水貂阿留申病研究进展
水貂阿留申病毒5个分离株的全基因测序及遗传变异分析
１ 材料与方法
１． １ 材料 １． １． １ 主 要试剂 ＵＮ Ｉ Ｑ １ ０ 柱式 病毒基 因组 抽 提 试剂盒为 上 海 生 工 生 物 工 程 技 术 服 务 有 限 公 司 产 、 感受态细胞Ｊ 品； ＭＤ １ ８ ＴＶ ｅ ｃ ｔ ｏ ｒ Ｍ １ ０ ９、 Ｔ ４Ｄ ＮＡ ｐ 连接酶 、 Ｄ ＮＡ Ｍ ａ ｒ ｋ ｅ ｒＤ Ｌ２０ ０ ０、 Ｅ ｘ犜 犪 ＮＡ 聚合 狇Ｄ 酶、 ｄ ＮＴ Ｐ为 Ｔ ａ Ｋ ａ Ｒ ａ 公 司 产 品； Ｄ ＮＡ 凝 胶 回 收 试 剂盒 、 溴化乙锭 （ 、 琼 脂 糖、 琼脂粉为维特杰公司 Ｅ Ｂ） 产品 。 １． １． ２ 病毒 由 吉 林 农 业 大 学 经 济 动 物 疾 病 实 验 室所分离和保存的 ５ 株具有致病性 的水 貂阿留 申病 病 毒 分 离 株 ，分 别 命 名 为 Ａ Ｄ Ｖ Ｄ Ｌ １ ２ ４、 Ａ Ｄ Ｖ Ａ Ｄ Ｖ Ｚ ３、 Ａ Ｄ Ｖ Ｑ ２、 Ａ Ｄ Ｖ Ｑ ３。 Ｄ Ｌ １ ２ ５、 １． ２ 方法 １． ２． １ 引物的设计 根 据 Ｇ ｅ ｎ Ｂ ａ ｎ ｋ上公布的不同 Ａ Ｄ Ｖ 全基因序列 （ Ａ Ｄ Ｖ Ｇ 登 录 号 ：Ｍ ２ ０ ０ ３ ６、
４］ 毒粒子构 建 疫 苗 带 来 了 许 多 的 困 难 ［ 。 对 此， 国外
许 学者认为基于 病 毒 衣 壳 构 建 疫 苗 应 该 是 无 效 的 ，
］ ５ 多尝试也证明 了 这 一 点 ［ 。因为 Ａ Ｄ Ｖ 特有的致病
给水貂养殖业造成了 水貂养殖场均 发 现 阿 留 申 病 ，
２］ 巨大的经济损失 ［ 。Ａ 水貂体内不 Ｄ Ｖ 感染水貂 后 ，
产生或只产生 少 量 的 中 和 抗 体 ， 而产生的多数抗体 不仅不能具有 中 和 病 毒 的 毒 力 ， 反而通过介导抗体 依赖性增 强 作 用 ， 进一步帮助 Ａ Ｄ Ｖ 对靶细胞的侵 ［ ３］ 染 。而且， 由于病毒抗原与抗体形成的复合物 （ ， 特有的理化特点可导致Ｉ ｉ ｍｍ ｕ ｎ ｅｃ ｏ ｍ ｌ ｅ ｘ Ｉ Ｃ） Ｃ ｐ 沉积并引发肾小球肾炎和动脉炎 。 这些 都 对基 于病
水貂阿留申病分子生物学及防控技术研究进展
Ｃｈ ａ ｎ ｇ ｃ ｈ ｕ ｎ １ ３ ０１ １ ２， Ｃｈ ｉ ｎ ａ；
２ ． ｊ ｉ ’ ａ ｎ Ｓ ｅ ｅ ｄ Ｃ ｏ ｍｐ ａ ｎ ｙ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｃ ｅ ， ｊ ｉ ’ ａ ｎ １ ３ ４ ２ ０ ０， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ３． Ａｎ ｈ ｕ ａ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｉ ｎ ｓ ｕ ｒ ａ ｎ ｃ ｅ Ｃ ｏ ｍ ｐ ａ ｎ ｙ Ｌ ｉ ｍｉ ｔ ｅ ｄ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｃ ｅ Ｂ ｒ ａ ｎ ｃ ｅ ， Ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｃ ｈ ｕ ｎ １ ３ ０ １ ２ ２， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ；
水貂阿留申病毒检测方法研究进展
貂 ，则 主 要 感 染 淋 巴结 巨 噬 细 胞 ，呈 低 水 平 病 毒 复 现 ＩＴＡ 的 阳性 反应 ，且 在 ＡＤ高 丙种 球蛋 白血 症 、浆 细 胞增 多 、 测 可 能 出现 ＩＡＴ 阴性 反应 ，所 以使 用该 方 法 的检 测
貂 养殖 场 几 乎 均 被 感 染 ，严 重 者 感 染 率 高 达 ９４． ＩＴＡ 得 不 到 有 效 的 检 测 。
５９ 。截 止 到 目前 为止 ，仍 没 有 成 品疫 苗 能 够 用 于 有效 的 预 防 和 治 疗 该 病 ，因 此 ，亟 需 可 大 批 量 检 测 、操作 简 单 、快速 且特 异 性强 的 检测 方 法 来 帮 助净 化 该 病 。
动 脉炎 、免疫 复 合 物 型 肾 小 球 。肾炎 为 特 征 的慢 性 疾 结 果 中容 易 出现 假 阴性 、假 阳 性 ，因而 ，这 种 做 法 只
病 ，可致 使水 貂 消 瘦 ，繁 殖 力 低 下口 ］。病 畜 的 临床 能作 为检 测该 病 的一 种辅 助方 法 。
表现 分急 性 和慢 性 。急性 患病 个 体 通 常无 明显 症状
零 劫
秣文献综述 啦
《 采
水 貂 阿 留 申病 毒 检 测 方 法 研 究进 展
刘 艺 ，冷 雪 ，时 坤 ，李 健 明 ，曾 范 利 ，宗 颖 ，宫 庆 龙 ，
张 姗 姗 ，孙 志 博 ，刘 亚 东 ，杜 锐
（吉林 农 业 大 学 ，吉 林 长 春 １３０１１８）
摘 要 ：水貂 阿留 申病 是 由水貂 阿 留 中病 毒 引起 的 以浆 细 胞 增 多为 主要 特 征 的慢 性 、消耗 性 、病 毒 性传 染病 。主要侵 害水貂 的免 疫 系统 ，导 致机 体免 疫 系统 紊 乱 引起 的 器 官 衰竭 ，病 死 率极 高 ，严 重损 害 了水 貂 养 殖 产业 的经 济利 益 ，该病 存在 于 绝 大 多数 养 殖水 貂 的 国家和 地 区 。 目前 ，能有 效预 防 该病 的 疫苗 尚未研 制 成 型 ，该病 的 防控 已成 为 水貂养 殖领 域 的世 界性 难题 ，在 防控 方面 主要 采取 淘 汰检 疫 Ｅｌ性 水貂 的 办法 。论 文主 要针 对 目前 该病 在 国 内外检 测 方法 的特 点和 流行 情 况进 行 阐述 ，以期 为水 貂 阿 留 申病 快 速检 测 方 法 的建 立 及 水貂 阿 留 申病 的有 效 防控提 供 参 考 。
水貂阿留申病防制的研究进展
水貂阿留申病防制的研究进展
李长生;王喜萍
【期刊名称】《中国动物检疫》
【年(卷),期】2000(017)002
【摘要】水貂阿留申病防制是水貂养殖领域的世界性难题。
该病临床特征是全身性淋巴细胞增殖、血清γ－球蛋白增高、肾肿大、动脉性血管炎和肝炎、持续性毒血症。
多年来，人们对水貂阿留申病防制的研究主要集中于对该病的诊断和淘汰，经历了碘凝集反应，对流免疫电泳技术两个主要阶段。
近年来，通过研究阿留申病循环免疫复合物的测定、抗体消长规律、免疫机制、试用免疫接种，使最终攻破阿留申病防制难关出现曙光。
【总页数】3页(P38-40)
【作者】李长生;王喜萍
【作者单位】吉林农垦特产高等专科学校,吉林左家;吉林农垦特产高等专科学校,吉林左家
【正文语种】中文
【中图分类】S858.925.3
【相关文献】
1.水貂阿留申病的危害及其防制 [J], 肖家美;赵景辉;李红;赵艳
2.水貂阿留申病的防制 [J], 邵西群;肖家美;赵元楷;籍玉林;王克坚
3.水貂阿留申病的诊断与防制 [J], 王忠杰;孙瑛;刘新江
4.水貂阿留申病的诊断与防制 [J], 杨雨哲;闫丽梅
5.水貂阿留申病防制的研究进展 [J], 李长生;王喜萍
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水貂阿留申病诊断技术的进展
水貂阿留申病诊断技术的进展李俚; 胡哲; 孙金辉; 关东嵩; 方孟颀; 王晓钧; 路义鑫【期刊名称】《《中国兽医杂志》》【年(卷),期】2018(054)011【总页数】3页(P58-60)【作者】李俚; 胡哲; 孙金辉; 关东嵩; 方孟颀; 王晓钧; 路义鑫【作者单位】东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030; 哈尔滨海关黑龙江哈尔滨150028; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069; 大庆海关黑龙江大庆163311【正文语种】中文【中图分类】S858.92水貂阿留申病(AMD)是由水貂阿留申病毒(AMDV)引起的一种能够引起自身免疫紊乱的慢性进行性传染病。
引起该病的病毒可感染各个年龄段的水貂,依据感染毒株类型的不同,病症呈多样性。
对新生仔貂而言,AMDV 引起的死亡率几乎可达到100%;而对于成年水貂,该病通常引起水貂的持续感染,并表现为终生病毒血症、高蛋白血症、动脉血管炎和由病毒-抗体复合体诱导的肾小球肾炎及肝炎等。
临床上还没有能够防治AMD 的有效疫苗和药物,因此目前防控该病的手段主要为水貂新引入前的检疫、场址的彻底消毒,以及感染貂群中病畜的扑杀。
大多数情况下,水貂感染AMD 后没有典型的临床症状,确诊主要依赖于实验室的检测。
本文对近年来国内外AMD 的主要诊断方法及特点进行综述,以期为新水貂引入前的检疫、环境消毒效果的评价及感染貂场AMD 的防控提供方法依据。
1 AMDV 的血清学检测方法1.1 碘凝集试验(IAT) IAT 是1962 年由Henson等[1]最先用于鉴别AMD 的血清学方法。
因该方法成本低廉、操作简单,所以很容易被推广。
但水貂感染AMDV后产生的丙种球蛋白水平通常需要1个月的时间才能被检测到,因此IAT 不适用于AMD初期感染的检测。
