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病毒REV_与ALV-J_经鸡胚垂直传播共感染对雏鸡的协同致病性

病毒REV_与ALV-J_经鸡胚垂直传播共感染对雏鸡的协同致病性

收稿日期:2023-06-27基金项目:广东省重点领域研发计划(2020B020222001)作者简介:马凌遥(1998-),女,在读硕士生,研究方向为预防兽医,E-mail:*****************通信作者:常爽(1981-),女,博士,副教授,研究方向为家禽免疫抑制性疾病,E-mail:*********************;蔡曼珊(1980-),女,硕士,兽医师,研究方向为家禽疾病控制与净化,E-mail:***************广东农业科学2023,50(10):141-148Guangdong Agricultural SciencesDOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2023.10.015马凌遥,王一新,赵鹏,常爽,蔡曼珊. 病毒REV 与ALV-J 经鸡胚垂直传播共感染对雏鸡的协同致病性[J]. 广东农业科学,2023,50(10):141-148.病毒REV 与ALV-J 经鸡胚垂直传播共感染对雏鸡的协同致病性马凌遥1,王一新1,赵 鹏1,常 爽1,蔡曼珊2,3(1.山东农业大学动物科技学院,山东 泰安 271018;2.广东省农业科学院动物科学研究所/猪禽种业全国重点实验室,广东 广州 510640)摘 要:【目的】J 亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)和禽网状内皮组织增殖病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)均可通过鸡胚垂直传播,且两者在鸡胚中的自然共感染已有报道,但两者经鸡胚共感染的致病性未有研究。

建立ALV-J 与REV 垂直传播共感染的实验动物模型,研究ALV-J 与REV 垂直传播共感染的致病作用及其对禽白血病净化检测的影响,以期为推动多病原协同净化提供参考。

【方法】通过鸡胚接种方式构建分别携带ALV-J、REV 及两者共感染的雏鸡感染模型,通过孵化率、死亡率、体重、胎粪ALV-p27抗原检出率、病毒血症阳性率等指标分析REV 与ALV-J 在垂直传播中共感染的致病性。

思想政治教育科学的研究方法及其选择依据

思想政治教育科学的研究方法及其选择依据

思想政治教育科学的研究方法及其选择依据乔凯;朱平【摘要】我国思想政治教育学科自建制以来虽然涌现了很多研究成果,但在相当长一段时间学者不太重视研究方法,从而极大地制约了思想政治教育学科的科学发展.思想政治教育学应破除传统研究方法占绝对主导的局面,更多地采用定量研究和质性研究的现代社会科学研究方法.定量研究和质性研究并不是完成同一个研究问题的不同途径,二者的特征和逻辑不同,通常都适合不同的研究问题.研究方法的选择需要与研究目标、研究问题、研究者的哲学立场及其自身条件相契合.【期刊名称】《常州大学学报(社会科学版)》【年(卷),期】2013(014)005【总页数】5页(P105-108,112)【关键词】思想政治教育科学;研究方法;定量研究;质性研究;选择依据【作者】乔凯;朱平【作者单位】蚌埠医学院药学系,安徽蚌埠233030;安徽师范大学政治学院,安徽芜湖241000;安徽师范大学政治学院,安徽芜湖241000【正文语种】中文【中图分类】B026研究方法是任何一门学科的支柱之一,在某种意义上说,研究方法的“成熟程度和独特性,是判断学科独立性和发展潜力的重要标准。

无论何种学科领域,‘最伟大而艰难的奋斗是关于理论基础和研究方法的’”。

[1]中国思想政治教育学科自建制以来虽然涌现了很多研究成果,但学者不太重视研究方法,从而极大地制约了思想政治教育学科的科学发展。

有学者曾对思想政治教育研究方法的运用状况进行探讨,发现95%左右的研究论文依然停留在哲学思辨、理论建构、文献分析、经验总结等传统人文社会科学研究方法,而只有5%左右开始尝试运用科学研究方法和具有科学研究方法的意识[2],能够规范地、合理地使用现代社会科学研究方法的更少之又少。

因此,思想政治教育作为一门学科,有哪些科学研究方法,这些研究方法各有什么特征和逻辑,如何选择合适的研究方法等问题就成为急需探讨的重要课题。

笔者不揣浅陋,试对思想政治教育科学研究方法的主要类型做概要介绍,并对研究方法的选择依据进行简要阐述,以唤醒思想政治教育学者研究方法的自觉,促进思想政治教育学科研究水平的提升。

植物遗传工程的现状--分子遗传学在植物学中的应用概况

植物遗传工程的现状--分子遗传学在植物学中的应用概况

植物遗传工程的现状--分子遗传学在植物学中的应用概况邵洪波;寇正涌;李长友;寇正杰
【期刊名称】《吉林师范大学学报(自然科学版)》
【年(卷),期】1989(000)002
【摘要】无
【总页数】4页(P61-63,60)
【作者】邵洪波;寇正涌;李长友;寇正杰
【作者单位】无
【正文语种】中文
【相关文献】
1.激光扫描共聚焦显微镜的原理及其在植物学中的应用概况 [J], 樊慧梅;仇建飞;宋志峰;杨建;马虹;魏春雁
2.创新教育在药用植物学教学中的应用初探--记药用植物学中"叶"这节课 [J], 吴朝晖
3.我国薏苡属植物学名及中名的应用现状及分析 [J], 乔亚科
4.荧光原位杂交技术及其在植物学中的应用现状 [J], 祝娟;杨颜慈
5.我国药用植物资源概况与植物学理论的应用 [J], 陈毓亨
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典型相关分析

典型相关分析

典型相关分析企业间认知差距与知识共享绩效的典型相关分析胡平波①(江西财经⼤学信息管理学院,江西南昌330013)[摘要]企业间认知状态对企业跨组织知识共享绩效形成具有重要的影响。

在构建企业间认知差距与知识共享绩效指标体系的基础上,分别运⽤主成分分析对两组指标体系进⾏融合,再通过典型相关分析法分析了企业间认知差距与知识共享绩效之间的相关关系。

结果表明:企业间认知差距的各主成分对企业间知识共享绩效形成具有明显的抑制作⽤。

因此,为了避免这种抑制作⽤,企业间需要谨慎选择知识共享合作伙伴,并充分地相互沟通与协调,尽可能缩⼩企业间认知差距,为知识共享顺利进⾏奠定基础。

[关键词]知识共享;认知差距;绩效;主成分分析,典型相关分析跨组织知识共享已成为当代企业⽣存与发展的战略选择。

但是,企业间认知差距将直接影响到知识共享绩效的形成。

但是,以往的学者更多地把知识共享绩效与企业间的协调机制相互联系,⽽在⼀定程度上忽视了企业间认知差距对知识共享影响的问题。

正是基于协调机制的重要作⽤,许多学者研究了企业间协调与合作绩效之间的关系。

例如,Uzzi(1996)研究了结构嵌⼊与企业间的合作绩效问题[1];孙国强(2003)认为企业间互动协调是⽹络组织协调效应形成的关键[2];徐和平、孙林岩、慕继丰(2004)研究了信任机制对⽹络组织治理绩效的影响[3];卢福财、胡平波(2005)论述了声誉协调机制对⽹络组织成员合作绩效的影响问题[4]。

这些⽂献对于理解企业间协调与知识共享绩效的关系具有重要意义,但是,在知识共享过程中,企业间认知差距对知识共享绩效形成具有明显地抑制作⽤。

这个问题可以从两个⽅⾯来说明:第⼀,每个企业对特定知识共享的认知状态,将决定该企业在知识共享过程中所采取的态度与⾏为⽅式,因此,认知差距将决定企业间态度与⾏为⽅式的差距,从⽽影响知识共享绩效;第⼆,企业认知具有⼀定的刚性特征,因此协调机制不可能把企业间存在的认知差距完全缩⼩为零,实际上企业间⾃始⾄终存在着认知差距,从⽽在⼀定程度上影响着知识共享绩效的形成。

怎样提高薄膜的利用率

怎样提高薄膜的利用率

怎样提高薄膜的利用率
吕云生
【期刊名称】《吉林农业》
【年(卷),期】1995(000)001
【摘要】怎样提高薄膜的利用率农膜覆盖栽培新技术,对各种作物的增产效果十
分显著,在农业生产中的应用也日趋广泛,但由于农膜利用率低,增加了生产成本。

