insect_Bt稻Cry1Ab杀虫蛋白在水体中的残留和Bt稻田三类水生昆虫数量调查
《转Cry1Ab基因抗虫水稻的检测方法研究》
《转Cry1Ab基因抗虫水稻的检测方法研究》一、引言随着现代农业科技的进步，转基因作物因其抗虫、抗病等特性，在农业生产中得到了广泛应用。
其中，转Cry1Ab基因抗虫水稻因其显著的抗虫效果，成为了研究的热点。
然而，对于这种转基因水稻的检测方法仍需深入研究，以确保其安全性和有效性。
本文旨在研究转Cry1Ab基因抗虫水稻的检测方法，为农业生产提供科学依据。
二、材料与方法1. 材料本研究所用材料为转Cry1Ab基因抗虫水稻及其对照组非转基因水稻。
2. 方法（1）DNA提取：采用CTAB法提取转基因水稻和对照组水稻的基因组DNA。
（2）PCR扩增：利用特异性引物，对提取的DNA进行PCR 扩增，扩增Cry1Ab基因片段。
（3）电泳检测：将PCR产物进行电泳，观察条带，初步判断Cry1Ab基因是否成功转入水稻中。
（4）荧光定量PCR：利用荧光定量PCR技术，对转基因水稻中Cry1Ab基因的拷贝数进行精确检测。
（5）免疫学检测：采用Western Blot技术，对转基因水稻中Cry1Ab蛋白进行检测。
三、实验结果1. PCR扩增结果电泳结果显示，转基因水稻组在Cry1Ab基因特异位置出现条带，而非转基因水稻组则无此条带，初步判断Cry1Ab基因已成功转入水稻中。
2. 荧光定量PCR结果荧光定量PCR结果显示，转基因水稻中Cry1Ab基因的拷贝数显著高于非转基因水稻，证明了转Cry1Ab基因的成功导入。
3. Western Blot结果Western Blot结果显示，转基因水稻中成功表达了Cry1Ab蛋白，而非转基因水稻组则无此表达。
四、讨论本研究采用多种方法对转Cry1Ab基因抗虫水稻进行检测，包括PCR扩增、电泳检测、荧光定量PCR和Western Blot等。
实验结果表明，这些方法可以有效地检测出转基因水稻中Cry1Ab 基因的成功导入及其表达情况。
其中，PCR扩增和电泳检测为初步判断方法，可快速筛选出转基因水稻；荧光定量PCR和Western Blot则为精确检测方法，可对转基因水稻中Cry1Ab基因的拷贝数和表达情况进行精确测定。
转基因抗虫作物中苏云金芽孢杆菌Cry蛋白的食品安全问题
转基因抗虫作物中苏云金芽孢杆菌Cry蛋白的食品安全问题王春玲;Bruce Hammond【摘要】苏云金芽孢杆菌（Bt）微生物制剂是农业、林业和饮用水等领域用来控制靶标害虫幼虫的有效工具,至今已经有50余年的使用历史。
同时其在美国、欧洲和其他一些国家被广泛用于经过认证的有机农业生产之中。
目前已获审批的转基因Bt作物中最常使用的是Cry蛋白。
Cry蛋白的作用机制、食品安全性以及致敏性已经经过啮齿类动物、农场动物和人体内试验和生物信息学研究的严格检验。
Cry 蛋白的杀虫作用只在靶标害虫的碱性消化道内,与中肠上皮细胞的特异蛋白受体结合才能起到杀虫作用,而其他非靶标生物体内（人类、猕猴、小鼠、大鼠和牛等）都被证明没有这种特异蛋白质受体。
美国、欧洲和其他国家的管理机构都已经证实了转基因Bt作物和Cry蛋白在农作物和饮用水中残留的安全性。
食物加工过程能够最大化地减少转基因作物中功能性Cry蛋白的摄入。
转基因抗虫作物有利于降低农药杀虫剂的使用的同时,也能够有效防止玉米中伏马菌毒素的污染。
%Bt microbial insecticides have been used to control larval insect pests that feed on agricultural crops, forest and drinking water for over 50 years. They are also widely used in certified organic agricultural food production in the United States, Europe and other countries. Cry proteins are most commonly introduced in registered Bt crops. Mode of action, food safety and allergenicity of Cry protein have been rigorously tested using rodent, farm animals, and human experiment and bioinformatics research tools. The insecticidal function of Cry protein only works in the alkaline environment of the insect gut where specific receptors on the membranes of midgut epithelial cells present. Other non-target organisms （humans,rhesus monkeys, mice, rats and cows etc.） lack these receptors. Regulatory agencies in US, EU and other countries have confirmed the history of safe consumption of Bt crop and Cry protein residues on crops and in drinking water. Food processing can minimize dietary intake to functionally active Cry proteins. Bt crop contributes to reduce use of insecticides and improves the safe consumption of corn grain by lowering contamination from fumonisin mycotoxins.