另外,IAT 为非特异性试验,对能够产生高丙种球蛋白血症的其他慢性疾病,如结核病和肾病等同样可以发生反应,所以单纯使用该法无法达到根除AMD 的目的,目前IAT 已很少被规模化的水貂养殖场采用。
水貂阿留申病毒感染过程中主要分子蛋白作用机理研究进展
2.1 VP1 和 VP2 的 切 割 和 活 化 研 究 表 明 VP1 和 VP2 在 AMDV 复 制 中占 有 重要 地 位。 AMDV 在猫 肾 细 胞 (CrFK)中参与复制的主要 mRNA 为 R2 mRNA。R2 mRNA 主
*Corresponding author
收稿日期：2018-08-30 基金项目：国家自然科学基金(31372436)；吉林省科技厅科技支撑计划(20160209006YY) 作者简介：栾美慧(1993-)，女，吉林通化人，硕士研究生，主要从事经济动物疫病学研究. * 通信作者：E-mail：13891035@；104974602@
第 41 卷 第 9 期 2019 年 9 月
中国预防兽医学报
Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine
Vol. 41，No.9 Sep. 2019
doi: 10.3969/j.issn.1008-0589.201808033
水貂阿留申病毒感染过程中主要分子蛋白 作用机理研究进展
内检测到了该病毒 。 [10]
新发 现 的貉 蓝 狐阿 留 申病 毒 (RFAV)、 火狐 阿 留申 病
毒 (RFFAV) 和 灰 狐 阿 留 申 病 毒 (GFAMDV) 在 2014 年 被 国
际 病 毒 分 类 委 员 会 纳 入 阿 留 申 病 毒 属 。 [11] AMDV 对 水 貂 的感染因水貂的年龄不同，其病理表现也不同。对成年水 貂，AMDV 由 Fc 受体介导感染其巨噬细胞。在幼年水貂 中 ， 病 毒 感 染 其 肺 泡 II 型 细 胞 并 引 起 该 细 胞 死 亡 。 AMDV 可以 通过 血 液、 唾 液、 粪 便 和尿 液 的直 接 或间 接 接触感染，还可以从感染的雌性水貂垂直传播到幼年水 貂。病毒粒子在环境中具有高度稳定性，这种稳定性使得 病毒难以从受污染物体的表面清除，并使得病毒在野外、 养殖场内和养殖场之间传播。
水貂阿留申病诊断抗原研究概述
ｆ ｅ ｂ ｒ ｉ ｌ ， ａ ｃ ｕ ｔ ｅ ， ｓ ｅ ｐ ｔ ｉ ｃ ａ ｎ ｄ ｈ ｉ ｇ ｈ ｌ ｙ ｆ ａ ｔ ａ ｌ ｆ ｅ ａ ｔ ｕ ｒ ｅ ｓ ． Ｎｅ ｗｃ ａ ｓ ｔ ｌ ｅ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｃ ａ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｔ ｉ ｍｅ ｓ ｏ ｆ ｏ ｕ ｔ ｂ ｒ ｅ ａ ｋ ｓ ａ ｎ ｄ ｉ ｓ ｗｉ ｄ ｅ — ｓ ｐ ｒ ｅ ａ ｄ ａ ｌ ｌ ｏ ｖ ｅ ｒ ｔ ｈ ｅ ｗｏ ｒ ｌ ｄ ， ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｉ ｎ ｇ ｉ ｎ ａ ｌ ａ ｒ ｇ ｅ ｅ ｃ ｏ ｎ ｏ ｍｉ ｃ ｌ ｏ ｓ ｓ ａ ｎ ｄ ｈ ｉ ｎ ｄ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ ｐ ｏ ｕ ｌ ｔ ｒ ｙ ｈ ｕ ｓ — ｂ ａ ｎ ｄ ｒ ｙ ． Ｔｈ ｅ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｃ ａ ｎ ｂ ｅ ｔ ｒ ｉ ｇ ｇ ｅ ｒ ｅ ｄ ｂ ｙ ａ ｖ ａ ｒ ｉ ｅ ｔ ｙ ｏ ｆ ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ ｓ ａ ｎ ｄ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｍｉ ｔ ｔ ｅ ｄ ｔ ｈ ｒ ｏ ｕ ｇ ｈ ａ ｖ ａ ｒ ｉ ｅ ｔ ｙ ｏ ｆ ｗａ ｙ ｓ ． Ｗｉ ｔ ｈ
水貂 阿 留 申病作 为毛 皮动 物 的三大 疫病之 一 （ 阿 留申病 、 犬瘟 热 、 病毒 性肠 炎） ， 是 导致母 貂产仔 率 下 降 、 公貂 配种 能力 降低和 毛皮 质量 下 降的一种 高度接 触性 传 染病 。至今 为 止 ， 还 没 有 商品 化 的疫 苗 来控 制 该 病 的传
（ １ ． 吉林农业大学 ， 吉林长春 １ ３ ０ １ １ ８ ； ２ ． 吉林 特 研 生 物 技 术 有 限 责 任 公 司 ， 吉林 长春 １ ３ ０ １ ２ ２ ； ３ ． 中 国农 业 科 学 院 特 产 研 究 所 ， 吉林长春 １ ３ ０ １ ２ ２ ）
水貂阿留申病研究进展
３ 发 病 机理
从 １４ ９０年发现 Ａ Ｄ以来 ， 国内外学者针对 Ａ Ｄ的发病机理进行了大量的研究工作。基于 目前国内
・ 通讯作者， 博士， 男， 教授。主要研究方向： 兽医微生物学与免疫学。Ｅｍ ｉｌｌｎｈｎ＠１３ｃｍ －ａ ：ｉ ｃｅｇ ６。ｏ 。 ｌ ｅｉ ａ
收稿 日 ： ０ １ ３ ９ 期 ２１－ － ００
２ 分子生物 学
１８ 年 ，ｌ ｍ等 完成了 Ａ Ｖ Ｇ亚型的基因序列测定 ， ９８ Ｂｏ Ｄ— 其基 因共包含 ４８ １ ０ 个核苷酸。基因组
的两端均存在回文序列 ， 并形成发夹结构 ， ４ 共有 个编码蛋 白的开放阅读框架（ Ｆ ） 分别为 ： ＯＲ ， 左开放阅 读框架（ —Ｒ ） 右开放阅读框架 （ — Ｒ ） ２个短 的可编码小 于 １ ｕ多肽 的中间开放阅读框架 ＬＯ Ｆ 、 ＲＯ Ｆ 和 ０ｋ （ Ｏ Ｆ 和 Ｍ Ｒ ２ 。ＬＯ Ｆ Ｍ Ｒ１ Ｏ Ｆ ） — Ｒ 对应非结构蛋 白 １ Ｎ １ ， —Ｒ （ Ｓ ） Ｒ Ｏ Ｆ对应结构蛋 白 １２ Ｖ １、 ） Ｍ Ｏ Ｆ ，（ Ｐ ， ， ．Ｒ 对应其他非结构蛋 白。
中图分类号 ： ８ ８ ９ ２ ６ ９ ２ Ｓ ５ ．２ ．５ ． 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ： ６ ２７ ８ （ ０ １ ｏ － ４ －３ １７ －９３ ２ １ ） ４ ０ ５ｏ ０
水貂阿留申病（ Ｄ 是 由细小病毒科 阿留申水貂病毒属水貂阿留申病毒 （ Ｄ ） Ａ） Ａ Ｖ 引起的， 主要侵染 水貂 、 病程缓慢的传染性疾病。阿留申病毒对水貂的健康有严重的影响 ， 能够使水貂呈现多种不同的临 床症状 。新生水貂表现为急性肺炎 ， 成年水貂则表现为伴有高 一 球蛋 白和 肾小球肾炎等症状的慢性免
疫系统失调 。Ａ Ｖ主要侵染水貂 ， Ｄ 不仅感染阿留申基 因型水貂 ， 其他所有基因型的水貂都易感 ， 只是非 阿留申型水貂的症状较轻 。
水貂阿留申病的诊治
中药治疗方法
中药复方
根据中兽医的理论，选用具有清 热解毒、抗病毒作用的中药组成 复方，对水貂阿留申病进行治疗
。
中药提取物
利用现代科技手段，从中药中提 取有效成分，制成中药提取物， 以便更好地发挥中药的治疗作用
。
针灸疗法
结合中兽医的针灸理论，对水貂 进行针灸治疗，以调和气血、疏 通经络，从而达到治疗水貂阿留
水貂阿留申病的诊治
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目录
• 引言 • 水貂阿留申病的发病机理与症状 • 水貂阿留申病的诊断方法 • 水貂阿留申病的治疗方法 • 水貂阿留申病的预防与控制 • 总结与展望
01
引言
水貂阿留申病的概述
定义
水貂阿留申病是由阿留申病毒引起的一种传染性疾病，主要 发生在水貂身上。
传播途径
该病毒主要通过直接接触感染，也可通过呼吸道、消化道等 途径传播。
防控策略
水貂阿留申病的防控策略主要包括疫苗接种、生物安全措施和饲养管理。疫苗接种是预防 水貂阿留申病的有效手段，同时加强饲养场的生物安全措施，改善饲养管理条件，可降低 疾病的发生和传播风险。
未来研究方向与挑战
深入研究病毒特性
进一步对水貂阿留申病病毒进行基因组学、蛋白组学等方面的研究 ，揭示病毒的致病机制和免疫逃逸机制，为防控策略提供科学依据 。
抗原检测：利用特异性抗体，通过抗原捕获ELISA等方法，检测病料中的病毒抗原，以快速 诊断水貂阿留申病病毒感染。
综上所述，针对水貂阿留申病的诊断，需要结合临床症状观察、病理学检查和免疫学诊断等 多方面的信息进行综合判断。在实际操作过程中，应遵循相关生物安全规范，确保诊断过程 的准确性和安全性。
04
水貂感染阿留申病毒后， 常常会出现高热，体温升 高，持续数天至数周不等 。
水貂阿留申病流行现状特点及防治技术
水貂阿留申病流行现状特点及防治技术一、病流行现状水貂阿留申病最早在2024年在加拿大发现，随后迅速传播至其他国家。
据统计，目前已经有多个国家出现水貂阿留申病例，其中包括欧洲、亚洲与北美洲国家。
该病以水貂为首要宿主，但也可以感染其他哺乳动物和人类。
因此，水貂阿留申病具有高度的传染性。
二、病特点1.病原体特点：水貂阿留申病的病原体主要是一种新型的冠状病毒，属于单股正义链RNA病毒。
该病毒具有强大的传播能力和感染性，能通过直接接触、飞沫传播和污染的水源等途径传播。