为了进一步提高经济效益,降低生产成本,对使用后破烂程度不大的塑料薄膜,抓紧冬闲时节进行修补,为来年水稻育秧或其他作...
【总页数】1页(P16-16)
【作者】吕云生
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】S354
【相关文献】
1.浅谈提高期刊利用率:兼谈提高我院期刊利用率 [J], 刘景霞
2.论当前高职院校提高实训室利用率有关问题——以我院提高实训室利用率为例[J], 胡晓锋;周备锋;俞晓富
3.高校图书馆纸质期刊利用率现状分析与提高利用率对策——以三峡大学图书馆以例 [J], 邢红鑫;陈慧玲;周玲;刘卫华
4.科学施肥促进肥料利用率稳步提高我国肥料利用率达33% [J], 农业部新闻办公室
5.绥化推进“四化”措施提高秸秆利用率预计到年末绥化市秸秆综合利用总量将超千万吨,利用率达到67%以上 [J],
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企业策划课程案例教学的实证研究

企业策划课程案例教学的实证研究

第27卷第1期吉林农业科技学院学报Vol.27No.12018年3月Journal of Jilin Agricultural Science and Technology UniversityMar.2018企业策划课程案例教学的实证研究李富英袁熊卫卫摘 要:通过对企业策划课程案例教学效果数据的采集,利用SPSS 对学生满意度、案例教学方式、案例教学效果等数据进行了分析,有针对性地提出优化案例教学效果的对策与建议。

本课程的教学实践为企业策划课程案例教学效果的量化评价提供了有益的探索与尝试。

关键词:企业策划;实证研究;案例教学;效果评价基金项目:吉林省高等教育学会高教科研课题(JGJX2017D234);吉林农业科技学院2014教学改革项目收稿日期:2017⁃04⁃21文章编号:1674⁃7852(2018)01⁃0087⁃04作者简介:李富英,吉林农业科技学院经济管理学院副教授,硕士,研究方向:经济管理与企业策划。

(吉林 132101)企业策划是为工商管理专业学生开设的专业课,使学生掌握企业策划的基本原理和基本方法,并具备完成一般企业策划案的能力。

由于企业策划课程本身的高度实践性要求,决定了单纯依赖教师灌输式教育无法取得满意的教学效果,而引入案例教学法则是解决这一教学问题的最佳选择[1]。

由于企业策划的实践教学是需要运用案例来完成的,在教学中可以运用案例来打开学生的思维,激发学生创新意识,通过具体企业案例达到举一反三的目的,使学生能产生策划的思想火花[2]。

案例教学法可以更加有效地解决理论与实践落差,有效提升学生分析问题、解决问题的能力。

1 企业策划案例教学情况调查1.1 调查样本的基本情况吉林农业科技学院工商管理专业2014级学生开设本课程,该班级有78名学生,是大三的第一学期,采用了案例教学法。

在课程结束时,进行了问卷调查。

本次调查共计发放50份问卷,回收50份,不符合要求的4份,问卷的有效率为92%。

概率问题的计算机仿真

概率问题的计算机仿真

概率问题的计算机仿真
夏雪
【期刊名称】《东莞理工学院学报》
【年(卷),期】2009(016)003
【摘要】借助于计算机仿真,可以得到对现实问题的精确度极高的近似解.就此展开一些讨论,并引入两个计算机仿真的例子,主要采用VC++和Matlab两种软件,给出了仿真算法.以此来说明这种方法对理论教学和实际应用的结合有时是不可或缺的.【总页数】5页(P54-58)
【作者】夏雪
【作者单位】广东医学院,教学质量控制中心,广东东莞,523808
【正文语种】中文
【中图分类】TP399
【相关文献】
1.动态系统计算机仿真技术综述--计算机仿真建模 [J], 胡峰;孙国基;卫军胡
2.从两个经典的概率问题谈起——计算机对于概率问题的模拟 [J], 张群文
3.计算机仿真技术方兴未艾:九八计算机仿真会议综述 [J], 伞治
4.电力电子技术与计算机仿真软件的结合路径——评《电工电子技术:电工技术与计算机仿真》 [J], 钟文建
5.电力电子技术与计算机仿真软件的结合路径——评《电工电子技术:电工技术与计算机仿真》 [J], 钟文建
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短评:警惕橡胶条溃疡病再次流行

短评:警惕橡胶条溃疡病再次流行

短评:警惕橡胶条溃疡病再次流行作者:文衍堂李锐吴雄伟梁艳琼李建辉杨开样贺春萍来源:《热带农业科学》2018年第03期摘要根据最近有关橡胶条溃疡病的报道和实地调查,推测海南省橡胶条溃疡病存在再次流行的风险。

建议普查,以便对病害的发展趋势作出科学评估。

关键词橡胶树;条溃疡病;流行中图分类号 S431 文献标识码 A Doi:10.12008/j.issn.1009-2196.2018.03.001Abstract According to its recent reports and field survey, the stripe canker of rubber tree may occur again in rubber plantations in Hainan. A general survey of the stripe canker in rubber plantations is suggested to evaluate the development trend of the stripe canker of rubber tree.Keywords rubber tree ; stripe canker ; epidemic橡胶条溃疡病是疫霉菌侵染橡胶树割面导致溃烂的重要病害。

20世纪60~70年代,海南垦区发生大流行,仅1970年因橡胶条溃疡病而导致350万株橡胶树溃烂,约占当年开割胶树的12%,损失惨重[1]。

20世纪70年代末以来,各农场认真贯彻“一浅四不割”的冬季防病割胶措施,加上合理施用杀菌剂和乙烯利增产剂,病害得到控制,近30年来在海南垦区没有发生流行。

李增平等[2]认为,橡胶条溃疡病因得到有效控制而变为次要病害。

然而2008年和2012年在西培农场和白沙县元门乡均有橡胶条溃疡病发生,其中西培农场某林段发病率达20%[3-5]。

笔者根据上述报道,于2017年12月和2018年1月在儋州市宝岛新村四周的几个橡胶林段进行查询,发现一些林段2015年的割面上发生过橡胶条溃疡病,现已成为老病灶,即溃烂边缘长出愈伤组织但尚未愈合(图1、2),未长出愈伤组织之处称新病灶。

喷施KH_(2)PO_(4)对孕穗期低温胁迫下小麦叶片抗氧化特性与幼穗冻害的影响

喷施KH_(2)PO_(4)对孕穗期低温胁迫下小麦叶片抗氧化特性与幼穗冻害的影响

麦类作物学报2021 ,41(5): 585 — 593J o u r n a l of T r itic e a e C r o p s doi:10.7606/j.issn. 1009-1041.2021.05.09网络出版时间:2021-03-04网络出版地址:http s://k n s. cnki. net/kcms/detail/61. 1359. S. 20210304. 1056. 010. html喷施k h2p o4对孕穗期低温胁迫下小麦叶片抗氧化特性与幼穗冻害的影响苏慧,李金鹏,胡燕美,朱玉磊,李金才,宋有洪(安徽农业大学农学院,安徽合肥230036)摘要:为探讨低温胁迫发生前叶面喷施磷酸二氢钾(KH2P04 )对小麦小穗发育及旗叶生理特性的调节作用,以烟农19(冬性,低温不敏感型)和新麦26(半冬性,低温敏感型)为材料.利用盆栽试验.在小麦孕穂期于人工气候模拟箱内进行低温(2 X:和一2 'C)胁迫,并在低溫处理前叶面喷施0. 2%KH^PO,溶液•低温 结束后分析了小麦幼穗冻害发生情况、小穗细胞结构、糖含量和旗叶生理特性的差异。

结果表明.一2r下小 麦孕穗期冻害发生率显著高于2 'C;不同低温处理下喷施KH2P〇4均显著降低冻害的发生率,一2 'C下喷施效果好于2 X;;喷施K H2P(),后小麦旗叶叶绿素含量及超氧化物歧化酶(S()D)、过氧化物酶(P()D)和过氧化氢酶(C A T)活性均显著提高,丙二醛(MDA)含量显著降低;喷施KH2PO<有效减轻了小麦幼穗的冻害程度和保持上部小穗内部器官完整性,显著提高结实率.降低上部小穗蔗糖和果糖含量•增加还原糖含量。

综上所述,小麦孕穗期低温发生前通过叶面喷施KHzPC^能有效增强旗叶抗逆性,减轻低温对小麦小穗造成的伤害.有利于穗部结构完整和产量形成,可作为黄淮海麦区孕穗期小麦防御倒春寒的有效措施。

