(直打版)医学微生物学笔记(总结得真的很好)

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四、影响细菌生长的环境因素(简答)
1、营养物质:水、碳源、氮源、无机盐及生长因子为细菌的代谢及生长繁殖提供必需的原料和充足的能量
2、酸碱度(pH):多数病原菌最适pH为7。

2—-7。

6,而结核杆菌最适pH值为6。

5--6.8,霍乱弧菌最适pH值为8。

4——9.2。

3、温度:病原菌最适温度为37度。

4、气体:
O2:根据细菌代谢时对氧气的需要与否分四类:
①专性需氧菌:具有完善的呼吸酶系统,需要分子氧作为受氢体以完成需氧呼吸,仅能在有氧环境下生长.
②微需氧菌:在低氧压(5%—6%)生长最好.
③兼性厌氧菌:兼有有氧呼吸和无氧发酵两种功能,在有氧、无氧环境中均能生长,但以有氧时生长较好.大多数病原菌属于此。

④专性厌氧菌:缺乏完善的呼吸酶系统,只能进行无氧发酵,必须在无氧环境中生长。

CO2:对细菌生长也很重要,大部分细菌在代谢中产生的CO2可满足需要,个别细菌初次分离时需人工供给5—10%CO2。

5、渗透压:
五、细菌的生长繁殖
1、细菌个体的生长繁殖:
繁殖方式——-—细菌以简单的二分裂方式进行无性繁殖。

繁殖速度-—-—繁殖一代所需时间(代时)约20-30min。

但少数细菌代时较长,如结核分枝杆菌代时为18小时。

能磷酸键的形式(ATP/ADP)储存能量。

1、EMP途径,又称糖酵解。

大多数细菌共有的基本代谢途径,有些专性厌氧菌产能的唯一途径.
2、磷酸戊糖途径,又称一磷酸己糖途径。

为生物合成提供前提和还原能。

3、需氧呼吸,需氧菌和兼性厌氧菌进行需氧反应。

4、厌氧呼吸,专性厌氧菌和兼性厌氧菌都能进行厌氧呼吸。

二、细菌的代谢产物
㈠分解代谢产物和细菌的生化反应
㈡合成代谢产物及其医学上的意义
1、热原质(致热源):是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。

产生热致源的细菌大都为格兰阴性菌,热致源即其细胞壁的脂多糖。

2、毒素及侵袭性酶:①外毒素:多数G+菌和少数G—菌在生长繁殖过程中释放菌体外的蛋白质;
②内毒素:G-菌细胞壁的脂多糖;外毒素毒性强于内毒素。

③侵袭性酶:某些细菌产生的,能损伤机体组织,促使菌体的侵袭和扩散,是细菌重要的致病物质。

3、色素:①水溶性;②脂溶性。

4、抗生素:某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。

抗生素大多由放线菌和真菌产生。

5、细菌素:某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。

细菌素仅对与产生菌有亲缘关系的细菌有杀伤作用。

6、维生素:
第四节细菌的人工培养
②煮沸法(100 ℃,5min)食具、注射器等消毒
③流动蒸汽消毒法(100 ℃ 15—30min)
④间歇蒸汽灭菌法(100 ℃ 5—30min,37 ℃24h×3天)
⑤高压蒸汽灭菌法:
*压力—103.4KPa(1。

05Kg/cm2)
*温度—121.3 ℃
*时间-15-20min
*效果-杀灭包括芽孢在内所有微生物
*应用—所有耐高温、高压、耐湿的物品
㈡辐射杀菌法:
①紫外线:波长240—300nm的紫外线具有杀菌作用,其中以265-266nm最强。

