应用ihpRNA干扰技术创制高支链淀粉马铃薯材料

应用ihpRNA干扰技术创制高支链淀粉马铃薯材料
刘玉汇;王丽;杨宏羽;余斌;李元铭;张俊莲;王蒂
【期刊名称】《中国农业科学》
【年(卷),期】2013(000)018
【摘要】[目的]创造块茎高支链淀粉或纯支链淀粉含量的转基因马铃薯材料。

[方法]以构建的由 Patatin启动子驱动的pBI121g-PgABI为干扰表达载体，采用农杆菌介导法转化马铃薯优良品种甘农薯2号。

用PCR、Southern blotting、半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR技术检测转基因植株，并对转基因植株的微型薯进行淀粉含量的测定。

[结果]通过农杆菌介导法获得10个转基因株系。

PCR和Southern杂交结果证明，目的基因已被整合到基因组中，通过半定量RT-PCR分析表明，转基因株系中GBSSI的表达均受到明显抑制，且在6个转基因株系中检测不到mRNA的表达。

进一步通过real-time PCR分析表明，转基因株系中GBSSI的mRNA沉默效率为66.27%-93.53%；转基因株系微型薯的淀粉含量也发生明显变化，其支链淀粉含量高达90.16%-98.84%，比对照高出10.31%-20.92%。

转基因株系 GBSSI的 mRNA 沉默效率与支链淀粉含量呈显著正相关（r=0.937， P<0.01）。

[结论]采用ihpRNAi技术可有效抑制马铃薯块茎中内源GBSSI表达，获得高支链或纯支链淀粉含量的马铃薯材料。

【总页数】8页(P3750-3757)
【作者】刘玉汇;王丽;杨宏羽;余斌;李元铭;张俊莲;王蒂
【作者单位】甘肃农业大学农学院/甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室，兰州730070; 甘肃省干旱生境作物学重点实验室，兰州730070;甘肃农业大学生
命科学技术学院，兰州730070;甘肃农业大学农学院/甘肃省作物遗传改良与种质
创新重点实验室，兰州730070;甘肃农业大学农学院/甘肃省作物遗传改良与种质
创新重点实验室，兰州730070; 甘肃省干旱生境作物学重点实验室，兰州730070;甘肃农村发展研究院，兰州730070;甘肃农业大学农学院/甘肃省作物遗
传改良与种质创新重点实验室，兰州730070; 甘肃省干旱生境作物学重点实验室，兰州730070;甘肃农业大学农学院/甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室，
兰州730070; 甘肃省干旱生境作物学重点实验室，兰州730070
【正文语种】中文
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