姜黄素抑制K562细胞增殖的机制
姜黄素与羟基脲对K562细胞的体外联合作用
文章编号:1000-2235(2000)03-0228-03姜黄素与羟基脲对K 562细胞的体外联合作用赵 蓉1 许建华2 柯丹如2 林 溪2 陈元仲3摘要: 目的 了解姜黄素与羟基脲合用对人白血病K 562细胞的体外作用。
方法 采用M T T 法测定药物的体外杀伤作用,应用A O/EB 荧光染料染色观察药物诱导细胞凋亡,金氏公式进行联合用药分析。
结果 姜黄素5,10 g /ml,羟基脲25,50 g/ml 同时给药,对K 562细胞可产生单纯相加的协同杀伤效果。
姜黄素与羟基脲同时给药诱导K 562细胞凋亡率高于羟基脲单独用药,低于姜黄素单独用药。
结论 姜黄素与羟基脲同时联合用药可产生单纯相加的协同杀伤效用,姜黄素可部分逆转K 562细胞对羟基脲诱导凋亡的抗药性。
关键词: 姜黄素;羟基脲;药物协同作用;抗肿瘤活性;K 562细胞株;白血病,幼红细胞,急性中图分类号:R282.71;R 979.19;R329.24;R 730.21 文献标识码: A收稿日期:2000-04-24基金项目:福建省自然科学基金资助项目(C992001)作者单位:福建医科大学,福州 350004 1.肿瘤研究室,2.临床药理研究所,3.福建省血液病研究所作者简介:赵 蓉(1957～),女,实验师. 姜黄素(Curcumin ,Cur )系从姜科植物姜黄中提取的酚性色素,因其抗突变、抗促癌作用而渐渐受到人们的重视。
前文报道[1]Cur 与5-氟脲嘧啶合用,对人慢性粒细胞白血病K562细胞不论在细胞杀伤还是诱导凋亡方面,均显协同作用。
羟基脲在临床上用于治疗慢性粒细胞白血病,文献报道K 562细胞对羟基脲诱导凋亡有显著的抗药性[2]。
Cur 可否逆转K 562细胞对羟基脲诱导凋亡的抗药性,未见文献报道。
本文探讨两药对K 562细胞的体外联合作用,为姜黄素的深入研究及应用奠定基础。
1 材料与方法1.1 药品与试剂 Cur 按文献[3]由本所从福建建阳地区所产姜黄(Curcuma L onga L.)中提取、分离,经硅胶薄层鉴定,与标准品的比移值相同。
乌骨藤提取物抑制慢性髓性白血病(K562)细胞增殖
乌骨藤提取物抑 制慢性髓性 白血病 （ ６ ） Ｋ５ ２
细胞增殖 ★
曾琛 ’陈燕 单连华 ２刘佳 陈丹娜 ‘朱力宇 周鹏 ， ， ， ， ， （长沙医学院， 南长沙， １２９ 湖南大学， 湖 ４ ０ １； 湖南长沙， １０２ ４ ０ １）
ｅ ｔａ ｔ ｎｏ ｄｆ ｒｎ ｏ ｃ ｎｒｔ ｎａ ｄｄｆ ｒｎ ｉｔｒｅｉｇｔ ｘ ｒｃ ｏ ｆ ｉｅ ｅ ｔ ｎ ｅ ｔ ｉ ｉ ｃ ａ ｏ ｎ ｉｅｅ ｔｎ ｅｆｒｎ ｉ ｍｅｗｅｅｉｖ ｓ ｇ ｔｄｂ ⅥＩ ａ ｓ ｙａ ｄ ｃ ｌ ｒ ｎ ｅ ｔ ａｅ ｙＩｒ ｓ ａ ｎ ｅｌｍｏ－ ｉ Ｔ ｒ ｐ ｏｏ ｙａ ｓ ｙ Ｒｅ ｕ ｔ １ ｆｅ ｔ Ｍａｓ ｅ ｉ ｅ ａ ｉｓｍａｅ ｔ ｃ ｏ ｎ ｔｅｃ ｌ ｐ ｌ ｅ ｔｏ ｆ ６ Ｓｃ ｎ ｈ ｌｇ ｓ ． ｓ ｌ ａ ｓ ｅｅ ｃ ｆ ｏ ｒｄ ｎａｔｎ ｃｓｉ ｘｒ ｔ ｎ ｏ ｅｌ ｒ ｉ ｒｉ ｎｏ Ｋ５ ２ ｉ ０ — ａｉ ｈ ｏ ｆａ
摘要 ： 目的 法 提取 乌骨藤 中抗肿瘤成分 ， 讨其对慢性髓性 白血病 Ｋ５ ２细胞增 殖的抑制作用及机制。方 探 ６
设计乌骨藤提取物浓度梯度、 时间梯度干扰 Ｋ ６ ５ ２细胞增殖 ， 通过显微镜 观察细胞 形态、 Ｔ 法检测增殖 ＭＴ
抑制 率。结果
随 着浓度和 时间梯度 的递增 ， ６ Ｋ５ ２细胞 增殖速度及细胞形 态受到 了明显的影响 。结论
ｅｔｃｏ ｈｄａ ｏｓｉ ｏｓｎｉｉ ｎ ｆ ｔｎ ｅ ｐ ｌ ｒ ｏ ｏｃｒ ｉｍ ｅ ｉｌ ｅ ｉｃｉｉ （Ｓ ２． ｘ ａｔｎ ａ ｃｎｐ ｕｕ ｉ ｂ ｉ ｅｅ ｏ ｃｌ ｒｉ ａ ｎ ｈｏ ｃ ｙｌｄ ｅ ｍ ａ ｅ ｌｅ ６ ） ｒｉ ｃ ｈ ｔ ｏ ｃ ｌｏ ｆ ｔ ｆ ｅｉ ｎ ｏ ｕ ｋ ｌｎ Ｋ
姜黄素与 STI571对慢性粒细胞白血病细胞株K562作用的体外研究
与 低 剂 量 （． ，， ５＃ ｌＩ 的 Ｓ Ｉ７ 联 合 应 用 对 抑 制 Ｋ ６ ０ １０ １ ｍｏ／ ） Ｔ５ １ ５ ２细 胞 增 殖 呈 单 独 相 加 ； 较 大 剂 量 则 可 明显 协 同下 而
调 Ｐ １ Ｐ Ｃ 的表 达 水 平 。 ２０ ” 和 Ｋ 关键词 ： 姜黄素 ； Ｔ５ １ Ｓ Ｉ ７ ；白血 病 ， 样 ， 性 ；药 物 疗 法 ， 合 髓 慢 联 中 图分 类 号 ： Ｒ ８ ． １ Ｒ ３ ． ２ ２ ２ ７ ； ７ ３ ７ 文献 标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ： １ ７—ｌ４ ２０ ）５０ ２—４ ６ ２４ ９ （ ０ ６ ０ —４ ７ ０
１ １ １ 药 品 与试 剂 姜 黄 素 （ 海 试 剂 三 厂 ， 号 ． ． 上 批
９ ０ ２ ） 纯 度 ９ ， 解 于 二 甲 基 亚 砜 （ ＭＳ ８８ ５ ， ９ 溶 Ｄ Ｏ）
ｌｔ） 一种 小分 子 的 ２苯 胺 嘧 啶衍 生 物 ， 酪 氨 酸 ａｅ是 一 是 激 酶抑制 剂 ， 目前 临床 上主要 用 于治疗 Ｃ ＭＬ。随着 该 药 的应 用 ， 不 良反 应 及 耐药 问 题 相 继 出 现 ， 其 且
维普资讯
型 ＪＦ ｕｉｎ Ｍ ｅ ｉ ｉ ｄ Ｕｎｖ ａ
２０ ｅ ｖ。ｌ４ｏ ０６Ｓｐ
