哮喘患儿血清抗菌肽ll-37、白三烯b4与25-羟维生素d3的相关研究

哮喘患儿血清抗菌肽ＬＬ￣３７㊁白三烯Ｂ４与２５￣羟维生素Ｄ３的相关研究
王璐㊀司利钢㊀王亚君
㊀㊀ʌ摘要ɔ㊀目的㊀探讨哮喘患儿血清抗菌肽ＬＬ￣３７㊁白三烯Ｂ４(ＬＴ￣Ｂ４)和２５￣羟维生素Ｄ３(２５￣(ＯＨ)ＶＤ３)
相关性ꎮ方法㊀选取哈尔滨医科大学附属第一医院２０１７年２月~２０１８年３月儿科住院或门诊诊治哮喘患儿
２０例㊁非哮喘肺炎患儿２０例ꎬ分别作为哮喘组和肺炎组ꎬ选取同期我院体检中心体检健康儿童２０例作为对照组ꎬ检测并比较各组抗菌肽ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４㊁２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平ꎬ分析各组间抗菌肽ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４㊁２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平相关性ꎮ结果㊀哮喘组ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４水平显著高于肺炎组㊁对照组ꎬ２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平显著低于肺炎组㊁对照组(Ｐ<０ ０５)ꎻ肺炎组ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４水平显著高于对照组ꎬ２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平显著低于对照组(Ｐ<０ ０５)ꎮＰｅａｒｓｏｎ分析得出:哮喘组㊁肺炎组㊁对照组间ＬＴ￣Ｂ４与ＬＬ￣３７水平均无相关性(ｒ１＝－０ ０２２ꎬｒ２＝－０ ２４７ꎬｒ３＝０ ２２５ꎻＰ>０ ０５)ꎮＰｅａｒｓｏｎ分析得出:哮喘组㊁肺炎组㊁对照组ＬＬ￣３７与２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平均无相关性(ｒ１＝０ １９９ꎬｒ２＝－０ ０３９ꎬｒ３＝０ ０４１ꎻＰ>０ ０５)ꎮ结论㊀哮喘患儿ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４水平显著升高ꎬ提示ＬＬ￣３７㊁
ＬＴ￣Ｂ４与支气管哮喘发生有密切相关性ꎬ哮喘患儿２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平较低ꎬ提示２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平降低与哮喘发生有关ꎮ
ʌ关键词ɔ㊀
哮喘ꎻ血清抗菌肽ＬＬ￣３７ꎻ白三烯Ｂ４ꎻ２５￣羟维生素Ｄ３ꎻ相关性
ｄｏｉ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００９－６６６３.２０２０.０３.０２５
作者单位:１５００００㊀黑龙江哈尔滨ꎬ哈尔滨医科大学附属第一医院
儿内科
㊀㊀支气管哮喘为影响小儿生长发育㊁健康常见呼吸系统疾病ꎬ对患儿家庭㊁社会均造成严重负担ꎮ支气管哮喘发生机制尚未研究清楚ꎬ可能与气道高炎
症反应㊁高应激反应等有相关性ꎮ研究指出ꎬ肥大细胞㊁白三烯及相关炎症因子在哮喘患儿气道分泌物中有较高表达水平[１]ꎮ抗菌肽ＬＬ￣３７为近年临床发现天然防御系统重要组成部分ꎬ与多种过敏原致病性有密切相关性[２]ꎮ白三烯为花生四烯酸在５￣脂氧合酶代谢作用下产生代谢产物ꎬ为气道炎症反应重要介质物质ꎮ２５￣(ＯＨ)ＶＤ３在哮喘发生㊁发展中同样有一定相关性ꎬ但其具体关系仍存在争议[３]ꎮ
为探究三者在哮喘患儿中表达水平及相关性ꎬ笔者研究如下ꎮ
资料与方法
一㊁一般资料
选取２０１７年２月~２０１８年３月哈尔滨医科大学附属第一医院儿科住院或门诊诊治哮喘患儿２０例㊁非哮喘肺炎患儿２０例分别作为哮喘组和肺炎组ꎬ选取同期我院体检中心体检健康儿童２０例作为对照组ꎮ纳入标准:①年龄３~１６岁ꎮ②哮喘组患儿诊断符合«儿童支气管哮喘诊断与防治指南
(２０１６年版)»[４]ꎬ均为哮喘稳定期ꎮ③肺炎组患儿诊断符合«儿科学(第８版)»中小儿肺炎诊断并标准[５]ꎮ④对照组均为体检健康儿童ꎮ⑤各组儿童家属均在医师告知下了解本次研究方法和内容ꎬ签署知情同意书自愿配合进行本次研究ꎮ排除标准:①近２周服用糖皮质激素㊁免疫抑制剂或影响炎症反应㊁应激反应药物ꎮ②合并有其它过敏性㊁氧化应
激反应疾病者ꎬ如红斑狼疮等ꎮ哮喘组㊁肺炎组㊁对照组间男/女㊁年龄比较无统计学差异(Ｐ>０ ０５)(见表１)ꎮ
