铺薄层板的经验总结

铺薄层板的经验总结
1.CMC-Na配置也比较重要,不能太稀了,不然硅胶的黏附性不好,铺好的硅胶容易脱落.太稠了也不行,不容易和硅胶混匀
2.CMC-Na与硅胶混合时注意比例,一般为30克硅胶加入100克0.3-0.5%的CMC-Na水
溶液.如果铺多了的话可以凭经验就能感觉到适合的程度.混合时最好朝一个方向研,这样
也不容易有气泡
3.铺板的均匀.这也是关系到板好坏的重要方面.为了使薄层板硅胶均匀,铺好后将玻
璃板放在桌边小心上下颠动,保证薄层板所以地方都一样均匀.
4.铺板的厚度,个人所好有所不同.有的铺得较厚,这种情况CMC-Na不能太稀,不然硅
胶哗哗的掉.厚的板展开的时候慢些,但是点样量可以多一些不容易扩散.薄的板展开比较快,容易扩散点样量宜少
5.薄层板的活化.活化一定要铺好板干了以后放到烘箱活化.干了是指看不到有水痕在
上面.一般可以选择晚上铺板,早上的时候正好薄层板已干,可放进烘箱活化.为什么要完全
干了才能活化，如果未完全干会导致活化的时候薄层板硅胶开裂.
一、手工铺板是非常考验你的耐力的事情，最好是找实验室的GGJJMMDD们一起，一
来速度快，二来大家仪器交流心得。

1．CMC-Na溶液必须配制的好，放置的也要很好，完全分层之后只能取上清液。

上清
液要澄清透明，时间太长的CMC-Na可能会发黄，如果有霉菌出现的话，绝对不能使用。

2．就是硅胶和CMC-Na溶液的比例可以适当的调节，根据你所需要薄层板的软硬来微调。

可以一个人研磨，一个人缓慢的倒CMC-Na溶液。

研磨时最能考验你的定力，我觉得
你该找女生来磨，但是那种太文弱的不行。

研磨时要顺着一个方向，速度不宜快，要顺着
研钵的边缘，观察仔细，一定要把气泡赶尽杀绝。

研磨好的因改是均匀的，没有气泡，没
有固体的粉末类异物，溶液有一定的粘性。

3．铺板，我觉得是各人各喜欢，可以顺着板中间倒，也可以顺着某个边缘倒，倒时
也要注意不能引入小气泡。

可以用玻璃棒引着溶液平铺在玻璃板上（顺便说一句，玻璃板
应该很干净，没有划痕，没有缺口，4个角要“健全”），如有需要，可以双手10个指头拖住玻璃板，有节奏的颠，使得硅胶分摊匀称。

尤其是4个角，容易高出玻璃板其他部位，所以要格外注意。

颠好的板，表面看上去要光滑平整，没有气孔。

铺好的板，要找个干净的地方放置晾干，这个过程也是耐心的等着它，请勿打扰！
自然晾干后，活化一下（105摄氏度40分钟左右），置于密封的干燥器保存。

最后想说一下，如果你铺板目的是做分析用的话，肯定得很仔细用心。

如果仅是天然
药化那种粗略检查过柱子得到的馏分纯度，那就没有必要这么复杂了，也就是说速度可以
快点，板的要求也没有必要这么高！
自己多看看人家怎么铺的，练练手，肯定就成高手了！
二、楼上的讲得很好，我再补充两点切身体会：
（1）CMC-Na溶液煮了以后不能再用冷水兑，否则，几天以后就会变绿，起霉。

（2）如果有抽滤装置你可以直接把CMC-Na溶液滤过，就可以不必等它沉淀再取上清
液了
（嘿嘿，我是急性子），还有两个好处一是节省CMC-Na溶液，二是倒滤过的CMC-Na
溶液的时候不必担心会把下层的不溶物倒出来了！）
三、本人的工作经验：
薄层层析制板
1. 配制4%～5%的羧甲基纤维素（CMC）：称取CMC，溶于冷水中，边加热边搅拌，
直至成为清澈、透明的溶液。