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４ ７ ２
姜 黄 素 与 ８ Ｉ 对 慢 性 粒 细胞 白血 病 细 胞株 Ｋ ６ Ｔ５ １ ７ ５ ２作 用 的体 外 研 究
方 法 锥 虫 蓝 排 染 法 计 算 Ｋ５ ２细 胞 增 殖 抑 制 率 ； ｅｔｒ ｌｔ 法 检 测 ６ Ｗ ｓ ｎ ｂｏ 方 ｅ
Ｃ ｒＳ ５ １以 及二 者联 合 应 用 对 Ｋ５２细 胞 Ｐ １ ｕ 、ＴＩ７ ６ ２Ｏ
六神丸对K562_ADM细胞增殖的抑制作用及其机制研究_李海燕
［2］王雪峰，刘芳，魏克伦，等．小柴胡汤及其分解剂对柯萨奇B3m病毒感染乳心肌保护及细胞免疫调节作用的研究［J］．中国中西医结合杂志，2000，20（8）：599－602．［3］邱红．小柴胡汤加减治疗病毒性心肌炎90例［J］．实用中医内科杂志，2005，19（5）：454－455．［4］李芳，李建北，张东明．柴胡的药理研究进展［J］．时珍国医国药，2004，15（2）：120－121．收稿日期：2010－07－06基金项目：广东省中医药管理局项目（2008158）；广州中医药大学创新基金项目（06C049）作者简介：李海燕（1974－），女，辽宁大连人，研究方向：中药学教学和中医药治疗白血病。
［5］宋琳莉，孟庆刚．黄芩的药理作用研究进展［J］．中华中医药学刊，2008，16（8）：1676－1678．［6］李仪奎，吴健宇．血清药理实验中采血时间的通法方案［J］．中国药理学通报，1999，15（6）：569－570．［7］薛庆善．体外培养的原理与技术［M］．上海：科学技术出版社，2001：622－625．［8］杨英珍．病毒性心肌病［M］．上海：上海科学技术出版社，2001：350．［9］孟庆云．中西医结合基础理论研究方法与实验技术［M］．北京：中医古籍出版社，1999：289．［10］Goshima K．Bcating of multinucleated giant myocardial cells in cul-ture［J］．Exp cell Res，1979，120：285．六神丸对K562/ADM细胞增殖的抑制作用及其机制研究李海燕（广州中医药大学中药学院，广东广州510006）摘要：目的：研究六神丸对人类红白血病耐药细胞（K562/ADM细胞）的增殖抑制作用，并对其作用机制进行初步的探讨。
方法：采用血清药理学方法，把六神丸含药血清加入K562/ADM细胞，MTT法检测细胞增殖抑制率，QPCR法检测Bcl－2mRNA的表达，Western blot方法检测Bcl－2蛋白的表达。
人白血病细胞K562增殖的作用
人白血病细胞K562增殖的作用白血病是造血系统的恶性肿瘤，其特征是骨髓、淋巴结等造血系统中一种或多种血细胞成分发生恶性增殖，并浸润体内各脏器组织，导致正常造血组织细胞受抑制，产生各种症状。
目前，对于此类疾病的治疗主要采取传统的化疗手段，标准的化疗方案仅能使40%~60%患者获得暂时缓解，中位生存期一般不超过3a。
大剂量化疗联合造血干细胞移植可使缓解率明显提升，但除了极少数患者以外，其余大多数仍难免会复发，其显著的不良反应使得患者的生活质量和治疗信心受到严重影响。
因此，寻找高效低毒的治疗药物，显得尤为重要。
我们以K562细胞作为研究对象，探讨力达霉素（LDM）抗白血病的可能机制。
1材料K562细胞（本室保存）；LDM（由中国医学科学院医药生物技术研究所甄永苏院士惠赠）；RPM-1640（美国Gibco公司）；胎牛血清（美国Biological公司）；MTT（噻唑蓝）法检测细胞增殖及细胞毒性试剂盒（南京凯基）；苔盼蓝；兔抗人肿瘤坏死因子（TNF-α）抗体（美国Affinity公司）；Betaactin（β肌动蛋白）抗体（美国Affinity公司）2方法2.1细胞培养K562细胞株从液氮中复苏后，用含10%胎牛血清的RPM-1640培养液在37℃，5%CO2恒温培养箱中培养，所有实验均采用对数生长期细胞。
2.2细胞增殖的检测在96孔板加入细胞100μl/孔（约1×104），置37℃，5%CO2细胞培养箱中培养24h后，加入不同浓度力达霉素（LDM），再于恒温培养箱孵育48h，加入50μlMTT，37℃孵育4h，使MTT还原为甲臜，1000g离心，吸出上清，每孔加入150μl二甲亚砜（DMSO）使甲臜溶解，平板摇床摇匀，于490nm波长处检测每孔的吸光度（A）值，计算细胞成活率。
2.3细胞的计数离心收集K562细胞，制备单细胞悬液并作适当稀释，细胞悬浮液与台盼蓝溶液以9∶1混合混匀，在3min内分别计数活细胞和死细胞，计算活细胞率。
姜黄素对耐格列卫人慢性粒细胞白血病细胞凋亡的诱导作用
姜黄素对耐格列卫人慢性粒细胞白血病细胞凋亡的诱导作用魏小娟1，赖菁2，刘成成2，祝爱珍2，刘革修2，李文瑜1△1广东省人民医院、广东省医学科学院肿瘤中心（广州510080）；2暨南大学医学院血液病研究所（广州510632）【摘要】目的探讨姜黄素对格列卫耐药人慢性粒细胞白血病细胞株K562/Glv的促凋亡作用及其机制。
方法采用cck－8的方法检测姜黄素对K562/Glv细胞的剂量－效应曲线及时间－效应曲线，台盼蓝染色观察细胞存活率；流式细胞仪检测姜黄素作用K562/Glv细胞的周期、凋亡变化、线粒体膜电位（Ψm△）；比色法检测Caspase－3酶活性变化。
结果姜黄素对K562/Glv细胞的生长抑制作用呈剂量依赖性，1.0μmol/L即有明显作用，5.0μmol/L增殖抑制率为（45.60ʃ2.23）%，10.0μmol/L为（77.95ʃ3.84）%；姜黄素作用于K562/Glv细胞，细胞周期阻滞于G2/M期，线粒体膜电位Ψm△在1h时显著升高，12h时恢复至正常水平，24h时下降至其79%，Caspase－3酶活性增加。
