气相色谱法测定盐酸氨溴索口服液中丙二醇和甘油的含量

气相色谱法测定盐酸氨溴索口服液中丙二醇和甘油的含量
发布时间：2021-12-30T08:42:30.803Z 来源：《中国科技人才》2021年第25期作者：韩婷婷
[导读] 盐酸氨溴索，其化学名称为反式4一[(2一氨基?3，5.二溴.苄基)氨基]环己醇盐酸盐，是一种祛痰药。

哈药集团三精制药有限公司黑龙江省哈尔滨市 150069
摘要：基于气相色谱法测定盐酸氨溴索口服液中丙二醇和甘油的分析方法，采用HP-INNOWAX色谱柱进行分离，外标法定量。

实验结果表明，丙二醇在50.4～806.0μg/mL范围内线性关系良好，相关系数为0.9995，平均回收率为99.1%，RSD=1.01%；甘油在190.5～
3048μg/mL范围内线性关系良好，相关系数为0.9995，平均回收率为99.8%，RSD=0.97%；二者的方法检出限：丙二醇为0.10g/100g，甘油为0.10g/100g，方法检出限低，重复性好，结果准确可靠，适用于盐酸氨溴索口服液中丙二醇和甘油含量的测定。

关键词：气相色谱法；盐酸氨溴索；口服液；丙二醇；甘油
盐酸氨溴索，其化学名称为反式4一[(2一氨基?3，5.二溴.苄基)氨基]环己醇盐酸盐，是一种祛痰药。

由于其生产过程带人乙酸、甲醇、乙醇、丙酮、甲苯等有机溶剂，因此有必要建立控制这几种有机溶剂残留量的测定方法。

盐酸氨溴索(ambroxolhydrochloride)系一种祛痰药，具有粘液溶解作用，能增加呼吸道黏膜浆液腺的分泌，减少粘液腺分泌，从而降低痰液粘度;还可促进肺表面活性物质的分泌，增加支气管纤毛运动，使痰液易于咳出。

同时，它还具有祛痰、增强肺表面活性物质的合成和分泌以及抗急性肺损伤的药理作用，在临床上广泛应用于小儿支气管肺炎、新生儿肺炎及胎粪吸入性肺炎等呼吸系统疾病的辅助治疗，倍受国内儿科医师的青睐。

盐酸氨溴索口服液的主药为盐酸氨溴索，辅料有山梨醇、丙二醇、甘油、酒石酸、糖浆、纯水等。

其中，丙二醇具有保水性、湿润性、防霉性及不被发酵性，被广泛应用到食品和药品中。

一、实验
1、仪器与试剂。

仪器：Agilent7890A气相色谱仪，配备氢火焰离子化检器(FID)；涡旋混匀器。

试剂：丙二醇(1，2-丙二醇)标准品(德国Dr.Ehrenstorfer，纯度≥99.8%)，甘油标准品(德国Dr.Ehrenstorfer，纯度≥99.5%)，乙醇(默克)，色谱纯；盐酸氨溴索口服液由某制药公司提供。

2、仪器条件。

HP-INNOWAX色谱柱(30m×0.25mm×0.25μm)；载气：高纯氮；柱流量：1.0mL/min；进样口温度：260℃；检测器温度：270℃；氢气：30mL/min；空气：400mL/min；分流比：30∶1；进样量：1μL；程序升温条件：70℃保持2分钟，然后以10℃/min升到60℃，保持10分钟。

3、标准曲线的绘制。

分别精密称量丙二醇80.60mg、甘油76.20mg至两个10mL的容量瓶中，用乙醇溶解，并定容至刻度，摇匀，作为对照品储备液。

取上述丙二醇储备液1mL，甘油储备液4mL至10mL容量瓶中，加乙醇稀释至刻度，得到丙二醇浓度为806.0μg/mL、甘油浓度为3048μg/mL的混合溶液，再将该混合溶液逐级对半稀释，最终得到丙二醇浓度为50.4μg/mL、100.8μg/mL、201.5μg/mL、403.0μg/mL、806.0μg/mL，甘油浓度为190.5μg/mL、381.0μg/mL、762.0μg/mL、152
4、3048μg/mL的标准曲线系列。