2.临床表现特点：水貂阿留申病对病貂的病程分为急性、亚急性和慢性三种类型。
急性型病貂主要表现为呼吸道症状如咳嗽、打喷嚏、呼吸急促等；亚急性和慢性型病貂则表现为消化系统症状如腹泻、食欲不振等。
此外，病貂还会出现发热、眼结膜炎、消瘦等症状。
3.人畜共患：水貂阿留申病具有人兽共患的特点。
人类感染该病毒后，临床表现与流感类似，包括发热、喉咙痛、咳嗽、疲劳等。
重症患者可能出现肺炎、急性呼吸窘迫综合征等严重后果。
三、防治技术1.动物管控：在水貂阿留申病疫情高发区域，要采取措施降低宿主动物的密度。
这可以通过减少饲养数量、改善饲养条件以及注意动物群体的居住密度等方式来实现。
2.人畜隔离：患病水貂要进行隔离，避免与其他动物和人类直接接触。
同时，要加强与水貂接触的人员的个人防护，包括戴口罩、穿戴防护服等。
3.疫苗研发：科学家正在努力研发水貂阿留申病的疫苗。
疫苗的研发将有助于预防水貂阿留申病的传播和减少其对人类的威胁。
4.国际合作：由于水貂阿留申病具有跨国界传播的特点，各国之间需要加强信息共享、技术交流和合作，共同应对水貂阿留申病的挑战。
总结起来，水貂阿留申病作为一种具有高度传染性的传染病，在全球范围内引起了广泛关注。
针对该病的特点和流行现状，防控应该以动物管控、人畜隔离、疫苗研发和国际合作为主要措施。
这些措施的有效实施将有助于减少水貂阿留申病对动物和人类的影响，保障公共卫生安全。
水貂阿留申病毒检测方法研究进展
水貂阿留申病毒检测方法研究进展刘艺;刘亚东;杜锐;冷雪;时坤;李健明;曾范利;宗颖;宫庆龙;张姗姗;孙志博【摘要】水貂阿留申病是由水貂阿留申病毒引起的以浆细胞增多为主要特征的慢性、消耗性、病毒性传染病.主要侵害水貂的免疫系统,导致机体免疫系统紊乱引起的器官衰竭,病死率极高,严重损害了水貂养殖产业的经济利益,该病存在于绝大多数养殖水貂的国家和地区.目前,能有效预防该病的疫苗尚未研制成型,该病的防控已成为水貂养殖领域的世界性难题,在防控方面主要采取淘汰检疫阳性水貂的办法.论文主要针对目前该病在国内外检测方法的特点和流行情况进行阐述,以期为水貂阿留申病快速检测方法的建立及水貂阿留申病的有效防控提供参考.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2018(039)010【总页数】4页(P74-77)【关键词】阿留申病毒;检测方法;防控【作者】刘艺;刘亚东;杜锐;冷雪;时坤;李健明;曾范利;宗颖;宫庆龙;张姗姗;孙志博【作者单位】吉林农业大学,吉林长春 130118;吉林农业大学,吉林长春 130118;吉林农业大学,吉林长春 130118;吉林农业大学,吉林长春 130118;吉林农业大学,吉林长春 130118;吉林农业大学,吉林长春 130118;吉林农业大学,吉林长春 130118;吉林农业大学,吉林长春 130118;吉林农业大学,吉林长春 130118;吉林农业大学,吉林长春 130118;吉林农业大学,吉林长春 130118【正文语种】中文【中图分类】S852.659.2水貂阿留申病(Aleutian disease of mink,ADM)是一种能够令宿主终生携带并引起机体免疫系统紊乱的毒血症。
水貂阿留申病毒(Aleutian disease virus，ADV)感染幼貂，可在其肺泡Ⅱ型细胞高效复制，引起急性致死性间质性肺炎，而感染成年貂，则主要感染淋巴结巨噬细胞，呈低水平病毒复制，引起以脾肿大、高丙种球蛋白血症、浆细胞增多、动脉炎、免疫复合物型肾小球肾炎为特征的慢性疾病，可致使水貂消瘦，繁殖力低下[1-2]。
水貂阿留申病诊断技术研究进展
动物医学进展,２０１９,４０(６):７８Ｇ８２P r o g r e s s i nV e t e r i n a r y Me d i c i n e 水貂阿留申病诊断技术研究进展㊀收稿日期:２０１８Ｇ０６Ｇ０７㊀基金项目:中国农业科学院农业科技创新工程项目(２０１８)㊀作者简介:韦㊀韬(１９９３－),男,甘肃庆阳人,硕士研究生,主要从事兽医学研究.∗通讯作者韦㊀韬,吴艳虹,丛㊀丽,赵永强,马瑞芳,邵西群∗(中国农业科学院特产研究所,吉林长春１３０１１２)㊀㊀摘㊀要:水貂阿留申病是水貂养殖业的重要疫病,目前无疫苗预防,主要通过发展诊断技术,淘汰感染貂防控该病.论文总结了在貂场应用的基因与抗体检测技术,基因检测具有高灵敏度和特异性,能够检测到动物带毒感染,不同类型的基因检测技术对变异性强的阿留申病毒检测各有所长;抗体检测是水貂阿留申病的主要检测方式,研究者不断创新和改进原有技术,趋向对阿留申病的规模化精准检测,但单一的抗体检测方法淘汰感染貂具有局限性.论文通过对两类检测技术分析,建议采用基因与抗体的联合检测方法,从感染貂群中区分耐受貂或抗性貂,期望为国内高感染率貂场的检测和选种提供参考.㊀㊀关键词:水貂阿留申病;阿留申病毒;诊断中图分类号:S ８５２．６５文献标识码:A文章编号:１００７Ｇ５０３８(２０１９)０６Ｇ００７８Ｇ０５㊀㊀水貂阿留申病(A l e u t i a n m i n kd i s e a s e ,AM D )是由水貂阿留申病毒(A l e u t i a n m i n kd i s e a s ev i r u s,AM D V )侵害免疫细胞引起的免疫抑制性传染病.在成年水貂中病毒持续慢性感染,引起浆细胞弥漫性增生,血清中γ球蛋白显著增高,在体内因AM ＧD V 与其抗体形成有感染性的病毒Ｇ抗体复合物.抗体不能中和病毒,引发抗体依赖性病毒感染增强效应(a n t i b o d y d e p e n d e n te n h a n c e m e n t ,A DE ),免疫复合物随血液循环沉积于血管内皮导致Ⅲ型迟发型超敏反应,造成血管炎㊁肾小球肾炎等症状,引起病貂免疫系统紊乱.而在３月龄内的幼貂,病毒侵入肺泡Ⅱ型细胞快速增殖,造成高致死性的间质性肺炎,用AM D V 的抗体被动免疫或肺炎耐过的幼貂发展为与成年貂相同的慢性感染症状[１Ｇ２].成年水貂阿留申病表现为进行性消瘦㊁贫血㊁嗜水和繁殖能力低等慢性消耗性症状,因此该病成为水貂养殖业的危害最为严重的疫病.水貂感染AM D V 后发展的类型受到自身的基因型与免疫力㊁AM D V 的毒力以及养殖环境等因素的影响.AM D V 感染非阿留申基因水貂主要发展成３种类型[３]:病毒持续感染,水貂表现出渐进性发病,发展为典型阿留申病;病毒短暂感染,水貂表现出暂时的病毒血症,随后病毒在体内被清除,可筛选为AM D V 抗性貂;病毒非渐进性感染,病毒在水貂体内自限性复制,在体内持续隐性存在,无明显阿留申病症状,可筛选为AM D V 耐受貂.由于水貂阿留申病是免疫加强的病理性疫病,目前试制的水貂阿留申病疫苗只能产生部分免疫保护[４],至今仍未研发出有效的疫苗和药物进行预防和治疗,因此水貂阿留申病的诊断技术是防控水貂阿留申病的关键.AM D V 属于细小病毒科㊁阿留申病毒属[５],是能自我复制的单股负链D N A 病毒,病毒基因组的转录本可编码结构蛋白V P １和V P ２,非结构蛋白N S １㊁N S ２和N S ３.其中V P ２为AM D V 的主要结构组分蛋白㊁抗原免疫蛋白;N S １是最大的非结构蛋白,主要参与病毒D N A 的复制和病毒基因的表达调控.本文主要围绕病毒基因㊁抗原特征阐述水貂阿留申病主要诊断技术,并展望水貂阿留申病诊断技术的发展趋势.１㊀AM D V 基因检测１．１㊀传统P C R 检测１９４６年首次发现水貂阿留申病,随后分离㊁纯化到AM D V ,确认其病原为细小病毒科成员[５].２０世纪８０年代完成对AM D V ＧG 株的全基因组测序.随着分子生物学发展,P C R 技术的发明,AM D VP C R 被应用于检测和流行病学调查中.邵西群等分别用P C R 和对流免疫电泳(c o u n t e r i mm u n o Ｇe Ｇl e c t r o ph o r e s i s ,C I E P )检测不同感染率貂群,发现P C R 与C I E P 结果不匹配,说明病毒感染先于抗体产生.在高感染率貂场不宜仅靠C I E P 来淘汰抗体阳性水貂,应将P C R 和C I E P 联合检测判断水貂感染状态,筛选出水貂阿留申病毒感染康复貂,可有效地降低貂场损失[３].P C R有着较高的敏感度,然而传统P C R检测操作繁琐,需要依靠实验室等问题,难以用于大规模检测.国内外学者通过P C R扩增测序,先后从灰狐㊁北极狐和乌苏里貉身上发现阿留申病毒新种[６Ｇ７].对臭鼬阿留申病毒开展分子流行病学调查,发现臭鼬阿留申病毒不同于AM D V,为阿留申病毒属内新种;比较属内阿留申病毒基因序列发现,N S１同源性小于８５％(５９．１％~８０．４％),V P２同源性小于９５％(７２．６％~９１．２％),表明V P２的保守性高于N S１[８].在小熊猫中检测到阿留申病毒,对其N S１测序并与AM D V的N S１氨基酸序列比较发现同源性约为７５％.根据国际病毒分类学委员会(I n t e r n a t i o n a l C o mm i t t e e o nT a x o n o m y o fV i r u s e s,I C T V)推荐细小病毒科病毒属内病毒种的划分以N S１氨基酸序列同源性小于８５％为标准[５],因而确定感染小熊猫的是一个新种阿留申病毒,并命名为小熊猫阿留申病毒[９].