NP968全自动核酸提取仪操作规程作业指导书
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NP968全自动核酸提取仪操作规程作业指导书
一、硅磁核酸提取法原理
硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料来吸附核酸,核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的,利用电磁场的吸附与分离原理,将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开,得到纯化的核酸。
二、试剂使用
试剂为原厂提供的全血磁珠法DNA提取液,包含蛋白酶k、核酸助沉剂、裂解液、磁珠、洗涤液1 乙醇混合液、洗涤液2、洗涤液3、洗脱液。
三、标本要求
使用EDTA抗凝,抽血2ml混匀,密闭保存,
2-4°C保存,一周内必须检测。
四、程序运行
1.开机:打开仪器后面的电源开关,仪器自动自检,自检完毕说明仪器可正常使用。
2.把样品加好
a) 取 200ul 待提取样品和分解液加入96 孔深孔板第1 排和第7 排中;
b) 依下表格在 96 孔深孔板中加入试剂:
10ul 蛋白酶K+4ul 核酸助沉剂+260ul 裂解液混匀+60ul 磁珠+200ul 样本=550ul
洗涤液1 乙醇混合液 500ul
洗涤液2 乙醇混合液 500ul
洗涤液3 550ul
洗脱液 100u
第1 排位于96 孔深孔板的最左方。
※每次吸取磁珠溶液前请混合均匀。
※将洗脱溶液置于第6 及第12 孔位。
c) 将 96 孔深孔板放入NP968 型核酸提取仪,确认96 孔深孔板的缺口朝外。
d) 将搅拌套插入搅拌套架。
e) 将 NP968 型核酸提取仪的实验舱门关上。
3.运行文件
在主界面轻触<程序运行>,进入程序运行界面。
如下图所示:
4、通过前后按键切换页面,通过返回键返回上一级界面。
选择所要运行的程序后,轻触确定键进入所选程序界面,如下图所示:
5、选择好运动起始步骤后,轻触将此程序运行。
点运行,仪器将按设定好的程序自动运行。
在一个程序文件正常运行完毕后,蜂鸣器发出长鸣声提示实验结束。
6、取出板,按顺序吸出最后一排已经提纯好的核酸,放入0.5ulPE管,盖紧,2-8°C保存备用。
五、仪器的维护
1、实验结束,使用75%乙醇清洁实验舱,并开启紫外灯照射60分钟以上进行消毒;
2、定期清洁仪器表面及实验舱,避免使用强碱、浓酒精和有机溶剂溶液;
3、仪器使用时请保证仪器四周通风;
4、请不要在电压不稳、过高、过低时使用仪器;
5、保持实验舱内环境较为干燥,无水渍等物。