2. 40%硅胶：按CMC溶液的量、按40%的比例称取薄板层
析硅胶，倒入大研钵中，与CMC溶液混合，充分研磨成均匀糊状。

3. 加入几滴乙醇或丁醇，可起到消泡的作用。

4. 将载玻片置于平台上，用药匙舀取糊状硅胶，均匀地铺在载玻片表面。

5. 自然干燥后，放入烘干箱烘12小时以上。

再在105~110℃活化，活化时间为
0.5~1小时，冷却后即可使用。

四．我也来谈一下自己的一点经验吧。

CMC-Na：硅胶为2.5：1较好，楼上师兄说的3：1应该也可以，但是硅胶配的过稀时后果很严重，板子在晾干时会出现许多裂缝，象万寿
菊样的开花状，完全不能用。

此乃本人的惨痛经历，当时不知道是硅胶过稀的原因，还以
为冬天太冷板子给冻裂了，又作了一批放在暖气房，还是照裂不务。

浪费了整整一瓶
GF254啊（做的是制备板用量较大）。

有个问题至今不明白，请教各位大虾，晾干的板子放在烘箱里怎么全炸裂了，有什么
方法可以避免板子炸裂。

楼上的兄弟，我也有过同样的遭遇。

当时板子铺得太厚，后来加长研磨的时间就好了。

首先我想说的是手工铺制的板子，只适宜于定性分析，不宜于分离定量。

手工铺板的要点
我认为有如下几点：
1.手工铺制的板子常用的有：硅胶G板和硅胶CMC板。

前者是煅石膏（石膏经140℃
烘烤3―4小时）与硅胶按1―1.3：10混合均匀。

每份硅胶G加水2―3份调成糊状，即
可使用。

后者的操作各位大虾已有论述。

2.载板要求平滑清洁。

在使用前一定要处理干净，用洗涤液或肥皂水洗涤，再用水冲洗干净，烘干；
3.CMC-Na要用蒸馏水为溶剂，加热溶解后，放冷，最好滤过使用；消泡剂可直接与CMC-Na溶液混合使用；
4. 我在做时，先在研钵中加CMC溶液，再加硅胶，按同一方向研磨，这样更容易调
匀不易包埋硅胶颗粒；稠度以用研棒粘取，成连珠状不成线状下滴为好；配制时遵循现配
现用、少量多次的原则，因其易干影响铺制效果。

薄层色谱法实践技巧目的：
1. 药典：薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，
使供试品所含成分分离，所得色谱图与事宜的对照物按同法所得的色谱图对比，并可用薄
层扫描仪进行扫描，用于鉴别、检查或含量测定。

2. 如果你是做鉴别的话，薄层的系统适用性主要是做检测限和分离度；
3. 如果你是做含量测定，比如说用薄层扫描法，薄层的系统适用性应该做线性范围、同板精密度、异板精密度、回收率；
4. 手工铺制的板子，只适宜于定性分析，不宜于分离定量；
5. 化学药一般是作有关物质，需要一定的载药量，所以要适当增加厚度；
6. 中药一般较难分离，需要薄板，以增加分离度；
7. 手工铺制的板子常用的有：硅胶G板和硅胶CMC-Na板。

前者是煅石膏（石膏经140℃烘烤3―4小时）与硅胶按1―1.3：10混合均匀。

每份硅胶G加水2―3份调成糊状，即可使用。

后者的操作各位大虾已有论述。

8. 如果你铺板目的是做分析用的话，肯定得很仔细用心；如果仅是天然药化那种粗
略检查过柱子得到的馏分纯度，那就没有必要这么复杂了，也就是说速度可以快点，板的
要求也没有必要这么高；
9. 单纯的手铺板，技巧要求很高的，如果有铺板器（也是完全手动的那种），铺出
的板子基本上可以保证均一的。

10. 要喷硫酸乙醇并定量的最好铺水板；铺水板是最考技术的，主要是碾磨技术，大
家可以探讨一下；
11. 硫酸乙醇显色作定量分析的品种，但凡加了CMC-Na的板都易烘糊，尤其是温度
高于100度时，后改用不加CMC辅的水板来作，就不会有烘糊现象，故也可推论CMC易于
与硫酸起糊化反应。

感觉辅水板关键是硅胶G与水的比例要达1：3.5左右，而且研磨后
要尽快涂布，不能易于凝固而难于涂布。

展开：
12. 药典：展开容器应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层色谱展开缸，并有严密的
盖子，底部应平整光滑，或有双槽。

上行展开一般可用适合薄层板大小的专用平底或双槽
展开缸，展开时须能密闭。

水平展开用专用的水平展开缸。

13. 药典：将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点
5mm为宜（切勿将样点侵入展开剂中），密封顶盖，待展开至规定距离，除另有规定外，
一般为8～15 cm，溶剂前沿达到规定的展距，取出薄层板，晾干，按正文项下的规定检测。