热处理对β-伴大豆球蛋白二级结构的影响

热处理对β-伴大豆球蛋白二级结构的影响
2 0 1 3 年第O 4 期
吉 林 农 业
J I LI N A GRI CULTURE
NO . 0 4。 2 01 3
( 总 第3 0 1 期)
( C u mu l a t i v e t y N O. 3 0 1 )
热处 理对 l 3 一 伴 大豆球蛋 白二级结构 的影响
李岩涛 ,秦贵信 ,龙 国辉
( 吉林 农 业大 学 ,吉林 长春 1 3 0 1 1 8 )
பைடு நூலகம்
摘 要 : 文章 旨在研 究热 处理 对 i 3 一 伴 大 豆球 蛋 白的 二 级 结 构 的影 响 ,通 过傅 里叶 变换 红 外 光 谱 ( F T I R ) 结 合S D S — P A G E 凝 胶 电泳 , N a t i v e — P A G E 凝 胶 电泳 研 究 了B一 伴 大豆 球蛋 白在 热 处理 下 的二 级 结构 变化 。研 究结 果 表 明, 在6 0 ℃~1 0 0 ℃处理 下 , 随温度 升 高, B 一 伴 大豆球 蛋 白的二 级 结构 中的 Q 一 螺 旋 呈下 降趋 势 , B折 叠总体 呈 升 高趋 势 , B一 转 角呈 下 降趋 势 ,无规 卷 曲呈 升 高趋 势 。 关 键词 : 大豆 一 伴球 蛋 白; 温度 :S D S ~ P A G E :N a t i v e — P A G E ;傅 里叶 变换 红外 光谱 ;二 级结 构 中图 分类 号 :¥ 5 6 5 . 1 文献 标识 码 :A 文 章编 号 :1 6 7 4 — 0 4 3 2( 2 0 1 3 )一 0 4 — 0 0 7 9 — 2 基 金项 目: 本文 系吉林 省科 技厅 青 年 基金项 目,项 目编 号 :2 0 1 i 0 1 1 1 9 。 ‘

龙珠软膏治疗小儿包皮粘连效果观察论文

龙珠软膏治疗小儿包皮粘连效果观察论文

龙珠软膏治疗小儿包皮粘连效果观察【摘要】目的观察龙珠软膏在包皮粘连分离治疗时的消炎止痛及恢复效果。

方法将包皮粘连分离的219例患儿随机分为观察组(112例)和对照组(107例),观察组在粘连分离后于包皮及龟头的创面外涂龙珠软膏,对照组外用红霉素软膏。

结果观察组消炎止痛及创面恢复效果明显优于对照组(p<0.05)。

结论龙珠软膏可有效减轻或消除包皮粘连分离治疗导致的疼痛,并有明显的抗感染能力,有效地促进创面的愈合,缩短治疗时间,减轻患儿的痛苦。

【关键词】龙珠软膏;包皮粘连;消炎;止痛;创面恢复doi:10.3969/j.issn.1004-7484(x).2013.06.497 文章编号:1004-7484(2013)-06-3266-01龙珠软膏具有清热解毒、消肿镇痛、祛腐生肌功效,已用于治疗多种皮肤感染性疾病及皮肤浅表性烧伤患者,疗效显著。

为了观察龙珠软膏(武汉马应龙药业集团有限公司生产)在小儿包皮粘连分离中的优势,我们对本院219例小儿包皮粘连的治疗资料进行分析。

结果如下:1 资料与方法1.1 一般资料自2009年——2012年门诊收治的包皮粘连患儿219例,新生儿及婴儿期(小于1岁)58例(26.48%),幼儿期(1-3岁)98例(44.74%),学龄前期(3-7岁)50例(22.83%),学龄期(7-12岁)13例(5.95%),随机分为两组,即观察组及对照组。

1.2 方法观察组在包皮粘连分离前后用碘伏稀释液(2%碘伏和0.9%生理盐水按1:1配制)消毒,擦干后外涂龙珠软膏,将龟头及包皮内翻涂薄薄的一层,然后翻下包皮,每日一次,包皮肿胀时,不要勉强上翻包皮,避免水肿的包皮嵌顿发生龟头坏死;对照组用同样的操作后,外用红霉素软膏。

2 结果(见表1)表1 两组疗效比较组别n痊愈(例)无效(例)有效率治愈平均时间(天)疼痛时间(天)感染数(例)包皮水肿平均天数观察组112109397.32%5322对照组107961189.72%76105(p<0.05)。

加强我省高校知识产权保护的对策

加强我省高校知识产权保护的对策

加强我省高校知识产权保护的对策
曾晓红;罗伟涛
【期刊名称】《湖南工业大学学报》
【年(卷),期】2002(016)003
【摘要】高等学校的知识产权保护是高等教育工作体系中的重要部分.在分析了我省高校知识产权保护工作的现状后,对新世纪加强知识产权保护意识、强化管理等方面提出了相应的对策.
【总页数】2页(P68-69)
【作者】曾晓红;罗伟涛
【作者单位】株洲工学院,湖南,株洲,412008;株洲工学院,湖南,株洲,412008
【正文语种】中文
【中图分类】DF523
【相关文献】
1.知识产权国际化与我省知识产权保护--我国加入WTO后,云南知识产权工作面临的问题及对策 [J], 许惠然
2.关于加强高校知识产权保护的调查研究r——以天津市高校为例 [J], 王瑾;宋巍;徐胜球
3.我省高校学生知识产权保护意识的现状及对策 [J], 钱晓峰;曹耀艳;袁莹;
4.加强我省农业知识产权保护迎接入世挑战 [J], 王平达
5.加强科技知识产权保护和管理——科技部部长徐冠华就加强知识产权保护和管理答记者问 [J], ;
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对双嘧达莫的再探讨

对双嘧达莫的再探讨

对双嘧达莫的再探讨
贺春萍
【期刊名称】《中国药业》
【年(卷),期】1997(000)012
【总页数】1页(P46-46)
【作者】贺春萍
【作者单位】河南省南阳油田职工医院
【正文语种】中文
【中图分类】R972
【相关文献】
1.HPLC法测定复方双嘧达莫缓释胶囊中阿斯匹林和双嘧达莫的含量 [J], 陆宇;王辉
2.RP-HPLC法测定复方双嘧达莫缓释片中双嘧达莫与阿司匹林的含量 [J], 杜云;陆步实;陆军
3.复方双嘧达莫缓释片中阿司匹林和双嘧达莫的含量测定 [J], 张丽娜;钟慧琼;罗邻涛;和炎
4.阿司匹林双嘧达莫缓释胶囊中双嘧达莫的体内外相关性研究 [J], 靳玲;王艳娇;何仲贵;
5.复方双嘧达莫缓释片中双嘧达莫与阿司匹林含量的RP-HPLC测定 [J], 易军;张蜀;谭载友
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毛竹ABCG基因鉴定及其表达模式研究

毛竹ABCG基因鉴定及其表达模式研究

核农学报2023,37(5):0917~0926Journal of Nuclear Agricultural Sciences毛竹ABCG基因鉴定及其表达模式研究李紫阳杨克彬朱成磊刘燕郭栋肖晓燕高志民 *(国际竹藤中心竹藤资源基因科学与基因产业化研究所,国家林业和草原局/北京市共建竹藤科学与技术重点实验室,北京100102)摘要:ATP结合盒转运蛋白G亚家族(ABCG)在植物体内的物质运输过程中发挥着重要作用。

为探究毛竹(Phyllostachys edulis)中ABCG s的分子特征、表达模式及转录因子对PeABCG15的调控关系,本研究利用生物信息学方法鉴定毛竹ABCG基因家族成员,对其基因结构、编码蛋白的理化性质和系统进化等进行系统分析,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对毛竹ABCG基因表达模式进行研究,借助酵母单杂交验证转录因子与ABCG基因的调控关系。

结果表明,在毛竹基因组中共鉴定到77个ABCG基因(PeABCG1~PeABCG77),其启动子中含有多种激素和非生物胁迫响应元件,其中脱落酸响应元件ABRE 最多,出现在74个基因的启动子中。

系统进化分析发现,PeABCGs分为白棕色复合体(WBC)和多效性耐药复合体(PDR)两个亚组,与水稻的亲缘关系较近。

qRT-PCR结果显示,在脱落酸(ABA)处理后,7个与ABA运输相关的PeABCG s中有6个呈上调表达趋势,而未检测到PeABCG34表达;在低温处理条件下,7个PeABCG s均受到诱导表达;在干旱处理条件下,有2个PeABCG s的表达受到抑制,其余基因的表达均受到不同程度的诱导。

