不同培养条件对罗汉果组培苗玻璃化的影响
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基金项目:国家科技重大专项子课题中药材种子种苗和种植渊养殖冤标 准平台 渊2009ZX09308-002冤; 广西农业科技成果转化项目 渊桂科转 0896002-8冤资助
通讯作者:马小军
毒 10~40s袁无菌水冲洗 3 次袁0.1%升汞灭菌 5min袁无菌 水冲洗 4 次遥选择不变色尧无褐化的茎段横切成面积约 0.8cm伊1.2cm 的带芽小块袁 接种在 MS+1.2mg/L 6-BA+ 26g/L 蔗 糖 +5.0g/L 琼 脂 的 诱 导 培 养 基 上 袁pH5.8袁 于 25益尧光照时间为 12h/d(日光灯袁光照强度 2000lx)的条 件下培养 3 周后袁 选取健康无菌的丛生芽进行继代培 养遥 取继代培养 3 周后的组培苗(株高 1.5~2.0cm)接种 于MS 基本培养基袁以 6-BA 浓度尧蔗糖浓度尧琼脂浓 度尧培养温度和光照时间为试验因子袁设置不同处理 进行试验遥 在添加 0.5mg/L 6-BA尧4.5g/L 琼脂袁蔗糖 浓度设置 20尧25尧30g/L 的 3 种处理遥 在添加 0.5mg/L 6-BA尧25g/L 蔗糖袁 琼脂浓度设置 4.0尧4.5尧5.0g/L 的 3 种处理遥 在添加 25g/L 蔗糖尧4.5g/L 琼脂袁6-BA 的 浓度设置 0.1尧0.5尧1.0mg/L 的 3 种处理遥 培养温度设 置 22尧26尧30益的 3 个处理遥 在光强 2000lx 下袁 光照 时间设置 10尧12尧14h/d 的 3 个处理遥 每个处理接种 15 株苗袁重复 3 次遥 培养 20d 后袁观察组培苗出现玻 璃化的情况遥
.果种Al苗l渊组Ri培g苗ht冤s市场Re需s求e量rv很ed大.遥 为此一些科学工作
者进行了罗汉果组培快繁研究[3- 4]袁旨在探索其种苗的 工厂化生产遥 然而在罗汉果组培快繁过程中袁再生芽容 易出现鲜绿透明的水渍状袁即玻璃化现象袁玻璃化的苗 由于组织畸形袁分化能力降低袁不易成活袁因此不宜用 作继代和移栽的材料遥玻璃化苗的成因很多袁包括了培 养基成分及培养条件的影响等[5-6]袁本文对罗汉果组培 苗玻璃化现象的影响因素进行了研究袁 以期为预防罗 汉果玻璃化苗的产生和提高罗汉果组培苗的质量提供 理论基础和有效措施遥
关键词院罗汉果曰组织培养曰玻璃化曰影响因素
罗汉果(Momordica grosvenori Swingle)是我国特有 的葫芦科多年生草质藤本植物袁以果实入药袁具有止咳 祛痰尧润肠通便等功效[1]遥同时袁罗汉果甜甙是一种低热 量高甜度的天然甜味剂袁用途非常广泛[2]遥近年来袁我国 越来越多的企业加入到生产罗汉果的行列袁因此袁罗汉
2援2 琼脂浓度对罗汉果组培苗玻璃化的影响 培养 基中琼脂的浓度直接影响培养基的硬度袁 硬度不同袁 植物对水分和营养物质吸收的程度就会不同袁从而导
研究论文
致植物生长状况的不同遥本试验随着琼脂浓度的增加袁 罗汉果组培苗的玻璃化率明显下降袁 增殖系数也下 降遥 当琼脂浓度为 4.0g/L 时袁培养基呈半固体状袁瓶苗 叶片皱缩卷曲袁呈不正常的水渍状袁玻璃化现象严重曰 当琼脂浓度为 4.5g/L 时袁罗汉果分化植株健壮袁丛生 芽多袁玻璃化率相对较低曰当琼脂浓度为 5.0g/L 时袁培 养基中无玻璃化苗袁 但大部分组培苗出现萎蔫现象遥 方差分析结果显示袁琼脂浓度对增殖总苗数尧芽增殖 系数有显著影响袁对玻璃化苗数及玻璃化率有极显著 影响(表 2)遥
表1 蔗糖浓度对罗汉果组培苗增殖和玻璃化的影响
蔗糖浓度 （g/L） 20
接种苗数 (株) 15
增殖总苗 数(株) 185
芽增殖 系数 12.3
玻璃化苗 数(株) 47
玻璃化率 （%） 25.4
25
15
325*
21.7
8*
2.5*
30
15
287
19.1
36
12.5
﹡表示 P＜0.05 ，**表示 P＜0.01，下同
2 结果与分析