阿留申病毒新种不断的被发现,扩展了对阿留申病毒种内种间多样性及其危害的认识,对于水貂阿留申病的防控有重要意义.因此,针对N S１和V P２设计P C R引物,有着不同的意义.V P２序列具有较高的保守性,针对V P２设计保守序列,能够覆盖阿留申病毒属内毒株,有效检测不同动物源的阿留申病毒新种.N S１序列变异性较大,通过对N S１设计引物,开展流行病学调查有利于区分毒株,对于暴发疫情的国家,N S１序列测定可以作为有效的追踪工具[１０],并且N S１序列是划分细小病毒科属内病毒种的重要依据.１．２㊀实时荧光定量P C R检测P r i e t oA等首次应用实时荧光定量P C R(r e a lＧt i m eP C R)对环境中的样本进行检测,包括粪便㊁泥土㊁鞋套㊁抓捕手套等,阳性率高达９３．９％.随后P r i e t oA对水貂随处环境进行了分类,基于N S１基因序列设计引物,对貂场环境中的样品进行r e a lＧt i m eP C R检测,发现样品与水貂距离越近,病毒含量越高.P r i e t oA认为水貂阿留申病净化失败原因之一是环境中存在病毒污染[１１Ｇ１２].张瑞等在国内首次建立S Y B R G r e e nⅠr e a lＧt i m eP C R方法检测AM D V,具有良好的特异性和敏感性.李艳伍等首次建立T a q M a nr e a lＧt i m eP C R方法检测AM D V,该方法可检测病毒量低至４７．７c o p i e s/μL,敏感性是传统P C R的１００倍[１３].r e a lＧt i m eP C R技术具有高灵敏度,能检测环境中病毒含量较低的样品,也能监测细胞培养中病毒感染量,分析病毒感染动态[１４].１．３㊀直接P C R检测用抗干扰性强的O m n iK l e n t a qＧL A D N A聚合酶建立直接P C R技术,检测水貂组织和血液样品中的AM D V.直接P C R技术无需对血液或组织进行D N A提取,可节约时间㊁降低成本㊁避免样本提取过程中所带来的D N A丢失㊁交叉污染等问题.将直接P C R与传统P C R相比,结果表明无论在血液还是组织中,直接P C R效果均优于传统P C R检测[１５].１．４㊀环介导等温扩增检测根据V P２基因设计了一套环介导等温扩增(l o o pＧm e d i a t e d i s o t h e r m a l a m p l i f i c a t i o n,L AM P)引物,在６５ħ下等温扩增３０m i n出现结果,４５m i n后扩增达到最大值.田国宁等根据V P２基因设计了５套引物,筛选出最优的反应条件和引物,灵敏度试验表明L AM P是普通P C R的１０倍[１３].L AM P有着高敏感性和特异性,操作方便,依靠恒温水浴锅或保温杯即可完成反应,在反应体系中加入S Y B R G r e e n I达到可视化效果,反应产物阴性呈橘黄色,阳性为绿色,是一项有望应用于现场的检测技术.综上所述,已应用于阿留申病毒的不同类型基因检测技术,适用于各自检测需求.P C R类检测具有高敏感性㊁特异性等优点,能够用于病毒感染早期诊断,并可检测多种样品;r e a lＧt i m eP C R可定量检测病毒,有效分析细胞培养中病毒感染情况,在指导防控AM D V的传播中发挥重要作用.动物阿留申病毒具有较高的遗传多样性,不断有阿留申病毒新种被发现,阿留申病毒属内保守区引物的设计,是检测动物阿留申病毒的关键.通过P C R扩增高变区序列进行比对,可区分不同阿留申病毒株,开展流行病学调查,对水貂阿留申病的防控具有重要意义.目前国内外基因检测主要发展趋势为建立现场易用,操作简便,无需实验仪器的快速批量基因检测技术,通过添加显色剂,使得结果易判,即快速检测技术(p o i n t e do f c a r e t e s t i n g,P O C T)[１６].２㊀血清学抗体检测２．１㊀碘凝集试验将碘凝集试验(I A T)用于水貂阿留申病的诊断中,感染AM D V且发病的水貂血清中γ球蛋白含量大于２１％(０．２g/L),碘液与其形成褐色的絮状沉淀[１７].I A T操作简单,反应快速,成本低廉,并且能够避免淘汰一些不发病的水貂阿留申病毒耐受貂,被广泛应用于现场检测中.I A T无法区别其他引起血清γ球蛋白含量增加的疫病,缺乏对水貂阿留申病的特异性,但在养殖场中应用,能够快速检测出动物是否患有慢性疫病,通过I A T筛选淘汰后的貂群９７韦㊀韬等:水貂阿留申病诊断技术研究进展平均产仔数和成活数明显提高.２．２㊀对流免疫电泳对流免疫电泳(C I E P)属于抗原抗体沉淀反应,在电场作用下,带负电荷的抗原从阴极向阳极移动;带弱负电荷的抗体在反渗作用下从阳极向阴极移动.抗原抗体在电场作用下相向运动,在琼脂糖凝胶中出现明显的白色沉淀线.C I E P重复性好㊁特异性高,操作简单,被广泛用于检测AM D V抗体,已被多国海关作为进出口检测的标准,并且C I E P用AM D V抗原能够检测其他阿留申病毒种感染产生的抗体[５].但C I E P在抗体处于未产生期或者低浓度的情况下,容易漏检水貂阿留申病阳性貂.调查发现,AM D V抗体存在一定的消长规律,一定比例C I E P检测阳性的水貂转为阴性,阴性水貂转为阳性的现象,群体抗体检测的阳性率在１２月份最高,确定此时期为C I E P检测的最佳时机[１８].用C I E P和P C R联合检测,通过组织病理学检测评价水貂阿留申病造成组织损伤的严重程度,结果发现水貂阿留申病阳性貂中存在一定数量的水貂阿留申病毒耐受貂(C E I P阳性,P C R阴性,γ球蛋白含量低,组织损伤程度降低)[１９].邵西群同样发现水貂阿留申病毒感染貂群存在一定比例抗性貂[３].由此可见,C I E P 检测抗体特异性高,重复性好,可有效控制貂群AM D V的感染率;但是仅靠单一的C I E P检测淘汰抗体阳性貂,将清除掉感染AM D V而无病症的耐受貂㊁抗性貂,削弱群体的抗病性.２．３㊀胶体金试纸条１９７１年胶体金层析技术首次引入到免疫学中,随后在临床诊断方面被广泛应用.２０１０年初步建立了AM D V抗体的胶体金试纸条检测方法,结果显示其敏感性高于C I E P[１３,２２].王振军等[２０]完善了水貂阿留申病检测胶体金试纸条制备工艺,采用少量全血稀释即可进行检测.试纸条使用简单,结果易判,已有商品化产品,在貂群抽样快速检测中发挥重要作用.２．４㊀斑点酶联免疫试验斑点酶联免疫试验(d o ti mm u n eＧe n z y m ea sＧs a y,D I A)是１９９２年首先提出一种应用于水貂阿留申病的诊断新技术.其原理与双抗体夹心E L I S A 相同,用硝酸纤维素膜替换聚苯乙烯反应板,将血清中AM D V抗体吸附在硝酸纤维素膜上,用昆虫表达系统表达重组病毒(V P１ＧV P２)为抗原,生物素化的AM D V特异性抗体与碱性磷酸酶标记的链霉亲和素为二抗进行检测.用针刺脚垫采血(０．５μL~１．０μL),转移到硝酸纤维素膜纸片上,１个４ˑ９c m２纸片可负载２００个血样,用笔在纸片上做好标记,以信件形式邮寄发往实验室完成质控反应,阳性结果以蓝色斑点显示在膜上,以图像形式返回用户.该技术采血量小,采样方便快捷,缩短采样时间,能有效控制采血造成的交叉污染和病毒散播[２１].国内建立了V P２㊁N S１以及V P２ＧN S１融合基因等不同蛋白为包被抗原的D I A,具有较高的灵敏度和特异性[２２].D I A检测技术在实验室严格质控下完成反应,可全自动化操作,规模化检测样品,在俄罗斯已成熟应用于貂场检测.２．５㊀酶联免疫吸附试验１９８２年W r i g h tPF等首次将酶联免疫吸附试验(e n z y m eＧl i n k e di mm u n o s o r b e n ta s s a y,E L I S A)应用在AM D V抗体检测中,W r i g h tPF用全病毒包被抗原,建立了间接E L I S A并与C I E P比较,发现E L I S A存在较高的假阴性,限制了应用.随后以昆虫杆状病毒表达系统表达重组V P２蛋白病毒颗粒作为包被抗原,建立了间接E L I S A,重组V P２ＧE L I S A与C I E P比较,具有较高的一致性[１３,２２].将V P２ＧE L I S A和AM D VＧG株为包被抗原的E L I S A 分别于C I E P比较,V P２ＧE L I S A敏感性,特异性分别为９９．７％和９８．３％,而AM D VＧGＧE L I S A为５４．３％和９３．２％,表明V P２ＧE L I S A优于全病毒E L I S A[２３].筛选出V P２(３８９a aＧ３９８a a,４５９a aＧ４７３a a)线性抗原表位并制备成单克隆抗体,与其他细小病毒科氨基酸序列比对,发现这些线性短肽在AM D V 中均高度保守.单抗的制备大大丰富了以单抗为基础的E L I S A㊁胶体金试纸条等检测手段,为水貂阿留申病免疫学检测奠定了基础[２４Ｇ２５].C h e n X 等[２６Ｇ２７]分别建立了V P２不同区段(３３２a aＧ４５２a a,４１５a aＧ４３３a a)线性抗原短肽E L I S A,具有良好的敏感性和特异性,并用原核表达系统表达短肽抗原,可降低检测成本.E L I S A敏感性㊁特异性不断被提高,广泛应用于检测AM D V抗体.D a mＧT u x e n R等[２２]建立了全自动化的E L I S A,每天可检３８,０００个样本,极大节省人工,适合大量样本检测,已被丹麦哥本哈根诊断中心采用.