10种杀菌剂对猕猴桃果实采后青霉病菌的室内毒力测定

生 物 灾 害 科 学 2021，44(1):1­4
Biological Disaster Science ，Vol. 44，No. 1，2021 DOI ：10.3969/j.issn.2095­3704.2021.01.01 收稿日期：2021­01­05 修回日期：2021­02­10
基金项目：江西省果蔬采后处理关键技术及质量安全协同创新中心项目（JXGS­03）和江西省自然科学基金项目（20192
BAB204018）
作者简介：安晓霞（1993—），女，硕士生，主要从事果实采后生理研究，*****************；*通信作者：陈明，博士，
副教授，*****************.cn 。

安晓霞, 张亚男, 陈秀, 等. 10 种杀菌剂对猕猴桃果实采后青霉病菌的室内毒力测定[J]. 生物灾害科学, 2021, 44(1):1­4.
10 种杀菌剂对猕猴桃果实采后
青霉病菌的室内毒力测定
安晓霞，张亚男，陈 秀，罗震宇，杨雪珍，王 强，向妙莲，陈 明
* （江西农业大学 农学院/江西省果蔬采后处理关键技术与质量安全协同创新中心/江西省果蔬保鲜与无损检测重点实 验室，江西 南昌 330045）
摘要：【目的】扩展青霉是猕猴桃的重要病害之一，严重影响品质与产量。

通过试验，测定 10 种杀菌剂对猕 猴桃果实采后青霉病菌 （Penicillium expansum ） 的毒力。

【方法】 利用牛津杯法测定不同种杀菌剂对 P . expansum 的毒力。

【结果】所供 10 种杀菌剂对 P . expansum 均有一定的抑菌作用，250 g/L 丙环唑、95%肟菌酯 WG 、 96%戊唑醇 WP 、40%双胍三辛烷基 EC 、95%苯醚甲环唑 WP 、50%咪鲜胺 WP 、95%多菌灵 SC 、0.5%申嗪霉 素EC 、 500 g/L 噻菌灵WP 和95%甲基硫菌灵WP 的EC 50 分别为0.181 6、 0.389 2、 0.615 4、 0.773 6、 0.910 6 mg/kg 、
1.241 9、9.273 2、15.754 0、31.376 0 和 37.879 1 mg/kg ，实验结果表明 250 g/L 丙环唑抑菌效果最好，95%甲 基硫菌灵 WP 毒力最弱。

【结论】研究通过杀菌剂抑菌效果筛选可为猕猴桃果实采后青霉病的防治提供理论依 据和技术参考。

关键词：猕猴桃青霉病；采后贮藏；杀菌剂；室内毒力测定
中图分类号：S763.11；S663.4 文献标志码：A 文章编号：2095­3704（2021）01­001­04
Indoor Toxicity Test of Ten Kinds of Fungicides Against
Penicillium expansum in Kiwifruit
AN Xiaoxia, ZHANG Ya’nan, CHEN Xiu, LUO Zhenyu,YANG Xuezhen,
W ANG Qiang, XIANG Miaolian, CHEN Ming
* (Collaborative Innovation Center of Postharvest Key Technology and Quality Safety of Fruits and Vegetables in Jiangxi Province, Jiangxi Key Laboratory for Postharvest Technology and Non­destructive Testing of Fruits & Vegetables, College of Agronomy, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045, China)
Abstract: [Objective] Penicillium. expansum is one of the important diseases of kiwifruit, which seriously affects the quality and yield of kiwifruit. Indoor toxicity test of 10 fungicides against P. expansum in kiwifruit was determined. [Methods] The Indoor toxicity test of different fungicides against P. expansum was carried out with oxford cup method. [Results] The results showed that all the 10 fungicides had certain inhibition effect on P. expansum and 250 g/L. The EC 50 of 250 g/L Propiconazole, 95% Trifloxystrobin, 96% Tebuconazole, 40% Iminoctadine tris, 95% Difenoconazole, 95% Prochloraz, 95% Carbendazim, 0.5% Phenazine­1­carboxylic acid, 500 g/L Probenazole and 95% Thiophanate­methyl were
·2· 生 物 灾 害 科 学 第 44 卷第 1 期
0.181 6, 0.389 2, 0.615 4, 0.773 6, 0.910 6, 1.241 9, 9.273 2, 15.754 0, 31.376 0 and 37.879 1 mg/kg respectively. Propiconazole had the best inhibition effect while 95% Thiophanate­ methyl was the weakest one. [Conclusion] In this study, the screening of antibacterial effects of fungicides could provide a theoretical basis and technical reference for the prevention and control of blue mold in postharvest kiwifruit.
Keywords: kiwifruit blue mold; postharvest storage; fungicides; indoor toxicity test
【研究意义】猕猴桃（Actinidia chinensis Planch）隶属猕猴桃科（Actinidiaceae）的野生落叶植物， 原产于我国，果实皮薄多汁、营养丰富，风味浓郁，是人们喜爱的水果之一 [1­2] 。