2援1 蔗糖浓度对罗汉果组培苗玻璃化的影响 糖作 为碳源袁 除为细胞提供合成新化合物的碳骨架和能源 之外袁 还起到维持一定渗透压的作用遥 当蔗糖浓度为 20g/L 时袁罗汉果组培苗玻璃化率高曰蔗糖浓度为 25g/L 时袁罗汉果分化植株健壮袁丛生芽多显著高于其他处理袁 玻璃化率显著低于其他 2 个处理曰 蔗糖浓度为 30g/L 时袁芽的分化受到抑制(表 1)遥
.为A0l.5lmg/RLi时gh袁芽ts增殖Re系s数er高v袁e玻d.璃化率较低曰6-BA 浓
1 材料与方法
1援1 材料 试验材料为广西壮族自治区药用植物园 选育并通过省级审定的青皮果系列罗汉果新品种永青 1 号遥 1援2 方法 从试验田里取罗汉果刚现蕾的幼嫩茎段袁 去掉较大的叶片袁剪成 1.0~2.0cm 长的带芽茎段袁保留 叶柄基部袁在加有 1%洗衣粉的洗涤液中浸泡 5~8min袁 用细流水冲洗 15min遥 在超净工作台上用 75%酒精消
表2 琼脂浓度对罗汉果组培苗增殖和玻璃化的影响
琼脂浓度 接种苗数 增殖总苗数 芽增殖 玻璃化苗数 玻璃化率
（g/L）
(株)
(株)
系数
(株)
（%）
4.0
15
137
9.1
86
62.8
4.5
15
322*
21.5*
9**
2.8**
5.0
15
205
13.7
0
0
2援3 6-BA 浓度对罗汉果组培苗增殖和玻璃化的影 响 不少研究报道袁在组织培养增殖过程中袁高浓度的 6-BA 会导致芽苗玻璃化袁而使培养失败遥 6-BA 浓度
圆园11 年第 2 期
研究论文
不同培养条件对罗汉果组培苗玻璃化的影响
潘丽梅 马小军 莫长明 冯世鑫
(中国医学科学院药用植物研究所广西分所袁南宁 530023)
摘要院 以广西壮族自治区药用植物园培育的罗汉果新品种 永青 1 号组培苗为研究对象袁探讨组织培养过程中蔗糖浓度尧琼 脂浓度尧6-BA 浓度尧培养温度以及光照时间对罗汉果组培苗玻 璃化的影响遥 结果表明袁适于罗汉果组培苗最大增殖及玻璃化最 低的培养条件为院 接种于 4.5g/L 琼脂尧25g/L 蔗糖尧0.5mg/L 6BA 的 MS 基本培养基袁并于 26益袁12 h/d(日光灯袁2000lx)的条件 中培养遥
通讯作者:马小军
毒 10~40s袁无菌水冲洗 3 次袁0.1%升汞灭菌 5min袁无菌 水冲洗 4 次遥选择不变色尧无褐化的茎段横切成面积约 0.8cm伊1.2cm 的带芽小块袁 接种在 MS+1.2mg/L 6-BA+ 26g/L 蔗 糖 +5.0g/L 琼 脂 的 诱 导 培 养 基 上 袁pH5.8袁 于 25益尧光照时间为 12h/d(日光灯袁光照强度 2000lx)的条 件下培养 3 周后袁 选取健康无菌的丛生芽进行继代培 养遥 取继代培养 3 周后的组培苗(株高 1.5~2.0cm)接种 于MS 基本培养基袁以 6-BA 浓度尧蔗糖浓度尧琼脂浓 度尧培养温度和光照时间为试验因子袁设置不同处理 进行试验遥 在添加 0.5mg/L 6-BA尧4.5g/L 琼脂袁蔗糖 浓度设置 20尧25尧30g/L 的 3 种处理遥 在添加 0.5mg/L 6-BA尧25g/L 蔗糖袁 琼脂浓度设置 4.0尧4.5尧5.0g/L 的 3 种处理遥 在添加 25g/L 蔗糖尧4.5g/L 琼脂袁6-BA 的 浓度设置 0.1尧0.5尧1.0mg/L 的 3 种处理遥 培养温度设 置 22尧26尧30益的 3 个处理遥 在光强 2000lx 下袁 光照 时间设置 10尧12尧14h/d 的 3 个处理遥 每个处理接种 15 株苗袁重复 3 次遥 培养 20d 后袁观察组培苗出现玻 璃化的情况遥
.果种Al苗l渊组Ri培g苗ht冤s市场Re需s求e量rv很ed大.遥 为此一些科学工作
者进行了罗汉果组培快繁研究[3- 4]袁旨在探索其种苗的 工厂化生产遥 然而在罗汉果组培快繁过程中袁再生芽容 易出现鲜绿透明的水渍状袁即玻璃化现象袁玻璃化的苗 由于组织畸形袁分化能力降低袁不易成活袁因此不宜用 作继代和移栽的材料遥玻璃化苗的成因很多袁包括了培 养基成分及培养条件的影响等[5-6]袁本文对罗汉果组培 苗玻璃化现象的影响因素进行了研究袁 以期为预防罗 汉果玻璃化苗的产生和提高罗汉果组培苗的质量提供 理论基础和有效措施遥