以AM D VＧV P２重组蛋白为包被抗原,建立了自动化E L I S A,与C I E P比较,敏感性,特异性分别为９６．２％和９８．４％[２８].由于原有的净化策略失败率较高,造成严重的经济损失,现欧美洲多个国家已改变原来的策略,通过筛选水貂阿留申病毒耐受貂,来降低水貂阿留申病所造成的影响.用E L I S A对AM D V抗体进行定量,筛选低滴度抗体０８动物医学进展㊀２０１９年㊀第４０卷㊀第６期(总第３１２期)的水貂阿留申病毒耐受貂[２９].用D B S(d r i e db l o o d s p o t s a m p l e s,D B S)V P２ＧE L I S A检测AM D V抗体,详细说明水貂阿留申病对水貂繁殖能力的影响,认为应该明确区分抗体水平标准,以O D４５０n m大于０．８３(血浆蛋白与γ球蛋白比值小于５)作为判断水貂阿留申病貂的标准[３０].针对AM D V产生的N S１和V P２抗体检测有着不同的意义,V P２为AM D V 的结构蛋白,具有较强保守性.针对V P２属内保守抗原区检测,可检测出属内新毒种;N S１为病毒早期的复制蛋白,针对N S１蛋白的检测,能够判断病毒是否在机体内复制.E L I S A能够定量AM D V抗体滴度,根据抗体滴度与γ球蛋白含量的对应关系,设定阈值,可准确推断水貂感染水貂阿留申病的状态,筛选水貂阿留申病毒耐受貂和抗性貂.综上所述,血清学抗体检测技术的发展日新月异,不断在原有技术上改进以及创新新型检测技术,为防控水貂阿留申病创造了有力条件,其趋势主要围绕着五个方面:采样方便,降低成本,可全自动化操作,能够定量抗体和γ球蛋白含量以及适合集中式大规模检测或者现场简便式检测.３㊀展望随着分子生物学和免疫学快速发展,AM D V的检测技术也日新月异.针对AM D V的基因㊁抗体检测技术可能的发展趋势如下:在采样方面,采样方便快捷,所需采血量少,降低对貂的损伤以及避免采血过程中的病毒传播和交叉污染;在现场检测方面,现场检测朝着P O C T发展,现场适合,操作方便,快速获得结果;在实验室检测方面,筛选保守引物㊁抗原表位,加强对阿留申病毒新种的发现㊁诊断;在群体检测方面,朝着规模化,自动化方向发展,降低人工的同时减少人为误差,提高实验的准确性.对于貂场来说,不同感染率的貂场所需检测技术不同.低感染率貂场可采取基因和抗体联合检测方法,淘汰阳性水貂,并可对貂场环境进行检测㊁消毒,从而建立无水貂阿留申病貂场;高感染率貂场,可改变原有的净化策略,通过基因和抗体联合检测水貂阿留申病,通过定量抗体滴度,根据抗体滴度与γ球蛋白含量的对应关系,准确把握水貂感染AM D V后临床发展类型,筛选水貂阿留申病毒耐受貂㊁抗性貂,提高貂群整体抗病性,减少水貂阿留申病和净化貂场所带来的经济损失.参考文献:[１]㊀B l o o m M E,B e s tS M,H a y e sSF,e t a l．I d e n t i f i c a t i o no fA l e uＧt i a nm i n kd i s e a s e p 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a g a i n s tV P２p r o t e i n[J]．V i r u sR e s,２０１６,２２３:３９Ｇ４２．[２５]㊀L uT,W a n g Y,G e J,e t a l．I d e n t i f ic a t i o n a nd c h a r a c te r i z a t i o n of an o v e lBＧc e l l e p i t o p eo n A l e u t i a n m i n kd i s e a s ev i r u sc a p s i dp r o t e i nV P２u s i n g am o n o c l o n a l a n t i b o d y[J]．V i r u sR e s,２０１８,２４８:７４Ｇ７９．[２６]㊀C h e nX,S o n g C,L i uY,e t a l．D e v e l o p m e n t o f a n e n z y m eＧl i n k e di mm u n o s o r b e n t a s s a y b a s e d o n f u s i o nV P２３３２Ｇ４５２a n t i g e n f o rd e t e c t i n g a n t i b o d i e s a g a i n s tA l e u t i a n m i n kd i s e a s ev i r u s[J]．JC l i n M i c r o b i o l,２０１６,５４(２):４３９Ｇ４４２．[２７]㊀M aF,Z h a n g L,W a n g Y,e ta l．D e v e l o p m e n to fa p e p t i d eE L I S Af o r t h ed i a g n o s i so fA l e u t i a n m i n kd i s e a s e[J]．P L o SO n e,２０１６,１１(１１):e０１６７９３．[２８]㊀K n u u t t i l aA,A r o n e nP,E e r o l aM,e t a l．V a l i d a t i o no f a na u t oＧm a t e dE L I S As y s t e mf o rd e t e c t i o no fa n t i b o d i e s t o A l e u t i a nm i n kd i s e a s e v i r u s u s i n g b l o o d s a m p l e s c o l l e c t e d i n f i l t e r p a p e r s t r i p s[J]．V i r o l J,２０１４,１１:１４１．[２９]㊀F a r i dA H,R u p a s i n g h e PP．A c c u r a c y o f e n z y m eＧl i n k e d i mm uＧn o s o r b e n t a s s a y s f o r q u a n t i f i c a t i o n o f a n t i b o d i e s a g a i n s tA l e uＧt i a n m i n kd i s e a s ev i r u s[J]．JV i r o lM e t h o d s,２０１６,２３５:１４４Ｇ１５１．[３０]㊀A n d e r s s o nA M,N y m a nA K,W a l l g r e nP．Ar e t r o s p e c t i v e c oＧh o r t s t u d y e s t i m a t i n g t h e i n d i v i d u a lA l e u t i a nd i s e a s e p r o g r e s si n f e m a l em i n ku s i n g aV P２E L I S Aa n d i t sa s s o c i a t i o nt or eＧp r o d u c t i v e p e r f o r m a n c e[J]．P r e vV e tM e d,２０１７,１４０:６０Ｇ６６．P r o g r e s s o nD i a g n o s i sT e c h n i q u e s o fA l e u t i a n M i n kD i s e a s eW E IT a o,WU Y a nＧh o n g,C O N GL i,Z H A O Y o n gＧq i a n g,MA R u iＧf a n g,S H A O X iＧq u n(I n s t i t u t e o f S p e c i a lA n i m a l a n dP l a n t S c i e n c e s,C h i n e s eA c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s,C h a n g c h u n,J i l i n,１３０１１２,C h i n a)A b s t r a c t:A l e u t i a nm i n kd i s e a s e i s t h em o s t i m p o r t a n td i s e a s e i nt h em i n kb r e e d i n g i n d u s t r y,n oe f f e c t i v e v a c c i n e t o p r e v e n t a s y e t,m a i n l y c o n t r o l l e d b y d e v e l o p i n g d i a g n o s i s t e c h n i q u e s a n d e l i m i n a t em i n k s i n f e c t e d w i t h t h eA l e u t i a nm i n kd i s e a s e v i r u s．