另外,随着竹笋木质化程度增加,PeABCG15呈持续上调表达趋势,并与木质素合成调控转录因子基因PeKNAT3和PeMYB42的表达趋势一致。

酵母单杂交试验证实,PeKNAT3和PeMYB42均能与PeABCG15的启动子结合。

由此表明,PeABCG s参与毛竹抗逆可能存在ABA介导和非介导两种方式,其中PeABCG15受ABA诱导,且可能通过促进木质素合成参与毛竹抗逆。

高中化学问题情境创设实践研究

高中化学问题情境创设实践研究

高中化学问题情境创设实践研究发布时间:2021-07-15T10:54:36.533Z 来源:《教学与研究》2021年第55卷第8期作者:刘琴[导读] 作为一门理科类学科,高中化学具有抽象性和逻辑性刘琴重庆市江津中学校摘要:作为一门理科类学科,高中化学具有抽象性和逻辑性,学生在掌握和理解上可能存在一定的难度,造成学生学习效果不理想的现象。

为提高课堂教学质量,教师需要抓住学生的心理特点,选择学生乐于接受的教学方式帮助学生掌握。

创设情境是一种较为常见的教学手段,情境创设的目的在于帮助学生张,本文主要从实验、科技以及语言三方面讨论如何创设符合学生发展的教学情境,实现高中化学教学质量的提升。

关键词:高中化学;问题情境相较于初中的科学来说,高中化学内容更多,公式更复杂,学生在掌握高中化学知识时也需要花费更多的时间和精力。

作为学生的引导者,教师需要正确指导学生学习,通过创设合理的教学情境激发学生的兴趣,调动学生的热情,使学生愿意自发参与到教学活动中,从而提高高中化学教学质量。

考虑到化学的逻辑性和抽象性,教师需要合理科学创设教学情境,增加学生的体验感,进而提高学生的学习效果。

一、借助实验创设问题情境化学是一门以实验为基础的学科,高中化学教材中包含大量的实验内容,教师需要借助化学实验创设教学情境。

化学实验的引入有利于吸引学生的注意力,相较于传统的直接教学式课堂,丰富多彩的实验现象更能抓住学生的眼球。

因此,教师需要合理利用实验,借助实验创设教学情境,促使学生快速进入学习状态,从而提高学生的学习效果。

【1】例如:在“碱金属”这一内容的教学中,教师可以借助化学实验创设教学情境,帮助学生掌握碱金属的原子结构以及性质。

教师取一小块钾,擦干表面的煤油后放在石棉网上加热,观察现象。

然后指导学生观察反应,并与钠和氧气的反应做比较。

通过观察、分析和归纳,学生掌握碱金属的性质,以及相关的反应。

如碱金属与水的反应化学方程式为,。

通式可以归纳为。

载体MCM-41对Tb(aspirin)3phen发光性能的影响

载体MCM-41对Tb(aspirin)3phen发光性能的影响

1 实验部分
十六 烷基 三ห้องสมุดไป่ตู้甲基 溴化 铵 ( T ) A. C AB ( R,北 京 西 中化工
厂) 正硅 酸 乙酯 ( O ) C P ; TE S ( . ,沈 阳化学试 剂一厂 ) ;乙二
活性剂为模板 , 合成 出孔道结构 和尺寸精确 可调的 M4 S介 1 孑 材料L ,引起 了众多 研究者 的关注 ,其组 装化学 也成 为 L 1 ] 近年来功能材料最 热 门的前沿 研究领 域之一 [ ] 3 。由于小 尺
文献标识码 :A D I 1 . 94 is 0 00 9 (O 8 1—4 80 O : 0 3 6  ̄.sr 10 —53 2 0 )12 9 —5 u
中图分类号 : 8 . 04 2 3
引 言
19 年美 国 Mo i公 司 Krse Vatl B c 92 bl . g , rui ek等用 表面 e ,
E DA环境 中 , 0 8gC AB E S和蒸馏水混 将 . T ,4mL T O
主一 客体异质纳米微粒 或量 子线 复合组 装 体在微 传感 器 、 光 开关 、 信息存储介质 、光电调制和转换 器等领域有 着 良好 的
应用前景[1 。 53 但受 MC 4 特 殊结构 的影响 , 土配合 物 _] M-1 稀
第 2 卷 , 1 期 8 第 1
2 08年 11月 0