【期刊名称】《生物技术进展》【年(卷),期】2011(001)004【总页数】7页(P235-241)【关键词】转基因;抗虫;苏云金芽孢杆菌;Cry蛋白;食品安全【作者】王春玲;Bruce Hammond【作者单位】孟山都生物技术研究（北京）有限公司,北京100190;孟山都生物技术研究（北京）有限公司,北京100190【正文语种】中文【中图分类】S476.11苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是一种常见的需氧性细菌,可以生长在不同的环境介质中,包括土壤、水、植物表面、谷物粉尘及昆虫宿主。
粮食中抗虫和抗除草剂转基因蛋白的快速检测
粮油检验粮食中抗虫和抗除草剂转基因蛋白的快速检测1 范围本文件规定了粮食中抗虫和抗除草剂转基因蛋白的快速检测的原理、试剂及材料、仪器及设备、样品制备、样品测定、结果判定等。
本文件适用于粮食作物中Bt Cry2A、Bt Cry1Ab/1Ac、Bt Cry1F、Vip3A四种抗虫转基因蛋白和CC-CP4 EPSPS、DMO二种抗除草剂转基因蛋白的定性快速检测。
本文件的方法检出限分别为：Bt Cry2A为1%；Bt Cry1Ab/1Ac为1%；Bt Cry1F为0.5%；Vip3A为0.2%；CC-CP4 EPSPS为0.1%；DMO为0.1%。
2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 5491 粮食、油料检验扦样、分样法GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 27404 实验室质量控制规范食品理化检测SN/T 2775 商品化食品检测试剂盒评价方法3 术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。
4 原理利用免疫层析原理，质控线和检测线预包被有二抗，样品中的转基因蛋白与胶体金标记的特异性抗体结合，形成复合物，样品液在层析作用下，到达检测线（T线）和质控线（C线），复合物与检测线（T线）和质控线（C线）上的二抗结合，生成肉眼可见色带，然后通过读数仪判读检测结果。
5 试剂缓冲液：称取0.80g氯化钠,0.12g磷酸氢二钠，0.02g磷酸二氢钾，0.02g氯化钾，用90ml水溶解，用盐酸调节pH至7.4±0.1，加水稀释至100mL。
提取液：蒸馏水或去离子水，或缓冲液。
6 仪器设备及材料天平：感量为 0.01g。
粉碎机：可使试样粉碎后全部通过20目筛。
离心机：转速不小于4000r/min。
涡旋振荡器。
读数仪：可测定并显示胶体金检测条的测定结果。
Cry1Ab毒蛋白对亚洲玉米螟生长发育的影响
料． 采用 饲料 混 合 法［ ６ １ 并 建 立 种群 生 命 表 的方 法 ． 研 究 Ｃ ｒ ｙ ｌ Ａ ｂ毒 蛋 白对 亚 洲 玉 米螟 生 长 发 育 和种 群 增
长 的影 响 ． 旨在 明确 Ｃ ｒ ｙ ｌ Ａ ｂ毒 蛋 白是 否对 亚 洲 玉
控害作 用． 采 用 实验 种 群 生命 表 的 方 法 ． 研究了Ｃ ｒ ｙ ｌ Ａ ｂ毒 蛋 白 对 亚 洲 玉米 螟 的 生 长发 育 和 种 群 增 长 的影 响 结 果 表 明 ．
５ ０ ． ０ 、 １ ０ ． ０ 、 １ ． ０ 、 ０ ． １ ｗ ｇ ／ ｍＬ ４个 系 列 浓 度 ，并 以 不 加 Ｃ ｒ ｙ ｌ Ａ ｂ毒蛋 白的人 工 饲 料 为对 照 ． 冷 却后 放 人 ４℃ 冰箱 保存 ． 待用
至 ６ ０℃左 右 ， 再加入 ４ ｍＬ甲醛 、 １ ０ ｇ抗 坏 血 酸【 “ Ｊ 和 上 述 不 同浓 度 的 Ｃ ｒ ｙ ｌ Ａ ｂ毒蛋 白 ． 搅拌均匀 ． 配 制 成
活 性１ ３ １ 何康 来 等研 究 表 明取 食 表 达 Ｃ ｒ ｙ ｌ Ａ ｂ杀 虫 蛋 白 的转 基 因玉 米 初 孵 幼 虫 的死 亡 率 远 大 于 常 规 玉米 的死亡 率 。国外 研究 表 明 ． Ｃ ｒ ｙ ｌ Ａ ｂ毒蛋 白对 欧 洲玉 米 螟 敏感 ｌ ５ 】 ． 其 Ｃ ｒ ｙ ｌ Ａ ｂ毒蛋 白是 否 为 亚洲 玉 米
０ ． Ｏ ５ ） ． ． 结果表明 ． Ｃ ｒ ｙ １ Ａ ｂ毒 蛋 白对 亚 洲 玉 米 螟 的 种 群 增 长 有
一
定影响 ． 且对 亚 洲 玉 米螟 具 有一 定 的控 制 作 用 关键 词 ： 亚 洲 玉 米螟 ； Ｃ ｒ ｙ ｌ Ａ ｂ毒 蛋 白； 生长 发 育 ： 种 群 增 长
Bt水稻Cry1Ab杀虫蛋白表达的时间动态及其在水稻土中的降解
