靛酚蓝反应测定发酵液中的氨态氮

靛酚蓝反应测定发酵液中的氨态氮
1：原理：氨在硝普纳的作用下与碱性次氯酸盐和苯酚反应生成蓝色的靛酚，氨氮摩尔浓度与靛酚的吸光度值成正比
2：材料与方法
2.1.1：仪器分光光度计，0.0001分析天平，恒温水浴锅，
2.1.2：试剂酚溶液：将
3.5克苯酚和0.040克硝普纳（亚硝基铁氰化钠。

二水）
溶解于100毫升水中避光冷藏，若颜色变绿应重新配制。

碱溶液：用少量水溶解1.8克氢氧化钠，加入4mL浓度为1moL/L
的次氯酸钠溶液。

铵标准溶液Ⅰ：将0.471g硫酸铵用水稀释并定溶至1000mL。

铵标准溶液Ⅱ：将Ⅰ用水稀释10倍
2.2：氨态氮的测定
按照下表配制标准溶液
取1ml如上标准溶液分别置于不同编号的试管中，于各试管分别先后加入5ml酚溶液和5ml碱溶液，每次加完后充分摇匀，迅速置于37℃水浴中反应35min。

用去1ml离子水和5ml溶液Ⅰ、5ml溶液Ⅱ作空白对照，用分光光度计在625nm处测吸光值，绘制浓度-吸光度标准曲线如图可知氨态氮质量浓度在0-7mg/L时与溶液的吸光度值有较好的线性关系。