14. 展开剂的选择（分离单体）：
（1）粗分，也就是当你的样品极性范围比较大的时候，可以直接采用极性较小的流
动相。

然后将前沿、原点以及前沿及原点间的硅胶分别刮下，提取。

这样，样品就被分为
几个部分，而各个部分的极性相差也比较小了。

然后再将这几部分分别进行下面的细分TLC。

（2）细分。

经过粗分之后，我们一般对各个部分的极性都能够做到心中有数了。

比如，被冲到前沿的样品，要采用更小极性强度的流动相，而死吸附部分，则需要较大强度
的流动相。

我们在初步确定了流动相的极性强度之后，可以自己设计几个溶剂系统。

在选择流动相的组成的时候，可以参考snyder的溶剂分类，从质子受体，质子给体和偶
极作用的溶剂中各选择一种，然后再选择一个强度调节剂。

当然，也可以参考文献中采用
的流动相。

选好了要用的流动相，就可以根据我们初步确定的极性强度得到流动相的配比
了（如果是二元流动相的话）。

如果是三元及以上的流动相，可以采用Glajch和Youngstrom的七种溶剂系统的方案进行选择流动相的配比。

然后从中选择分离效果比较好的组合。

最开始可以采用微量圆环法（将样品点在中间，然后将流动相用毛细管从原点向圆周
扩散）和小板实验法来摸索，然后再应用于大的制备TLC。

我也曾直接采用圆环法，也称为环形展开，来进行制备的。

本来是应该有专门的U形
展开
室来展开，但是因为我们这里没有这个设备，所以我一般采用简易的方法：即将样品
点在中央，然后用尖头的滴管源源不断的向圆心滴加流动相的。

样品会分出不同的同心圆
而得到分离。

这样的好处有三：（1）只要操作小心，各个同心圆真的就非常圆，即不会
出现线性层析中的边缘效应等。

（2）分离效果更好，拖尾现象小于线性层析。

（3）由于
圆心式展开的Rfc是线性展开的Rf的平方根，要大于线性展开的Rf，所以分的更开。

弊
端在于将各个组分从板上刮下的时候需更小心才不会使之混杂。

15. 当展开剂极性差别很大时，特别是极性大的成分所占比例很小时，往往会出现溶
剂脱混现象。

在这种情况下，展开槽饱和与不饱和差别没有显著性差异，薄层板上往往
会出现类似分层的现象，所以只有换展开系统来调整。

16. 甲醇用量较小，而甲醇又易挥发，容易产生边缘效应，要特别注意展开剂的平衡
和层析缸的密封。

17. 如果经过一次展开后,展开槽内仍剩下足够的展开剂,可以展开第二块板子吗？
个人认为最好不要。

一般来说为得到较好的分离效果，应先饱和一下，第二次使用如
果还要饱和就会造成另一侧残留的展开剂附着在板子上，造成影响。

而且有机溶剂一般较
易挥发。

18. 自己手铺的薄层板怎么都没有买来的高效板好用，用过之后也可以用极
性大些的展开剂将展开的点，二次展开跑过，这样就可以重复利用了。

显色：
19. 药典：显色装置喷雾显色要求用压缩气体使显色剂呈均匀细雾状喷出；浸渍显
色可用专用的玻璃器皿或用适宜的玻璃缸代替；蒸气熏蒸显色可用双槽玻璃缸或适宜大小
的干燥器代替。

20. 说关于薄层板加热变黑的问题，其实很容易解决：当喷完显色剂后不用在放烘箱
里烘了，可以用电吹风在板子背面吹吹就能显色了。

我们实验室里一般都采用此法，简便、快洁．如果一非想使用烘箱烘的话，一定要用带玻璃窗的，当看到显色了就取出，不然不
好控制显色时间，时间过长，CMC容易碳化变黑。

21. 根据我的经验，薄层版变黑与CMC－Na的浓度过大有关，如果你留意的话，你会发现，当显色剂中有浓硫酸时，加热时
间稍长就会变黑（其他显色剂是没事的），我老师说这是因为浓硫酸把CMC－Na炭化了，
其实这种情况你只要适当降低CMC-Na的浓度就可以了，当然如果不加CMC-Na的话容易把
板弄破。

22. 显色剂：称取100mgDC红色19号（染料索引号No 45170）溶于150ml二乙醚、
70ml 95％乙醇和15ml水。

此溶液可保存一周。

薄层板喷布显色剂R6后，立即在366nm
下观察和记录。

问题与应用：
23. 板子会裂口，一则可能是因为硅胶的比例太大，二则可能是，板子要在常温下晾
干后，再在烘箱中活化。

如果铺完不久就在较高温度下，裂口的几率就比较高的。

24. 板铺好后，自然凉干最好，一定是要从玻板后看也是干的，注意一定要放平，最
好控制空气流动；然后再放到烘箱中活化，这样就不会有裂开的现象了；如果直接铺好
后或者只是硅胶表面是干的，放进烘箱都会有裂开的。