Bt水稻Cry1Ab杀虫蛋白表达的时间动态及其在水稻土中的降解白耀宇;蒋明星;程家安【期刊名称】《生态学报》【年(卷),期】2005(025)007【摘要】采用ELISA技术检测了Bt水稻克螟稻1号(KMD1)和克螟稻2号(KMD2)不同生育期茎和叶片中cry1Ab基因的表达水平,以及植株组织(茎和叶片)室内埋于不同稻田土壤中其Cry1Ab杀虫蛋白的降解动态.结果表明,不论是KMD1还是KMD2,茎和叶片中cry1Ab基因的表达量为3.7～9.1ug/g鲜重,均以拔节期和孕穗期相对较低,灌浆初期显著升高,黄熟期又明显下降(但仍然维持在较高的表达量).KMD1茎和叶片中Cry1Ab蛋白在3种水稻土即青紫泥田、黄松田和黄筋泥田中的降解,均以前期(处理后12d内)较快,但中后期明显较慢;处理后42d,这两种组织中的Cry1Ab残留量均稳定在μg级水平,分别仅有0.20～0.85μg/g干重和0.35～1.81μg/g干重.KMD1茎和叶片中Cry1Ab蛋白降解动态与土壤类型密切相关,青紫泥田中降解最快,黄筋泥田中次之,黄松田中最慢.淹水可加快土壤中茎和叶的腐解,从而促进其中Cry1Ab蛋白的降解.KMD2粉碎叶中Cry1Ab蛋白在有菌水稻土中的降解快于无菌土中,表明土壤微生物存在可加快Cry1Ab蛋白的降解.在各种土壤淹水与非淹水、灭菌与非灭菌处理条件下的Cry1Ab蛋白降解过程均可用指数方程进行拟合,算得其消减半衰期为2.2～11.6d不等.讨论了土壤类型、淹水等影响Cry1Ab蛋白降解的可能机制,认为土壤微生物是其中起关键作用的一个因子.【总页数】8页(P1583-1590)【作者】白耀宇;蒋明星;程家安【作者单位】浙江大学应用昆虫学研究所,杭州,310029;西南农业大学植物保护学院,重庆市昆虫学与害虫控制工程重点实验室,重庆,400716;浙江大学应用昆虫学研究所,杭州,310029;浙江大学应用昆虫学研究所,杭州,310029【正文语种】中文【中图分类】Q968【相关文献】1.转Bt基因抗虫玉米根茬和根际土壤中Cry1Ab杀虫蛋白的田间降解动态 [J], 邢珍娟;王振营;何康来;白树雄2.影响Bt稻离体叶中Cry1Ab杀虫蛋白降解的环境因子研究 [J], 白耀宇;蒋明星;程家安3.转Cry1ab/ac基因水稻与相应非转基因水稻种子的蛋白表达谱和营养组分分析[J], 王龑;许文涛;赵维薇;郝俊冉;罗云波;唐小革;张雨;黄昆仑;杨暄4.转Bt基因水稻Cry1Ab杀虫蛋白在水稻土中的降解 [J], 白耀宇;蒋明星;程家安;沈慧梅;杨璞;陈正贤;姜永厚;舒庆尧5.转Bt基因抗虫玉米植株叶腋处花粉中Cry1Ab杀虫蛋白的田间降解动态 [J], 邢珍娟;王振营;何康来;白树雄因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
转Bt基因作物对土壤节肢动物的生态风险性_袁一杨
应用昆虫学报Chinese Journal of Applied Entomology 2014, 51(5): 1143−1148. DOI: 10.7679/j.issn.2095−1353.2014.136* 资助项目：国家转基因生物新品种培育重大专项（2012ZX08011002） **通讯作者，E-mail: gef@收稿日期：2014-08-21，接受日期：2014-09-02转Bt 基因作物对土壤节肢动物的生态风险性*袁一杨 戈 峰**（中国科学院动物研究所，农业虫鼠害综合治理研究国家重点实验室，北京 100101）摘 要 土壤节肢动物在土壤生态系统物质循环中起着非常重要的作用，因此人们越来越关心转基因作物对土壤节肢动物的生态安全性。
本文在介绍转基因作物对土壤节肢动物影响机制的基础上，重点论述了土壤跳虫、螨类、甲虫、水生昆虫等节肢动物对不同转基因作物响应的研究进展，旨在为科学全面的开展转基因作物土壤生态风险评价提供参考。
关键词 转基因作物，生态风险分析，土壤跳虫，螨类，甲虫，水生昆虫The ecological risk of transgenic crops to soil arthropodsYUAN Yi-Yang GE Feng **(State Key Laboratory of Integrated Management of Pest Insects & Rodents, Institute of Zoology,Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China)Abstract Soil-dwelling arthropods carry out critical nutrient cycling process in the soil ecosystem. Since the adoption of genetic modified (GM) crops has increased dramatically in recent years, concerns have been raised regarding the potential negative effects of GM crops on this ecosystem. We here review the impacts of transgenic plants on non-target soil organisms, and provide an overview of recent advances in the understanding of responses of non-target soil arthropods, including springtails, mites, beetles and aquatic insects, to various GM crops. We hope this review will provide a useful reference for research on the ecological risks of GM crops to the soil ecosystem.Key words transgenic crops, ecological risk analysis, soil collembola, mite, beetle, aquatic insect从1996年到2013年，全球转基因作物种植面积已经达到1.75亿 hm 2（James ，2013）。