表１㊀组一般临床资料
组别ｎ男/女(ｎ)年龄(岁)哮喘组２０１２/８６.５ʃ１.３肺炎组２０８/１２６.８ʃ２.０对照组
２０１１/９
６.７ʃ１.６χ２/Ｆ值－１.７３５３０.１７
Ｐ值－
０.４１９９０.８４４３㊀㊀二㊁方法
１㊀标本收集㊀收集入组儿童病史ꎬ包括过敏性
皮炎㊁湿疹㊁食物过敏㊁过敏性鼻炎㊁药物过敏等ꎬ并仔细进行体格检查ꎮ符合标准后ꎬ检测并比较儿童ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４㊁２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平ꎬ分析各组间ＬＬ￣
３７㊁ＬＴ￣Ｂ４㊁２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平相关性ꎮ
２㊀检测方法㊀入组次日ꎬ空腹状态下ꎬ抽取各
组儿童肘部静脉血３~５ｍＬ置入离心管中ꎬ在常温
４３４临床肺科杂志㊀２０２０年３月㊀第２５卷第３期
下放置２ｈꎬ使标本凝固ꎬ再放入４ħ冰箱(中国ꎬ容声)中ꎬ冷藏４~８ｈꎬ以４０００ｒ/ｍｉｎ速度离心５ｍｉｎ
(台式高速离心机)ꎬ吸取上清液至少１００μＬ置入Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中ꎬ并在对应Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管上编码患儿姓名㊁编号ꎬ后将标本冷冻于－２０ħ冰箱中ꎬ保存待测ꎮ用酶联免疫吸附试验(Ｅｎｚｙｍｅ￣ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｅｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙꎬＥＬＩＳＡ)中双抗体夹心(Ｄｏｕｂｌｅ￣ａｎｔｉｂｏｄｙｓａｎｄｗｉｃｈ)方法定量分析ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４㊁２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平ꎮ试剂盒均由武汉华美生物(ＣＵＳＡＢＩＯ)公司生产ꎮ
三㊁统计学处理
本实验所有的统计学分析均采用ＳＰＳＳ１７ ０统计软件ꎻ性别用χ２检验ꎻＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４㊁２５￣(ＯＨ)ＶＤ３浓度单位用ｎｇ/ｍＬ表示ꎬ年龄㊁ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４㊁２５￣(ＯＨ)ＶＤ３结果以均数ʃ标准差( ｘʃｓ)表示ꎬ数据特点符合正态分布ꎬ用Ｆ/ｔ检验ꎻ各组浓度相关性用Ｐｅａｒｓｏｎ分析ꎻ以ａ＝０ ０５为检验水准ꎬＰ<０ ０５差异有统计学意义ꎮ
结㊀㊀果
一㊁各组ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４㊁２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平比较
哮喘组ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４水平显著高于肺炎组㊁对照组ꎬ２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平显著低于肺炎组㊁对照组(Ｐ<０ ０５)ꎻ肺炎组ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４水平显著高于对照组ꎬ２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平显著低于对照组(Ｐ<０ ０５)(见表２)ꎮ
㊀㊀二㊁各组ＬＴ￣Ｂ４与ＬＬ￣３７水平相关性
Ｐｅａｒｓｏｎ分析得出:哮喘组ＬＴ￣Ｂ４与ＬＬ￣３７相关系数为－０ ０２２１ꎬ无相关性ꎮ肺炎组ＬＴ￣Ｂ４与ＬＬ￣３７相关系数为－０ ２４７ꎬ无相关性ꎮ对照组ＬＴ￣Ｂ４与ＬＬ￣３７相关系数为０ ２２５ꎬ无相关性ꎮ
三㊁各组ＬＬ￣３７与２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平相关性Ｐｅａｒｓｏｎ分析得出:哮喘组ＬＬ￣３７与２５￣(ＯＨ)ＶＤ３相关系数为０ １９９ꎬ无相关性ꎮ肺炎组ＬＬ￣３７与２５￣(ＯＨ)ＶＤ３相关系数为－０ ０３９ꎬ无相关性ꎮ对照组ＬＬ￣３７与２５￣(ＯＨ)ＶＤ３相关系数为０ ０４１ꎬ无相关性ꎮ
讨㊀㊀论
哮喘为小儿常见呼吸系统过敏性㊁炎症反应性