结论姜黄素通过使线粒体膜电位Ψm△异常，并激活Caspase－3，诱导耐格列卫人慢性粒细胞白血病细胞K562/Glv的凋亡。
【关键词】姜黄素；耐格列卫；慢性粒细胞白血病；凋亡；线粒体慢性髓系白血病（CML）Bcr－Abl靶点特异药物格列卫是目前CML治疗的一线药物，但是同时也不乏有临床格列卫耐药的现象出现，且格列卫不能根除残留的白血病干细胞及原始祖细胞，成为疾病复发的危险因素［1］。
因此，寻找新的药物以减少耐药与复发仍然十分必要。
姜黄素是从多年生草本植物姜黄的根茎中提取的一种常用中药，已有大量研究表明其具备抗多种肿瘤细胞的作用，且有报道其能通过多种途径逆转肿瘤细胞耐药的作用［2－4］，但是对于耐格列卫的白血病细胞株的作用尚未见相关报道。
2011年4—11月，本实验初步探讨素对耐格列卫白血病细胞株K562/ Glv细胞凋亡的影响及可能作用机制，为姜黄素应用于耐药的慢性粒细胞白血病患者提供理论基础。
姜黄素调控自噬抑制K562细胞增殖的体外研究
ｐｒｏｔｅｉｎ ＬＣ３一ＩＩ／ＬＣ３一Ｉ ａｎｄ ｔｈｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ２１ ａｎｄ ｐ２７ ｗｅｒｅ ｄｅｃｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｃｕｒｃｕ—
标 志 蛋 白 ＬＣ３一ＩＩ／ＬＣ３一Ｉ变 化 水 平 ；同 时 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分 析 ｐ５３，ｐ２１和 ｐ２７表 达 变 化 。结 果 姜 黄 素 能 以 时 间 、剂
量 依 赖 性方 式 抑 制 Ｋ５６２细胞 增 殖 ，与 ３一ＭＡ 对 照 组 相 比 ，ＬＣ３一ＩＩ／ＬＣ３一Ｉ比值 显 著 上 升 ，姜 黄 素 诱 导 Ｋ５６２细 胞 周 期
摘 要 ：目 的 研 究 姜 黄 素诱 导 自噬 对 Ｋ５６２细胞 增 殖 的影 响 。 方 法 采 用 １、５、１０、２Ｏ和 ４０ ＦＭ／Ｌ姜 黄 素 及 自噬
抑 制 剂 ３一Ｍ Ａ作 用 于 Ｋ５６２细 胞 ２４ ｈ，采 用 ＭＴＴ 实验 观察 Ｋ５６２细 胞 增 殖 变 化 情 况 ，随后 采 用 Ｗ ｅｓｔｅｒｎ—ｂｌｏｔ检 测 自噬
ｍ ｉｎ ｃｏｕｌｄ ｉｎｈｉｂｉｔ Ｋ５６２ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｄｕｃｅ Ｇ１ ｐｈａｓｅ ａｒｒｅｓｔ；ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ＬＣ３一ＩＩ／ＬＣ３一１ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ；ｆｕｒｔｈｅｒｍ ｏｒｅ，Ｃｕｒｃｕｍ ｉｎ ｃｏｕｌｄ ａｌｓｏ ｕｐ—ｒｅｇｕｌａｔｅ Ｋ ５６２ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐ５３，ｐ２１ ａｎｄ ｐ２７，ａｎｄ
姜黄素联合PDTC体外抗白血病K562细胞的作用研究
姜黄素联合PDTC体外抗白血病K562细胞的作用研究高荧;于宜平;苗久旺;张钦德【摘要】目的探讨姜黄素联合PDTC体外抗K562细胞的作用.方法 MTT法检测姜黄素单独或联用PDTC后对K562细胞增殖活性的影响;Hoechst33342染色法观察细胞凋亡形态;Western blot法检测Cleaved Caspase 3的表达活性.结果 10 μmol·L-1姜黄素联合25 μmol·L-1的PDTC后,可显著提高对K562细胞增殖的抑制活性,并显示出诱导细胞凋亡的形态学特征,使细胞Cleaved Caspase 3表达增加.结论姜黄素联合PDTC可增强抗K562细胞作用,机制与诱导K562细胞凋亡作用有关.【期刊名称】《云南中医中药杂志》【年(卷),期】2018(039)001【总页数】3页(P72-74)【关键词】姜黄素;吡咯烷二硫代氨基甲酸盐;细胞凋亡;Caspase 3【作者】高荧;于宜平;苗久旺;张钦德【作者单位】山东中医药高等专科学校,山东烟台264199;山东中医药高等专科学校,山东烟台264199;山东中医药高等专科学校,山东烟台264199;山东中医药高等专科学校,山东烟台264199【正文语种】中文【中图分类】R285.5核因子-kappaB(nuclear factor-kappaB，NF-κB)与肿瘤细胞的增殖、凋亡有密切关系[1]。
研究表明，吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)特异性抑制NF-κB后，对人白血病K562细胞的增殖有抑制作用、并可诱导凋亡，还可逆转肿瘤耐药[2]。
姜黄素及其类似物抗K562细胞作用明确、且呈多靶点性，但存在不稳定、易降解、体内吸收差、低浓度下抑制活性较弱的缺点[3，4]。
采用高效低毒的中药活性成分与肿瘤化疗药联合应用以减少化疗药的用量、提高化疗效果、降低药物不良反应，是抗肿瘤药物研究的重要方向。
姜黄素诱导K562细胞自噬的抗瘤作用研究