T h em a i n g e n e a n d a n t i b o d y d e t e c t i o nm e t h o d s a p p l i e d i nm i n k f a r m s w e r e s u mm a r i z e d i n t h i s r e p o r t．T h e g e n e d e t e c t i o n t e c h n i q u e s c a nd e t e c t t h e a m d o p a r v o v i r a l c a r r i e r sw i t h h i g hs e n s i t i v i t y a n d s p e c i f i c i t y．D i f f e r e n t t y p e so f t e c h n i q u e s p l a y d i s t i n c t r o l e s i nd e t e c t i n g A l e u t i a n m i n k d i s e a s e v i r u sw i t hs t r o n g v a r i a b i l i t y．T h e a n t i b o d y d e t e c t i o n m e t h o d i s t h em a j o r t e s t i n g o fA l e u t i a n m i n k d i s e a s e,a n d i th a sb e e nc o n t i n u o u s l y i n n o v a t e da n d i m p r o v e db y r e s e a r c h e r s,w i t ht h e t e n d e n c y o f l a r g eＧs c a l e a c c u r a t e d e t e c t i o no f t h eA l e u t i a nd i s e a s e．S o m e s t u d i e s h a v e s h o w n t h a t s i n g l e a n t i b o d y t e s t i n g i s n o t e n o u g h t od e t e c tm i n k i n f e c t e dw i t hA l e u t i a nm i n kd i s e a s ev i r u s．T h e r e f o r e,b y a n a l y z i n g t w ok i n d so f d eＧt e c t i o n t e c h n o l o g i e s,t h i s p a p e r s u g g e s t s t h a t c o m b i n a t i o no f a m d o p a r v o v i r a l g e n e a n d a n t i b o d y t e s t i n g c a n b eu s e d t os c r e e nt h em i n k sw h i c ht o l e r a t eo r r e s i s t t h eA l e u t i a n m i n kd i s e a s ev i r u s i n f e c t i o n,h o p i n g t o p r o v i d e r e f e r e n c e f o r d e t e c t i o na n d s e l e c t i o no f d o m e s t i cm i n ks t o c kw i t hh i g h p r e v a l e n t r a t e．K e y w o r d s:A l e u t i a nm i n kd i s e a s e;A l e u t i a nm i n kd i s e a s e v i r u s;d i a g n o s i s２８动物医学进展㊀２０１９年㊀第４０卷㊀第６期(总第３１２期)。
水貂阿留申病的诊治
水貂阿留申病主要在北美、欧洲 和亚洲等地流行，多呈地方性流 行或散发。该病多发于密集饲养 的水貂场，尤其是幼貂养殖场。
易感动物与发病季节
易感动物
水貂是阿留申病毒的主要宿主和传染 源，其他动物如狐狸、狼等也可能感 染该病毒，但通常不发病。
发病季节
水貂阿留申病一年四季均可发生，但 通常在秋冬季节发病率较高。
合理搭配饲料
根据水貂不同生长阶段的营养需求， 合理搭配饲料，保证营养均衡。
定期进行疫苗接种和抗体检测
制定疫苗接种计划
根据当地疫情和疫苗种类，制定合理的疫苗接种 计划。
定期接种疫苗
按照接种计划，定期对水貂进行疫苗接种，提高 免疫力。
抗体检测
定期对水貂进行抗体检测，了解免疫效果，及时 补种疫苗。
发现病例及时隔离治疗，防止扩散
病原学检查
通过采集病料进行细菌培养、分 离和鉴定，确定病原菌种类。
血清学检查
利用特异性抗体检测水貂血清中的 抗体水平，判断是否感染该病。
分子生物学检测
利用PCR、RT-PCR等技术检测病料 中的病毒核酸，为快速诊断提供支 持。
分子生物学技术在诊断中的应用
病毒基因测序
对病毒基因进行测序分析，了解 病毒的遗传背景和变异情况。
提高了诊断的准确性和效率。
疫苗的应用
02
针对阿留申病的疫苗已经研发成功，并在生产中得到广泛应用
，有效降低了该病的发病率、定期消毒、隔离病貂等措施，有效地控制
了阿留申病的传播。
对未来防治工作的展望和建议
加强监测和预警
建立完善的监测和预警体系，及时发现并控制疾病的爆发和传播 。
03
临床症状与病理变化
临床症状描述
威海某地区水貂阿留申病的诊断与调查
Ｄｉ ａ ｇ ｎ ｏ ｓ ｉ ｓ ａ ｎ ｄ Ｓ ｕ ｒ ｖ ｅ ｙ ｏ ｆ Ａｌ ｅ ｕ ｔ ｉ ａ ｎ Ｄｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｏ ｆ Ｍｉ ｎ ｋ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ Ｒｅ ｇ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｗ ｅ ｉ ｈ ａ ｉ
Ｄｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｗａ ｓ ｖ ｅ ｒ ｙ ｓ ｅ ｒ ｉ ｏ ｕ ｓ ｉ ｎ Ｗｅ ｉ ｈ ａ ｉ ．
Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ ：ｍｉ ｎ ｋ ；ａ ｌ ｅ ｕ ｔ ｉ ａ ｎ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ； ｄ ｉ ａ ｇ ｎ ｏ ｓ ｉ ｓ ；ｓ ｕ ｒ ｖ ｅ ｙ
天津农 业科学 删ｉ ｎ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ
・畜 牧 兽 医 与 水 产 养 殖
威海某地 区水貂 阿留申病 的诊断与调查
陈超 然 ， 温建 新
（ 青 岛农 业 大学 动物 科技 学 院 ， 山东 青岛 ２ ６ ６ １ ０ ９ ）
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｓ ｏ ｍｅ ｓ ｕ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ｌ ｅ ｔ ｈ ａ ｌ Ａｌ ｅ ｕ ｔ ｉ ａ ｎ ｍｉ ｎ ｋ ｓ ａ ｎ ｄ ｍｏ ｒ ｅ ｔ ｈ ａ ｎ ２ ０ ０ ０ ｂ ｌ ｏ ｏ ｄ ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｏ ｂ ｔ ａ ｉ ｎ ｅ ｄ ｉ ｎ ｓ ｏ ｍｅ ａ ｒ ｅ ａ ｓ ｔ ｈ ｅ ｔ ｗｏ ｍｉ ｎ ｋ ｆ ａ ｒ ｍ ｉ ｎ Ｗｅ ｉ ｈ ａ ｉ ． Ｂ ｙ ｖ ｉ ｓ ｕ ａ ｌ ｅ ｘ ａ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ａ ｄ ｍｉ ｎ ｋ ａ ｎ ｄ ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ ｅ ｘ ａ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ， ｍｉ ｎ ｋ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ ｄ ｉ ａ ｇ ｎ ｏ ｓ ｉ ｓ ｗ ａ ｓ ｍａ ｄ ｅ ｄ ， ｔ ｈ ｅ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｒ ａ ｔ ｅ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｇ ｉ ｏ ｎ Ａｌ ｅ ｕ ｔ ｉ ａ ｎ Ｍｉ ｎ ｋ Ｄｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｗｅ ｒ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｓ ｉ ｍｕ ｌ ｔ ａ ｎ ｅ ｏ ｕ ｓ ｌ ｙ ． Ｔｈ ｅ ｂ ｌ ｏ ｏ ｄ ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｃ ａ ｒ ｉ ｒ ｅ ｄ ｏ ｕ ｔ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｂ ｙ