疾病ꎬ与患儿遗传㊁环境㊁反复呼吸道感染等均有相
关性ꎬ对患儿健康㊁生活质量均造成严重影响ꎮ支气
管哮喘发病机制尚未研究清楚ꎬ认为与多种炎症介
质㊁炎症因子发生有关[６－７]ꎮ分析炎症因子㊁炎症介质在哮喘患儿中表达水平及相关性ꎬ对临床诊断㊁治
疗支气管哮喘有重要指导价值[８－１０]ꎮ
根据本研究结果得出ꎬ哮喘患儿ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４
水平显著升高ꎬ２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平显著降低(Ｐ<０ ０５)ꎻ但各组间相ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４㊁２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平无相关性(Ｐ>０ ０５)ꎮ有关研究发现ꎬ肺部感染患者中ꎬＬＬ￣３７在支气管上皮细胞㊁肺内炎性细胞㊁肺泡上皮细胞及成纤维细胞细胞浆和细胞膜中均表达阳性[１１－１２]ꎮ支气管哮喘和肺炎虽然发病因素不同ꎬ但两者均能诱导支气管上皮细胞产生炎症介质ꎬ引起炎症细胞在支气管中聚集ꎬ认为ＬＬ￣３７为重要免疫调节因子[１３－１４]ꎮ另有学者分析哮喘患者中ＬＬ￣３７表达水平ꎬ得出ＬＬ￣３７水平显著升高ꎬ分析ＬＬ￣３７在哮喘患者中通过趋化中性粒细胞㊁肥大细胞㊁Ｔ细胞及单核细胞作用ꎬ能刺激肥大细胞脱颗粒ꎬ调节主动防御机制[１５－１６]ꎮ肥大细胞为介导免疫反应重要细胞ꎬ能引起气道水肿㊁痉挛狭窄ꎬ为哮喘发生的重要病理作用ꎬ因此ꎬ可见ＬＬ￣３７在哮喘中有重要促进作用ꎮＬＴ￣Ｂ４为白三烯中趋化嗜酸细胞㊁中性粒细胞最强的白三烯类细胞激活剂ꎬ为引起呼吸系统过敏反应重要介质之一ꎮ实验研究指出ꎬ吸入ＬＴ￣Ｂ４后ꎬ支气管灌洗液中ꎬ中性粒细胞数量可增加１７倍[１７－１８]ꎮ有学者分析学龄期哮喘儿童与健康儿童呼气气体中ＬＴ￣Ｂ４水平差异ꎬ同样得出ＬＴ￣Ｂ４水平在哮喘患儿中水平较高ꎬ且与患儿哮喘严重程度呈相关性[１９－２１]ꎮ另有学者研究证实ꎬＬＴ￣Ｂ４具
表２㊀各组ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４㊁２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平比较(ｎｇ/ｍＬꎬ ｘʃｓ)
组别ｎＬＬ￣３７ＬＴ￣Ｂ４２５￣(ＯＨ)ＶＤ３哮喘组２０１.８９ʃ０.２７∗８.４６ʃ１.４６∗２.００ʃ０.４８∗肺炎组２０１.６８ʃ０.３７＃６.３０ʃ１.４６＃６.７９ʃ２.９２＃对照组２０１.４１ʃ０.４１５.１８ʃ１.４２７３.００ʃ１６.０６Ｆ值－９.１９２６.５６３５４.２７Ｐ值－０.０００３０.００１０.００１㊀㊀注:与肺炎组㊁对照组比较ꎬ∗Ｐ<０ ０５ꎻ与对照组比较ꎬ＃Ｐ<０ ０５５３４
临床肺科杂志㊀２０２０年３月㊀第２５卷第３期
有较强中性粒细胞趋化作用ꎬ能促使中性粒细胞在支气管肺泡内聚集ꎬ促使哮喘发生ꎬ并加重哮喘患者症状[２２]ꎮ临床有相关研究ꎬ表明２５￣(ＯＨ)ＶＤ３途径中多个基因与哮喘发生有相关性[２３－２４]ꎮ一项国外独立研究发现ꎬ哮喘㊁过敏反应均与２５￣(ＯＨ)ＶＤ３有相关性ꎬ同时证实２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平与哮喘严重程度有一定负相关性[２５]ꎮ分析２５￣(ＯＨ)ＶＤ３在哮喘中致病作用ꎬ认为２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平下降能影响机体免疫功能ꎬ增加患儿呼吸系统感染发生风险ꎬ进而增加对小儿气道刺激损伤作用ꎬ增加哮喘发生风险ꎮ但目前ꎬ临床中针对哮喘患儿是否需要补充２５￣(ＯＨ)ＶＤ３进行治疗ꎬ仍存在较大争议ꎬ今后临床还应进行大量实验研究ꎬ以准确分析２５￣(ＯＨ)ＶＤ３和哮喘关系ꎬ为临床治疗哮喘提供另一新思路ꎮ综上所述ꎬ哮喘患儿ＬＬ￣３７㊁ＬＴ￣Ｂ４水平显著升高ꎬ认为ＬＬ￣３７和ＩＬ￣Ｂ４与哮喘发生有一定关联性ꎻ哮喘患儿２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平显著降低ꎬ认为２５￣(ＯＨ)ＶＤ３水平降低影响患儿免疫功能ꎬ为增加哮喘发生风险重要原因ꎮ但本研究受到实验条件㊁样本数量限制ꎬ可能对实验结果造成一定影响ꎬ今后可进一步扩大研究样本量进行研究和分析ꎬ以获得更为准确研究数据ꎮ
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[收稿日期:２０１９－１０－１７]
６３４临床肺科杂志㊀２０２０年３月㊀第２５卷第３期。