姜黄素诱导K562细胞自噬的抗瘤作用研究于鑫; 卢发强; 宗成国; 张卫军; 牟锐; 魏丹冰; 范世珍; 于波海【期刊名称】《《中国实验诊断学》》【年(卷),期】2019(023)011【总页数】5页(P1965-1969)【关键词】姜黄素; 自噬; 慢性粒细胞白血病; K562细胞; BCR-ABL融合基因【作者】于鑫; 卢发强; 宗成国; 张卫军; 牟锐; 魏丹冰; 范世珍; 于波海【作者单位】大连大学附属中山医院检验科辽宁大连 116001; 广州中医药大学深圳医院【正文语种】中文【中图分类】R733.7姜黄素(curcumin)是从植物姜黄根茎中提取的天然多酚化合物,是姜黄能发挥药理学作用的主要成分[1]。
大量研究表明姜黄素具有多种生物学功能,包括抗氧化、抗炎及抗肿瘤等特性。
姜黄素可通过选择性的细胞毒性对多种肿瘤细胞产生抗瘤效应,例如,抑制结肠癌和肺癌的肿瘤细胞增殖,减缓乳腺癌和肝癌等的发展,在肿瘤的临床治疗中具有广阔的应用前景[2,3]。
自噬(autophagy)是细胞内大分子和细胞器降解和循环利用的分解代谢过程,普遍存在于真核细胞中。
自噬是细胞在不利存活的环境中为保持细胞完整性的生存机制,同时也可作为细胞死亡的一种方式,称为Ⅱ型程序性细胞死亡。
慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)是骨髓恶性增殖性疾病,约有95%的病例有骨髓细胞的克隆性增殖,其特征是包含Ph染色体,导致BCR-ABL融合蛋白的产生[3,4]。
研究显示姜黄素对于肿瘤细胞的主要毒性作用是凋亡,自噬可能在肿瘤的发展过程中起到双重作用：促进或抑制肿瘤细胞的死亡[4]。
本课题以CML细胞系K562细胞为实验模型,研究姜黄素诱导细胞自噬在抗瘤过程中的作用,为临床治疗提供可靠的依据。
1 材料与方法1.1 细胞株K562细胞购自和元生物技术(上海)股份有限公司。
1.2 药物与试剂姜黄素,3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA),噻唑蓝(MTT),二甲基亚砜(DMSO)购自Sigma-Aldrich公司；RPMI-1640培养基,青-链霉素抗菌液购自美国GIBCO 公司；胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)购自以色列Biological Industries公司；TRIzol试剂购自美国Life Technologies公司；cDNA合成试剂盒购自美国Thermo Fisher公司；Wsetern Blotting ECM增强显色法检测试剂盒,SDS-PAGE凝胶配制试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司；兔抗鼠LC3IgG,Beclin1 IgG购自日本MBL公司；GAPDH内参抗体购自北京中杉金桥公司；蛋白质定量试剂盒购自美国Bio-Rad公司。
药物治疗慢性粒细胞白血病的研究进展
药物治疗慢性粒细胞白血病的研究进展刘素晓;王幼平;崔琳【摘要】Chronic myeloid leukemia(CML)is a pluripotent stem cell disease characterized by the proliferation of myeloid cell.Ph chromosome has been found in 95% of CML patients.BCR-ABL fusion protein expressing on Ph chromosome displayed constitutive tyrosine kinase activity.The fusion protein could phosphorylate and activate downstream substrates continually in the process of cell signal transduction,and then cells proliferate and migrate constantly,resulting the occurrence of CML.In recent years, people have been tried various methods to cure CML, which included developing some chemotherapy drugs and herbal extracts,as well as designing and synthesizing the inhibitors targeting BCR-ABL tyrosine kinase.Clinical studies showed that these drugs have been achieved remarkable effects.This paple aimed to review for drugs treated in CML.%慢性粒细胞白血病（ chronic myelocytic leukemia，CML）是一种以粒系细胞增生为主要特征的多能干细胞疾病。
论花色素对白血病细胞株K562 细胞增殖的影响
论花色素对白血病细胞株K562 细胞增殖的影响K562 细胞是一种分化极差、恶性程度较高的人红白血病细胞株。
研究证明,其在体外可被多种诱导剂诱导,可分别向红系、粒系、单核巨嗜细胞系及巨核细胞系分化。
花色素是一类分布十分广泛的植物色素,具有类黄酮的典型结构。
有研究表明,花色素对人乳腺癌、前列腺癌、结肠癌等肿瘤细胞具有生长抑制作用。
其作用机制与抗氧化作用、抑制肿瘤细胞增殖、诱导癌细胞凋亡和分化等有关,且对机体无明显不良反应。