紫外线杀菌机理是干扰细菌DNA合成,导致细菌变异和死亡。

手术室空气消毒常采用紫外线消毒
②电离辐射:高速电子、X射线、γ射线
③微波:波长为1-1000mm的电磁波,不能穿透金属表面。

微波主要靠热效应发挥作用,且必须在有一定含水量条件下才能显示出来。

㈢滤过杀菌法
㈣干燥杀菌法
㈤低温杀菌法
二、化学消毒灭菌法
原理(填空):⑴破坏菌体蛋白;⑵干扰细菌的酶系统和代谢;⑶改变细胞膜的通透性。

第四节影响消毒灭菌效果的因素
㈠微生物的种类
微生物对消毒灭菌的敏感性高低排序大致如下:真菌、细菌繁殖体、有包膜病毒、无包膜病毒、分枝杆菌、细菌芽胞.
㈡微生物的物理状态
㈢微生物的数量
㈣消毒剂的性质、浓度及作用时间
㈤温度:消毒剂的杀菌作用速度随温宿升高而加快。

㈥酸碱度
㈦有机物
第五节病原微生物实验室生物安全
一、病原微生物的分类
第一类:能够引起人类或动物非常严重疾病的微生物,以及我国尚未发现或已经宣布消灭的微生物。

第二类:能够引起人类或动物严重疾病,比较容易直接或间接在人与人、动物与动物、动物与人间传播的微生物。

第三类:能够引起人类或动物疾病,但一般情况下对人、动物或环境不构成严重危害,传播风险有限,实验室感染后很少引起严重疾病并且具备有效治疗和预防措施的微生物.
第四类:通常情况下不会引起人类或动物疾病的微生物。

二、病原微生物实验室的分级:根据生物安全防护水平(BSL)及实验室生物安全国家标准
一级:
二级:
灭活.噬菌体能耐受低温和冰冻,但对紫外线和X射线敏感。

第二节毒性噬菌体
1、噬菌体感染细菌有两种结果:
①毒性噬菌体(virulent phage):能在宿主细胞内复制增殖,产生许多子代噬菌体,并最终裂解细菌,建立溶菌周期。

②温和噬菌体(temperate phage):噬菌体基因与宿主染色体整合,成为前噬菌体,细菌变成溶原性菌,不产生子代噬菌体,但噬菌体DNA能随细菌DNA复制,并随细菌的分裂而传代,建立溶原状态。

2、毒性噬菌体
■毒性噬菌体在宿主菌内以复制方式进行增殖,增殖过程包括:吸附、穿入、生物合成、成熟和释放。

液体培养基-—噬菌现象可使浑浊菌液变得澄清.
固体培养基——若用适量的噬菌体和宿主菌液混合后接种培养,培养基表面可有透亮的溶菌空斑出现。

一个空斑系由一个噬■菌体复制增殖并裂解细菌后形成,称为噬斑(plaque),不同噬菌体噬斑的形态与大小不尽相同。

■若将噬菌体按一定倍数稀释,通过噬斑计数,可测定一定体积内的噬斑形成单位(plaque forming units,pfu)数目,即噬菌体的数目.
第三节温和噬菌体
■前噬菌体(prophage)温和噬菌体的基因组能与宿主菌基因组整合,并随细菌分裂传至子代细菌的基因组中,不引起细菌裂解。