猕猴桃为呼吸跃变型浆 果，采后贮藏极易发生呼吸跃变，易被病原菌侵染而造成果品品质下降，果实腐烂，缩短货架期等问题 [3­4] 。

【前人研究进展】由扩展青霉（Penicillium expansum）引起的猕猴桃青霉病是猕猴桃果实成熟期和 釆后贮藏的重要病害之一 [5­6] ，不仅导致果实腐烂变质，对我国猕猴桃产业造成严重经济损失，而且其分 泌产生的展青霉素（Patulin, PAT）是一种神经毒物，具有致畸性和致癌性，给食品安全带来潜在威胁 [6­7] 。

青霉病菌（P. expansum）主要通过皮孔和果皮伤口侵染果实，破坏细胞膜的完整性，促进乙烯的释放 [8­9] ， 加剧腐烂，果实贮运期间主要通过接触进行传播。

猕猴桃青霉病初期为水渍状淡褐色圆形病斑，病部果 皮变软腐烂，扩展迅速 [10­11] 。

【本研究切入点】目前主要通过化学药剂控制猕猴桃采后青霉病，虽有一 定的抑制效果，但长期使用药剂易造成农药残留，影响果品品质，并会导致病菌抗药性，甚至破坏生态 安全，因此急需寻找高效低毒的理想替代药剂来减缓这种危害 [12] 。

【拟解决的关键问题】本实验采用牛 津杯法 [13­14] ，测定 10 种不同药剂对扩展青霉（P. expansum）的毒力，从而筛选出有效药剂，为制定猕 猴桃果实采后青霉病的防治提供理论依据和技术参考。

1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试病原菌猕猴桃青霉病菌（P. expansum）由江西农业大学农学院植物病理实验室提供。

分离 自贮藏期‘红阳’猕猴桃病果，分离纯化后-80 ℃保存，试验前活化备用。

1.1.2 培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基（Potato Dextrose Agar, PDA）：葡萄糖 20.0 g，琼脂 18.0 g， 马铃薯 20 g，蒸馏水 1 000 mL。

1.1.3 供试药剂供试药剂共 10 种（表 1），由江西农业大学农学院植物保护系农药实验室提供。

表 1 10 种供试药剂
序号 药剂 通用名 剂型
1 250 g/L 丙环唑 Propiconazole EC
2 95%肟菌酯 Trifloxystrobin SC
3 96%戊唑醇 Tebuconazole EC
4 40%双胍三辛烷基 Iminoctadine tris WP
5 95%苯醚甲环唑 Difenoconazole WG
6 50%咪鲜胺 Pyraclostrobin WP
7 95%多菌灵 Carbendazim WG
8 0.5%申嗪霉素 Phenazine­1­carboxylic acid EC
9 500 g/L 噻菌灵 Probenazole WP
10 95%甲基硫菌灵 Thiophanate­methyl WP
1.2 10 种杀菌剂对猕猴桃果实青霉病菌的室内毒力测定
采用牛津杯法 [13­14] ，测定 10 种杀菌剂对猕猴桃青霉病菌的毒力。