25. “晾干的板子放在烘箱里怎么全炸裂了，有什么方法可以避免板子炸裂。

”
你的板没有完全干透，表面看是干了，但是最中间的没有干，所以你直接放入105度
的烘箱
烘，当然会炸裂了，所以应该先用低温大约40度左右烘30分钟左右，再用105度活化，就可以解决这个问题了。

26. 板子炸裂也可能是CMC-Na中有絮状沉淀所致。

27. 但凡加了CMC的板都易烘糊，尤其是温度高于100度时，若改用不加CMC辅的水
板来作，就不会有烘糊现象，但不加CMC辅的板又太软，点样时容易点出洞，有个好办法
是将CMC的浓度调至0.1%，这样就不易烘黑的。

28. 系统适用性：如果你是做鉴别的话，薄层的系统适用性主要是做检测限和分离度。

如果你是做含量测定，比如说用薄层扫瞄法，应该做线性范围，同板精密度，异板精密度，回收率。

CMC-Na溶液的配制：
29. 药典规定CMC-Na浓度为0.2％～0.5％，实际操作中0.4％～0.5％最为实用；CMC-Na溶液的溶剂应用蒸馏水，以尽量减少污染。

30. 配制CMC-Na溶液，根据实际经验一般将溶液浓度配成0.3%，需要铺厚板可配成0.5%左右，薄板可配成0.2%即可。

CMC-Na溶解最好是自然溶解（浓度不是太高），也可
在水浴中加热促溶（用时还是过滤一下好，避免铺出的板子有麻坑）。

31. 配制CMC-Na溶液时，可以先量取好蒸馏水，再将称量好的CMC-Na均匀撒在水中，用玻璃棒搅拌，如果操作的好的话可以不用加热都能溶解的很好；当溶解完全后，应该抽
滤一下，这样铺的板子很均匀，不过滤会因为一些肉眼看不到的不溶物混入，这样铺的板
子会出现许多小颗粒；
32. 第一个关键的地方，你的CMC-Na溶液必须配制的好，放置的也要很好，完全分
层之后只能取上清液。

上清液要澄清透明，时间太长的CMC-Na可能会发黄，如果有霉菌
出现的话，绝对不能使用；
33. 如果有抽滤装置你可以直接把CMC-Na溶液滤过，就可以不必等它沉淀再取上清
液了（嘿嘿，我是急性子），还有两个好处一是节省CMC-Na溶液，二是倒滤过的CMC-Na
溶液的时候不必担心会把下层的不溶物倒出来了。

34. 在CMC-Na的溶解过程中，可以使用可进行加热操作的磁力搅拌器，大概搅拌5
小时，应该可得到满意的效果。

而且这样就可以使CMC-Na溶解，并且溶液更澄清; CMC-
Na后处理，很多人说是过滤，或者抽滤，我觉得可能速度很慢，而且又容易浪费。

我的做法是离心，5000rpm离心20min。

倒出上清液，（非常清，也同时消除了过滤过程中可能
发生的污染）。

更难能可贵的是，我可以收集下面没有充分溶解的CMC-Na。

继续加到水中，还可以配制。

35. 配制4%～5%的羧甲基纤维素（CMC）：称取CMC，溶于冷水中，边加
热边搅拌，直至成为清澈、透明的溶液。

36. 有个办法过滤CMC-Na溶液，在布氏漏斗上平铺薄薄一层脱脂棉，千万保证每个
小孔都没漏掉哦！用蒸馏水润湿脱脂棉，启动真空泵，抽紧后就可以放心大胆的倒CMC-Na 溶液了，保证滤过的溶液澄清透明，而且长时间放置不沉淀。

37. CMC溶液的浓度0.3-0.7% 比较合适，浓度高了将来显色时如果有加热过程稍不
小心板子容易发黑，浓度低了铺出来的板子不结实，轻轻一碰就掉渣，不好保存，而且点
样时会很紧张，容易出洞；
38. 先将CMC-Na溶解完全,可将溶解成所需浓度加热后超声处理,再抽滤,可很快得到
上清液 39. CMC-Na煮沸大概30分钟或更久的，其实这个过程很慢。

千分之3。

过滤一下，抽滤最
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