S e to c p n p crlAn lss p cr s o y a d S e ta ay i







V 1 8N .1p29—52 o 2 , o1 ,p48 0 . 2
No e b r 0 8 v m e ,2 0

类弹性蛋白多肽-红色荧光蛋白融合蛋白的表达纯化及细胞相容性

类弹性蛋白多肽-红色荧光蛋白融合蛋白的表达纯化及细胞相容性

第22卷第1期北华大学学报(自然科学版)Vol.22No.12021年1月JOURNAL OF BEIHUA UNIVERSITY(Natural Science)Jan.2021文章编号:1009-4822(2021)01-0042-05DOI :10.11713/j.issn.1009-4822.2021.01.008类弹性蛋白多肽-红色荧光蛋白融合蛋白的表达纯化及细胞相容性刘㊀宁,崔梅英,王明月,杨泽斌,王㊀浩,毛㊀禹,方楷漪,夏㊀薇,关新刚(北华大学医学技术学院,吉林吉林㊀132013)摘要:目的㊀构建携带红色荧光蛋白(mCherry)标签的类弹性蛋白(ELP)原核表达载体,并表达纯化ELP-mCherry 融合蛋白,探讨ELP-mCherry 融合蛋白与细胞的相容性.方法㊀对利用限制性内切酶Xba I 和Xho I 对mCherry 质粒和pET28a-ELP 载体同时进行双酶切,将酶切产物回收㊁连接并转化DH5α大肠杆菌感受态细胞,构建重组质粒pET28a-ELP-mCherry;将重组质粒转化到BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中,诱导表达ELP-mCherry 融合蛋白;利用可逆转变循环(ITC)法对ELP-mCherry 融合蛋白进行纯化;通过MTT 法探讨ELP-mCherry 融合蛋白与人胚肾上皮细胞HEK293T 和小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3的细胞相容性.结果㊀DNA 测序结果显示成功构建了ELP-mCherry 原核表达载体;利用BL21(DE3)大肠杆菌表达系统成功表达ELP-mCherry 融合蛋白,通过ITC 法纯化得到了高纯度融合蛋白.MTT 结果表明:在所有ELP-mCherry 蛋白测试浓度下,HEK293T 和NIH3T3细胞存活率接近或超过100%.结论㊀成功构建ELP-mCherry 原核表达载体,成功表达并纯化得到高纯度的ELP-mCherry 融合蛋白,ELP-mCherry 融合蛋白在HEK293T 和NIH3T3细胞中具有良好的细胞相容性.关键词:类弹性蛋白多肽;红色荧光蛋白;原核表达;蛋白纯化;细胞相容性中图分类号:Q943.2文献标志码:A收稿日期:2020-03-08基金项目:吉林省科技发展计划项目(20180101213JC);吉林省人才开发资金项目(201858);吉林省教育厅科学技术研究项目(JJKH20200033KJ);吉林省卫生计生青年科技骨干培养计划项目(2017Q040);吉林市科技创新发展计划项目(201831729);北华大学青年科研创新团队项目.作者简介:刘㊀宁(1996 ),女,硕士研究生,主要从事检验诊断新技术研究,E-mail:842832918@;通信作者:夏㊀薇(1964 ),女,博士,教授,硕士生导师,主要从事检验诊断新技术研究,E-mail:xiawei4016@.Prokaryotic Expression ,Purification and Cell Compatibility ofELP-mCherry Fusion ProteinLIU Ning,CUI Meiying,WANG Mingyue,YANG Zebin,WANG Hao,MAO Yu,FANG Kaiyi,XIA Wei,GUAN Xingang(School of Medical Technology ,Beihua University ,Jilin 132013,China )Abstract :Objective To construct elastin-like protein (ELP)prokaryotic expression vector with red fluorescent protein (mCherry)tag,to purify the ELP-mCherry fusion protein and investigate the biocompatibility of ELP-mCherry protein on cells.Method mCherry plasmids and pET28a-ELP plasmids were double digested by restriction endonucleases Xba I and Xho I,which were used to construct pET28a-ELP-mCherry plasmid.The recombinant plasmids were transformed into BL21(DE3)E.coli competent cells to express ELP-mCherry fusion protein.ELP-mCherry fusion was purified by reversible transformation cycle method (ITC).The biocompatibility of ELP-mCherry protein was evaluated on human renal epithelial cells and mouse embryonic fibroblasts by MTT method.Results DNA sequencing result indicated the successful construction of ELP-mCherry plasmid,and ELP-mCherry fusion protein was acquired and purified by using BL21(DE3)E.coli system via ITC method.MTT results showed that HEK293T and NIH3T3treated with ELP-mCherry fusion protein under all tested concentration has a cell viability of100%or more.Conclusion We successfully constructed ELP-mCherry prokaryotic expression vector,and got the high purity ELP-mCherry fusion protein,ELP-mCherry protein had good cell compatibility on HEK293T and NIH3T3.Key words:elastin-like polypeptide;mCherry;prokaryotic expression;protein purification;cell compatibility㊀㊀类弹性蛋白样多肽(elastin-like polypeptide, ELP)是一种由基因工程设计合成的非免疫原性且无热原性的具有良好生物相容性的蛋白质聚合物[1-2],ELP主要是由五肽重复序列单元构成,即Val-Pro-Gly-Xaa-Gly(VPGXG),其中Xaa是除脯氨酸以外的任一种氨基酸[3-5].ELP具有可逆相变循环(Inverse transitioncycling,ITC)的特性,即温度低于其相变温度,ELP多肽以高度可溶的形式存在于水溶液中;若温度高于其相变温度,ELP开始聚集,形成不溶物聚集体,且该过程可逆[6].由于ELP具有的这种特殊性质,在大肠杆菌中高产量表达的ELP蛋白可以利用可逆相变的特性进行快速纯化[7].红色荧光蛋白(mCherry)是SHANER 等[8]将发色基团mRFP进行位点突变得到的一种单体红色荧光蛋白[9],mCherry的荧光强度高且稳定性好[10].KALIMUTHU等[11]将含有mCherry基因的慢病毒颗粒转染人间充质干细胞,表达红色荧光mCherry基因,用生物发光成像法追踪间充质干细胞在荷瘤小鼠中的迁移.在本研究中,基于ELP蛋白的独特优势及mCherry的荧光成像特性,我们构建了ELP-mCherry原核表达载体,表达纯化了ELP-mCherry 融合蛋白,探讨了其与人肾上皮细胞HEK293T和小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3细胞的相容性,为设计开发新型的荧光示踪组织工程材料奠定了基础. 1㊀材料与方法1.1㊀细胞、主要仪器和试剂pET28a-ELP和pEGFP-N1-mCherry质粒(Origene 公司,美国);限制性内切酶Xba I与Xho I(生工生物工程(上海)有限公司);大肠杆菌BL21菌株为本实验室保存菌株;HEK293T细胞㊁NIH3T3细胞复苏自本实验室冻存细胞;胰蛋白胨㊁酵母提取物㊁卡那霉素㊁异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)(生工生物工程(上海)有限公司);多功能酶标仪Tecan Spark(上海帝肯公司);PCR仪㊁核酸电泳以及SDS-PAGE电泳所使用的电泳仪与电泳槽(Bio-Rad公司,美国).1.2㊀ELP-mCherry原核表达载体的构建及鉴定根据GenBank中mCherry基因的核苷酸序列设计包含mCherry基因编码框的引物(生工生物工程(上海)有限公司),并在引物两端分别添加Xba I和Xho I酶切位点.以pEGFP-N1-mCherry为模板通过PCR扩增获得mCherry片段,凝胶回收mCherry片段.mCherry片段和pET28a-ELP质粒分别用1μL限制性内切酶Xba I和Xho I酶切,回收目的片段,利用T4DNA连接酶在4ħ连接过夜,将连接产物转化到DH5α感受态细胞,接种于含有卡那霉素的LB平板上过夜培养.从平板培养基中挑取单个菌落,170r/min摇床过夜,提取质粒后用Xba I限制性内切酶进行单酶切验证,再用Xba I和Xho I进行双酶切及1%琼脂糖凝胶电泳检测(Bio-rad),并将构建的重组质粒送至生工生物工程(上海)股份有限公司进行测序分析.1.3㊀ELP-mCherry融合蛋白的原核表达将构建的pET28a-ELP-mCherry质粒转化到大肠杆菌感受态细胞(BL21)中,过夜培养后挑取单克隆菌落,接种于20mL含有卡那霉素的LB培养基中,37ħ㊁170r/min摇菌过夜;第2天按1ʒ50接种于1L含有卡那霉素的LB培养基中,当OD600达到0.6时,加入IPTG(终浓度1mmol/L),37ħ条件下培养6h诱导蛋白表达;离心收集菌体,PBS重悬菌体沉淀后加入苯甲基磺酰氟(PMSF,终浓度1mol/L),应用超声破碎菌体,离心收集上清和沉淀,通过SDS-PAGE电泳分析蛋白的表达情况. 1.4㊀ELP-mCherry融合蛋白的纯化利用ITC法快速纯化ELP-mCherry融合蛋白,将裂解液上清用NaOH调节pH至9.0,4ħ振荡过夜;第2天将裂解液上清在4ħ下,5000r/min离心90min,去除不溶性蛋白沉淀;将分离的上清恢复至室温后,置于37ħ摇床,250r/min震荡3h,在3h 内分3次加入NaCl至终浓度为1mol/L,37ħ离心收集沉淀,PBS重悬沉淀.以上过程重复两个循环,通过SDS-PAGE电泳分析蛋白的纯化情况.1.5㊀ELP-mCherry融合蛋白的细胞相容性用MTT法检测ELP-mCherry融合蛋白对HEK293T细胞和NIH3T3细胞增殖能力的影响.将对数生长期的HEK293T细胞和NIH3T3细胞以5000个/孔接种于96孔板中,置入37ħ㊁5%CO2培养箱中培养24h;第2天每孔中加入终浓度25㊁34第1期刘㊀宁,等:类弹性蛋白多肽-红色荧光蛋白融合蛋白的表达纯化及细胞相容性50㊁100㊁200㊁300μg /mL 的ELP-mCherry 融合蛋白,每个ELP-mCherry 融合蛋白浓度做5个平行孔.培养48h 后每孔加入20μL 的MTT,37ħ孵育4h 后,每孔再加入150μL 二甲基亚砜(DMSO),沉淀充分溶解后在酶标仪(TECAN M200)上测定OD 490时每孔的吸光度值.2㊀结㊀㊀果2.1㊀ELP-mCherry 原核表达载体的构建将从mCherry 质粒中获得的PCR 产物与pET28a-ELP 质粒分别用限制性内切酶Xba I 和Xho I 双酶切后,酶切产物经0.8%琼脂糖凝胶分离,将目的片段凝胶回收后连接,连接产物转化到Kana 平板,获得阳性克隆.提取质粒通过酶切进行验证,双酶切产生的片段与预期大小一致,提示pET28a-ELP-mCherry 重组质粒初步构建成功.