整合在细菌基因组中的噬菌体基因组称为前噬菌体(prophage)。

带有前噬菌体基因组的细菌称为溶原性细菌。

■溶原性转换(lysogenic conversion):某些前噬菌体可导致细菌基因型和性状发生改变。


如白喉棒状杆菌产生白喉毒素的机理。

第五章细菌的遗传与变异
●遗传(heredity):使微生物的性状保持相对稳定,子代与亲代生物学的性状基本相同,且代代相传。

●变异(variation):在一定条件下,子代与亲代之间以及子代与子代之间的生物学性状出现的差异,有利于物种的进化。

●基因型(genotype):细菌的遗传物质.
●表型(phenotype):基因表现出的各种性状。

●遗传性变异:是细菌的基因结构发生了改变,故又称基因型变异.常发生于个别的细菌,不受环境因素的影响,变异发生后是不可逆的,产生的新性状可稳定地遗传给后代。

●非遗传性变异:细菌在一定的环境条件影响下产生的变异,其基因结构未改变,称为表型变异。

易受到环境因素的影响,凡在此环境因素作用下的所有细菌都出现变异,而且当环境中的影响因素去除后,变异的性状又可复原,表型变异不能遗传。

第一节细菌的遗传物质
●DNA的结构与功能:
结构——两条互相平行而方向相反的多核苷酸链
功能-—储存、复制和传递遗传信息
复制——半保留复制
特点——复制中易发生错误—基因突变
蛋白合成——分子生物学中心法则(DNA-RNA-蛋白质)
●基因与基因的转录
结构基因——编码结构蛋白质基因结构
非结构基因—-编码功能蛋白质基因转录
●遗传信息的翻译
第二节细菌的遗传与变异
一、染色体(chromosome)
①一条环状双螺旋DNA长链,按一定构型反复回旋形成松散的网状结构;
②缺乏组蛋白,无核膜包裹;
③约含有5000个基因;
二、质粒-—是细菌染色体以外的遗传物质,是闭合环状的双链DNA。

1、质粒的特征:
①质粒具有自我复制的能力。

②质粒DNA所编码的基因产物赋予细菌某些性状特征。

③质粒可自行丢失与消除。

④质粒的转移性。

⑤质粒可分为相容性与不相容性两种。

2、质粒的分类
(1)根据质粒能否通过细菌的接合作用进行传递
①接合性质粒
②非接合性质粒
(2)根据质粒在细菌内拷贝数多少
①严紧型质粒
②松弛型质粒
(3)根据相容性
①相容性--几种质粒同时共存于同一菌体内
②不相容性-—不能同时共存
*可借此对质粒进行分组、分群。

(4)根据所编码的生物学性状
质粒基因可编码多种重要的生物学性状:
致育质粒(fertility plasmid、F质粒)编码性菌毛,介导细菌之间的接合传递;
■耐药性质粒(resistance plasmid、R质粒)编码细菌对抗菌药物或重金属盐类的耐药性.分两类,一是接合性耐药质粒(R质粒),另一是非接合耐药性质粒(r质粒);
■毒力质粒(Vi质粒) 编码与该菌致病性有关的毒力因子;
■细菌素质粒:编码细菌产生细菌素;
■代谢质粒:编码产生相关的代谢酶。

三、转位因子
●转位因子(transposable element):是一类在细菌染色体、质粒或噬菌体之间可自行移动的一段特异的具有转位特性的核苷酸序列片段,又称移动基因。

●转座子有二类:
①插入序列(insertion sequence,IS):最小,不超过2kb,只携带与转座功能有关的基因。

②转座子(transposon,Tn):长度一般超过2kb,除携带与转位有关的基因外还携带其他基因(如耐药性、毒素基因等)。

四、整合子
定位:细菌染色体、质粒或转座子上.
基本结构:两端为保守末端(attI,59—be),中间为可变区(orf 1),含一个或多个基因盒。

功能元件:重组位点(attI,59-be);整合酶基因(intI);启动子(Pc).
功能:通过转座子或接合性质粒,使多种耐药基因在细菌中进行水平传播.
第三节基因的转移与重组
●基因转移(gene transfer):外源性的遗传物质由供体菌进入某受体菌细胞内的过程。

●基因重组(recombination):转移的基因与受体菌DNA整合在一起,使受体菌获得供体菌某些特性.
●细菌的基因转移和重组方式:转化、转导、接合、溶原性转换、原生质体融合。

1、转化(transformation):受体菌直接摄取供体菌游离的DNA片段获得新的遗传性状的过程称为转化.
2、接合(conjugation):是细菌通过性菌毛相互连接沟通,将遗传物质(主要是质粒DNA)从供体菌转移给受体菌。

能通过结合方式转移的质粒称为接合性质粒,不能通过性菌毛在细菌间转移的质粒为非接合性质粒。

F质粒的接合
■F+ -—即F质粒,编码性菌毛,称雄性菌
■Hfr——F质粒整合到细菌染色体上,使细菌能高效地转移染色体上的基因,故称高频重组菌■F'——Hfr菌中的F质粒可从染色体上脱离下来,并带染色体上几个邻近的基因,故称F’
三者均有性菌毛,均可发生接合
R质粒的接合
■细菌的耐药性与耐药性的基因突变及R质粒的接合转移等有关.
■R质粒有耐药传递因子和耐药决定因子两部分组成。