本研究通过体外培养K562 细胞,观察花色素对K562 细胞的形态变化,探讨花色素对K562 细胞关于增殖方面的作用,为临床上白血病的治疗提供新思路。
1 材料与方法1. 1 材料花色素( 购自上海惠诚责任有限公司) ; RPMI-1640 培养基( 美国GIBCO 公司) ; 新生牛血清( 杭州四季青生物工程材料有限公司) ; MTT 试剂盒( 武汉博士生物工程有限公司) ; CO2细胞培养恒温箱购于美国Forma Scientific 公司; 倒置相差显微镜( Olympus公司) ; 96 孔培养板( 美国Falcon 公司) ; 流式细胞仪( 美国Becton-Dickinson 公司) ; 自动酶标仪( BIORAD公司550 型) 。
K562 细胞为吉林医药学院检验学院细胞室冻存细胞,接种K562 细胞于含10%新生牛血清的RPMI-1640 完全培养基,37 ℃、5% CO2饱和湿度培养箱中培养,取对数生长期细胞用于试验。
1. 2 细胞培养常规传代培养K562 细胞至对数生长期,将对数生长期细胞分成5 组,以每孔1 105 接种于96 孔板中,24 h 后分别加入花色素,使终浓度分别为25、50、100、200 mg /L,并设置对照组,培养24 h 后于倒置显微镜下观察细胞状态并拍照。
1. 3 瑞氏染色观察常规传代培养K562 细胞至对数生长期,将对数生长期细胞分成5 组,24 h 后分别加入花色素使终度分别为25、50、100、200 mg /L,并设置对照组,培养24 h后收集各组细胞,离心800 r /min,5 min,弃上清,将细胞沉淀涂布于载玻片上,甲醇固定10 min 后取出,PBS 冲洗,自然晾干,滴加瑞氏染液1 min 后再加入等量的PBS,混匀,静置5 min 后,细流水洗,吸干,镜检观察并拍照。
姜黄素对人类红白血病细胞（K562）的抑制及诱导分化作用
姜黄素对人类红白血病细胞（K562）的抑制及诱导分化作用孟秀香;宋振岚
【期刊名称】《大连医科大学学报》
【年(卷),期】1999(021)002
【摘要】用人类红白血病细胞（Ｋ５６２）为通过细胞计数、ＭＴＴ法测定，形态学观察、ＮＢＴ还原试验及联七胺反应等方法检测了不同浓度姜黄素对体外人Ｋ５６２细胞的作用。
结果表明，姜黄素对Ｋ５６２细胞有明显的抑制作用。
随浓度增加，抑制作用逐渐增强，形态学观察可见轻微诱导分化作用。
鉴于姜黄素对人类红白血病细胞兼有轻微诱经和增殖抑制人艇，提示姜黄素有可能应用于人类红白血病的治疗。
【总页数】3页(P98-100)
【作者】孟秀香;宋振岚
【作者单位】大连医科大学检验系;大连医科大学检验系
【正文语种】中文
【中图分类】R730.52
【相关文献】
1.雷公藤多甙对人类红白血病细胞株K562作用机制的研究 [J], 宋健辉;刘静;唐小玲
2.人类红白血病细胞株K562的诱导分化机制 [J], 张彦
3.冬凌草甲素对人红白血病细胞系K562细胞生长的抑制作用 [J], 冯长伟;潘祥林;邹俊晖;郭娟娟
4.土贝母苷甲对人红白血病细胞K562的诱导分化作用 [J], 刘姬艳;高营;于立坚;马润娣
5.苦参对K562红白血病细胞系诱导分化作用 [J], 秦建平;蒋纪恺;张彦;王霞文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
姜黄素衍生物C085对K562细胞的作用及机制研究
姜黄素衍生物C085对K562细胞的作用及机制研究吴莺;陈瑞家;吴丽贤;许建华【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2015(31)6【摘要】目的：研究姜黄素衍生物C085对K562细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。
方法采用 MTT 法观察C085对细胞增殖的影响；Annexin V-FITC/PI双荧光染色后流式细胞仪检测C085对细胞凋亡的影响；蛋白免疫印迹探讨C085引发K562细胞凋亡的机制,检测其对BCR-ABL及其下游信号转导通路蛋白的磷酸化及对其他凋亡相关蛋白表达的影响；JC-1荧光染色法检测C085对细胞线粒体膜电位的影响。
结果 C085在低浓度下抑制K562细胞,IC50只有其母体姜黄素的1/5甚至更低；在24h即对K62细胞有较强的诱导凋亡作用,主要是中、晚期凋亡。
与阳性对照药IM相比,诱导凋亡作用明显。
对其作用机制研究发现,C085可下调BCR-ABL的自磷酸化和下游信号转导通路蛋白Stat 5和Crkl的磷酸化水平,作用均强于IM。
JC-1荧光染色法结果表明,C085通过直接作用于线粒体的PT孔使其开放,下调Bcl-2、上调Bax,诱导细胞凋亡,促凋亡作用强于IM。
结论 C085可抑制 BCR-ABL+ K562细胞的生长,与其抑制BCR-ABL蛋白激酶活性,下调相关信号通路；直接作用于线粒体的PT孔使其开放,激活凋亡相关蛋白,诱导细胞凋亡有关。