一种选育Cry1C抗虫转基因水稻两系不育系的方法[发明专利]
![一种选育Cry1C抗虫转基因水稻两系不育系的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/ab001c6ebceb19e8b9f6babb.png)
专利名称：一种选育Cry1C抗虫转基因水稻两系不育系的方法专利类型：发明专利
发明人：殷得所,查中萍,李进波,万丙良,戚华雄
申请号：CN201811347477.1
申请日：20181113
公开号：CN109402287A
公开日：
20190301
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种选育Cry1C抗虫转基因水稻两系不育系的方法，该方法包含：(1)以携带光温敏核不育基因的水稻为受体，以含有Cry1C基因和bar基因的可育水稻为供体，获得BCF种子；
(2)喷施除草剂筛选阳性单株，种植；(3)提取单株水稻的基因组DNA，检测光温敏感育性基因，并将阳性单株与受体不育株材料回交得BC2F1种子；(4)重复步骤(2)～(3)，获得BCF，自交得BCF；(5)将BCF播种，幼穗分化期低温处理；(6)抽穗后观察花育性和单穗结实，无花粉单株割兜再抽穗；(7)对再生穗进行低温处理，自交得BCF；(8)将BCF，重复步骤(5)～(7)，得BCF；(9)育成新的抗虫两系不育系水稻。
本发明的方法在4年内完成两系不育系选育，提高了工作效率。
申请人：湖北省农业科学院粮食作物研究所
地址：430064 湖北省武汉市洪山区南湖大道3号
国籍：CN
代理机构：北京众合诚成知识产权代理有限公司
代理人：苗艳荣
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转Bt基因玉米幼苗残体中Ory1Ab杀虫蛋白田间降解动态
转Bt基因玉米幼苗残体中Ory1Ab杀虫蛋白田间降解动态邢珍娟;王振营;何康来;白树雄【期刊名称】《中国农业科学》【年(卷),期】2008(041)002【摘要】[目的] 研究间苗后留在田间地表的转Bt基因玉米幼苗残体中CrylAb杀虫蛋白的降解规律,比较两种Bt玉米幼苗残体中CrylAb杀虫蛋白的降解速度. [方法] 以两种表达CrylAb杀虫蛋白的转Bt基因抗虫玉米MON810和Bt11为材料,采用ELISA方法测定各取样时期中幼苗残体中CrylAb杀虫蛋白残留量.[结果] 转Bt基因玉米幼苗残体中杀虫蛋白降解是逐渐的,且降解速度较快,到50 d时幼苗残体已经完全腐烂,Bt11幼苗残体中的杀虫蛋白已经完全降解,在MON810中还能检测到微量的杀虫蛋白.两种转基因玉米幼苗残体中的Bt杀虫蛋白的初始含量差异不显著,但在同一时间段的Bt杀虫蛋白降解速度存在差异均显著,在30d前MON810幼苗残体中Bt杀虫蛋白降解速度比Bt11降解的快,30d后,则降解趋势相反,到50 d取样结束时MON810和Bt11分别降解了初始含量的99.81%和100%.[结论] 两种转Bt基因玉米间苗后留在田间的幼苗残体中的CrylAb杀虫蛋白降解速度不同,在50 d完全腐烂时,其中的杀虫蛋白完全降解或仅有微量残留.【总页数】5页(P412-416)【作者】邢珍娟;王振营;何康来;白树雄【作者单位】中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100094;中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100094;中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100094;中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100094【正文语种】中文【中图分类】S4【相关文献】1.转Bt基因抗虫玉米根茬和根际土壤中Cry1Ab杀虫蛋白的田间降解动态 [J], 邢珍娟;王振营;何康来;白树雄2.新疆北部地区转Bt基因棉外源杀虫蛋白表达时空动态研究 [J], 王冬梅;李海强;丁瑞丰;汪飞;李号宾;徐遥;阿克旦·吾外士;刘建3.转Bt基因水稻Cry1Ab杀虫蛋白在水稻土中的降解 [J], 白耀宇;蒋明星;程家安;沈慧梅;杨璞;陈正贤;姜永厚;舒庆尧4.转Bt基因玉米残体Cry1Ab蛋白在土壤中的残留动态 [J], 张运红;黄威;胡红青;刘玉荣;陈迪勤5.转Bt基因抗虫玉米植株叶腋处花粉中Cry1Ab杀虫蛋白的田间降解动态 [J], 邢珍娟;王振营;何康来;白树雄因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Cry1Ab杀虫蛋白对淡足侧沟茧蜂生长发育的影响