见图1.DNA 测序结果显示mCherry 基因被成功插入表达载体中,没有发生碱基突变和移位,表明pET28a-ELP-mCherry 重组质粒构建成功.见图2.M.DL 5000DNA marker;1.Xba I 单酶切结果;2.Xba I 和Xho I 双酶切结果.图1pET28a-ELP-mCherry 重组质粒的酶切鉴定Fig.1Identification of pET28a-ELP-mCherry㊀㊀recombinant plasmid by enzymedigestion图2pET28a-ELP-mCherry 重组质粒的测序结果Fig.2Sequencing result of pET28a-ELP-mCherry recombinant plasmid2.2㊀ELP-mCherry 融合蛋白的原核表达将pET28a-ELP-mCherry 表达载体转入大肠杆菌感受态细胞(BL21)中,诱导ELP-mCherry 重组蛋白表达,SDS-PAGE 电泳结果显示:在细胞裂解液的上清在分子量30kDa 左右出现明显的蛋白条带,与ELP-mCherry 融合蛋白的预计分子量相符,说明ELP-mCherry 融合蛋白存在于细胞裂解液上清中,然后再利用ITC 法进行快速纯化.见图3.M.蛋白分子量标准;1.菌体细胞裂解液上清;2.菌体细胞裂解液沉淀.图3ELP-mCherry 重组蛋白的原核表达Fig.3Prokaryotic expression of ELP-mCherryrecombinant protein2.3㊀ELP-mCherry 融合蛋白的纯化利用ITC 法纯化ELP-mCherry 融合蛋白,裂解液上清通过两轮ITC 循环的结果显示:电泳条带纯化后的ELP-mCherry 融合蛋白在30kDa 位置显示单一条带,未出现明显的蛋白杂带,且蛋白分子量与ELP-mCherry 融合蛋白相符.因此,可以确定纯化蛋白为ELP-mCherry 蛋白.见图4.M.蛋白分子量标准;1.纯化后的ELP-mCherry 融合蛋白.图4ELP-mCherry 融合蛋白纯化Fig.4Purification of ELP-mCherry fusion protein2.4㊀ELP-mCherry 融合蛋白细胞相容性分析将不同浓度ELP-mCherry 融合蛋白(25㊁50㊁100㊁200㊁300μg /mL)分别处理HEK293T 细胞及NIH3T3细胞48h 后,通过MTT 法检测细胞的存活率.处理48h 后,HEK293T 细胞的存活率在各个浓44北华大学学报(自然科学版)第22卷度下都超过100%,NIH3T3细胞在测试所有浓度下也接近100%,这些结果说明ELP-mCherry 融合蛋白在两种细胞中都具有良好的细胞相容性.见图5.图5ELP-mCherry 融合蛋白的细胞相容性Fig.5Cell compatibility of ELP-mCherry fusion protein3㊀结㊀㊀论利用传统亲和层析法(麦芽糖结合蛋白MBP㊁谷胱甘肽S-转移酶GST㊁多聚组氨酸标签His㊁多聚精氨酸Arg)可以快速获得高纯度的目的蛋白,然而纯化介质成本较高,因此,迫切需要开发一种成本低廉的高纯度蛋白量产方法[12-13].1999年,MEYER 等[14]首次将ELP 与其他蛋白融合表达时发现了其可逆温度相变转换的特性,从此开创了一种新的蛋白纯化方法,称为 ELP 化 ,即将目的蛋白基因与ELP 基因的N 末端或C 末端融合而获得融合蛋白的方法.由于类弹性蛋白多肽类衍生蛋白具有可逆温度相变(低温溶解,高温聚集)特性,应用ITC 法对ELPs 蛋白进行纯化只需要加盐㊁升温(蛋白聚集)㊁离心(收集蛋白沉淀)㊁蛋白复溶几个步骤即可完成,多数情况下只需要2~3轮ITC 纯化即可获得高纯度的目的蛋白,无需昂贵的亲和层析介质,极大地降低了蛋白的生产成本,有利于进行大规模的蛋白质生产.近年来 ELP 化 法在重组蛋白纯化㊁改善目的蛋白半衰期㊁提升蛋白产量㊁作为蛋白的递送载体等方面获得了广泛应用[15-18].例如,MOKTAN 等[19]将细胞穿膜肽和促凋亡肽分别融合在ELP 基因的N 末端和C 末端,通过大肠杆菌表达系统制备了一种新型的蛋白抗肿瘤药物SynB1-ELP-KLAK,结果显示融合蛋白具有显著抑制肿瘤细胞增殖的能力.PHAN 等[20]将两种禽流感H 5N 1抗原与ELP 融合后在转基因烟草中进行融合蛋白表达,并利用ITC 方法成功获得了融合蛋白,结果显示ELP 化方法在烟草表达系统中能够显著提高目的蛋白产量.FLOSS 等[21]将anti-HIV-1单克隆抗体2F5与ELP 融合后在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)也获得了成功表达,结果显示单克隆抗体与ELP 融合并未影响2F5与抗原的结合活性,显示ELP 化法在哺乳动物表达系统中的有效性.本研究结果显示:通过构建ELP-mCherry 融合蛋白的表达载体,并将其转入大肠杆菌中进行融合蛋白表达,应用ITC 法对融合蛋白进行纯化,得到纯度较高的ELP-mCherry 融合蛋白.鉴于ELP 蛋白在细胞中极佳的细胞相容性,我们随后检测了ELP-mCherry 融合蛋白在HEK293T 细胞和NIH3T3细胞中的细胞相容性,结果显示融合蛋白在两种细胞的存活率超过或接近100%,提示引入mCherry 并未降低ELP 的细胞相容性,为接下来的组织工程应用奠定了良好的材料基础.mCherry 红色荧光蛋白的最大激发波长为587nm [22-24],具有结构稳定㊁表达量高㊁测定简便等优点,因此,被广泛用来对组织细胞定位进行示踪.将ELP 与mCherry 制备成ELP-mCherry 融合蛋白,既可以利用ELP 的可逆温度相变转换特性纯化的融合蛋白,又可以利用mCherry 高度稳定的红色荧光追踪其分布[25],因此,可作为理想的集示踪与支架功能于一身的生物材料用于皮肤损伤愈合㊁组织修复等工程应用.综上所述,本研究成功构建pET28a-ELP-mCherry 表达载体,表达并纯化ELP-mCherry 融合蛋白,ELP-mCherry 融合蛋白对HEK293T 细胞和NIH3T3细胞具有良好的细胞相容性,此研究为开发新型的组织工程示踪材料奠定了基础.参考文献:[1]MECO E,LAMPE K J.Impact of elastin-like proteintemperature transition on PEG-ELP hybrid hydrogel pro-perties[J].Biomacromolecules,2019,20(5):1914-1925.[2]MULLERPATAN A,CHANDRA D,KANE E,et al.Purification of proteins using peptide-ELP based affinityprecipitation[J].Biotechnol,2020,309:9-67.[3]GONZALEZ V J,GIROTTI A,MUNOZ R,et al.Self-54第1期刘㊀宁,等:类弹性蛋白多肽-红色荧光蛋白融合蛋白的表达纯化及细胞相容性assembling ELR-based nanoparticles as smart drug-delivery systems modulating cellular growth via Akt[J].Bioma-cromolecules,2019,20(5):1996-2007.[4]TA D T,VANELLA R,NASH M A.Bioorthogonal elastin-like polypeptide scaffolds for immunoassay enhancement[J]. Acs Appl Mater Interfaces,2018,10(36):30147-30154.[5]SREEKUMAR P G,LI Z,WANG W,et al.Intra-vitreal alphaB crystallin fused to elastin-like polypeptide pro-vides neuroprotection in a mouse model of age-related macular degeneration[J].J Control Release,2018,283: 94-104.[6]SARANGTHEM V,CHO E A,YI A,et al.Application of bld-1-embedded elastin-like polypeptides in tumor targe-ting[J].Sci Rep,2018,8(1):3892.[7]HUANG Kaizong,GAO Mengyue,FAN Lin,et al.IR820 covalently linked with self-assembled polypeptide for photothermal therapy applications in cancer[J].Biomater Sci,2018,6(11):2925-2931.[8]SHANER N C,CAMPBELL R E,STEINBACH P A,et al.Improved monomeric red,orange and yellow fluore-scent proteins derived from Discosoma sp.red fluorescent protein[J].Nat Biotechnol,2004,22(12):1567-1572.[9]王文旭,郁飞.红色荧光蛋白融合表达载体的构建和蛋白质细胞内定位研究[J].江苏农业科学,2019,47 (8):52-55.[10]陈英,王培娟,张文,等.mCherry红色荧光标记乳酸菌的融合表达系统构建及应用[J].生物工程学报,2019,35(3):492-504.[11]KALIMUTHU S,ZHU L,OH J M,et al.Migration ofmesenchymal stem cells to tumor xenograft models andin vitro drug delivery by doxorubicin[J].Int J Med Sci,2018,15(10):1051-1061.[12]ZHU D,WANG H,TRINH P,et al.Elastin-like protein-hyaluronic acid(ELP-HA)hydrogels with decoupledmechanical and biochemical cues for cartilage regene-ration[J].Biomaterials,2017,127:132-140. [13]LUO T,DAVID D A,DUNSHEE L C,et al.Thermo-responsive elastin-b-collagen-like peptide bioconjugatenanovesicles for targeted drug delivery to collagen-con-taining matrices[J].Biomacromolecules,2017,18(8):2539-2551.[14]MEYER D E,CHILKOTI A.Purification of recombinantproteins by fusion with thermally-responsive polypept-ides[J].Nature Biotechnology,1999,17(11):1112-1115.[15]MONFORT D A,KORIA P.Recombinant elastin-basednanoparticles for targeted gene therapy[J].Gene Ther,2017,24(10):610-620.[16]KOUHI A,YAO Z,ZHENG L,et al.Generation of a mon-oclonal antibody to detect elastin-like polypeptides[J].Biomacromolecules,2019,20(8):2942-2952. 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[23]金权鑫,许嘉珍,魏枫,等.MuSK-mCherry融合荧光蛋白的构建及对重症肌无力患者MuSK抗体的检测[J].中国免疫学杂志,2014,30(10):1369-1373. [24]赵俊丽,王东阳,南天惠,等.红色荧光蛋白遗传标记腺病毒衣壳蛋白pⅨ的实验研究[J].陕西师范大学学报(自然科学版),2011,39(6):60-63. [25]樊晋宇,崔宗强,张先恩.红色荧光蛋白的光谱多样性及体外分子进化[J].生物化学与生物物理进展,2008,35(10):1112-1120.ʌ责任编辑:陈丽华ɔ64北华大学学报(自然科学版)第22卷。

