和塘面及鱼 群的活动与死鱼的情况，了解发病的经过及已 采取的措施等，详细记录以备作为确诊时参考 之用。
PART 02
02
病鱼检查顺序
检查顺序
首先测量、观察鱼体特征(各部位长度及鱼体重量)，检查 鱼体表组织(如口、眼、鳃、鳍、鳞)，取背鳍前下方鳞， 然后解剖鱼体。解剖鱼体先从口腔开始，最后检查体腔。 检查血液和心脏必须用活体，也就是说要在外部检查以前 做血液涂片，解剖之后则首先检查心脏体腔。器官和组织 的检查也应当按照一定顺序。检查顺序由外到内,粘液、鳍、 鼻腔、口腔、血液、鳃、体腔、脂肪组织、胃肠、肝、脾、 胆囊、心脏、鳔、肾、膀胱、性腺、眼、脑.脊髓、肌肉。
沉降
用18目滤网过滤样品消化液,滤液移入塑料盘子中,取250mL生理盐水冲洗滤 网上的残留物,洗液并入塑料盘子滤液中。较大的寄生虫留在滤网上,肉眼检查 过滤网上的寄生虫,记录检查结果。把塑料盘子中的滤液倒入分液漏斗内,自然 沉降1h后,释放大约50ml沉降物到100 ml烧杯中。
检查
如果沉降物为半透明，直接进行观察;如果样品太粘稠,用适量生理盐水稀释至 半透明后进行观察。用吸管将沉降物转移至平皿,加盖,先用肉眼,接着用生物解 剖显微镜,最后用生物倒置显微镜或普通光学显微镜检查寄生虫。检查烧杯中 的全部50mI样品液，计数、初步鉴定,记录观察结果。选择有代表性的寄生虫 进行固定，作进一步鉴定。
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PART 03
检查方法
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1.病鱼外观肉眼检查
0 体表检查
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体表是从头部、口、眼、鳃盖、鳞片、鳍条等处
消化
将经处理的250g样品放入1500mL烧杯中,加入750ml胃蛋白酶消化液。用 盐酸调整上述消化液pH值为2。烧杯中放入搅拌转子.用铝箔纸盖紧烧杯口, 放入37°C士0.5°C培养箱,打开磁力搅拌器，以100 r/min搅拌,平衡15 min后, 再次校准pH值为2。继续消化直至样品完全消化为止，消化时间不超过 24 h。.
BUSENESS 鱼肉寄生虫学检疫的方法
第七组：宫浩铭、吴志强、殷志雷、尹 书隆、郭修文、谭春浩、杨昌骜
目录
0 1 病鱼样品的采集 02 病鱼检查顺序 03 检 查 方 法
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PART 01
病鱼样品的采集
样品采集
（1）作检查诊断的病鱼要采用活鱼或刚死不久的， 否则会因鱼死后太久，而使某些症状消失或体表的病 原体死亡或病原体离开宿主而无法鉴别，影响诊断结 果的可靠性、正确性。取样时标本(待检病鱼)应放在 盛水的桶中，如路较远，病鱼应用湿布或湿纸包裹， 以防干燥;
谢谢大家
4 检查鳃丝要看颜色是否正常，粘
液是否增多,鳃丝末端是否肿大、 发白和腐烂。
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如果鳃丝末端肿大、腐烂，即为细菌性烂 鳃病的症状;鳃丝颜色发白并有红色小点，
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为鳃霉病的症状;鳃丝粘液过多，往往与一
些寄生虫存在有关。
2.烛光法
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3.机械分离沉降法
因为鱼肉为固体，容易沉淀至管底，所以可以使用 机械分离沉降法
（1）样品制备 随机抽取250g鱼肉样品用于检测.把鱼肉切 成薄片,分成两份(每份125 g).分别放入食品 捣碎机,每份加入250 ml 35℃温水,间歇捣 碎角肉1 min~2 min,倒进大口烧杯，加入 大约600 ml水并搅拌,静置15 min，缓慢倒 去上清液，保留沉淀物及大约100 ml上清 液;再次加人大约600 ml.水并搅拌，静置 15 min,缓慢弃去上清液,保留沉淀物及大约 100 ml上清液备用。