Cry1Ab杀虫蛋白对淡足侧沟茧蜂生长发育的影响张蕾;蒋善军;江幸福;杨海霞;罗礼智【摘要】以黏虫[Mythimna separata (Walker)]为寄主,研究了亚致死浓度的Bt 杀虫蛋白Cry1Ab对淡足侧沟茧蜂[Microplitis pallidipes (Szepligeti)]生长发育的影响.结果表明,当寄主从淡足侧沟茧蜂寄生后开始取食含Cry1Ab杀虫蛋白浓度为1、2、4μg/g和8μg/g的饲料时,淡足侧沟茧蜂卵—幼虫发育历期比以对照黏虫为寄主的显著延长,茧(蛹)重和成虫体重显著下降,但对茧历期及成虫寿命没有显著影响.淡足侧沟茧蜂的卵—幼虫发育历期随着寄主取食Cry1Ab杀虫蛋白浓度的增加而显著延长,茧重和成虫体重则随Bt蛋白浓度的上升而显著下降.因此,尽管Cry1Ab杀虫蛋白对淡足侧沟茧蜂的生长发育具有一定程度的负面影响,但其仍可以在取食Bt毒蛋白的黏虫上完成整个世代发育.%The oriental armyworm Mythimna separata (Walker) was used as the insect host to study the effects of CrylAb, a Bt insecticidal protein, on the development of the parasitoid Microplitis pallidipes (Szepligeti). The results showed that, when M. pallidipes adults parasitized the larvae of M. separata constantly feeding on diets containing 1, 2, 4, 8 μg/g of Cry1Ab toxin, the egg-larval duration of the parasitoid was significantly prolonged, and the cocoon weight and adult weight of M. pallidipes were significantly less than the control, while no significant effects on the cocoon period and the adult longevity were observed. In addition, the egg-larval duration was significantly increased and the cocoon weight and adult weight of M. pallidipes were significantly decreased as the dosage of Cry1Ab toxin increased. It was shown that though Cry1Ab toxin had a negative effect onthe growth and development of M. pallidipes, it could complete development of the whole generation.【期刊名称】《植物保护》【年(卷),期】2011(037)006【总页数】5页(P107-111)【关键词】Cry1Ab杀虫蛋白;黏虫;淡足侧沟茧蜂;生长发育【作者】张蕾;蒋善军;江幸福;杨海霞;罗礼智【作者单位】植物病虫害国家重点实验室,中国农业科学院植物保护研究所,北京100193;植物病虫害国家重点实验室,中国农业科学院植物保护研究所,北京100193;植物病虫害国家重点实验室,中国农业科学院植物保护研究所,北京100193;植物病虫害国家重点实验室,中国农业科学院植物保护研究所,北京100193;植物病虫害国家重点实验室,中国农业科学院植物保护研究所,北京100193【正文语种】中文【中图分类】S476自1983年首例转基因植物问世以来，植物转基因技术发展十分迅猛，目前已获得了棉花、玉米、马铃薯、烟草、水稻、番茄等百余种转基因作物［1］。
转Bt基因抗虫玉米植株叶腋处花粉中Cry1Ab杀虫蛋白的田间降解动态
转Bt基因抗虫玉米植株叶腋处花粉中Cry1Ab杀虫蛋白的田间降解动态邢珍娟;王振营;何康来;白树雄【期刊名称】《应用与环境生物学报》【年(卷),期】2008(14)2【摘要】以表达Cry1Ab杀虫蛋白的两种转Bt基因抗虫玉米MON810和Bt11为材料,采用ELISA方法研究了玉米散粉时沉积在植株叶腋处Bt玉米花粉中Cry1Ab杀虫蛋白的田间降解动态,比较了两种Bt玉米花粉中Cry1Ab杀虫蛋白的降解速度.结果表明,Bt玉米花粉中Cry1Ab杀虫蛋白是逐渐降解的,且降解速度逐渐加快.但两种Bt玉米花粉中Cry1Ab杀虫蛋白降解速度不同,MON810中的Bt杀虫蛋白降解较快,而Bt11中的降解较慢.d15时在MON810叶腋处的花粉中已经检测不到Bt杀虫蛋白,而在Bt11花粉中Bt杀虫蛋白到d18才完全降解.两种Bt玉米花粉中杀虫蛋白的初始含量差异显著,且在各个取样时间内Bt杀虫蛋白的残留量存在显著差异.玉米散粉时留在田间的Bt玉米花粉中的Cry1Ab杀虫蛋白不会在自然界累积.【总页数】4页(P163-166)【关键词】转Bt基因玉米;花粉;Cry1Ab杀虫蛋白;叶腋;降解【作者】邢珍娟;王振营;何康来;白树雄【作者单位】中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室【正文语种】中文【中图分类】S513.034;S476【相关文献】1.转Bt抗虫基因植物中杀虫蛋白的酶联免疫检测技术研究Ⅲ.酶联免疫(ELISA)间接法检测Bt杀虫蛋白研究 [J], 严吉明;叶华智;伍光庆;张敏2.转Bt基因抗虫玉米根茬和根际土壤中Cry1Ab杀虫蛋白的田间降解动态 [J], 邢珍娟;王振营;何康来;白树雄3.转Bt基因玉米幼苗残体中Ory1Ab杀虫蛋白田间降解动态 [J], 邢珍娟;王振营;何康来;白树雄4.转cry1Ab/Gc基因玉米的不同转化事件Bt蛋白表达和抗虫性分析 [J], 刘洋;柳青;李楠;刘相国;张航;赵方方;贾伟;韩四平;尹悦佳5.转Bt基因水稻Cry1Ab杀虫蛋白在水稻土中的降解 [J], 白耀宇;蒋明星;程家安;沈慧梅;杨璞;陈正贤;姜永厚;舒庆尧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