耐药传递因子的功能与F质粒相似,可编码性菌毛的产生和通过接合转移;R决定子能编码对抗菌药物的耐药性。

3、转导(transduction):是以温和噬菌体为载体,将供体菌的一段DNA转移到受体菌内,使受体菌获得新的性状。

■根据转导基因片段的范围,可将转导分为两类:普遍性转导(转导的DNA可是供菌染色体上的任何部分)、局限性转导(转导的DNA只限供菌染色体上的特定基因)。

4、溶原性转换(lysogenic conversion):溶原性细菌因染色体上整合有前噬菌体而获得新的遗传性状称为溶原性转换。

5、原生质体融合(protoplast fusion):G +菌形成原生质体后,在聚乙二醇(PEG)作用下,可使两种不同的细菌细胞发生融合的过程。

■融合后形成双倍体细胞,可短期生存,染色体重组,获得多种不同表型的重组融合体。

人为实验基因转移与重组.
第四节基因突变
一、基因突变规律:
1、自发突变与诱发突变
①突变可以自然发生为:自发突变,具自发性,随机性。

●彷徨试验(fluctuation test,波动试验):随机的、非定向的突变是在接触噬菌体之前就已发生,噬菌体对突变仅起筛选而不是诱导作用。

②人工诱导产生的突变为诱发突变,可提高突变率.
2、突变率:是指细菌生长时发生突变的频率。

二、特异性免疫
(一)体液免疫——抗体的作用
1、抑制病原体黏附
2、调理吞噬作用
3、中和细菌外毒素
4、溶菌作用
5、抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)
(二)细胞免疫
细胞毒T细胞(CTL)直接杀伤靶细胞
效应T细胞(Th1)产生细胞因子发挥作用
(三)黏膜免疫(mucosal immune system,MIS)
三、抗细菌感染免疫的特点
(一)抗胞外菌感染的免疫
■胞外菌:指寄生在宿主细胞外的组织间隙和血液、淋巴液和组织液中的细胞。

如葡萄球菌。

■靠非特异免疫;但主要是体液免疫发挥作用
●吞噬作用(非特异)
●抗体和补体的作用:①阻止细菌定植(黏附);②调理吞噬;③激活补体溶菌;④中和细菌外毒素。

●细胞免疫(Th2):辅助B细胞产生抗体;产生细胞因子,促进吞噬。

(二)抗胞内菌感染的免疫
■胞内菌:寄生在细胞内的细菌,分专性胞内菌(立克次体,衣原体)、兼性胞内菌(结核分枝
■按病情缓急不同分:
1、急性感染:发作突然,病情突然,一般为数日至数周。

病愈后,致病菌消失。

2、慢性感染:病程缓慢,一般为数月至数年.胞内菌往往引起慢性感染。

■按感染部位不同分:
1、局部感染
2、全身感染:
①毒血症:致病菌侵入体内后,只在机体局部生长繁殖,病菌不进入血循环,但其产生的外毒素入血。

(白喉)
②内毒素血症:G-菌侵入血液,并在其中大量繁殖、崩解后释放大量内毒素;也可由病灶内G-菌死亡释放内毒素入血。

③菌血症:致病菌由局部侵入血流,但未在血流中生长繁殖,只是短暂的一过性通过血循环到达体内适宜部位后再进行繁殖而致病。

(伤寒早期)
④败血症:致病菌侵入血后在其中大量繁殖并产生毒性物质,引起全身性中毒症状。

(高热、皮肤和粘膜瘀斑、肝脾肿大)
⑤脓毒血症:化脓性菌侵入血后在其中大量繁殖,并通过血流扩散至宿主体内的其他组织或器官,产生新的化脓性病灶.
(三)带菌状态:致病菌在显性或隐性感染后并未消失,在体内继续留存一段时间,与机体免疫力处于相对平衡状态。