关键词院罗汉果曰组织培养曰玻璃化曰影响因素
罗汉果(Momordica grosvenori Swingle)是我国特有 的葫芦科多年生草质藤本植物袁以果实入药袁具有止咳 祛痰尧润肠通便等功效[1]遥同时袁罗汉果甜甙是一种低热 量高甜度的天然甜味剂袁用途非常广泛[2]遥近年来袁我国 越来越多的企业加入到生产罗汉果的行列袁因此袁罗汉
2援2 琼脂浓度对罗汉果组培苗玻璃化的影响 培养 基中琼脂的浓度直接影响培养基的硬度袁 硬度不同袁 植物对水分和营养物质吸收的程度就会不同袁从而导
研究论文
致植物生长状况的不同遥本试验随着琼脂浓度的增加袁 罗汉果组培苗的玻璃化率明显下降袁 增殖系数也下 降遥 当琼脂浓度为 4.0g/L 时袁培养基呈半固体状袁瓶苗 叶片皱缩卷曲袁呈不正常的水渍状袁玻璃化现象严重曰 当琼脂浓度为 4.5g/L 时袁罗汉果分化植株健壮袁丛生 芽多袁玻璃化率相对较低曰当琼脂浓度为 5.0g/L 时袁培 养基中无玻璃化苗袁 但大部分组培苗出现萎蔫现象遥 方差分析结果显示袁琼脂浓度对增殖总苗数尧芽增殖 系数有显著影响袁对玻璃化苗数及玻璃化率有极显著 影响(表 2)遥
表1 蔗糖浓度对罗汉果组培苗增殖和玻璃化的影响
蔗糖浓度 （g/L） 20
接种苗数 (株) 15
增殖总苗 数(株) 185
芽增殖 系数 12.3
玻璃化苗 数(株) 47
玻璃化率 （%） 25.4
25
15
325*
21.7
8*
2.5*
30
15
287
19.1
36
12.5
﹡表示 P＜0.05 ，**表示 P＜0.01，下同
2 结果与分析
2援1 蔗糖浓度对罗汉果组培苗玻璃化的影响 糖作 为碳源袁 除为细胞提供合成新化合物的碳骨架和能源 之外袁 还起到维持一定渗透压的作用遥 当蔗糖浓度为 20g/L 时袁罗汉果组培苗玻璃化率高曰蔗糖浓度为 25g/L 时袁罗汉果分化植株健壮袁丛生芽多显著高于其他处理袁 玻璃化率显著低于其他 2 个处理曰 蔗糖浓度为 30g/L 时袁芽的分化受到抑制(表 1)遥
.为A0l.5lmg/RLi时gh袁芽ts增殖Re系s数er高v袁e玻d.璃化率较低曰6-BA 浓
1 材料与方法
1援1 材料 试验材料为广西壮族自治区药用植物园 选育并通过省级审定的青皮果系列罗汉果新品种永青 1 号遥 1援2 方法 从试验田里取罗汉果刚现蕾的幼嫩茎段袁 去掉较大的叶片袁剪成 1.0~2.0cm 长的带芽茎段袁保留 叶柄基部袁在加有 1%洗衣粉的洗涤液中浸泡 5~8min袁 用细流水冲洗 15min遥 在超净工作台上用 75%酒精消
表2 琼脂浓度对罗汉果组培苗增殖和玻璃化的影响
琼脂浓度 接种苗数 增殖总苗数 芽增殖 玻璃化苗数 玻璃化率
（g/L）
(株)
(株)
系数
(株)
（%）
4.0
15
137
9.1
86
62.8
4.5
15
322*
21.5*
9**
2.8**
5.0
15
205
13.7
0
0
2援3 6-BA 浓度对罗汉果组培苗增殖和玻璃化的影 响 不少研究报道袁在组织培养增殖过程中袁高浓度的 6-BA 会导致芽苗玻璃化袁而使培养失败遥 6-BA 浓度
圆园11 年第 2 期
研究论文
不同培养条件对罗汉果组培苗玻璃化的影响
潘丽梅 马小军 莫长明 冯世鑫
(中国医学科学院药用植物研究所广西分所袁南宁 530023)
摘要院 以广西壮族自治区药用植物园培育的罗汉果新品种 永青 1 号组培苗为研究对象袁探讨组织培养过程中蔗糖浓度尧琼 脂浓度尧6-BA 浓度尧培养温度以及光照时间对罗汉果组培苗玻 璃化的影响遥 结果表明袁适于罗汉果组培苗最大增殖及玻璃化最 低的培养条件为院 接种于 4.5g/L 琼脂尧25g/L 蔗糖尧0.5mg/L 6BA 的 MS 基本培养基袁并于 26益袁12 h/d(日光灯袁2000lx)的条件 中培养遥