稻田害虫的农业防治技术
稻田害虫的农业防治技术稻田害虫是农业生产中非常常见的一种害虫，给稻田产量带来了很大的损失。
为了控制稻田害虫的危害，农业生产中一般采用综合防治的方法，包括物理防治、化学防治、生物防治和治理农业环境。
1.物理防治物理防治主要是利用物理手段防治稻田害虫，包括排水、淹水、土壤消毒、集虫灯、人工拔虫、捕杀成虫、剪除虫卵等手段。
其中，排水和淹水是防治水稻虫害的最常见方法，即调整稻田的水位，通过利用稻田内部的水文和生态特点，防止虫害发生和伤害稻株，同时能有效地控制杂草生长、促进水稻生长，提高水稻产量。
2.化学防治化学防治是指利用化学农药防治稻田害虫。
化学防治是当前防治稻田害虫的主要手段之一。
根据稻田害虫的种类和性质，选择合适的农药进行喷洒。
现在市场上常用的化学杀虫剂包括有机磷、氨基甲酸酯、吡蝶酮类和氨基酰胺类等。
但是，使用化学农药必须采取科学防治措施，避免对环境和人体的危害。
3.生物防治生物防治是指利用天敌或其他生物剂防治稻田害虫。
生物防治是绿色防治稻田害虫的主要手段之一。
主要包括微生物杀虫剂、昆虫天敌、寄生性线虫和其他生物剂等。
其中，嗜好酚的马铃薯夜蛾、天敌蜻蜓对稻田害虫的防治效果比较显著。
4.治理农业环境治理农业环境是指优化稻田生产环境，增强稻株抗虫能力，减少稻田害虫发生。
首先要做到合理施肥，掌握肥料的用量、用时、施法等；其次，要减少杂草的生长，及时开展灭草拔节等措施；再次，要加强管理和维护，当地农民要建立起定期巡查，及时发现和处理稻田的问题。
总之，综合防治是防治稻田害虫的有效手段，物理防治和生物防治是绿色防治稻田害虫的主要方法，相比化学防治，对环境和人体的危害较小。
在稻田害虫防治中，一定要合理施用各类农药，养成健康、生态和可持续的生产方式，保护稻田生态环境和稻田生态平衡。
初一生物Bt生物农药的作用机理
初一生物Bt生物农药的作用机理初一生物 Bt 生物农药的作用机理Bt 生物农药是一种利用孢子结晶蛋白毒素杀灭害虫的生物农药。
它是利用一种具有制虫效果的芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis 来制备，因此得名。
Bt 生物农药的作用机理主要包括以下几个方面。
一、杀虫蛋白的分解Bt 生物农药中的主要成分是杀虫蛋白，它通过进入害虫体内后，被害虫体消化酶分解，释放出具有杀虫作用的活性片段。
这些活性片段会与害虫肠道中的细胞膜蛋白结合，破坏细胞膜的完整性，导致细胞内发生渗漏现象，最终引起害虫体内电解质平衡的紊乱，从而导致害虫的死亡。
二、毒素的作用靶点Bt 生物农药中的杀虫蛋白毒素主要通过与害虫肠道细胞的特定受体结合而发挥作用。
这些受体位于肠道上皮细胞的微绒毛上，与杀虫蛋白毒素结合后，通过改变受体结构从而破坏肠道细胞的正常功能。
例如，某些杀虫蛋白毒素会使受体失去葡萄糖吸收功能，导致害虫体内糖代谢紊乱，最终导致害虫死亡。
三、杀虫蛋白的毒力与抗性问题Bt 生物农药的杀虫蛋白毒素在作用于害虫时，其毒力是非常高效的。
然而，随着时间的推移，一些害虫种群产生了对杀虫蛋白毒素的抗性。
这是因为害虫在毒素压力下经过遗传变异，进化出了能够降低或抵抗杀虫蛋白毒素的特性。
为了解决这个问题，科学家通常会通过改变杀虫蛋白毒素的构造或生成多种不同类型的杀虫蛋白毒素来应对害虫抗性的产生。
四、环境友好性与传统化学农药相比，Bt 生物农药具有较好的环境友好性。
Bt 杀虫蛋白毒素在土壤和水中容易自然降解，对非目标生物和环境影响较小。
此外，Bt 生物农药对益虫、蜜蜂等有益昆虫的影响也较小，有利于生态平衡的维持。
综上所述，Bt 生物农药的作用机理主要包括杀虫蛋白的分解、毒素的作用靶点、杀虫蛋白的毒力与抗性问题以及环境友好性。
通过深入研究和应用Bt 生物农药，我们可以更好地保护农作物免受害虫的危害，同时减少对环境的负面影响，实现可持续农业的发展。
二化螟的水稻种群和茭白种群对杀虫剂和Cry蛋白的敏感性比较
二化螟的水稻种群和茭白种群对杀虫剂和Cry蛋白的敏感性比较周睿琦;赵梦洁;全为礼;马伟华;王小平【期刊名称】《中国科技论文》【年(卷),期】2014(009)009【摘要】采用微量点滴法测定了二化螟的水稻和茭白种群幼虫对杀虫剂辛硫磷、毒死蜱、氯虫苯甲酰胺、杀虫单和阿维菌素的敏感性,采用人工饲料胃毒法测定了二化螟对Cry蛋白(Cry1Ac、Cry2Aa、Cry1Ca)的敏感性,目的是为二化螟科学防治和抗性治理提供理论基础.结果表明:二化螟两寄主种群对阿维菌素和氯虫苯甲酰胺的敏感性差异显著,但对其他3种药剂及Cry蛋白的敏感性差异不显著.水稻种群和茭白种群对5种杀虫剂的敏感性由高到低均为阿维菌素＞氯虫苯甲酰胺＞辛硫磷＞毒死蜱＞杀虫单;对3种Cry蛋白的敏感性由高到低为Cry1Ca＞Cry1Ac＞Cry2Aa.因此,针对不同寄主田的二化螟种群应采用不同类型的药剂,尽量不使用单一药剂,可考虑采用药效最好的阿维菌素与其他几种药剂进行混配施用.【总页数】5页(P1075-1079)【作者】周睿琦;赵梦洁;全为礼;马伟华;王小平【作者单位】华中农业大学昆虫资源研究所,武汉430070;华中农业大学昆虫资源研究所,武汉430070;华中农业大学昆虫资源研究所,武汉430070;华中农业大学昆虫资源研究所,武汉430070;华中农业大学昆虫资源研究所,武汉430070【正文语种】中文【中图分类】S435.112+1【相关文献】1.