水貂阿留申病毒最新检测方法研究进展
PCR-DHPLC变性高源自液相色谱分析 （de-naturing high performance liquid chromatography，DHPLC） 是近年来建立并迅速发展的一种新型基 因突变筛查技术。DHPLC 具有高通量检测、自动化程 度高、灵敏度和特异性较高、检测 DNA 片段和长度
[9] 变动范围广、相对价廉等优点。贾赟 （2016） 根据
水貂阿留申病 （Aleutian disease of mink， AD） 是由细小病毒科阿留申病毒属的水貂阿留申病毒 （Aleutian mink disease virus，ADV） 引起水貂的 一种慢性、进行性、免疫抑制性传染病。少数呈急 性经过，大多数呈慢性或隐性感染，不表现明显的 临床症状。该病一方面，引起成貂繁殖能力、皮张 质量、健康状况下降以及死亡率增加；另一方面， 常造成新生幼貂的急性间质性肺炎甚至死亡 。AD
Research Progress on the Detection Methods of the Aleutian Disease of Mink
Zhuang Jinqiu, Mei Jianguo, Wang Yumao, Yao Chunyang, Mo Ling, Shen Zhiqiang
玲， 沈志强
256600）
摘
要： 水貂阿留申病 （AD） 是一种在世界范围内广泛流行的、 严重危害水貂养殖业的病毒性免疫抑制性传染
病。该病尚无有效的疫苗预防， 也无特效治疗方法， 唯一可行的防治方法就是通过定期检疫和淘汰阳性貂， 逐步净 化貂群， 从而达到最终控制和消灭该病的目的。本文综述了该病最新实验室检测方法研究进展， 以期为防控本病提 供参考。 关键词： 水貂阿留申病， 检测， 研究进展 中图分类号：S852.65 文献标识码：A 文章编号：1672-9692(2017)11-0053-06
水貂阿留申病的诊断方法
神萎顿 。当侵 害神经 时伴 有抽搐 、 痉挛 、 共济失调 、 后躯麻痹 等症状 ， 病程为 ２ ～ ３ ｄ 。 病貂血 液学变化明显 ， 最为 明显 的是 血清丙种球蛋 白增
高， 从正 常的每 １ ０ ０ ｍ Ｌ血清中 １ ｇ 增加至 ４ ～ ５ ｇ 。病貂 血小板
经 过许 多试 验 ， 至今尚未找到有效的治疗方法 。 目前对
减少， 通常发生在感染后的第 ４ ￣ ８ 周， 直至死亡为止 ， 最后可 减 少至正常的 １ ０ ％～ ５ ０ ％。病貂 血氨 、 血清总氨 、 麝香草 酚浓 度、 谷草转 氨酶 、 谷 丙转氨 酶及 淀粉 酶均显 著增 高 ， 而 血清 钙、 白蛋 白和球蛋 白之 比降低 。
种特异性反应 ， 其缺点是检 出率不高和 出现假阳性 反应。
２ ． ２ 对流免疫电泳
诊断本病具有高度灵敏性 和特异 性的方法 ， 现已在国外
开展使用 ， 近年来累积 了较多 的资料 。加拿 大的一些 貂场应 用此法检查 阿 留申病 ， 阳性反应貂 打皮淘 汰 ， 采 取此种措 施 后， 出现 了许 多无 阿 留申病的貂场 ， 经过考察在 ４ １ 个 场中仅
在我 国免疫 电泳法不能普遍推广使用 的主要原 因， 一 是 免疫 电泳 法抗 原系用超速离心或层析过 注等方 法制备 ， 致使 其价格昂贵。二是 由于本病是一种慢性传染 病 ， 病貂数 目又 在半 数以上等原因 。为此 ， 东北林大野生动物资源学 院经数 年研 究 ， 利用猫 肾细胞 培养 物两次盐析的方法制备 出的抗 原 与美 国抗 原基本相 同， 显著的降低 了成本 。在 国内各地试用 效果 良好 。 用此抗原东北林业大学野生动物 资源学 院与 日本 合作进行 了应 用酶联 免疫吸 附实验法对 水貂 阿留申病诊 断 研究 ， 结果表明与免疫 电泳法检 出符合率 为 １ ０ ０ ％， 抗原使用
水貂阿留申病的流行特点及病理变化
点， 质地脆弱 ， 胸腺体积缩小 ， 呈黄褐色 ， 质软 ， 表 面有粟粒 大
出血 。
重病慢性病例尸体 消瘦 ， 可视粘膜苍 白。口腔 、 齿龈及 胃 黏膜有浅表而易出血 、 呈粟粒大小不规整的糜 烂或溃疡 。
布传染病上的危害性更大 ， 更严重 。一只雄貂担负 ４ ５只雌 貂 的配种任务 ， 阳性雄 貂不仅本 身散布和传播 ， 而且通过 配
处理该病毒 、 进行高浓度研制实验及 剖检 时应格外谨慎 。
或慢性病 例 ， 肾脏体 积略肿大 或缩小 ， 颜色微 黄 、 灰黄 、 棕黄
或苍 白而无光泽。 重者表面 凹凸不平 ， 呈桑葚状 ， 包膜难 以剥 离。 隆起部 为土黄色颗粒 ， 晦暗无光 ， 凹陷部位轮廓鲜 明乳 白 色的 圆形或椭圆形 小点 。 切面皮质亦可见同于表面的乳 白色 小点 ， 肾小球形象不 明。 肝、 脾、 淋 巴结肿胀 ， 肝呈黄色或 土黄色 ， 可见 灰 白色斑
２ ． ２ 组织 学变化 （ １ ）全身富有 网状 内皮组织 的各个器 官
中， 浆细胞显著 增加 ， 呈浸润状 态 。开始 时在淋 巴结 、 骨髓 、 脾、 肝、 。 肾等器官 ， 可见个别浆细胞增生 ， 随着疾病的发展 ， 在
任何器官和组织都 可看 到 ， 在各器官血管周 围形成管 套状 浸
１ ． ２ 水貂对阿留中病毒的易感性随基因型、 性别、 年龄的不
同而有差异 国外 资料 表明 ， 具有 阿留 申基 因“ ａ ａ ” 的水貂发
病率高 于其他水貂 。国内对 ８种基因型 ５ ０ ０ ０只貂调查 的研 究报告表 明： 红眼白貂 “ ｂ ｂ ｃ ｃ ” 发病率很高（ ２ ９ ％） ， 其次 为银蓝 貂“ Ｐ Ｐ ” 发 病率 为 ２ １ ． ５ ％， 再 次为 米黄 色貂 “ ｂ ｐ ｂ ｐ ” 发病 率 为 １ ５ ． ９ ％， 标准貂易感性最低 ， 发病率为 １ ２ ． ７ ％。雄兽 比雌兽 略 高， 相差 １ ％左右。人们 常因雌貂 在貂 群中 占比例大 ， 常出现 发病 死亡 的是雌貂 ， 而误 认为雌貂 发病率 高 ， 其 实雄貂在 散
一例水貂阿留申病的诊治报告
行病毒分离鉴定 ， 为阿留申病毒 ； 进行血清学诊断 ， 碘凝集试
验、 琼脂 扩散 验 、 均 为 阳性 。由流 行 病 学 、 临床症状 、 病 理 剖 检
户江某 打电话说 ， 他家养 了 ５ ０ ０只水貂 ， 水 貂拉煤焦油 样粪 便， 有抽搐 的病症 。 接到电话 马上到江某家 ， 认真仔细地检查
一
例 水貂 阿留 申病 的诊治报 告
金 胜 才
（ 辽宁省大连市普兰店 区城子坦动物卫生监督所 ，辽宁 大连 １ １ ６ ２ ０ ０）
ＤＯ１ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ Ｊ ． Ｉ ＳＳＮ． １ ６ ７ １ — ６ ０ ２ ７． ２０ １ ７ ． ０ ５． １ １ ８
水 貂阿 留申病是 由阿留 申病毒 引起的水貂 的一种 自身 免疫性 、 慢性消耗性 、 超敏感性 的疾病 ， 阿留申病 的特征是血
如果条件允许 ， 应先做药敏 试验然后再 决定用药 ， 以免病株
产 生耐药性从而延长治疗的时间甚至延误治疗 。
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从该患病企鹅的整个病程来看 ， 企鹅表 现出明显 的张 口呼吸 症状或呆立不动 已是病程 的后期 ， 因此 在工 作中要 日常细心
件 ，从 而减少疾病 的发生机率并 能及早发 现动物 的异 常情
水貂阿留申病的研究进展
水貂阿留申病的研究进展
王克祥;刘永逵;孙宏磊
【期刊名称】《中国畜牧兽医》
【年(卷),期】2010(037)012
【摘要】水貂阿留申病(Aleutian disease of mink,ADM)是由水貂阿留申病细小病毒(Aleutian mink disease parvovirus,ADMV)引起的一种慢性、进行性传染病,一直是危害世界养貂业健康发展最重要的疫病之一.到目前为止,还没有疫苗可成功用于ADM的预防,也没有特异有效的治疗方法,唯一可行的防治方法就是通过多次特异性检疫,淘汰病貂,净化貂群.笔者对阿留申病的病原学、发病机制、防治措施等方面进行概述,为临床防治水貂阿留申病提供了理论基础.