第五节医院感染
一、医院感染(hospital acquired infection):患者在住院期间发生的感染或医院内获得而出院后发生的感染,或与前次住院有关的感染(不包括入院前已处于潜伏期的感染)。

二、医院感染的分类
1、按微生物来源:
■内源性医院感染:由自身正常菌群转变成机会性致病菌所致
特定条件:①寄居部位改变;②免疫功能下降;③菌群失调
■外源性医院感染(交叉感染):患者遭受医院内非自身存在的病原体侵袭而发生的感染。

病人之间、医患之间、污染医护用品或诊治设备、环境空气等,也称医院内感染。

■医源性感染。

2、按感染部位分类—-全身各部位均可发生
三、医院感染的微生物特征
*主要是机会性致病菌(常为内源性感染)
*常为耐药菌
*新的病原菌不断出现,种类变迁
*主要是细菌,其次为病毒和真菌
四、医院感染的危险因素
■易感对象:年龄因素(老人、婴幼儿);基础疾病(抗感染能力下降)
■诊疗技术及侵入性检查与治疗因素:器官移植;血液透析和腹膜透析;介入检查和治疗
■损伤免疫系统的因素:放射治疗;化学治疗;激素治疗
■其他因素:抗生素使用不当;外科手术及各种引流;住院时间过长
五、医院感染的预防和控制
*消毒灭菌
*隔离预防
*合理使用抗生素
1、标本采取:
■肠热症:1W取血,2W取粪便,3W取尿液,1-3W取骨髓液
■食物中毒:粪便、呕吐物、可疑食物
■败血症:血
■带菌者:粪便
2、分离鉴定:增菌(血、骨髓)→EMB、SS→生化反应→血清鉴定
3、血清学诊断——肥达反应(Widal)→(问答:试述肥大反应原理及其判断)
■肥达反应:是指用已知伤寒杆菌菌体抗原、H抗原及甲、乙副伤寒杆菌H抗原测定可疑病人血清中特异性抗体含量的定量凝集试验.(肥达反应阳性开始于病程的第2周)
■原理:伤寒杆菌有三种抗原:分别为菌体抗原(O抗原)、鞭毛抗原(H抗原)、体表抗原(Vi 抗原)。

其中以O抗原及H抗原的抗原性较强,而Vi抗原的抗原性不强,且相应抗体效价低且为时短暂,随细菌的消除而消失,故不列为肥达试验的检测项目。

当抗原遇到特异性抗体时,便会发生凝集反应,通过对凝集物量多少来推算病人体内抗体的多少,以协助诊断、治疗及判断预后。

■方法:试管凝集法(定量)
当TO≥1:80,TH≥1:160,PA、PB均≥1:80才有意义
■动态观察:双份血清抗体四倍升高有诊断意义
■临床意义:辅助诊断伤寒和副伤寒
O抗体(IgM), H抗体(IgG)
*O 、H抗体均升高,患伤寒的可能性大
*O 、H抗体不升高,患伤寒的可能性小
*只有H升高,则可能是预防接种过或非特异性回忆反应,
2、培养特性:兼性厌氧,氧气充分生长良好。

营养要求不高,耐碱不耐酸(pH7.4—9.6),故用pH8-9碱性培养基,形成光滑透明湿润的“水滴样”菌落,分离(选择)能在无盐培养基中生长(区别其它弧菌)。

3、生化反应:触酶、氧化酶(+),硝酸盐还原(+),靛基质(+)
4、抗原分型:根据0抗原的不同,有155个血清群,其中O1群、O139群可引起霍乱,其余不致病或仅引起胃肠炎等, O1群包括两个血清型:古典生物型和埃托生物型(E1—Tor)。

5、抵抗力:较弱,干燥时易死亡,水环境中可存活两周(水源性传播,水性爆发);怕酸-—正常胃酸4min;不耐热—-100℃,1-2min;对消毒剂敏感,可用漂白粉处理病人的排泄物或呕吐物。