4、试品溶液的制备。

精密称取盐酸氨溴索口服液约200mg至20mL容量瓶中，用无水乙醇溶解并定容至刻度，涡旋混匀，待测。

5、定量方法。

盐酸氨溴索口服液中的丙二醇和甘油的含量结果，采用外标法定量。

其中X为盐酸氨溴索口服液中的丙二醇和甘油的含量，单位为克每100克(g/100g)；c为从标准曲线中获得的丙二醇和甘油的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)；V为供试溶液定容体积，单位为毫升(mL)；m为样品称样量，单位为毫克(mg)。

计算公式如下：
二、结果
1、分离度测试。

取丙二醇浓度为806.0μg/mL，甘油浓度为3048μg/mL的标准混合溶液1μL，注入气相色谱仪，按照色谱条件，得到的色谱分离度R为100。

分离度R为1.5时，即可做为相邻两峰能完全分开的标志，可见二者得到了较好的分离。

2、仪器精密度试验。

取丙二醇浓度为806.0μg/mL，甘油浓度为3048μg/mL的标准混合溶液，按照色谱条件，连续进样6次，结果如表所示。

由表数据可以看出，丙二醇的峰面积RSD=0.77%，甘油的峰面积RSD=0.86%，RSD均小于2.0%，仪器精密度符合要求。

3、线性关系。

将标准曲线系列的标准对照品，各取1μL，按照1.2中的色谱条件，进样，以标准品浓度为横坐标，标准品响应峰面积为纵坐标，进行线性回归，得到丙二醇和甘油的回归方程。

由数据可以看出二者的线性相关系数均为0.9995，由此可见丙二醇在50.4～806.0μg/mL范围内线性关系良好，甘油在190.5～3048μg/mL范围内线性关系良好。

4、重复性试验。

按样品配制方法，平行配制6份样品溶液，取1μL进样，外标法定量，结果最终测得样品中丙二醇和甘油的平均含量分别为3.10g/100g和12.4g/100g，RSD分别为1.84%和1.59%，方法重复性良好。

三、讨论
溶剂水中存在Cl-，样品是盐酸盐，样品浓度较高时会带入大量的Cl-，过量的Cl-在柱子上的保留对测定以及柱子都有一定的影响，填充型Ag+型阳离子交换剂的柱子可除去样品中过量的Cl-，如果使用此固相萃取柱应可降低Cl-的影响。

综合样品的溶解度性质(略溶于水)、样品中Cl-的浓度和实际实验条件因素。

乙醇、醋酸和甲苯溶剂残留量采用毛细管气相色谱同时测定国内尚未见文献报道，由于三者性质差异较大，给同时分析带来一定困难。

醋酸极性较强，根据相似相溶原理及参考有关文献采用极性强的色谱柱分析醋酸，曾选用DM一FFAP毛细管柱，同时测定有机溶剂残留，结果发现醋酸保留时间过长，峰后拖尾严重，影响醋酸定量。

采用DM一624毛细管柱，直接进样，可将有机溶剂快速分离，且分离度好，峰形较对称。

由于盐酸氨嗅索仅易溶于甲醇，所以溶剂可选甲醇，但甲醇本身含有少量乙醇，会对乙醇测定产生干扰，且在试验中发现与醋酸保留时间接近处有干扰极大的杂质峰存在，故甲醇并不适合做溶剂。

采用DMF为溶剂，不影响有机溶剂残留分析。

我们还发现当用DMF做溶剂时醋酸的保留时间大幅度后拖(从6.5min延至9.5min)，推测由于醋酸和DMF的出峰时间都比较晚，两者在色谱柱中共存的时间比较长，DMF 可能与醋酸以某种方式产生可逆结合，起到类似临时固定相作用，因此改变了醋酸在色谱柱上保留行为，增长其保留时间，结果反而达到与样品中杂质峰有效分离的结果。

DMF出峰晚，可能会对下次测定产生干扰，此时只需要以30℃?min一’的速率程序升温至180℃，保持
5min，即可消除干扰。

采用气相色谱法测定盐酸氨溴索中的丙二醇及甘油的含量，方法的线性、精密度、准确度、回收率、检出限等均得到了满意的结果。

参考文献
[1]黄京芳,徐云,彭方.盐酸氨溴索注射液有关物质检查方法研究[J].河南医学研究，2019,24(10):30-34.
[2]覃贾丽,夏敏.盐酸氨溴索注射液在国内儿科临床的应用进展[J].医学综述，2021(8):100-102.。