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乳汁检查
乳中细胞学检查法
1. CMT(加利福尼亚乳房炎检测法):
原理:
使⽤阴离⼦表⾯活性物质如烷基或烷基硫酸盐破坏乳中的体细胞,释放其中的蛋⽩质,蛋⽩质与试剂结合沉淀或凝胶。
细胞中聚合的DNA是CMT产⽣阳性反应的主要成分,乳中体细胞数越多,释放的DNA越多,产⽣的凝胶就越多,凝结就越紧密。
试剂:
烷基硫酸钠(或烷基烯丙基硫酸钠、烷基硫酸钾、烷基烯丙基硫酸钾)30—50克,苛性钠15克,溴甲酚紫0.1克,蒸馏⽔1000ml。
⽅法:
将2ml被检乳汁置于塑料乳房炎检验盘中,再加⼊试剂2ml缓慢摇匀10秒,
CMT法判定标准
被检乳乳汁反应判
定符
号
细胞总数
(万个/
ml)
嗜中性粒细胞
的⽐例(%)
阴性⽆变化,不出现凝块。
— 0-2 0-25可疑微量沉淀,不久既有消失的倾向。
± 15-50 30-40弱阳性部分形成凝胶状。
﹢ 40-150 40-60
阳性全部呈凝胶状,回转摇动时凝块向中央集中,停⽌
摇动时凝块呈凸凹状附于⽫底。
﹢
﹢
80-500 60-70
强阳性全部呈凝胶状,回转摇动时凝块向中央集中,停⽌
摇动时凝块仍保持原状,并固着于⽫底。
﹢
﹢﹢
500以上 70-80
酸性
pH=5.2
以下
乳汁变黄⾊,意味着细菌增多,乳糖被分解。
碱性pH=7.0以上乳汁呈深紫⾊,为接近⼲奶期。
感染乳房炎和泌乳量降低的现象。
2.过氧化氢酶法:
该法为间接测定乳中⽩细胞的⽅法,即测定乳中⽩细胞的过氧化氢酶,来推断⽩细胞的含量。
试剂:取30%的过氧化氢,配成6%~9%的过氧化氢试剂待⽤。
⽅法:将载玻⽚置于⽩⾊衬垫物上,滴加被检乳1滴,再加过氧化氢1滴,混合均匀,静⽌2分钟后观察。
过氧化氢法判断乳房炎的标准
反应判定符号
液⾯中⼼⽆⽓泡,或有⼩如针尖众泡聚集正常乳﹣
液⾯中⼼有少量⼤如粟粒的⽓泡聚集可疑乳 ±
液⾯中⼼布满或有⼤量粟粒⼤的⽓泡聚集感染乳﹢
3.苛性钠凝乳检验法
此法操作简单,但不适合检验泌乳初期及接近⼲乳期的乳。
将载玻⽚置于⿊⾊衬垫物上,加被检乳5滴,再加4%苛性钠溶液2滴(冷藏2天以内的乳样加试剂1滴即可),⽤玻璃棒或⽛签迅速搅匀,使其扩展为直径2.5㎝的圆形,并继续搅拌20-25秒观
察。
苛性钠凝乳检验法判定标准
反应判定符号
⽆变化,不出现凝乳现象。
阴性﹣
有细⼩凝块出现。
可疑 ±
出现较⼤的凝块,乳汁略微显透明。
弱阳性﹢
出现⼤凝块,⽤⽕柴棒搅动时,形成丝状凝结物,乳汁⽔样透明。
阳性﹢﹢
出现乳⽩⾊的⼤凝块,有时全部凝成⼀⼤块。
强阳性﹢﹢﹢
乳汁PH检验法
常⽤BTB法(溴麝⾹草酚蓝)
试剂:47.4%⼄醇500ml加⼊BTB 1克,再加5%苛性钠溶液1.3-1.5ml,混合均匀成为微带绿⾊的溶液即为BTB试剂。
⽅法:
试管法:⾸先在10ml试管中加⼊BTB 1ml,再加被检乳5ml,然后再沿试管壁缓缓加⼊BTB试剂 1ml,观察被检乳与试剂接触⾯的变化。
玻⽚法:将载玻⽚置于⽩⾊衬垫物上,滴加被检乳1滴,再加BTB试剂1滴,混合,观察。
BTB实验判断标准
颜⾊反应 PH判定符号
黄绿⾊ 6-6.5正常乳﹣
绿⾊ 6.6可疑乳 ±
蓝绿⾊⾄青绿⾊ 6.6以上感染乳﹢。