%Aim To explore the anti-proliferation and apoptotic effects of C085, a curcumin derivative, on K562 cells and its mechanism. Methods MTT assay and flow cytometry were used to examine cell prolifera-tion and apoptosis, respectively. The phosphorylation levels of Bcr-Abl initiated signaling proteins were ana-lyzed using Western blot.Results The results showed that C085 suppressed the growth of K562 cells and the IC50 value was about 5-fold lower than that of Cur. C085 also induced significant apoptosis on K562 cells in 24 hours when compared with imatinib. Western blot results demonstrated that C085 down-regulated the phosphorylation of Bcr-Abl in K562 cells in a dose-de-pendent manner. The phosphorylation of Stat 5 and <br> Crkl, which were downstream signaling proteins of Bcr-Abl kinase, was also inhibited byC085. C085 caused the opening of mitochondrial PT holes as detected by JC-1 fluorescent, which inhibited Bcl-2 and enhanced Bax , then induced apoptosis. Conclusion C085 in-hibited BCR-ABL+ K562 cells through inhibiting BCR-ABL kinase activity and down-regulating its down-stream signal proteins. Directly acting on mitochondrial PT hole and then activating apoptosis- associated pro-teins are also involved in the pro-apoptotic effect of C085 .【总页数】6页(P870-875)【作者】吴莺;陈瑞家;吴丽贤;许建华【作者单位】福建医科大学药学院福建省天然药物药理学重点实验室，福建福州350108; 福建医科大学药学院天然药物学系，福建福州 350108;福建医科大学药学院福建省天然药物药理学重点实验室，福建福州 350108;福建医科大学药学院福建省天然药物药理学重点实验室，福建福州 350108;福建医科大学药学院福建省天然药物药理学重点实验室，福建福州 350108【正文语种】中文【中图分类】R282.71;R284.1;R329.24;R329.25【相关文献】1.姜黄素衍生物FM17对K562细胞增殖影响及其与P210bcr/abl激活的信号途径关系 [J], 陈云艳;许建华2.姜黄素衍生物 C085抑制K562／G01细胞及 Bcr-Abl激酶的体外研究 [J], 吴莺;吴丽贤;许建华3.姜黄素衍生物C085与Hsp90及其不同片段相互作用以及对Hsp90 ATPase活性的影响 [J], 范莹娟;张连茹;刘洋;许建华4.姜黄素衍生物对K562细胞酪氨酸激酶活性的影响 [J], 许娇红;张志强;刘洋;许建华5.淫羊藿苷与HMBA衍生物单独及联合作用对K562细胞生长的影响及机制研究[J], 狄凯军;章静波因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
姜黄素对细胞内阿霉素蓄积的影响
姜黄素对细胞内阿霉素蓄积的影响
张慧珠;李兰香;杨林
【期刊名称】《上海中医药杂志》
【年(卷),期】2006(40)2
【摘要】目的为研究姜黄素对阿霉素在细胞内蓄积的影响。
方法观察姜黄素在0、1.56、6.25、12.5μg/ml浓度下,对人口腔上皮癌细胞KB及其多药耐药细胞株KBV200和小鼠肝、肾细胞内阿霉素蓄积的影响,并采用荧光分光光度法对不同浓
度姜黄素在各种细胞内的蓄积量进行了测定。
结果姜黄素可提高阿霉素在KBV200细胞内的蓄积,降低或不影响阿霉素在KB细胞内的蓄积;不影响阿霉素在肝、肾细
胞内的蓄积;姜黄素在各种细胞内随着用量的增加蓄积量增加。
结论姜黄素增敏阿
霉素抗肿瘤作用在KB与KBV200细胞通过不同机制;姜黄素不增加阿霉素对正常
组织的毒性。
【总页数】2页(P57-58)
【关键词】姜黄素;阿霉素;荧光分光光度法;药理学
【作者】张慧珠;李兰香;杨林
【作者单位】华北煤炭医学院药理教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.茶多酚抑制MDA生成及对阿霉素在小鼠肝细胞内蓄积的影响 [J], 树华;杨林;齐亚娟;韩淑英;张惠珠;朱丽莎
2.苦参碱抑制丙二醛生成及对阿霉素在小鼠肝细胞内蓄积的影响 [J], 齐亚娟;杨林;王树华
3.华蟾素对耐阿霉素人乳腺癌细胞内阿霉素蓄积的影响 [J], 王玲;刘世坤;周于禄;裴奇;阳宁
4.γ干扰素对鼠源性平滑肌细胞内源性CXC配体16表达及细胞内脂质蓄积的影响[J], 杨婷;全智华
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红芪总黄酮对K562细胞增殖的抑制作用及机理研究的开题报告