苎麻 RSAP -PCR 反应体系的正交优化

苎麻 RSAP -PCR 反应体系的正交优化

苎麻 RSAP -PCR 反应体系的正交优化佚名【期刊名称】《中国麻业科学》【年(卷),期】2013(35)3【摘要】Restriction Site Amplified Polymorphism ( RSAP) is one of new molecular marker tech-niques.In order to identify the utilization feasibilityof RSAP in ramie , a reaction system of Restricted Site Amplified Polymorphic ( RSAP ) -PCR was designed orthogonally and optimized.The results showed that, the test combination factors were 1U Taq DNA polymerase, 0.3 mmol/L dNTPs, 0.25 μmol/L primer, and 10 ng DNA in 25μL reaction solution.%限制性位点扩增多态性( restriction site amplified polymorphism , RSAP)是一种新型的分子标记技术,为了明确该标记技术在苎麻上利用的可行性。

对限制性位点扩增多态性( RSAP)-PCR反应体系利用正交试验进行优化。

结果表明:25μL体系中,其最优条件为Taq DNA聚合酶1U,dNTPs 0.3mmol/L,引物0.25μmol/L, DNA 10ng。

【总页数】7页(P132-138)【正文语种】中文【中图分类】S563.1【相关文献】1.红花檵木RSAP-PCR反应体系的建立与优化 [J], 李炎林;熊兴耀;于晓英;陈海霞;李艳香;李达2.苎麻属植物RAPD-PCR反应体系的双重正交法优化 [J], 蒙祖庆;刘立军;汪波;彭定祥3.辽细辛和北马兜铃ISSR-PCR的引物筛选及反应体系的建立与正交优化 [J], 朱连连;赵容;李诗慧;赵思慧;刘洋洋;梁一凡4.正交设计优化硬叶兜兰SSR-PCR反应体系 [J], 郑之典;张罗霞;李宗艳5.应用降落PCR和正交设计优化AtSUC9 PCR反应体系 [J], 季策;张立军;阮燕晔;吴晓丹;白雪梅因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

试论影响思想政治教育效果的外部因素

试论影响思想政治教育效果的外部因素

试论影响思想政治教育效果的外部因素
朱巧英
【期刊名称】《山西广播电视大学学报》
【年(卷),期】2006(11)4
【摘要】影响思想政治教育效果的外部因素也可以理解为思想政治教育环境,包括宏观环境和微观环境.本文从思想政治教育环境分类入手,探讨了影响思想政治教育效果的外部因素,分析了二者的相互关系.
【总页数】2页(P33-34)
【作者】朱巧英
【作者单位】河南师范大学公共事务学院,河南,新乡,453007
【正文语种】中文
【中图分类】G41
【相关文献】
1.试论影响思想政治教育效果的外部因素 [J], 朱巧英
2.思想政治教育效果的影响因素与对策——基于思想政治教育信息化的探索 [J], 李春芳;汪晓丽
3.影响实习教育中思想政治教育效果的因素探索 [J], 韩笑天;陈志清
4.独立学院学生思想政治教育效果的影响因素及对策分析 [J], 张国迎;
5.高职院校大学生思想政治教育效果的影响因素及控制 [J], 熊安锋;阳军;殷遇骞因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

基于外在参数的冷水机组数学模型

基于外在参数的冷水机组数学模型

基于外在参数的冷水机组数学模型
李威;张昌
【期刊名称】《制冷与空调(四川)》
【年(卷),期】2011(025)006
【摘要】根据冷水机组外在参数之间的多参数非线性函数表达式,建立了描述冷水机组工作性能的个性化工程应用模型。

通过相对误差检验和模拟计算得知此模型具有较高的精度,符合实际工程要求,能够可靠地应用于空调系统中冷水机组的仿真模拟。

【总页数】4页(P620-623)
【作者】李威;张昌
【作者单位】武汉纺织大学,武汉430074;武汉纺织大学,武汉430074
【正文语种】中文
【中图分类】TU831
【相关文献】
1.双级离心式冷水机组的数学模型及其应用 [J], 陈权;邵双全;张晓亮;燕达;石文星;李先庭;江亿;入谷阳一郎;上田宪治
2.基于特征参数的冷水机组模型抗干扰性分析 [J], 赵琳;梁彩华;张小松
3.基于遗传算法和人工神经网络的冷水机组模型参数辨识及误差补偿方法 [J], 张丽珠;章超波;陈琦;赵阳
4.基于统计学参数与SVM算法的核电风冷式冷水机组高压保护故障研究 [J], 顾明伟;宋海川
5.基于现场传感器参数及SVM的冷水机组故障诊断 [J], 范雨强;崔晓钰;韩华;武浩;徐玲
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陕西国防工业职业技术学院毕业设计说明书防火涂料的研制及应用专业:精细化学品生产技术班级:精化3111 姓名:贺春萍学号: 52311106 指导教师:韩平印目录第一章绪论………………………………………………………………………………………第二章实验部分…………………………………………………………………………………第三章结果与讨论………………………………………………………………………………第四章常见涂料的优缺点比较…………………………………………………………………第五部分结论……………………………………………………………………………………参考文献……………………………………………………………………………………专业:精细化学品生产技术班级:精化3111姓名:贺春萍学号52311106室外用超薄钢结构防火涂料的研制摘要:重点阐述超薄型钢结构防火涂料的研制过程和防火机理,介绍超薄型钢结构防火涂料的定义和性能,讨论超薄型钢结构防火涂料的应用和一些因素对防火涂料性能的影响。

关键词:超薄型;钢结构防火涂料;膨胀防火体系第一章绪论1.1概况施用于可燃性基材表面,用以改变材料表面燃烧特性,阻滞火灾迅速蔓延;或施用于建筑构件上,用以提高构件的耐火极限的特种涂料,称防火涂料。

防火涂料就是通过将涂料刷在那些易燃材料的表面,能提高材料的耐火能力,减缓火焰蔓延传播速度,或在一定时间内能阻止燃烧,这一类涂料称为防火涂料,或叫做阻燃涂料。

1.2防火原理防火涂料的防火防火原理大致可归纳为以下五点:⑴、防火涂料本身具有难燃性或不燃性,使被保护基材不直接与空气接触,延迟物体着火和减少燃烧的速度。

⑵、防火涂料除本身具有难燃性或不燃性外,它还具有较低的导热系数,可以延迟火焰温度向被保护基材的传递。

⑶、防火涂料受热分解出不燃惰性气体,冲淡被保护物体受热分解出的可燃性气体,使之不易燃烧或燃烧速度减慢。

⑷、含氮的防火涂料受热分解出NO、NH3等基团,与有机游离基化合,中断连锁反应,降低温度。

⑸、膨胀型防火涂料受热膨胀发泡,形成碳质泡沫隔热层封闭被保护的物体,延迟热量与基材的传递,阻止物体着火燃烧或因温度升高而造成的强度下降。

1.3材料组成厚涂型钢结构防火涂料的基本组成是:胶结料(硅酸盐水泥、氯氧化镁或无机高温黏结剂等)、骨料(膨胀蛭石、膨胀珍珠岩、硅酸铝纤维、矿棉、岩棉等)、化学助剂(改性剂、硬化剂、防水剂等)、水。

钢结构防火涂料基料的硅酸盐水泥、氯氧化镁水泥和无机黏结剂,常用的无机黏结剂包括碱金属硅酸盐类以及磷酸盐类物质等。

但在碱金属硅酸盐中往往都存在着游离的碱金属离子,空气中的酸性气体和CO2等将与其发生化学反应。

如果单独用碱金属硅酸盐来作为涂料的基料时会使涂膜不耐水、不耐潮、耐候性差,并且涂层容易出现开裂、脱粉等不良现象。

因此如果采用碱金属硅酸盐作为钢结构防火涂料的基料,首先要解决的关键问题就是对其进行改性,即解决对游离的碱金属离子的抑制问题。

磷酸盐类黏结剂也是常用的无机黏结剂,用它作为防火涂料的基料时,避免了碱性氧化物与空气中的酸性气体反应的问题,从而提高了涂料的耐候性、耐水性等理化性能指标。

但是,磷酸盐类黏结剂中M/P的摩尔比(M指金属,P是磷)对涂料的贮存稳定性、耐水性以及涂料与钢基材的黏结力等各项性能都有直接的影响。

因此,在以磷酸盐为基料的钢结构防火涂料的研制中,基料摩尔比的控制是很重要的。

由于厚型钢结构防火涂料的涂层厚而且用量多,增加建筑物自重。

因此,在涂料应注意加入一些轻质材料和高效隔热骨料以降低涂料的密度。

用得最多的轻质隔热骨料主要是膨胀蛭石和膨胀珍珠岩。

蛭石是一种含铁、镁的铝硅酸盐类矿物质,具有层状结构,层间有结晶水。

它受热膨胀时,会像水蛭一样蠕动,故名蛭石。

蛭石经过晾干、破碎、筛选,在850~1000的温度下煅烧,颗粒会膨胀20倍以上,形成膨胀蛭石。

其密度为80~200kg/m3,热导率为0.17~0.25W/(m·K),耐火性能强,吸声、隔声性能好,无毒无味,是防火涂料的重要掺材。

珍珠岩是一种玻璃质岩石,经破碎、筛分、预热、瞬间焙烧,可膨胀至20倍左右,形成具有蜂窝泡沫状结构的膨胀珍珠岩。

膨胀珍珠岩的质量极轻,容重为80-250kg/m3,热导率为0.042~0.076W/(m·K),具有保温、隔热、不燃、无毒、化学稳定性好等特性,也是防火涂料中的重要填料。