二化螟水稻种群与茭白种群光周期反应的比较 [J], 肖海军;薛芳森;刘仰青;朱杏芬2.转Cry1Ab和Cry1Ac融合基因型抗虫水稻对田间二化螟和大螟种群发生动态的影响 [J], 李志毅;隋贺;徐艳博;韩兰芝;陈法军3.二化螟的水稻种群和茭白种群对杀虫剂和Cry蛋白的敏感性比较 [J], 周睿琦;赵梦洁;全为礼;马伟华;王小平;4.武汉地区二化螟水稻种群和茭白种群越冬代发生时间的比较研究 [J], 陈荣;高俏;王小平5.武汉地区二化螟水稻种群和茭白种群越冬代发生时间的比较研究 [J], 陈荣;高俏;王小平;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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R esidues of Cry1Ab Insecticidal Protein in W ater R eleased from Bt Rice Tissue Litter and Surveying of Three Aquatic Insect G roups in Bt Rice FieldsBAI Ya o2yu1,2,J IANG Min g2xing1,CHENG J ia2a n1ΞΞ(1.Institute of Insect Sciences,Zhe jiang University,Hangzhou310029,Zhejiang,China;2.Chongqing K ey Laboratory of Entomology and Pest Control Engineering,College of Plant Protection,S outhwest University,Beibei400716,Chongqing,China)Abstract:Stems and leaves of transgenic cry1A b rice,KMD1and KMD2,collected at mature stage are submerged in water,and the Cry1Ab concentrations in these plant tissues as well in the water are determined in laboratory(28℃,L16∶D8).The population densities of major aquatic insect groups are surveyed in paddies of Bt rice Huachi B6and the control rice line Jiazao935at early,mid-and late tillering stages.The Cry1Ab in water reaches a concentration that is higher than that of015ng calibra2 tor as the lowest limit of detection in tested kits at100d for KMD1and KMD2,res pectively,after the submergence of their stems and leaves.The density of ephemeropterans in Huachi B6paddies at late tillering stage is significantly higher than that in control paddies,while no significant difference is found in densities for any other aquatic insect group(chironomids and dominant coleopterans)at the whole tillering stage.K ey w ords:transgenic Bt rice;Cry1Ab insecticidal protein;residue;aquatic insectsBt稻Cry1Ab杀虫蛋白在水体中的残留和Bt稻田三类水生昆虫数量调查Ξ白耀宇1,2,蒋明星1,程家安1ΞΞ(1.浙江大学昆虫科学研究所,浙江杭州 310029;2.西南大学植物保护学院,重庆市昆虫学与害虫控制工程重点实验室,重庆北碚 400716)摘要:以转Bt cry1A b基因水稻克螟稻1号(KMD1)和克螟稻2号(KMD2)黄熟期的茎叶为材料,室内测定了其经浸水处理后(28℃,L16∶D8)残体和水体中Cry1Ab杀虫蛋白的含量;测定了KMD1与早籼稻嘉早935培育成的Bt 稻华池B6分蘖期稻田水体中Cry1Ab蛋白的含量,同时调查了该Bt稻和对照稻嘉早935在分蘖初期、盛期和末期稻田3类水生昆虫的数量。
结果表明,KMD1和KMD2茎叶经浸水100d后,水体中残留有Cry1Ab杀虫蛋白。
华池B6分蘖期稻田水体中没有检测到Cry1Ab蛋白;除分蘖末期华池B6稻田中的蜉蝣目昆虫个体数量显著高于对照田嘉早935外,其他2类水生昆虫摇蚊(spp.)和鞘翅目甲虫(sp.)在两类稻田间均无显著差异。
关键词:转Bt基因水稻;Cry1Ab杀虫蛋白;残留;水生昆虫中图分类号:S511.01;S435.112.9 文献标识码:A 文章编号:1000-2650(2006)01-0025-04 转Bt基因抗虫作物的成功获得开创了害虫防治的新局面。