二、致病性与免疫性
1、致病物质:
①霍乱肠毒素—-最强烈的致泻毒素
②菌毛:使细菌定植于小肠
③鞭毛:鞭毛运动有利于细菌穿过黏膜表面黏液,其致病机制与ETEC的LT相似,但作用强烈得多.
2、所致疾病:霍乱
■传染源:病人和无症状感染者的粪便污染的水源和食物。

■传播途径:经口传播
■潜伏期:2—3d
■临床表现:剧烈吐泻、米泔样,每日数十次,持续2-3天,失水12000ml,严重吐泻引起水
电解质紊乱,脱水酸中毒,肾衰、循环衰竭、休克、死亡,及时补充液体和电解质,大大降低死亡率。

■免疫力:病人愈后可获得牢固免疫。

但以前感染O1群获得的免疫对O139群感染无交叉保护作用.霍乱弧菌引起的肠道局部黏膜免疫是霍乱保护性免疫的基础。

三、微生物学检查法
烈性传染病(发病率高、流行迅速、死亡率高),早期、快速、准确诊断(尤其首例)对防治蔓延意义重大。

1、标本:“米泔样”便及呕吐物,快速送检,指定实验室
2、直接涂片镜检:悬滴法或暗视野显微镜,观察穿梭样运动有助于诊断。

3、分离培养鉴定
4、快速诊断:荧光菌球法,SPA 协同凝集试验
四、防治原则
加强国境检疫,加强水源及粪便管理
及时检出病人,隔离封锁疫区
疫苗接种
对症治疗,及时补充液体和电解质,预防大量失水引起的低血容量性休克和酸中毒,及时抗菌治疗。

第二节副溶血弧菌
副溶血弧菌:嗜盐性弧菌,沿海地区常见,存在于近海海水、海泥、海产品中,1950年首发于日本大阪,主要引起食物中毒。

一、生物学性状
1、G—弧菌(多形性),单鞭毛
2、具有耐盐性(与霍乱弧菌的显著差别),在含有3。

5% NaCl培养基中生长良好,无盐不长,>8%也不长。

3、神奈川现象(KP):神奈川现象(KP):在特定条件下,副溶血性弧菌中某些菌株在含高盐(7%)的人O型血或兔血及以D—甘露醇为碳源的我妻琼脂平板上可产生β溶血,该现象作为鉴定致病性与非致病性菌株的一项重要指标。

二、致病性与免疫性
1、致病机制不甚明确
(KP+为致病株、KP—不致病)
KP+有耐热性溶血毒素(耐热直接溶血素和耐热相关溶血素)及黏液素及黏液素酶
2、引起食物中毒
好发夏季,误食未熟海产品等而致,潜伏期短5—72h(24h),急性胃肠炎症状,水样便,病程短,可自愈。

3、病后免疫力不牢固,可重复感染
第十二章螺杆菌属
幽门螺杆菌
一、生物学特性
■G— ,菌体弯曲呈螺旋型、S形、海鸥形,有鞭毛(从毛菌)
■微需氧,营养要求高,生化反应不活跃,但尿素酶丰富-—快速脲酶实验强阳性(主要鉴定依据)
二、致病性与免疫性
■传染源:人
■传播途径:粪口途径
■致病物质和致病机制不清主要与以下疾病有关:在以下疾病中本菌的检出率很高,80~100%▪慢性胃炎
▪胃溃疡
▪胃癌
▪胃黏膜相关B细胞淋巴瘤
▪十二指肠溃疡
三、微生物学检查法
1、直接镜检
2、检测尿素酶活性(常用):尿素酶丰富,可迅速分解尿素释放氨,是鉴定该菌的主要依据之一。

3、分离培养
4、抗原、抗体及核酸的检测
四、防治原则
■疫苗正在研发中
■枸橼酸铋钾+抑酸剂+抗生素
第十三章厌氧性细菌
■厌氧菌——是生长和代谢不需要氧气,利用发酵而获取能量的一群细菌。

■根据芽胞有无分为:
→厌氧性芽胞梭菌(外源性感染--致病菌)。

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