【总页数】3页(P223-225)
【作者】王克祥;刘永逵;孙宏磊
【作者单位】山东省龙口市畜牧兽医工作站,龙口,265701;山东省烟台市牟平区动物卫生监督所,烟台,264100;山东省烟台市福山区畜牧兽医站,烟台,265500
【正文语种】中文
【中图分类】S815.1
【相关文献】
1.水貂阿留申病诊断技术的研究进展 [J], 张蕾;马凡舒;孙彦刚;王洋;闫喜军;徐淑娟
2.水貂阿留申病毒最新检测方法研究进展 [J], 庄金秋;梅建国;王玉茂;姚春阳;莫玲;沈志强
3.水貂阿留申病毒实验室检测方法研究进展 [J], 庄金秋;梅建国;王玉茂;姚春阳;莫玲;沈志强
4.水貂阿留申病毒检测方法研究进展 [J], 刘艺;刘亚东;杜锐;冷雪;时坤;李健明;曾范利;宗颖;宫庆龙;张姗姗;孙志博
5.水貂阿留申病诊断技术研究进展 [J], 韦韬;吴艳虹;丛丽;赵永强;马瑞芳;邵西群因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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１ ． ２ Ａ ＤＭＶ株 间的差异
不 同毒株对 不 同动物及 不同组
织 的毒 力有差 异 ，据 Ｌ ｏ ｆ ｓ ｓ ｏ ｎ ［ ５ 】 报道 ，该病 毒具有 极高 的 变 异 性 。Ｇｅ ｎ ｂ ａ ｎ ｋ其 基 因 序 列 大 概 为 １ ０ ７ ６ ２ ６ — １ ０ ７ ６ ６ ０ 。 Ａ ｋ ａ ｍｉ ［ ６ Ｊ 等报道感 染雪貂 的ＡＤ ＭＶ与感染水 貂的Ａ ＤＭＶ有 很大 的不 同，是Ａ ＤＭＶ的变异群 。Ｄｙ ｅ ｒ 【 ’ 】 等用Ｐ Ｃ Ｒ 测定 感 染貂 不 同组织 中的病 毒时 ，发现 引起 貂非 化脓性 脑脊膜
Ｄ ＮＡ的复制及 其它基因产物 的合成 ：在ｓ 期受Ａ ＤＭＶ产物
阈下刺 激 的细 胞 ，只 显示 了低 水 Ｉ ￡ 的Ｄ ＮＡ复制 ，不支持 Ａ ＤＭＶ的复制 。Ａ ＤＭＶ的宿 主 范围及致病 力受 核衣 壳蛋 白基 因调控 。通过埘 弱 毒株Ａ ＤＶ － Ｇ和强毒 株Ａ ＤＶ － Ｕ Ｔ Ａ Ｈ 的基 因与宿 主关 系的研 究 ，发 现基 因片段５ ４ － － ６ ５ 和６ ５ — ８ ８
炎的…株 病毒 的两个 一氨基 酸残基 与在其 他组织 中发 现 的 病 毒不 同 ．可 能是 它 决 定 了其 致 病力 。在 分 离的
ＡＤ ｖ ＿ ＵＴ Ａ Ｈ、 Ａ Ｄ Ｖ － Ｇ、 普 曼 株 、 威 斯 康 辛 株 和 欧 洲 株
由水貂阿 留 申病 毒（ Ａｌ ｅ ｕ ｔ ｉ ａ ｎ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｏ ｆ ｍｉ ｎ ｋ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ， Ａ ＤＭＶ） ￣ Ｉ 起 的水貂 阿留 申病（ Ａ ｌ ｅ ｕ ｔ ｉ ａ ｎ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｏ ｆ ｍｉ ｎ ｋ ， Ａ ＤＭ） ，又称 为浆 细胞增 多症 。是主要侵 害水貂的免疫系 统 ， 以浆细 胞弥 漫性增 生和 持续 性病 毒血 症为特 征的水 貂慢性传 染病 。ＡＭＤ的发病 率和 死亡 率都很 高， 同时病 貂毛 皮质 量下降 ，对水 貂养 殖业 造成 巨大 的经济 损失 。 因此 ，笔 者对Ａ ＭＤＶ的理化特 性 ，毒 株之 问的差 异 以及
毒抗 原 。
水貂 阿 留 申病导 致 自身免 疫 系统 紊乱 并逐渐 衰竭 ， 同时并发 强烈 的 自身 免疫 的慢性 传染 性疾 病 。该 病特征 是终生病毒血症 ，持续感染 。全 身淋 巴细胞增生 ，血清Ｙ －
球蛋 白增 多， 肾小球 肾炎 ，动脉 炎和 肝炎 。其 实质是 由 于强 烈 的抗原刺激 ，过度 的免疫 球蛋 白产 生及免 疫复合
２ 发病 机理
２ ． １ 分子免 疫学 Ａ Ｄ ＭＶ 主要侵 害网状 内皮系统 ，以浆
细胞弥 漫性增 生 ，产 生多量 的Ｙ － 球蛋 白。它不 能中和病
毒，反而 形成病 毒一 抗 体 的复合物 ，沉淀 于肾小管和血 镑壁 ，引起 肾小 球肾 炎，动 脉炎和肝 炎等病 理变化 ，并
物在 组织 内沉积 出现超 敏 。从而 导致 复合 物沉积 组织损
无囊 膜 ，无 脂质 ，无糖类 ，结构 紧密 ，在 氯化铯 中，沉
淀系数为 ｌ １ ０ Ｓ 的单链Ｄ ＮＡ病毒 。分子量约 １ ． ４ ｘ １ ０ ６ ，直径 大约为 １ ０ — ５ ０ ｉ ｒ ｍ，最多 为２ ３ ～ ３ ５ ｎ ｍ。病 毒含有两 种多肽 ， 分子量分别为８ ９ ｌ 【 ｌ ｌ 和７ ７ ． ６ ｋ ｕ 。该病毒对化 学药品和核酸酶
伤 。病貂最终死于组织损伤和继发感 染Ｉ ” 。
ｌ 病原特性 １ ． １ 理化特性 Ａ ＤＭＶ属 于细小 病毒科 ，细 小病 毒属 ，
且应 起超 敏反应 和 身免 疫现象 。Ａ Ｄ ＭＶ抗 原最初位于 脾 和 淋 巴结 的 巨噬坌 ｝ ¨ 胞 和 肝 脏 的枯 否 氏细 胞浆 内，据 Ｊ ｅ ｎ ｓ ｅ ｎ ［ ９ ］等报道 ，与Ａ ＤＭＶ共同陪养７ ２ ｈ 的水貂淋巴结巨 噬细 胞 中发 现 了ＡＤ ＭＶ的核 衣 壳 ，非 结 构 蛋 白 Ｓ ｌ 和
中。ＡＤ Ｖ － Ｕ Ｔ ＡＨ是强毒株 。但不能侵袭猫 肾细胞系Ｃ Ｒ Ｆ Ｋ
细胞 。ＡＤ Ｖ － Ｇ为弱毒株 ，能使Ｃ Ｒ Ｆ Ｋ产生病变，但对 貂没
有致病力 。
１ ． ３ 培养
该病 毒能在貂 睾丸细胞特性 方面进 行 了总 结 ，并对Ａ ＤＭ的致 病机理
ＮＳ ２ ） ，同时还 发现 了被包被的Ａ ＤＭＶ的Ｄ ＮＡ 。还有人观 察￣ Ｊ Ｉ ＡＤ ＭＶ抗 原位 于慢性 感染水 貂的骨髓细胞 内，Ｔ 和Ｂ 细胞 内也含有ＡＤ ＭＶ抗原 。Ｏｌ ｅ ｋ ｓ ｉ ｅ ｗｉ ｃ ｚ ［ ‘ ０ 】 等研 究证 明： 在细 胞的Ｓ 期受到ＡＤ ＭＶ产 物阈上刺 激的细胞 ，将在Ｓ 后 期 或Ｃ 期 出现 循 环 抑制 ，但 仍 支持 高 水平 的Ａ ＤＭＶ的
２ ０ １ ３年第 ｌ Ｏ期 （ 总第 ２ ０ １
文献综述
水貂 阿 留申病研究进展
廉 慧锋 （ 山西出 入境检验检疫局 太原 ０ ３ ０ ０ ２ ４ ） 胡传伟 贾 赞 肇 慧君 （ 辽宁出 入境检验检疫局 大连 ）
中图分 类号：￥ ８ ５ ８ ． ９ ２ 文献标识码：Ａ 文章编 号：１ ０ ０ ７ － １ ７ ３ ３ （ ２ ０ １ ３ ） １ ０ － ０ ０ ９ １ － ０ ２
进行 了阐述 ，介 绍 了其研 究进展 的情 况 ，为 以后 阿 留 中 病的研究提供理论依据 。
成纤维细胞等原代细胞上生长 ，也可在猫 肾细胞株（ Ｃ Ｒ Ｆ Ｋ ）
和 鼠Ｌ 细胞株传 代细胞上繁殖 ，并产生细胞 病变。非洲绿 猴 肾细胞和人 的细胞株 ＷＩ 一 －３ ８ 巾有 限地产生阿 留Ｆ ｝ Ｉ 病病
的作用 具有 高度抵抗 力 ，能抵 抗 乙醚和 氯仿 ，且耐 热 ，
８ ０ ℃ 时可存活 ｌ ｈ ，９ ０ ℃时 ，可耐 受 １ ０ ａｉ ｒ ｎ ，１ ０ ０ ℃３ ｍｉ ｎ 仍 能保持感染性 。３ ％的福尔 马林 约２ 周 处理仍有活力 ，耐受 ４ 周 才灭活 。在ｐ Ｈ２ ． ８ ～ ｌ ０ 的环境 中均 能保持 活力 ，但蛋 白 酶处理时 ，病毒滴度 明显下 降。可被紫外线 、０ ． ５ ｍｏ ｌ ／ Ｌ的 盐酸 、０ ． ５ ％碘及２ ％的氢氧化钠 灭活【 ， ， 钔。