红芪总黄酮对K562细胞增殖的抑制作用及机理研究的开题报告一、选题背景红芪（Astragalus membranaceus）是中药中常用的一种草药，在中医药学中被广泛应用于治疗各种疾病。
红芪中含有大量的黄酮类物质，其中包括总黄酮、异黄酮等多种成分，在体内具有多种生物活性，如抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等作用。
近年来，越来越多的研究表明，红芪总黄酮在肿瘤预防和治疗中具有广泛的应用价值。
K562细胞是人类慢性髓系白血病细胞系，具有高度增殖能力和低程度的分化。
目前，K562细胞已经成为研究抗肿瘤药物作用机理的一种常用细胞模型。
因此，研究红芪总黄酮对K562细胞增殖的抑制作用及其作用机理，对于揭示红芪总黄酮在肿瘤治疗中的作用机制具有重要意义。
二、研究目的本研究旨在探究红芪总黄酮对K562细胞增殖的抑制作用及其作用机理，为红芪总黄酮在肿瘤治疗中的应用提供理论基础。
三、研究内容和方法本研究将采用细胞学实验方法，研究红芪总黄酮对K562细胞增殖的抑制作用，并探究其作用机理。
具体研究内容如下：1. 红芪总黄酮对K562细胞增殖的抑制作用测定通过MTT法测定不同浓度的红芪总黄酮对K562细胞增殖的影响，得出其50%抑制浓度（IC50）。
2. 红芪总黄酮对K562细胞周期的影响通过流式细胞术测定不同浓度的红芪总黄酮对K562细胞周期的影响，观察其是否对细胞周期产生影响。
3. 红芪总黄酮对K562细胞凋亡的诱导作用通过细胞核染色法和Annexin-V/PI双染法测定不同浓度的红芪总黄酮对K562细胞凋亡的诱导作用，观察其是否具有诱导细胞凋亡的能力。
四、预期结果通过本研究，预期可以得到以下结果：1. 红芪总黄酮对K562细胞增殖具有明显的抑制作用，且具有一定的剂量-效应关系。
2. 红芪总黄酮对K562细胞周期可能产生影响，如使细胞在G0/G1期停滞。
3. 红芪总黄酮对K562细胞具有一定的诱导凋亡作用。
以上结果可为揭示红芪总黄酮在肿瘤治疗中的作用机制提供理论基础。
姜黄素对TK6细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用研究
姜黄素对TK6细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用研究
张建清;张立实;王瑞淑
【期刊名称】《营养学报》
【年(卷),期】2003(25)3
【摘要】目的 : 观察姜黄素 (curcumin)对人的类淋巴母细胞 TK6细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用 ,为进一步探讨其抗诱变、抗肿瘤的机制和开发利用提供理论依据。
方法 : 姜黄素处理TK6细胞 ,采用 MTT比色分析法、3 H- Td R掺入法和细胞周期测定以及细胞超微结构观察和流式细胞分析。
结果 : 2 0 μmol/L的姜黄素处理细胞 2 4 h,即可产生显著的细胞增殖抑制作用和凋亡诱导作用 ,且有剂量和时间依赖性。
姜黄素引起细胞的凋亡主要在细胞周期的 DNA合成期 (S期 ) ,将细胞周期阻滞在静止期和 DNA合成前期 (G0 /G1期 )。
结论 : 姜黄素对 TK6细胞具有显著的增殖抑制作用和凋亡诱导作用。
【总页数】4页(P268-271)
【关键词】类淋巴母细胞;TK6细胞;细胞增殖;细胞凋亡;姜黄素;体外试验
【作者】张建清;张立实;王瑞淑
【作者单位】深圳市疾病控制中心;四川大学公共卫生学院
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.姜黄素抑制大鼠气道平滑肌细胞增殖和诱导凋亡的作用 [J], 张庭庭;许继德;白洪波;韩志远;王超智
2.姜黄素对胃癌BGC-823细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用 [J], 周海燕;江红星
3.姜黄素对肺癌细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用 [J], 郑伟;吴丽娜;杨向红
4.姜黄素对结肠癌细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用研究 [J], 吴亚丽;谢俊霞;卢楠;郭立达;梁世中
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人参总皂苷对K562细胞增殖抑制、诱导分化的信号转导机理的研究的开题报告
人参总皂苷对K562细胞增殖抑制、诱导分化的信号转导
机理的研究的开题报告
背景：
人参总皂苷是从人参中提取的一种主要生物活性成分，已被广泛应用于临床治疗肿瘤、心脑血管疾病等疾病。
前人研究表明，人参总皂苷可抑制多种肿瘤细胞的增殖，并促进分化。
然而，其在K562细胞中的分子作用机制尚未被充分研究。
目的：
本研究旨在探究人参总皂苷抑制K562细胞增殖、诱导分化的信号转导机制。
研究方法：
1.细胞培养：采用国内常用的K562细胞系，于37℃下5%CO2下用RPMI1640
培养基进行细胞培养。
2. 实验分组：将细胞分为对照组和人参总皂苷处理组，其浓度范围为20～100 μM。
每组实验均设置5个亲管，同一个处理浓度的样品分别重复3次。
3. 检测细胞增殖：采用MTT法测定细胞增殖率。
4. 检测细胞分化：采用巯基乙酰化（NBT）还原试验测定细胞分化程度。
5. 检测细胞信号通路：采用Western blot法检测相关蛋白表达，如p38、
ERK1/2、JNK等。
预期结果：