药剂系列浓度的配置在无菌操作 条件下进行，每种药剂配置成 7 个浓度梯度的母液。

青霉病菌（P. expansum）培养 7 d 左右用 0.9%生理
2021年第1期 安晓霞等： 10种杀菌剂对猕猴桃果实采后青霉病菌的室内毒力测定 ·3·
盐水洗脱孢子，配置成浓度为 10 6 spores/mL 的青霉孢子液；待三角瓶中 PDA 培养基（54 mL）冷却至 45 ℃左右后，每瓶培养基中加入 6 mL 孢子悬浮液，摇匀，制成含扩展青霉孢子平板；含菌平板凝固后， 将直径为 8.0 mm的牛津杯置其中心位置，每个牛津杯中加入配制好的 7 个浓度梯度的药液 25 μL，以加 入等体积的无菌水为对照，每处理重复 3 次。

置 25~28 ℃恒温培养箱内培养，逐日观察，采用十字交叉 法量取抑菌圈直径，按以下公式：抑菌率/%=（抑菌圈平均直径/培养皿直径）×100 计算各处理的抑菌圈 直径平均值及抑菌率。

以药剂质量浓度（mg/kg）对数值为横坐标（x），采用 DPS 统计软件进行统计分析，以抑菌率机率 值为纵坐标（y），绘制回归直线，求出毒力回归方程和相关系数（r），计算出 EC50。

2 结果与分析
10 种杀菌剂的测定结果如表 2 所示。

EC50 值越小，表明药剂对病菌的毒力指数越高 [13] 。

由表 2 可知， 250 g/L丙环唑EC、95%肟菌酯WG、96%戊唑醇WP、40%双胍三辛烷基EC、95%苯醚甲环唑WP、50%咪 鲜胺WP对猕猴桃青霉病菌的EC50 值较小， 分别为0.1816、 0.3892、 0.6154、 0.7736、 0.9106和1.2419 mg/kg， 而 250 g/L 丙环唑 EC 对猕猴桃青霉病菌的毒力最强，其 EC50 值为 0.181 6 mg/kg；95%多菌灵 SC、 0.5%申嗪霉素 EC 对猕猴桃青霉病菌的毒力相对弱，其 EC50 值分别为 9.273 2 mg/kg、15.754 0 mg/kg； 500 g/L 噻菌灵 WP、95%甲基硫菌灵 WP 毒性较低，EC50 分别为 31.376 0、37.879 1 mg/kg。

表 2 10 种杀菌剂对 P. expansum 的室内毒力测定结果
药剂 毒力回归方程 EC50/(mgꞏkg ­1 ) 相关系数（R） 250 g/L 丙环唑 Y=5.673 0+0.473 8x 0.181 6 0.989 7
95%肟菌酯 Y=5.364 6+0.488 7x 0.389 2 0.989 3
96%戊唑醇 Y=5.785 5+0.520 9x 0.615 4 0.978 5 40%双胍三辛烷基 Y=5.150 2+0.366 8x 0.773 6 0.968 1
95%苯醚甲环唑 Y=5.051 2+0.363 9x 0.910 6 0.989 9
50%咪鲜胺 Y=5.453 6+0.308 9x 1.241 9 0.919 2
95%多菌灵 Y=5.369 6+0.506 3x 9.273 2 0.997 9
0.5%申嗪霉素 Y=7.479 0+0.786 3x 15.754 0 0.999 2
500 g/L 噻菌灵 Y=5.905 1+0.403 4x 31.376 0 0.974 8
95%甲基硫菌灵 Y=4.868 9+0.312 7x 37.879 1 0.976 5
3 结论与讨论
本试验测定了10 种杀菌剂对P. expansum 的毒力，结果表明，供试的10 种杀菌剂对P. expansum 均有一 定的抑菌活性。

250 g/L丙环唑EC、95%肟菌酯WG、96%戊唑醇WP 和40%双胍三辛烷基EC 对猕猴桃青 霉病菌都具有较高的毒力， EC50 均小于1.0 mg/kg， 其中250 g/L丙环唑EC 的EC50 值最低， 为0.1816 mg/kg， 可以考虑与 95%肟菌酯 WG、96%戊唑醇 WP、40%双胍三辛烷基 EC、95%苯醚甲环唑 WP、50%咪鲜胺 交替使用，提高田间防治效果。

