全自动染色机在病理HE染色中的使用心得

全自动染色机在病理HE 染色中的
使用心得
随着医学技术的不断发展和医疗设备的不断更新，目前很多医院的病理科或相关实验室正在使用全自动染色机来替代繁琐的手工HE染色。

全自动染色机HE染色与手工染色相比，染色结果色彩鲜艳，洁净透明，细胞质与细胞核结构清晰，有利于制片质量标准化[1]。

我科于2018年开始使用Leica Autostainer XL全自动染色机，在使用的这几年中，刚开始染色对比差、染色质量不稳定，到后来染色鲜亮、对比度好、染色质量稳定。

全自动染色机运行稳定，故障率低，大大提高了染色效率，同时又节省了人力。

要使一台全自动染色机能够出色的染出高质量的病理切片并且能够稳定地运行，我们不仅要懂得如何去调试程序和排除故障，而且要注重日常的使用和保养。

现将我科近几年在使用Leica Autostainer XL全自动染色机过程中的一些经验和心得分享给大家，希望能给想要购入或正在使用全自动染色机的同仁们提供一些参考，内容如下：
1.
全自动染色机最好安放在通风厨里，这样可以减少染色过程中散发出的有害气体对人体的损害，染色机需要接水源和排水管，还配电源插座，有需要的可以预留出封片机的安放位置。

2.
全自动染色机具体的程序因设备品牌不同、使用的染色试剂不同等因素，所以程序的设置方法不同，大家可根据自身实际情况设置和调试出适合自己的染色程序。

下面我们主要讨论下关于程序设置的一些注意事项：
1）.在进行全自动染色机的程序设置时，苏木精、盐酸乙醇、伊红等需要水洗的染液应尽量靠近水缸，脱水透明的染缸要靠近染色机的输出口，尽量避免滴
落的试剂污染其它染液缸[2]。

在染色程序运行过程中，尤其是程序设置初期，观
察染片架的运行轨迹，尽量避免出现试剂互相污染的现象。

染片架从脱蜡水化到
苏木精再到分化液最后到伊红之前的80%乙醇，中间过程中需注意避免带水的染
片架越过其他试剂缸。

带水的染片架避免越过其他试剂。

2）.为了保持染片架的平稳移动，机械臂移动染片架的速度较缓慢，染片架
上下移动也较缓慢，当染片架数多时机器会有延时，所以对于需要规定时间浸染
的步骤需将精确时间设置为“是”，如苏木精、盐酸乙醇、伊红等。

由于机械臂
移动缓慢的原因，在分化步骤时，切片与盐酸乙醇分化液反应时间变长，建议把
盐酸乙醇分化液浓度由1%调整为0.5%，时间为1秒，能达到较好的分化效果。

3）.如果用的是醇溶性伊红，建议在伊红前增加一缸80%乙醇，这样可以减
少水洗后的切片将水分带入染液中，影响染色效果，伊红之后的2缸95%乙醇，
时间设置不易久，否则会淡化伊红的染色效果。

3.每次开机检查设备是否运行正常，确认是否为所选用的程序，逐一检查试
剂缸，若发现试剂液面低于刻度线或无法浸没组织切片的，应及时添加。

4.每次染色结束后，对染色机外部进行擦拭，染色缸之间的溢液要及时清洁
去除，观察水洗槽是否排干净。

每2周清洁一次染色机试剂槽，取出试剂槽时，
注意各个槽的对应位置，清洁后放回原位。

每2周检查水洗槽底部排水孔和进水
孔是否通畅，用毛刷清洗干净，防止生霉、堵塞，确保每个水洗槽都流水通畅。

注重设备的日常维护和保养有助于染色质量的持续稳定。

5.Leica Autostainer XL全自动染色机，在新换染色试剂的情况下染色效果
优良，核质颜色对比清晰、组织结构清楚、背景干净，但是随着染色批次的增多，试剂的染色效果下降，同时试剂盒内出现沉淀物、脱落的组织碎片等，靠后的染
色批次会有染色质量下降、交叉污染率上升等问题，导致总体切片的优良率下降，稳定性降低[3]。

所以要保持染色质量的稳定，除了有适合的染色程序外，还需要
及时更换试剂。

一般可根据染片张数来决定试剂的更换时间，我们的方法是根据
仪器运行时间加上观察二甲苯的颜色改变来决定试剂的更换时间。

具体方法是：
观察透明的第一缸二甲苯，若发现浑浊略呈乳白色，更换伊红染液之后的两缸95%
乙醇，脱蜡的第一缸二甲苯和之后的第一缸无水乙醇，透明的第一缸无水乙醇及
之后的第一缸二甲苯，以上需要更换的第一缸无水乙醇或二甲苯腾出位置，后面
的依次前移，把新的试剂放在最后。

每次更换试剂做好记录，内容包括试剂更换
日期、名称及位置，根据前几次更换试剂的日期，可估算出下次更换的日期。

苏
木精和伊红也需要定期过滤和更换，具体时间大家根据实际染片数量和染片的效
果来决定。

6.更换的废液中如含二甲苯和盐酸等有害物质，应倒入专用化学废液回收容
器内并盖紧盖子，倾倒时注意个人防护，废液存储量不超过容器的3/4，48小时
内由具备专业资质的公司统一回收，并做好交接记录。

7.设备旁应配备安全操作手册，内容包括设备的操作方法、染色流程、维修
记录、运行状况、校准文件及停水、停电、设备故障等应急预案，每次染色结束，及时填写设备运行状况，并签字。

设备操作区域显著位置张贴操作流程图。

设备
上贴有设备状态管理标识铭牌，内容包括设备名称和型号、校准周期、校准结果
和日期、下次校准日期以及设备维修电话等。

全自动染色机由于采用了精准的计算机控制染色程序，每一步染色几乎都是
相同的时间和步骤，当染色出现异常时，能够及时找到问题的原因，有利于病理
制片的质量控制。

只要科学合理地使用全自动染色机，平时注意保养和维护，就
能保持病理切片染色质量的高效和稳定。

参考文献：
[1].崔锦珠，陈玲，黄克强，等.国产全自动染色机在常规染色中的应用[J].诊断病理学杂志，2019，26（1）：66-67.
[2].张鹏，包磊，任丽芳，等.全自动染色机与手工染色的比较及其染色程
序的改进[J].临床与实验病理学杂志，2015，31（2）:224-225.
[3].梁晓辉，赵秀兰，刘增辉，等.两种全自动HE染色机在常规病理中的应
用对比[J].临床与实验病理学杂志，2018，34（11）：1279-1281.。