1.4质量检查1.可在现场对产品的质量作一初步的检查:在已施工好的基材上切取2~3块小样,或取少量样品涂在2~3块150mm×150mm胶合板上,按实际施工的情况涂刷。

待干透后,用酒精灯的火焰检查。

火焰高度40mm左右,施加火焰的时间一般为20min,检查涂层发泡情况。

正常的情况下,按规定的用量(一般为500克/平方米)施工,一级防火涂料的泡层厚度为20mm以上,二级防火涂料的泡层厚度为10mm以上,泡层应均匀致密。

2.合格防火涂料在受到喷灯等强火灼烧时,会大量发泡膨胀,表面聚集凸起,数分钟内不会出现烧损现象,而假冒伪劣防火涂料则基本不发泡,会出现大量散落掉渣的情况,木质基材也会很快发生燃烧破损的现象。

3.查验该产品是否具有国家级消防质检中心出具的合格检验报告,也可上网查询。

防火涂料实行消防产品型式认可制度,市场上销售的防火涂料应具备国家消防产品型式认可证书和型式检验合格报告。

4.在实际使用中,为了保证防火涂料的防火及其他使用性能,一般需要采用透明的罩面涂层。

防火涂料的用量一般为350~500克/平方米,罩面涂层的用量一般为50克/平方米。

5.根据国家标准,除满足阻火性要求外,防火涂料的燃烧性能分为一级和二级。

在规定的实验条件下,一级防火涂料的耐燃时间不小于20分钟,二级防火涂料的耐热时间不小于10分钟。

用户在选择时应注意加以区别,避免企业以次充好,达不到防火保护效果。

1.5防火知识1.5.1种类防火涂料种类很多,但是按照防火涂料的使用对象以及防火涂料的涂层厚度来看,一般分为饰面型涂料和钢结构防火涂料。

饰面型防火涂料一般用作可燃基材的保护性材料,具有一定的装饰性和防火性,又分为水性和溶剂型两大类。

而钢结构防火涂料主要是用作不燃烧体构件的保护性材料,这类防火涂料的涂层比较厚,而且密度小、导热系数低,所以具有优良的隔热性能,又分为有机防火涂料和无机防火涂料。

1.5.2评定质量既然防火涂料是用来阻滞火势的蔓延,那么怎样的防火涂料的质量才是好的呢?有怎样的评判标准?照目前来看,国内防火涂料总共分为一、二、三级,当然是一级性能最好。

防火涂料的质量的好坏其实主要由防火涂料的防火性能和理化性能决定。

防火性能包括耐燃时间、火焰传播比值、失重及碳化体积等四个指标,可以分别根据国家标准进行大板燃烧法、隧道燃烧法、小室燃烧法试验得出。

而理化性能主要包括固体含量、粘度、柔韧性、冲击强度、附着力、干燥时间和耐水性。

其技术指标则根据国家标准试验后获得。

1.5.3耐火性能是否防火涂料的涂层越厚,它的耐火性能就越好呢?一般来说是这样的,对非膨胀型防火涂料来说,正是依赖于它本身的难燃性和不燃性来阻止火焰传播。

所以,涂层越厚,高温下形成的一种釉状物也越厚,防火涂料的隔热效果也会得到提高。

对膨胀型防火涂料来说,涂层厚,受火膨胀发泡,形成隔绝氧气和隔热的泡沫层也愈厚,同时部分含氮防火涂料分解出的[NO]、[NH3]等基团增多,与有机游离基化合,中断链锁反应的效果也好。

所以,从提高耐火性能来说,防火涂料处理时,涂层越厚越好。

用防火涂料处理提高建筑构件的耐火性能效果好吗?随着我国阻燃科学的发展,先进、优质的防火涂料应运而生,从正程应用情况看,效果是明显的。

1.5.4遇火燃烧为什么有的防火涂料遇火也会燃烧呢?要解释这个问题,我们首先来看,防火涂料由基料、分散介质、阻燃剂、溶剂等组成。

施工前的防火涂料遇火发生燃烧,其实是防火涂料中的易燃液体溶剂在燃烧,而防火涂料的基料、阻燃剂等物质是不会燃烧的。

因为溶剂型防火涂料以有机溶剂为溶剂,如200号溶剂汽油、正丁醇、丙酮、环己酮、甲苯等,因此,这些防火涂料一旦从桶里漏出来,就容易引起火灾。

涂在建筑构件上的防火涂料,只有在溶剂蒸发完以后,才能起到阻火隔热的作用。

1.5.5分类饰面防火涂料;木材防火涂料;钢结构防火涂料、混凝土结构防火涂料、隧道防火涂料、电缆防火涂料。

防火涂料是由基料(即成膜物质)、颜料、普通涂料助剂、防火助剂和分散介质等涂料组分组成的。

除防火助剂外,其他涂料组分在涂料中的作用和在普通涂料中的作用一样,但是在性能和用量上有的具有特殊要求。

1.6防火原理1.6.1超薄型或薄型涂覆在钢结构上的超薄型或薄型钢结构防火涂料的防火隔热原理是防火涂料层在受火时膨胀发泡,形成泡沫,泡沫层不仅隔绝了氧气,而且因为其质地疏松而具有良好的隔热性能,可延滞热量传向被保护基材的速度;根据物理化学原理分析,涂层膨胀发泡产生的泡沫层的过程因为体积扩大而呈现吸热反应,也消耗了燃烧时的热量,有利于降低体系的温度,这几个方面的作用,使防火涂料产生显著的防火隔热效果。

1.6.2厚型钢结构涂覆在钢构件上的厚型钢结构防火涂料的防火隔热原理是防火涂料受火时涂层基本上不发生体积变化,但涂层热导率很低,延滞了热量传向被保基材的速度,防火涂料的涂层本身是不燃的,对钢构件起屏障和防止热辐射作用,避免了火焰和高温直接进攻钢构件.还有涂料中的有些组分遇火相互反应而生成不燃气体的过程是吸热反应,也消耗了大量的热,有利于降低体系温度,故防火效果显著,对钢材起到高效的防火隔热保护.另外该类钢结构防火涂料受火时涂层不发生体积变化形成釉状保护层,它能起隔绝氧气的作用,使氧气不能被保护的易燃基材接触,从而避免或降低燃烧反应.但这类涂料所生成釉状保护层导热率往往较大,隔热效果差.为了取得一定的防火隔热效果,厚涂型防火涂料一般涂层较厚才能达到一定的防火隔热性能要求.1.7选择误区避免误区选合适防火涂料:不同空间不用材质对防火涂料的性能要求有所区别,因此选购涂料时可询问有经验的店铺销售员,在适合的地方使用适合的地方采用适合的防火涂料,才能起到最佳的防火效果。

误区1把木结构防火涂料用在钢结构上由于木结构防火涂料和钢结构防火涂料用肉眼是无法识别,消费者选购时必须了解的防火涂料的详细属性。

如果钢结构使用木结构的防火涂料,其附着力大大下降,而且容易脱落,无法保证防火安全。

误区2未区分溶剂型和水性防火涂料钢结构防火涂料有两种,溶剂型防火涂料和水性防火涂料。

从附着力角度比较,溶剂型大于水性,因此,对用于室外的钢结构应采用溶剂型防火涂料,室内钢结构可使用溶剂型或水性防火涂料。

国内有些厂家生产的防火涂料,遇火时会分解出有毒气体。

如果耐火电气产品使用了这种涂料,一旦失火就会释放出有毒气体。

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