WB试剂各组分作用
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W B试剂各组分作用 Document number:NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT
acr和bis:当然是产生凝胶的最基本物质。
SDS:使蛋白在胶中可以保持变性
-Hcl:使分离胶的pH保持在,浓缩胶的pH保持在
对于浓缩胶来说,可以通过甘氨酸和和氯离子的作用产生压缩,从而使蛋白条带压细。
对于分离胶来说,与甘氨酸的pka接近,从而使不同分子量的蛋白产生不同的泳动速度,从而使不同分子量的蛋白分开。
TEMED和AP:这两种物质的作用都是催化剂。
样品处理液中加入适量的甘油或蔗糖,是为了增大溶液密度,使加样时样品溶液可以沉入样品加样槽底部.
sds作为阴离子去污剂,其作用应至少有三:
1.断裂分子内和分子间的氢键,使蛋白质分子去折叠,破坏蛋白质分子的二三级结构,消除蛋白质在迁移过程中结构的影响;
2.与蛋白质形成-蛋白质复合物,由于sds带有大量负电荷,好比蛋白质穿上带负电的“外衣”,蛋白质本身带有的电荷则被掩盖了,从而消除蛋白质在迁移过程中自身电荷的差异造成的影响。
那么蛋白质的迁移速度就只与其本身分子量的大小有关了(分子筛效应的作用)
3.可起到助溶作用,使结合了sds的蛋白质变为亲水性,易于在水相中迁移。
AP提供acr和bis聚合的氧自由基,是acr和bis聚合的引发剂,TEMED可催化AP释放氧自由基,是反应的催化剂。