本试验中，95%甲基硫菌灵 WP、500 g/L 噻菌灵 WP 和 0.5%申嗪霉素 EC 对 P. expansum 抑菌活性较低，其 EC50 分别为 37.879 1，31.376 0，15.754 0 mg/kg，说明 P. expansum 可能已经对上述杀菌剂产生了抗药性。

甲基硫菌灵等杀菌剂广泛应用于果蔬采后病害防治当中，但因其 作用位点单一，长期使用同一种杀菌剂，抗药性问题越来越严重。

因此，亟需深入研究 P. expansum 对甲 基硫菌灵等杀菌剂的抗性水平。

猕猴桃果实采后青霉病的防控可通过低温冷藏 [15] 和粘红酵母处理 [16] 等多种方式，目前主要通过化学 杀菌剂控制该病害。

因单一化学杀菌剂重复使用的局限性，研究者建议筛选多种杀菌剂交替或者复配使 用以维持良好的防治功效。

此外，本试验 10 种杀菌剂对 P. expansum 室内毒力测定结果，仅限于在离体
·4· 生 物 灾 害 科 学 第 44 卷第 1 期
条件下上述杀菌剂对猕猴桃青霉病菌的直接活性，尚不能反映杀菌剂的渗透能力，所以不同杀菌剂对猕 猴桃果实采后青霉病防控的贮藏试验需待后续进一步验证。

参考文献：
[1] Pan L Y, Zhao X Y, Chen M, et al. Effect of exogenous methyl jasmonate treatment on disease resistance of postharvest
kiwifruit[J]. Food chemistry, 2020, 305, 125483.
[2] 牛佳佳, 袁云凌, 鲁云风, 等. 冷藏条件下不同保鲜处理对'金桃'猕猴桃果实品质的影响[J]. 河南农业科学, 2020,
49(12):115­123.
[3] 孟文俊, 王增池. 猕猴桃鲜果采后贮藏保鲜研究进展[J]. 现代农村科技, 2020(4):107­109.
[4] 邵宝林, 刘露希, 宿白玉, 等. 猕猴桃储藏期病原真菌的分离与鉴定[J]. 中国植保导刊, 2020(6):17­21.
[5] 程小梅, 彭亚军, 杨玉, 等. 猕猴桃青霉病病原菌鉴定及中草药提取物对其抑菌效果[J]. 植物保护, 2018, 44(3):
186­189.
[6] 段腾飞, 李昭, 岳田利, 等. 反式­2­己烯醛对猕猴桃贮藏过程扩展青霉生长的抑制作用[J]. 农业工程学报, 2019, 35(2):
301­309.
[7] 吴凤琪, 岳振峰, 张毅, 等. 食品中主要霉菌毒素分析方法的研究进展[J]. 色谱, 2020, 38(7):759­767.
[8] 彭慧, 龚迪, 魏亚楠, 等. 扩展青霉侵染苹果果实膜磷脂代谢的变化[J]. 食品科学, 2020, 1­14.
[9] Li B, Chen Y, Zhang Z Q, et al. Molecular basis and regulation of pathogenicity and patulin biosynthesis in Penicillium
expansum[J]. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety, 2020, 19(6):3416­3438.
[10] 陈越, 李树成, 赵显阳, 等. 不同杀菌剂对梨果实采后青霉病菌的室内毒力测定[J]. 生物灾害科学, 2019, 42(2):8­10.
[11] 董汉松. 植病研究法[M]. 北京: 中国农业出版社, 2012.
[12] 谭才邓, 朱美娟, 杜淑霞, 等.抑菌试验中抑菌圈法的比较研究[J]. 食品工业, 2016, 37(11):122­125.
[13] 沈晋良. 农药生物测定[M]. 北京: 中国农业出版社, 2013.
[14] 张穗. 杀菌剂生物测定技术[J]. 植物保护, 1999(3):38­40.
[15] 张群, 葛可达, 张维, 等. 1­MCP 结合低温贮藏对猕猴桃采后品质的影响[J]. 湖南农业科学, 2020, 49(3):69­74.
[16] 雷琼, 刘颖沙, 李国秀. 粘红酵母对猕猴桃贮藏期青霉病的抑制效果[J]. 贵州农业科学, 2020, 48(5):81­84.。