目前,已有多个转Bt基因抗虫作物品种(品系)在我国进入了商业化应用,并在害虫治理中发挥着重要作用。
2003年,全球转Bt基因作物第24卷 第1期2006年3月 四川农业大学学报Journal of Sichuan Agricultural UniversityVol.24No.1Mar.2006Ξ收稿日期:2005-11-21基金项目:国家自然科学基金资助项目(30070500)。
ΞΞ通讯作者(Corresponding author)。
致谢:浙江大学核农所舒庆尧教授提供转基因水稻种子和给予热情帮助;浙江大学昆虫科学研究所叶恭银教授在试验调查中给予协作;中国科学院上海植物生理生态研究所柯欣副研究员帮助鉴定虫种,在此一并表示感谢。
的种植面积达到了1121×106hm2[1]。
我国从1998年开始种植Bt抗虫棉,当年面积约2199×105 hm2[2];2002年抗虫棉种植面积约2149×106hm2,市场份额达到4818%,仍呈进一步上升趋势[3]。
据估计,我国年产农作物秸秆518×1011kg,其中将秸秆还田以增加土壤肥力是合理利用秸秆的一种有效途径。
因此,大量Bt作物秸秆还田后,可能对农田土壤(水体)环境造成的影响和生态安全问题应引起人们的重视。
探明转Bt基因植物外源Bt杀虫蛋白(Insecti2 cidal Crystal Proteins,ICPs)在水体(土壤)中的环境行为和归趋,是剖析其对水生(土壤)生物影响及其机理的基础。
已有研究结果表明,Bt作物(包括水稻)在生长期可持续通过根部向土壤分泌具有杀虫活性的ICPs[4,5];植株残体、伤口流出物、木质部流体以及花粉等中的ICPs也会进入土壤(水体)中[6];当释放于其中的ICPs量超过了昆虫等生物的消耗、微生物的降解和非生物因素的钝化时,ICPs就会在土壤(水体)中残留、浓缩和累积,并保持较强的杀虫活性[7,8],从而危害非靶标生物。
多数的研究对Bt 作物ICPs的环境动态主要集中在Bt作物生育期ICPs在“植物-害虫-天敌”间的传递和积累动态;且对生物多样性影响的研究也局限于地上非靶标生物方面,对地下水生生物,尤其是水生昆虫的研究鲜有报道。
水生昆虫(Aquatic insects)在湿地和水生环境中的食物网中起着重要作用,一些对水质变化比较敏感的类群是水环境质量的重要指示者[9]。
稻田水生昆虫是稻田环境中重要的生物类群,其种类和数量的多寡对水稻害虫的科学管理具有重要意义[10]。
因此,本研究通过室内和田间测定了Bt水稻Cry1Ab杀虫蛋白在水体中的残留,进一步结合田间调查评价了Bt水稻对稻田水生昆虫的影响,这对进一步丰富和完善转Bt基因植物生态风险性评价体系具有重要的现实意义。
1 材料与方法1.1 供试水稻材料晚粳品种秀水11(简称XS11)以及它为亲本,通过农杆菌介导法获得的2个转Bt基因粳稻纯合品系克螟稻1号(KMD1)和克螟稻2号(KMD2);早籼稻嘉早935及其与KMD1培育成的华池B6。
KMD1、KMD2和华池B6均含Ubi启动子基因和cry1A b基因,后代均能稳定表达Cry1Ab杀虫蛋白,且表达的量较高,在室内和田间条件下高抗二化螟、三化螟和稻纵卷叶螟等8种鳞翅目害虫[11]。
华池B6和嘉早9353月下旬播种,30d左右移栽于大田; KMD1、KMD2和XS116月中旬播种,30d左右移栽于网室内。
1.2 室内条件下Bt稻Cry1Ab蛋白在水体中的残留分别收集KMD1、KMD2和XS11黄熟期的茎叶,拿回室内除去根系和穗,剪成10cm长,称1125 kg放入到透明玻璃缸内(35cm×22cm×24cm),加自来水215L,盖好盖子(其上开有直径10cm用铁纱网罩住的孔)放入人工气候室内(28℃,RH60%～80%,L16∶D8)。
定期加水以使每个缸内的水量保持不变。
每50～60d从每个处理缸内随机取110 mL水,经过离心后取上清液测定其中Cry1Ab的含量,重复5～8次,单位为ng/mL。
同时测定水稻残体中Cry1Ab蛋白的含量,单位为μg/g鲜重(Fresh weight,FW)。
1.3 Bt稻分蘖期稻田水体中Cry1Ab蛋白的残留和水生昆虫调查种植华池B6和其亲本非转基因水稻嘉早935的稻田从移栽后至分蘖末期一直让田中保持有淹没土表5cm以上的水层,稻田之间用泥土将田埂垫高防止水体间的交换。
从水稻移栽1个月后分别在水稻分蘖初期、盛期和末期进行调查,每次从各个处理田中设20～25个样点取样。
取样时,用直径25 cm,高30cm的圆桶快速罩在一丛水稻周围,然后将该丛水稻周围的水体全部吸出装袋,拿回室内去除其中的植物残体后,挑出其中的水生昆虫,放入75%酒精中,在解剖镜下鉴定和统计其主要种类和数量;同时测定水体中Cry1Ab蛋白的含量。
1.4 Cry1Ab蛋白的EL ISA定量分析Envirologix Cry1Ab/Cry1Ac平板试剂盒购自美国Envirologix公司,其中包括一块包埋好抗体的96孔(12×8)平板及配套试剂,4个Cry1Ab标样,其浓度分别为0、015、215和510ng/g。
分别称取含有KMD1、KMD2、华池B6粉碎组织0101～011g,或准备定容好的水体110mL,设3～5个重复。
将样品加入115mL离心管中,然后加适量抽提液,将离心管置于振荡器上剧烈震荡数秒,进行抽提,离心,取上清液稀释后按照试剂盒说明书上的步骤进行测定。
所有结果均由酶标仪读取,设置波长为450 nm。
每次试验均用Cry1Ab标样制作标准曲线。
1.5 数据统计与分析数据统计分析采用《实用统计分析及其DPS数62 四川农业大学学报 第24卷据处理系统》[12]软件。