本研究将探讨人参总皂苷对K562细胞增殖抑制、诱导分化的信号转导机制。
预期结果为，人参总皂苷可抑制K562细胞的增殖，并诱导其分化。
同时，该药物可能通过调控p38、ERK1/2、JNK等蛋白的表达来发挥这种生物学效应。
结论：
该研究可为深入了解人参总皂苷的药理机制、开发新型抗癌药物提供理论和实验基础。
同时，为临床治疗肿瘤提供了新的思路。
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山东 医药 ２０ ０ ８年第 ４ ８卷第 ４ １期
水平下 降 ， 高血 液 ｐ 值 ， 善循 环血 流 状 态 ， 提 Ｈ 改 增 加尿量 等 方 面 直 接 对 抗 内毒 素 和 Ｄ Ｃ 的 发 生 作 Ｉ 用 ］ 。这 些研 究结 果 的提 示 为我 们 在 抗 感 染 性 休 克 的治 疗 中加 用 参 麦 注 射 液 得 到 了 相 关 的 理论 基 础 ， 在本研究 结果 中得到相 关 的证 实 。 并 ［ 参考 文献 ］
［ 关键词 ］ 姜黄素 ； 白血病 ； 自吞噬作用 ； 微管相关蛋白质类 ； 线粒体 ［ 中图分类号 ］ Ｒ ９ ． ３２２ ［ 文献标识码 ］ Ｂ ［ 文章 编号 ］ １０ －６ Ｘ（０ ８ ４ － ９ － ０ ２２ ６ ２０ ）１０ ５０ ０ ２
近年来 ， 黄素 抗 肿瘤 作 用机 制 的 研究 大 多集 姜 中在诱 导 细胞 凋 亡 及 相 关 基 因表 达 等 方 面 。２ ０ ０５ 年 ９月 ～ ０ ６年 ３月 ， 们采用 Ｍ盯 法测 定姜黄 素 ２０ 我 对 Ｋ６ ５ ２细 胞 增 殖 的抑 制 作 用 ， 细胞 自噬 的 角度 从 探讨 姜黄 素抑制 Ｋ ６ ５ ２细胞增殖 的机制 。
［ ２］Ｑ ａ Ｓ ｐ Ｍ，Ｅｍ ｎＣ ．Ｂ ｎｈｔ—ｅ ｓ ｅ ｅｉ ｆｎｔ ｎ ｌｔｎ ｌ ｓ ｏ Ｔ ｅ ｃ— ｂｄｉ ｖｅ ｕ ｃｉ ａ ｒ ａｏ— ｏ ｄ ｒ ｗ： ｏｌ ｅ ｉ
ｎ ｅｐ ｎ ｅａ ｄｔｅｒ ｓ ｉ ｓ ｂ ｔ ｅ ｏ ｇ ｌｔｏ ｎｄ ｔ ｅ ｉ ｎ ｔ ｍｍｕ ｅ ｒ ｓ ｏ ｓ ｎ ｈ ｉ ｈ ｐ ｅｗｅ ｎ ｃ ａ ｕ ａ ｉｎ ａ ｈ ｎ ａ ｅ ｉ
１ 材料 与方法
１０ １０ ２ ０ ２ ０ ３０、５ 、０ ｍ ｌＬ ， ０ 、５ 、０ 、５ 、０ ３ ０ ４ ０ Ｉ ｏ ） 阴性 对照 ｘ ／
组加入 等体积 生理盐 水 ， 每组 均设 ３复孔 ， 别培养 分
１ 、４ ４ 、２ｈ ２ ２ 、８ ７ 。培 养终 止 前 ４ ｈ加人 Ｍ Ｉ ４ ｈ后 Ｔ＇ ， 每孔加 入酸 化的 １ ％ Ｓ Ｓ１０ 终 止反应 ， ０ Ｄ ０ 放置过 夜， 于酶标仪 检测波 长为 ５０ ｎ 时 的吸光 度 Ａ值 。 ７ ｍ 重复 ３次 。 １２ ２ 细胞 自噬 的形 态学 观察 ．． 选 取 抑瘤 效 果 明 显 的药 物浓 度 １０￣ ｏ ５ ｍ ＶＬ分别 给 药 ３ ６ １ 、４ ｈ 、 、２ ２ ，
姜 黄 素抑制 Ｋ ６ ５２细胞 增 殖 的机 制
潘红宁 ， 杏华 ， 侍 高 薇， 郑 丹， 朱 慧 （ 盐城 卫生职 业技 术 学院 ， 江苏盐城 ２ ４ ０ ） ２０６
［ 摘要 ］ 用不同浓度 的姜黄素处理人慢 性粒细胞 白血病细胞 株 Ｋ ６ ５ ２细胞 ， 采用 Ｍｒ Ｉ ｔ ｒ法测定姜黄素对 Ｋ ６ ５２
对照组 和给药 组用含 ＭＤ （ ０Ｉ ｏ Ｌ 的新 鲜培养 Ｃ ５ ｍ ｌ ） ￣ ／
１ １ 材料 ．
人 慢性 粒 细胞 白血 病 细 胞 株 Ｋ ６ ５ ２细
胞 由苏 大 药 理 实 验 室 保存 ， 含 １ ％ 灭 活 Ｆ Ｓ的 用 ０ Ｂ
Ｒ Ｍ１ ６ ０培养基 ， Ｐ ４ １ 另加 Ｇｕ０ ０ ％ 、 ｐ ｓ ．６ 、 ｌ ．３ Ｈｅｅ ０ ％ ０
疑难 病 杂 志 ，０２，（ ）２ －３ ２０ １ １ ：２２ ．
［ ］韩丽莎 ， ４ 马玉亭， 韩抬， 参麦注射 液对缺血再灌注兔 的保 护作用 ［ ］ 中国病理生理杂志 ，００，６ ７）６ ３６４ Ｊ． ２０ １ （ ：６ －６ ．
（ 稿 日期 ：０８０ －１ 收 ２０ －８１ ）
『 ］ ｎｌ ｅ ，１９ ３ ３ １ ） １２ —０ ２ Ｊ ．Ｎ Ｅ ｇ ＪＭ ｄ ９ ５，３ （ ６ ：０ ５１３ ．
［ ］Ｇ ｔｎｎ Ｂａｚ Ｌ ＰｌｓＰ， ｔ ．Ａｔａｏ ｏ —ｒ ｎｅ ｅ － １ ａｔ ｏｉ ｉ Ｌ， ｒｚｉ ， ｅｏｉ ｅ ａ ｉ ｆ ａ ｏｉ ｔ ｈｍｏ １ ｒ ｌ ｇｌ ｅ ｄ
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７ １ ： ３３ ． （ ） ２ －８
［ ］贾连旺 ， ３ 范寿坤． 参麦 注射液治疗原 发性低血压 临床观察 ［ ］ Ｊ．
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传 代。取对 数生长期 细胞 进行 实验 。Ｒ ＭＩ１４ Ｐ ６ ０培 养 基 ； 级 新生 小 牛 血 清 （ Ｂ ） 姜 黄 素 ， ０ １Ｎ 超 ＦＳ ； 用 ． ＮＯ ａ Ｈ配成 １０ ｍ ｏ 浓 度 ， 滤除 菌后 ４ ｃ 保 存 备 ０ ｍ ｌ 过 ＝ Ｉ
20080811姜黄素抑制k562细胞增殖的机制盐城卫生职业技术学院江苏盐城224006摘要用不同浓度的姜黄素处理人慢性粒细胞白血病细胞株k562细胞采用mriii法测定姜黄素对k562细胞增殖的抑制作用应用mdc荧光染色观察自噬的发生免疫组化法观察自噬特异性蛋白lc3的表达流式细胞仪观察细胞线粒体膜电位变化